一种黄檀组织培养的快速繁殖方法
【专利摘要】本发明研究了一种黄檀组织培养的快速繁殖方法，包括黄檀外植体的无菌处理、腋芽的诱导、丛生芽的增殖、生根培养、炼苗移栽等步骤，本发明方法通过对黄檀的离体培养，建立起黄檀的快速繁殖体系，为黄檀的规模化育苗提供一条有效途径，使得这一优良的药用植物更快的应用到生产中。
【专利说明】
一种黄檀组织培养的快速繁殖方法
技术领域
[0001 ]本发明涉及黄檀组织培养的快繁方法，属于植物栽培技术领域。【背景技术】
[0002]黄檀，feMergia At/jOeafla /feflce，豆科，别名:不知春、望水檀、檀树等，乔木，高 10-20米，树皮暗灰色，呈薄片状剥落，产山东、江苏、安徽、浙江、江西、福建、湖北、湖南、广东、广西、四川、贵州、云南，海拔600-1400米，平原及山区均可生长，喜光，耐干旱瘠薄，不择土壤，但以在深厚湿润排水良好的土壤生长较好，忌盐碱地;深根性，萌芽力强，生于山地林中或灌丛中，山沟溪旁及有小树林的坡地常见，其根皮，夏、秋季采挖，味辛、苦，行平，小毒， 具有清热解毒、止血消肿之功效，主治疮疥疗毒、毒蛇咬伤、细菌性痢疾、跌打损伤等，民间用于治疗急慢性肝炎、肝硬化腹水。目前主要采用种子育苗栽培，传统繁殖方法繁殖率低， 成本高，组织培养方法可以缩短培养周期，且不受季节性影响，目前尚未见报道。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题是提供一种黄檀的快速繁殖方法，本发明方法通过对黄檀的离体培养，建立起黄檀的快速繁殖体系，为黄檀的规模化育苗提供一条有效途径，使得这一优良的药用植物更快的应用到生产中。
[0004]本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的:取黄檀的带芽茎段，保留一腋芽，流水冲洗15min，超净工作台上70%的酒精处理15s， 0.2%的氯化汞处理5min，3%过氧化氢处理6min，无菌水冲洗5次，消毒处理过的黄檀带芽茎段接入MS+TDZ0 ? 2mg/L+NAA0 ? 5mg/L+ZT0 ? lmg/L培养基中进行腋芽的诱导，附加蔗糖30g/L， 卡拉胶6.5g/L，pH5.8，光照1200lx，温度27°C，湿度80%，诱导出来的腋芽接入培养基1/2MS+ IBA0 ? 2mg/L+TDZ0 ? 2mg/L+NAA0 ? 5mg/L+IAA0 ? lmg/L 进行增殖培养，附加蔗糖 30g/L，卡拉胶 6 ? 5g/L，pH5 ? 8，光照3300lx，温度27°C，增殖后的芽苗接入培养基MS+NAA0 ? 01-0 ? 03mg/L+环烷酸钠l_2g/L中进行生根诱导，附加蔗糖45g/L，卡拉胶5g/L，pH5.95,光照150001X，温度28 °C，黄檀试管苗炼苗移栽前两周，在MS培养基中加入2mg/L多效唑壮苗培养，黄檀试管苗炼苗移栽之前把培养瓶的封口膜打开，在培养条件下炼苗两天，取出生根苗，小心洗净根上沾有的培养基，用35mg/L的IBA和稀释600倍的甲基托布津浸泡30min，然后将待移栽的生根苗的根部浸泡在清水中1.5h让其吸收水分，移栽时先在花盆底部铺一层基质，然后将生根苗置于基质上，把根展开放好，尽量减少根的损伤，每5天浇水一次，浇水不宜直接从基质上方浇水，而是将容器放入水中，使水从容器底部的孔隙中反渗进入基质，保证基质无积水。
[0005]采用本发明制备的黄檀成活率高，培养过程简单易控，无污染，利于大规模种植。
[0006]下面将结合【具体实施方式】对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。【具体实施方式】
[0007]实施例1
取黄檀的带芽茎段，保留一腋芽，流水冲洗15min，超净工作台上70%的酒精处理15s，0.2%的氯化汞处理5min，3%过氧化氢处理6min，无菌水冲洗5次，消毒处理过的黄檀带芽茎段接入MS+TDZ0.2mg/L+NAA0.5mg/L+ZT0.lmg/L培养基中进行腋芽的诱导，附加蔗糖30g/L，卡拉胶6.5g/L，pH5.8，光照1200Ix，温度27°C，湿度80%，诱导出来的腋芽接入培养基I/2MS+IBA0.2mg/L+TDZ0.2mg/L+NAA0.5mg/L+IAA0.lmg/1 进行增殖培养，附加蔗糖30g/L，卡拉胶6.5g/L，pH5.8，光照33001x，温度27°C，增殖后的芽苗接入培养基MS+NAA0.01mg/L+环烷酸钠lg/L中进行生根诱导，附加蔗糖45g/L，卡拉胶5g/L，pH5.95，光照150001X，温度28°C，黄檀试管苗炼苗移栽前两周，在MS培养基中加入2mg/L多效唑壮苗培养，黄檀试管苗炼苗移栽之前把培养瓶的封口膜打开，在培养条件下炼苗两天，取出生根苗，小心洗净根上沾有的培养基，用35mg/L的IBA和稀释600倍的甲基托布津浸泡30min，然后将待移栽的生根苗的根部浸泡在清水中I.5h让其吸收水分，移栽时先在花盆底部铺一层基质，然后将生根苗置于基质上，把根展开放好，尽量减少根的损伤，每5天浇水一次，浇水不宜直接从基质上方浇水，而是将容器放入水中，使水从容器底部的孔隙中反渗进入基质，保证基质无积水，一个月后统计，成活率89%。
[0008]实施例2
取黄檀的带芽茎段，保留一腋芽，流水冲洗15min，超净工作台上70%的酒精处理15s，
0.2%的氯化汞处理5min，3%过氧化氢处理6min，无菌水冲洗5次，消毒处理过的黄檀带芽茎段接入MS+TDZ0.2mg/L+NAA0.5mg/L+ZT0.lmg/L培养基中进行腋芽的诱导，附加蔗糖30g/L，卡拉胶6.5g/L，pH5.8，光照1200Ix，温度27°C，湿度80%，诱导出来的腋芽接入培养基I/2MS+IBA0.2mg/L+TDZ0.2mg/L+NAA0.5mg/L+IAA0.lmg/1 进行增殖培养，附加蔗糖30g/L，卡拉胶6.5g/L，pH5.8，光照33001x，温度27°C，增殖后的芽苗接入培养基MS+NAA0.03mg/L+环烷酸钠2g/L中进行生根诱导，附加蔗糖45g/L，卡拉胶5g/L，pH5.95，光照150001X，温度28°C，黄檀试管苗炼苗移栽前两周，在MS培养基中加入2mg/L多效唑壮苗培养，黄檀试管苗炼苗移栽之前把培养瓶的封口膜打开，在培养条件下炼苗两天，取出生根苗，小心洗净根上沾有的培养基，用35mg/L的IBA和稀释600倍的甲基托布津浸泡30min，然后将待移栽的生根苗的根部浸泡在清水中I.5h让其吸收水分，移栽时先在花盆底部铺一层基质，然后将生根苗置于基质上，把根展开放好，尽量减少根的损伤，每5天浇水一次，浇水不宜直接从基质上方浇水，而是将容器放入水中，使水从容器底部的孔隙中反渗进入基质，保证基质无积水，一个月后统计，成活率90%。
[0009]实施例3
取黄檀的带芽茎段，保留一腋芽，流水冲洗15min，超净工作台上70%的酒精处理15s，
0.2%的氯化汞处理5min，3%过氧化氢处理6min，无菌水冲洗5次，消毒处理过的黄檀带芽茎段接入MS+TDZ0.2mg/L+NAA0.5mg/L+ZT0.lmg/L培养基中进行腋芽的诱导，附加蔗糖30g/L，卡拉胶6.5g/L，pH5.8，光照1200Ix，温度27°C，湿度80%，诱导出来的腋芽接入培养基I/2MS+IBA0.2mg/L+TDZ0.2mg/L+NAA0.5mg/L+IAA0.lmg/1 进行增殖培养，附加蔗糖30g/L，卡拉胶6.5g/L，pH5.8，光照33001x，温度27°C，增殖后的芽苗接入培养基MS+NAA0.02mg/L+环烷酸钠2g/L中进行生根诱导，附加蔗糖45g/L，卡拉胶5g/L，pH5.95，光照150001x，温度28°C，黄檀试管苗炼苗移栽前两周，在MS培养基中加入2mg/L多效唑壮苗培养，黄檀试管苗炼苗移栽之前把培养瓶的封口膜打开，在培养条件下炼苗两天，取出生根苗，小心洗净根上沾有的培养基，用35mg/L的IBA和稀释600倍的甲基托布津浸泡30min，然后将待移栽的生根苗的根部浸泡在清水中1.5h让其吸收水分，移栽时先在花盆底部铺一层基质，然后将生根苗置于基质上，把根展开放好，尽量减少根的损伤，每5天浇水一次，浇水不宜直接从基质上方浇水， 而是将容器放入水中，使水从容器底部的孔隙中反渗进入基质，保证基质无积水，一个月后统计，成活率92%。
【主权项】
1.一种黄檀组织培养的快速繁殖方法，包括黄檀外植体的无菌处理、腋芽的诱导、丛生芽的增殖、生根培养、炼苗移栽，其主要步骤如下: (1)取黄檀的带芽茎段，对其进行消毒处理； (2)取步骤(I)消毒处理过的黄檀带芽茎段接入MS+TDZ0.2mg/L+NAA0.5mg/L+ZT0.1mg/L培养基中进行腋芽的诱导，附加蔗糖30g/L，卡拉胶6.5g/L，pH5.8，光照1200Ix，温度27°C，湿度80% ； (3)取步骤(2)诱导出来的腋芽接入培养基1/2MS+IBA0.2mg/L+TDZ0.2mg/L+NAA0.5mg/L+IAA0.lmg/1进行增殖培养，附加蔗糖30g/L，卡拉胶6.5g/L，pH5.8，光照33001x，温度27°C； (4)取步骤(3)增殖后的芽苗接入培养基MS+NAA0.01-0.03mg/L+环烷酸钠l-2g/L中进行生根诱导，附加蔗糖45g/L，卡拉胶5g/L，pH5.95，光照15000Ix，温度28°C ; (5)取步骤(4)生根后的试管苗放入加2mg/L多效唑的MS培养基中进行壮苗培养 (6)取步骤(5)壮苗后的黄檀试管苗进行炼苗移栽。2.按照权利要求1所述的一种黄檀组织培养的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(I)中所述黄檀无菌外植体获得为:取黄檀的带芽茎段，保留一腋芽，流水冲洗15min，超净工作台上70%的酒精处理15s，0.2%的氯化萊处理5min，3%过氧化氢处理6min，无菌水冲洗5次。3.按照权利要求1所述的一种黄檀组织培养的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(4)中黄檀炼苗移栽之前把培养瓶的封口膜打开，在培养条件下炼苗两天，取出生根苗，小心洗净根上沾有的培养基，用35mg/L的IBA和稀释600倍的甲基托布津浸泡30min，然后将待移栽的生根苗的根部浸泡在清水中I.5h让其吸收水分。4.按照权利要求1所述的一种黄檀组织培养的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(6)中黄檀试管苗移栽时先在花盆底部铺一层基质，然后将生根苗置于基质上，把根展开放好，尽量减少根的损伤，每5天浇水一次，浇水不宜直接从基质上方浇水，而是将容器放入水中，使水从容器底部的孔隙中反渗进入基质，保证基质无积水。
【文档编号】A01H4/00GK106069761SQ201610455913
【公开日】2016年11月9日
【申请日】2016年6月22日
【发明人】杨成东
【申请人】南京泽朗生物科技有限公司