一种利用多效唑调控国兰株型的方法
【专利摘要】本发明公开了多效唑在调控国兰株型或在制备调控国兰株型的制剂方面的应用，并探索优化出了利用多效唑调控国兰株型的最佳工艺方法，即利用叶喷的方式，将多效唑喷施在国兰叶片上，至处理叶片表面湿润；优选地是待植株长至5~15cm时，开始用1000~1500mg/L的多效唑进行处理，每隔10~20天处理一次，处理3~4次。该方法大大提升了多效唑对国兰的作用，不仅可以显著的降低国兰的株高，而且还保证植株叶片展幅不受影响，株型更加紧凑，处理后的国兰株型更加美观，可大规模应用于栽培生产。
【专利说明】
一种利用多效唑调控国兰株型的方法
技术领域
[0001] 本发明属于花卉培养技术领域。更具体地，涉及是一种利用多效唑调控国兰株型 的方法。
【背景技术】
[0002] 国兰(Cymbidium Sw.)是兰属中我国所特有的一些观赏兰花，是我国十大传统名 花之一。近年来也受到西方发达国家的欢迎。因此大力发展我国国兰产业的市场条件已经 成熟。小微型盆栽得到了人民广泛的关注和热爱。
[0003] 我国国兰品种虽然丰富多样，但是传统国兰种大都株型较大，特别是叶片太长、太 软，株型较散，抗性较低，影响了它们的观赏价值。因此，结合国兰自身特点及市场流行趋 势，适当地控制国兰叶片生长、调整株型，对提高国兰的观赏价值、满足市场需求很有必要。
[0004] 但是，目前关于调控国兰株型方面，国内外都很少有相关的研究报道。观赏植物的 矮化方法有很多，例如整枝修剪、摘心，控制水肥管理，杂交育种等技术(王玉华，1998)，但 是这些方法费时费力、成本高、成效慢。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是针对现有国兰株型调控技术的缺陷和不足，提供多效唑在调控国 兰株型方面的应用，以及一种利用多效唑调控国兰株型的方法及其应用。
[0006] 本发明上述目的通过以下技术方案实现：
[0007] 多效唑在调控国兰株型或在制备调控国兰株型的制剂方面的应用。
[0008] 优选地，所述国兰为墨兰、建兰或建兰与大花蕙兰的杂交种。
[0009] 更优选地，所述墨兰为企黑或吴字翠品系。更优选地，所述建兰为黄金彩虹品系。 更优选地，所述建兰与大花蕙兰的杂交种为台北小姐。
[0010] -种利用多效唑调控国兰株型的方法，是利用叶喷的方式，将多效唑喷施在国兰 叶片上，至处理叶片表面湿润。
[0011] 其中，优选地，所述多效唑的浓度为500mg/L~1500mg/L。
[0012] 更优选地，所述多效唑的浓度为1000mg/L~1500mg/L。
[0013] 最优选地，所述多效唑的浓度为1000mg/L或1500mg/L。
[0014] 优选地，上述利用多效唑调控国兰株型的方法是待到植株长至5~15cm时，开始用 500~1500mg/L的多效唑进行处理，每隔10~20天处理一次，处理3~4次。
[0015] 更优选地，对于企黑共处理3次，而对于吴字翠则处理4次。
[0016] 即综合考虑，企黑的最佳矮化方式为：用1000~1500mg/l多效唑，待到植株10cm左 右开始处理，处理3次，每隔10-20天处理一次效果最佳。
[0017] 矮化吴字翠植株最合适的处理方案为：用1000~1500mg/L多效唑在植株10cm左右 开始处理，处理4次，每隔10~20天处理一次。
[0018] 优选地，待到植株长至9~11 cm时开始处理。优选地，每隔20天处理一次。
[0019] 另外，作为一种优选地可实施方案，上述利用多效唑调控国兰株型的方法是待到 植株长至10~13cm时进行第一次多效唑叶喷处理，多效唑喷施浓度200mg/L;待植株长至15 ~18cm时，进行第二次多效唑叶喷处理，多效唑喷施浓度700mg/L;待植株长至20~22cm时， 进行第三次多效唑叶喷处理，多效唑喷施浓度1200mg/L;
[0020] 或待到植株长至15~17cm时进行第一次多效唑叶喷处理，多效唑喷施浓度500mg/ L;待植株长至18~22cm时，进行第二次多效唑叶喷处理，多效唑喷施浓度1000mg/L;待植株 长至22~25cm时，进行第三次多效唑叶喷处理，多效唑喷施浓度1500mg/L。
[0021] 更优选地，上述利用多效唑调控国兰株型的方法是待到植株长至10或13cm时进行 第一次多效唑叶喷处理，多效唑喷施浓度200mg/L;待植株长至15或18cm时，进行第二次多 效唑叶喷处理，多效唑喷施浓度700mg/L;待植株长至20或22cm时，进行第三次多效唑叶喷 处理，多效唑喷施浓度1200mg/L;
[0022] 或待到植株长至15或17cm时进行第一次多效唑叶喷处理，多效唑喷施浓度500mg/ L;待植株长至18或22cm时，进行第二次多效唑叶喷处理，多效唑喷施浓度1000mg/L;待植株 长至22或25cm时，进行第三次多效唑叶喷处理，多效唑喷施浓度1500mg/L。
[0023] 最优选地，上述利用多效唑调控国兰株型的方法是待到植株长至13cm时进行第一 次多效唑叶喷处理，多效唑喷施浓度200mg/L;待植株长至18cm时，进行第二次多效唑叶喷 处理，多效唑喷施浓度700mg/L;待植株长至22cm时，进行第三次多效唑叶喷处理，多效唑喷 施浓度1200mg/L;
[0024] 或待植株长至15cm时进行第一次多效唑叶喷处理，多效唑喷施浓度500mg/L;待植 株长至18cm时，进行第二次多效唑叶喷处理，多效唑喷施浓度1000mg/L ;待植株长至22cm 时，进行第三次多效唑叶喷处理，多效唑喷施浓度1500mg/L。
[0025] 总之，经多效唑处理后，国兰植株明显矮化、株型更加紧凑，而且叶片的展幅也不 会太小，保持了良好的株型，能在矮化植株的同时保证株型的美观。
[0026] 因此，上述方法在调控国兰株型方面的应用也在本发明的保护范围之内。
[0027] 植物生长延缓剂对植物的调节生长作用受到各方面的影响，包括土壤条件、气候 环境及植物的品种等。除去自然环境对植物生长延缓剂的影响，为达到商品生产的目的，延 缓剂的施用种类、施用时间的选择、施用量的选取是控制调节的关键。本发明首先对植物生 长延缓剂用于国兰矮化的施用条件进行了探究，包括探究合适的延缓剂种类、合理的处理 浓度、合适的处理时间以及处理次数。试验结果显示，相比矮壮素和丁酰肼，多效唑是良好 的国兰矮化药剂，能够抑制叶片的生长速率使植株提前停止增长。优选处理方案为利用 1000~1500mg/L的多效唑，待到国兰植株10cm左右开始处理，处理3~4次，每隔10~20天 (优选20天)处理一次效果最佳，具有优良的矮化效果。更进一步地，采取在植株不同生长时 期施用浓度梯度递增的生长延缓剂，在矮化国兰植株的同时，还可以保证植株叶片展幅不 受影响，同时优化植株的各项生长及生理生化指标。
[0028]本发明具有以下有益效果：
[0029]本发明提供了多效唑在调控国兰株型方面的应用，并探索优化出了最佳工艺方 法，即待植株长至5~15cm时，用1000~1500mg/L多效唑进行处理，每隔10~20天处理一次， 处理3~4次;更优选地在植株不同生长时期施用浓度梯度递增的多效唑，大大提升了多效 唑对国兰的作用，不仅可以显著降低国兰的株高，而且还保证植株叶片展幅不受影响，处理 后的国兰株型美观，可大规模应用于栽培生产。
[0030] 而且，本发明利用多效唑调控国兰株型的方法，具有省工省时、经济效益高的优 点，是一种简单、方便、见效快的方法。因此使用多效唑控制国兰株型、叶片生长，提高国兰 抗病性、色泽及观赏价值方面的研究对提高国兰的品质是一个新的研究课题，也有很大的 经济效益和社会效益，前景广阔。
[0031] 另外，得出了适合于国兰矮化的多效唑使用浓度和使用方法的成套技术，包括合 适的处理时间、合理的处理次数等等，可应用于国兰栽培的大规模应用，提高国兰的生产技 术水平和观赏价值，增强我国在世界花卉产业上的竞争力，并获得巨大的经济效益和社会 效益，对我市乃到我国国兰现代化生产也有示范作用。
【附图说明】
[0032]图1为多效唑各组处理企黑植株高度的变化。
[0033]图2为矮壮素各组处理企黑植株高度的变化。
[0034]图3为多效唑各组处理吴字翠植株高度的变化。
[0035]图4为矮壮素各组处理吴字翠植株高度的变化。
[0036] 图5为多效唑对企黑光合特性的影响。
[0037] 图6为多效唑对吴字翠光合特性的影响。
[0038] 图7为多效唑对企黑叶绿素含量的影响。
[0039] 图8为多效唑对吴字翠叶绿素含量的影响。
[0040] 图9为多效唑对黄金彩虹生长的影响。
[0041] 图10为丁酰肼对黄金彩虹生长的影响。
[0042] 图11为植物生长延缓剂对黄金彩虹抗氧化酶活性及丙二醛含量的影响;A~D分别 为丁酰肼、烯效唑及多效唑对建兰黄金彩虹过氧化物酶活性、超氧化物歧化酶活性、过氧化 氢酶活性和丙二醛含量的影响。
[0043]图12为丁酰肼、烯效唑及多效唑对建兰黄金彩虹可溶性糖含量(A)以及可溶性蛋 白质含量(B)的影响。
[0044] 图13为丁酰肼、烯效唑及多效唑对建兰黄金彩虹叶绿素含量的影响。
[0045] 图14为丁酰肼、烯效唑及多效唑对建兰黄金彩虹光合特性的影响。
[0046] 图15为多效唑对台北小姐生长的影响。
[0047] 图16为丁酰肼对黄金彩虹生长的影响。
[0048] 图17为植物生长延缓剂对杂交兰台北小姐抗氧化酶活性及丙二醛含量的影响;A ~D分别为丁酰肼、烯效唑及多效唑对台北小姐过氧化物酶活性、超氧化物歧化酶活性、过 氧化氢酶活性和丙二醛含量的影响。
[0049] 图18为丁酰肼、烯效唑及多效唑对台北小姐可溶性糖含量(A)和可溶性蛋白质含 量(B)的影响。
[0050] 图19为丁酰肼、烯效唑及多效唑对台北小姐叶绿素含量的影响。
[00511图20为丁酰肼、烯效唑及多效唑对台北小姐光合特性的影响。
[0052]图5、图6、图14和图20中Pn是净光合速率，Gs是气孔导读，Ci是胞间二氧化碳浓度， Tr是蒸腾速率。
【具体实施方式】
[0053]以下结合说明书附图和具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明 做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试 剂、方法和设备。除非特别说明，所用试剂和材料均为市购。
[0054]实施例1植物生长延缓剂对墨兰的矮化研究 [0055] 1、试验材料
[0056] 中国兰墨兰Cymbidium sinense(Andr· )Willd.中的两个品种企黑和吴字翠。
[0057]四川国光农化有限公司生产的15 %的多效唑（PP333)粉剂，及日本进口矮壮素 (CCC)原药两种植物生长延缓剂。
[0058] 本试验在华南师范大学国兰研究中心进行，每盆种植母株4~7株于3.5寸塑料花 钵内，以石子混合发酵花生壳为基质培养。
[0059] 2、试验设计
[0060] (1)试验采用正交设计实验方法，以确定延缓剂施用于墨兰的最佳剂量、生长时 期、施用次数及施用的时间间隔。两种生长延缓剂皆设四个因素，分别为生长延缓剂浓度、 处理时期、处理次数、处理时间间隔；每个因素设三个水平，其中生长延缓剂浓度为(500mg/ 1^，100011^/1，150011^/1)，处理时期分别为植株高5〇11、10〇11、15〇11左右时（只处理新发生的叶 芽），处理次数分别为2次3次4次，处理时间间隔分别为10天、20天、30天。正交表设计如表1。 [0061 ]表1正交试验因素水平表
[0062]
[0063]
[0064] (2)处理方式:植物生长延缓剂施用采用叶喷方式（以处理叶片表面湿润为原则）， 以清水为对照。植株墨兰企黑，一盆约4~6株，新叶芽2~4芽，每芽施用延缓剂8~10ml;每 处理6芽，三次重复。墨兰吴字翠，一盆约5~7株，新叶芽4~6芽，每盆施用延缓剂30ml;每处 理一盆，三次重复。常规水肥管理。
[0065] 3、测定项目及测定方法
[0066] (1)植株生长量测定:开始处理后，每隔30天测定每处理组植株的叶片长度，计算 其叶片生长量。
[0067] (2)植株生长指标:从开始处理160天后分别测定各处理组植株的株高、叶片展幅、 假茎粗，并测量植株从外到内第二片叶片的长度、宽度以及叶面积，及整株植物的叶片生物 量。株高以植株离水平面最高点到假茎基部的距离为准;假茎粗选择离假茎基部0.5cm最宽 处进行测量;叶片展幅为单株叶片展开的最大长度为准。叶长选取从叶片基部与假鳞茎相 接处至叶尖的长度；叶宽选取叶片最宽处测量;叶面积采用雅欣叶面积仪Yaxin-1241进行 测量;叶片生物量用千分之一天平测定各处理组单株地上部分的鲜重，放于80°C烘箱中烘 干至恒重后称取干重。（以上均测量5次取平均值）。
[0068] (3)光合作用相关指标的测定：处理140天后，每处理选取6株，测定净光合速率 (Pn)、气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Tr)、细胞间隙C02浓度(Ci)，用美国LI-C0R公司生产的LI-6400光合作用测定系统测定。
[0069] (4)叶绿素含量的测定:参考Arnon方法(植物生理生化指导，1995)。
[0070] 4、数据分析:采用Excel 2010和SPSS 17.0统计软件进行数据统计，用单因素方差 分析(one-way AN0VA)、最小显著差异法(LSD)和同类子集(Duncan)多重比较不同处理组数 据的差异。正交试验的直观分析与方差分析由正交设计助手软件v3.1处理后得出。
[0071] 5、试验结果与分析
[0072] (1)植物生长延缓剂对墨兰生长速率的影响
[0073] 1)植物生长延缓剂对企黑株高的影响：如附图1和2所示，与对照相比，多效唑各处 理组均有效降低了株高，其中PL1、PM2、PL3组效果最为显著，PL1组株高比对照降低了 59%。 而与对照相比，矮壮素各处理方案对企黑株高都没有显著影响，说明浓度为500、1000、 1500mg/L的矮壮素不利于降低株高。
[0074] 2)植物生长延缓剂对吴字翠叶片长度株高的影响：如附图3和4所示，多效唑各处 理组均有效降低了株高，而矮壮素各处理不能矮化吴字翠植株。因此，说明矮壮素不适宜用 作墨兰的矮化剂使用。以下试验不再列出矮壮素的结果。
[0075] (2)植物生长延缓剂对墨兰形态指标的影响
[0076] 1)植物生长延缓剂对企黑形态指标的影响
[0077]如表2所示，多效唑处理能显著的降低企黑的株高、叶长，所有处理组矮化程度均 达到35%以上。其中，PL1组降幅最显著，株高较对照降低了 55.30%，叶长较对照降低了 58.23% WM2、？1^、？1^3、？]?1处理也大幅矮化了企黑，株高分别降低了20.62〇11、19.83〇11、 18 · 87cm、18 · 64cm，叶长分别减小了 25 · 53cm、23 · 28cm、22 · 36cm及22 · 21cm。可见浓度为 1000mg/L和1500mg/L的多效唑对株高的抑制效果更显著。同时，多效唑处理也使叶片展幅 显著缩小;尤其是在小苗时用高浓度处理，叶片几乎不展开。多效唑处理也减小了植株的假 茎粗，其中PL1处理降幅最大，下降了 6.6mm。除PL3处理，其余处理组叶宽也较对照小幅降 低，但除PL1和PS3处理外都没有显著性差异。
[0078]总之，经多效唑处理后，企黑植株明显矮化、株型更加紧凑。
[0079]表2多效唑对企黑形态指标的影响
[0080]
[0081 ] 2)植物生长延缓剂对吴字翠形态指标的影响
[0082]如表3所示，植物生长延缓剂多效唑对墨兰吴字翠的各项形态指标都有明显影响。 各处理组叶片长度较对照均有显著下降，其中PL1组与PM2组变短最明显，分别下降了 49.28%、48.22%。株高除在大苗（15〇11以上）时候开始处理的？33、？13、？1^3外，其余各组也 都下降明显且达到显著性差异，降低程度最明显的同样是PL1、PM2组，降幅达23.8%及 22.3%。各处理组植株叶片展幅较对照均显著减小；叶长降低较多的处理组其叶展幅度相 对较小。各组植株假茎粗均显著减小。PM3和PL3处理显著增加了叶宽，其他处理与对照差异 不大。
[0083]表3多效唑对吴字翠形态指标的影响 [0084]
[0085]综上所述，500~1500mg/L的多效唑能有效降低两种墨兰植株的叶长与株高。但 500~1500mg/L的矮壮素却未对矮化墨兰起作用，反而小幅提高了墨兰的叶长和生物量，达 到了壮苗的效果。
[0086]实施例2多效唑矮化墨兰方案优化 [0087] 1、实验材料和方法同实施例1。
[0088] 2、影响形态指标的最优条件分析：以降低株高、叶长最多且尽量不影响叶片展幅 为评判依据。
[0089] (1)多效唑处理墨兰企黑最优条件分析
[0090] 株高最高的是PS1组，为25.56cm，最低的是PL1组，为17.96cm。由表5方差分析可 知，延缓剂多效唑的施用浓度较其他三个因素有一定差异，说明施用浓度在株高中起着决 定性作用。表6直观分析中，浓度为1500mg/L能最有效的降低株高。处理时间、处理次数、处 理间隔3个因素对结果影响不大，其最优水平分别是植株处于10cm左右时开始处理、处理4 次、每隔20天处理一次。
[0091]同样，使叶长缩短最多的组为PL1组，PM2、PL2组其次。由方差分析可知，多效唑的 施用浓度较其他因素对缩短叶长具有明显影响。由叶长得出的最佳处理水平分别是：用浓 度为1500mg/L的多效唑处理，在植株长到10cm左右时开始处理，处理4次，每隔20天处理一 次。
[0092] 9个处理组皆大幅减小了企黑的植株开展幅度，但开展幅度太小会影响国兰的观 赏效果。所以选择降低展幅程度最小的水平为最佳方案。由表4正交直观分析可知，展幅的 最佳处理方案为施用500mg/L的多效唑，在植株长到15cm左右开始处理，处理2次，每隔10天 处理一次。
[0093]综合考虑，企黑的最佳矮化方式为用1000~1500mg/l多效唑，待到植株10cm左右 开始处理，处理3次，每隔10~20天处理一次效果最佳。
[0094] 表4多效唑处理企黑的直观分析
[0095]
[0096]
[0097] 表5多效唑处理企黑的方差分析
[0098]
[0099] (2)多效唑处理墨兰吴字翠最优条件分析
[0100] 表6多效唑处理吴字翠的直观分析
[0101]
[0103]表7多效唑处理吴字翠的方差分析
[0104]
[0105] 注:*代表显著性差异(P〈0.05)，林表示极显著差异(P〈0.01)
[0106] 由表7可知，多效唑的开始处理时间对吴字株型影响较大，达到显著性差异。由株 高得出的最佳处理方案为：施用1500mg/L多效唑，在植株高度达到5cm时开始施用，处理4 次，每隔10天处理一次。由对叶长的正交试验方差分析可知，处理时间对叶长的影响最大， 达到了极显著差异；多效唑浓度、处理间隔也对夜场影响较大，达到了显著性差异水平。由 表6可知，影响叶长的最佳处理方案与株高相同。而对展幅来说，处理时间和浓度对结果影 响较大，均达到显著性差异水平。由表6得到的直观分析可知最佳的处理方案为：用500mg/L 多效挫，在植株达到15cm左右开始处理，处理4次，每隔20天处理一次。
[0107] 综合分析，矮化吴字翠植株最合适的处理方案为：用1000~1500mg/L多效唑在植 株10cm左右开始处理，处理4次，每隔10~20天处理一次。
[0108] 3、植物生长延缓剂对墨兰生物量的影响
[0109] (1)多效唑对墨兰企黑生物量的影响：由表8可知，经多效唑处理后，企黑植株干 重、鲜重都显著降低。PL1、PS3、PM2处理组生物量下降最多。且植株干重与鲜重的变化趋势 大致相同。其中PL1组鲜重比对照降低了61%，但干重只降低了57%，说明多效唑处理增加 了植株的相对干物质量。除PM3处理外，其余各组单位干物质量都比对照少量增加，但未达 到显著性差异，说明除PM3外的各种处理方式对企黑单位叶片的干物质含量没有影响。
[0110] 表8多效唑对企黑生物量的影响
[0111]
[0112] (2)多效唑对墨兰吴字翠生物量的影响
[0113] 表9多效唑对吴字翠生物量的影响
[0114]
12 由表9可知，多效唑对吴字翠各处理组生物量的不尽相同。其中，PS3、PM3、PL3三 组，是在大苗(植株高15cm以上)时期才开始处理的处理组，其鲜重干重都较对照有所增加。 而其他处理组生物量较对照降低明显。且对照组的干重/鲜重比值低于各处理组，其中PS1、 PS2、PM1、PL3处理有显著差异，说明经多效唑处理，更有利于吴字翠植株积累干物质。 2 4、植物生长延缓剂对墨兰光和特性的影响
[0117] (1)多效唑对墨兰企黑光合特性的影响
[0118] 如图5所示，由净光合速率Pn的变化可看出PL1组较对照降幅为70.6%，达到显著 性差异;其他各组变化不显著。其中PM1、PS1、PL3处理增加了企黑的净光合速率。与对照相 比，除PM1组外，其他处理均降低了企黑的气孔导度Gs。各处理组蒸腾速率Tr的变化也不尽 一致，但与对照均差异不显著。说明多效唑处理企黑在一定程度上会影响光合速率，增强或 减弱依施用方案不同而异。这与PL1组胞间C0 2的增加也证明了 PL1组光合减弱，导致对C02的 吸收减少。说明矮化明显的PL1、PM2处理组较其他处理更耐荫蔽环境。
[0119] (2)多效唑对墨兰吴字翠光合特性的影响
[0120] 如图6,多效唑处理后吴字翠的光合作用有所减弱，各处理组Pn、Gs、Tr均下降。净 光合速率Pn除PS1、PL3组外，全部达到显著性差异。其中PL1组光合速率降低最显著，降幅达 76%，同时PL1也是矮化效果最显著的处理组。表明高浓度高次数施用多效唑会减弱吴字翠 的光合作用。气孔导度Gs、蒸腾速率Tr变化与Pn基本一致，各处理组均下降，且降幅最明显 的也是PL1组。而胞间C0 2变化受到气孔导度、叶肉导度和光合活性情况的影响而变化不一 致。
[0121] 5、植物生长延缓剂对墨兰叶绿素含量的影响：如附图7和8所示，多效唑处理使企 黑和吴字翠的叶绿素含量略有降低。
[0122] 6、综上所述，经过正交试验后，药剂浓度和第一次处理的时间这两个因素对实验 结果起着决定性的作用。
[0123] 对于企黑植株来说，最佳的矮化方式为用1000~1500mg/L多效唑，待到植株10cm 左右开始处理，处理3~4次，每隔10~20天处理一次效果最佳。综合株高、叶长、展幅、叶绿 素含量及光合速率的各方面因素，认为多效唑处理在不影响植物正常生长的情况下能够有 效的矮化企黑，但要避免高浓度多次施用。
[0124]对于吴字翠植株来说，最合适的处理方案为：用1000~1500mg/L多效挫在植株 10cm左右开始处理，处理4次，每隔10~20天处理一次。
[0125] 吴字翠与企黑处理得到的结果非常相似，所以可以得到墨兰植株的普遍矮化方 案：即使用1000~1500mg/L多效唑，待到植株10cm左右开始处理，处理3~4次，每次处理相 隔10~20天效果最佳。处理后墨兰植株矮化程度可达到40%，且处理后植株状态良好。
[0126] 实施例3植物生长延缓剂对建兰生长的研究
[0127] 1、实验材料
[0128] 以中国兰建兰Cymbidium ensifolium(L. )Sw.中的黄金彩虹为试验材料。每盆种 植母株4~7株于3.5寸塑料花钵内，以石子混合发酵花生壳为基质培养。
[0129 ]植物生长延缓剂选用两种，四川国光农化有限公司生产的15 %的多效唑(PP333 )粉 剂，四川国光农化有限公司生产的50 %的丁酰肼(B9)粉剂。
[0130] 2、实验设计
[0131] (1)多效唑的设计如表10所示，丁酰肼设三个不同浓度(如表11所示）。
[0132] 根据之前正交试验的结果，已筛选得出最佳的处理时间、处理次数和处理时间间 隔。但用较高浓度多次处理会抑制国兰的生长，影响其植株的展幅，从而影响国兰的观赏效 果。因此此次试验需探索如何在矮化植株的同时，还能尽量不抑制植株的生长使植株叶片 正常开展。设置处理时期为植株高l〇cm左右时（处理新发生的叶芽），处理4次，处理时间间 隔为20天。具体处理方案表10所示。
[0133] 表10多效唑试验设计
[0134]
[0135] 表11 丁酰肼试验设计
[0136]
[0137]
[0138] (2)处理方式:植物生长延缓剂施用为采用叶喷方式（以全部处理叶片表面湿润为 原则），以清水为对照;建兰黄金彩虹，一盆约4~6株，新叶芽4~6芽，每芽施用延缓剂10ml; 每处理10芽，三次重复。
[0139] 3、测定项目及测定方法
[0140] (1)植株生长量的测定：从开始施用植物生长延缓剂的1~80天，每隔20天测定各 处理组植株的叶片长度、植株高度、叶片展幅及假茎粗。
[0141] (2)植株生长指标的测定:施用80天后，每处理组随机选取3株，离体后测定单株最 长叶片的宽度、叶面积、植株鲜重、干重。
[0142] (3)丙二醛(MDA)含量的测定:采用硫代巴比妥酸法(赵世杰等，2002)。
[0143] (4)抗氧化酶活性测定:包括超氧化物歧化酶（S0D)活性、过氧化物酶(P0D)活性 (采用愈创木酚法）、过氧化氢酶(CAT)活性(采用紫外分光光度法）。
[0144] (5)可溶性总糖及可溶性蛋白含量的测定。
[0145] (6)光合特性的测定、叶绿素含量的测定，同上述实施例。
[0146] (7)数据分析:采用Excel 2010和SPSS 17.0统计软件进行数据统计，用单因素方 差分析(one-way AN0VA)、最小显著差异法(LSD)和同类子集(Duncan)多重比较不同处理组 数据的差异。
[0147] 4、实验结果
[0148] (1)植物生长延缓剂对黄金彩虹生长情况的影响
[0149] 1)多效唑对黄金彩虹生长情况的影响
[0150] 如图9所示，P1、P2处理组均能降低黄金彩虹植株的株高及叶长，同时也使其叶片 展幅减小。P1、P2组黄金彩虹的生长速率差不多，但P1组在处理20天后略高于P2组。所以可 以推测随着处理天数的增加，P1、P2两处理组的叶片长度和株高会越来越接近。叶片展幅的 增长速率也是P1组略大于P2组，但由于P2组开始处理时叶片已经开展较大，所以最终P2组 仍展开较P1组多约2cm。说明处理时期对展幅的影响大于处理浓度对展幅的影响。
[0151 ] 2) 丁酰肼对黄金彩虹生长情况的影响
[0152] 如图10所示，经过丁酰肼处理后的植株高度、叶片长度及叶片展幅降幅不大，矮化 不明显。而且，2000mg/L的丁酰肼对建兰黄金彩虹没有矮化作用。
[0153] (2)植物生长延缓剂对黄金彩虹形态指标的影响
[0154] 表13 丁酰肼、烯效唑及多效唑对建兰黄金彩虹形态指标的影响
[0155]
[0156] 表13显示了经两种延缓剂处理80天后黄金彩虹的生长状况。矮化效果最好的为S3 处理组，与对照相比将株高和叶长分别降低了 18.7%和28.7%，达到极显著差异水平。其 次，多效唑的两个处理组P1、P2的株高也分别降低了 17.8 %和7.4 %。而丁酰肼的合适矮化 浓度在6000mg/L及以上。
[0157] 另外，所有处理组的叶片展幅都较对照有所减小，其中降低最多的是P1处理组，其 余各组降低程度不显著，其中B3及P2处理展幅最大。各处理假茎粗度叫对照略有增加，叶片 宽度不同处理组变化不同，但二者与对照均无显著性差异，说明两种延缓剂对叶宽及假茎 粗的影响不大。
[0158] (3)植物生长延缓剂对黄金彩虹生物量的影响
[0159] 表14 丁酰肼、多效唑对建兰黄金彩虹生物量的影响
[0160]
[0161] 除P2处理外，其余所有处理组鲜重干重与对照相比均降低。其中鲜重降低明显，均 达到显著性差异。株高降幅最显著的P1处理组其生物量降幅也最大。而P2处理却增加了植 株的鲜重及干重，并且增幅很大，达到了 18.1%和24.0%，说明P2组的延缓剂处理方式能够 有效的增加植物的生物量。而经过计算单位干物质量，各组都比对照有所增加，但没有显著 性差异。
[0162] (4)植物生长延缓剂对黄金彩虹抗氧化酶活性及丙二醛含量的影响
[0163] 如图11所示，所有处理组植株的P0D活性均低于对照(A图）。各处理组与对照均无 显著性差异，2种生长延缓剂处理均未对植株S0D活性造成较大影响（B图）。过氧化氢酶CAT 活性与SOD活性各处理组与对照相比均无显著性差异(C图）。不同处理对黄金彩虹MDA含量 影响均未达到显著性差异(D图）。
[0164] (5)植物生长延缓剂对黄金彩虹可溶性糖和可溶性蛋白（抗性指标)含量的影响： 由图12可知，P1处理组可溶性糖及可溶性蛋白含量均较对照提高，说明用P1的处理方式使 植株具有更强的渗透调节能力，能增强植株的抗逆性。
[0165] (6)植物生长延缓剂对黄金彩虹叶绿素含量的影响
[0166] 如图13所示，综合比较，P1处理的叶绿素含量与对照组最为接近。
[0167] (7)植物生长延缓剂对黄金彩虹光合生理的影响
[0168] 根据之前的试验结果，确定B3、P1、P2处理组对黄金彩虹有良好的矮化效果。所以 选择B3、P1、P2组植株测定其光合特性。
[0169] 如图14所示，B3、P1、P2三个处理组的净光合速率均有提高，都较对照提高了 14.7%以上。总之，这三种处理方式能够提高建兰黄金彩虹的光合作用，其中P2处理组的处 理方式效果最佳。
[0170] 综上所述，本次试验总结上次正交试验，设计了在植株较幼小时施用低浓度试剂， 随着植株的长高再逐渐增大生长延缓剂浓度。结果显示此种方法确实大大改善了之前由于 高浓度多次施用造成的植株展幅太小的弊端。P1、P2两种处理方式均有明显的矮化效果，且 P2处理对植株的展幅影响不大，很好的优化了黄金彩虹的株型。而经过对各项生理指标的 试验也证明两种处理方式对植株生长没有不良影响，且提高了植株的光合作用。说明两种 方式均可作为优良的矮化方案使用。相比之下，丁酰肼的矮化效果相对较差，只有B3处理即 6000mg/L的浓度可以降低株高，而高浓度施用丁酰肼容易造成药害，且残留物致癌，所以丁 酰肼对黄金彩虹来说并非合适的矮化剂。
[0171] 因此，P2、P1两种处理方式对建兰黄金彩虹的矮化效果最好，而且叶片的展幅也不 会太小，能在矮化植株的同时保证株型的美观，可用于生产实践。
[0172] 实施例4植物生长延缓剂对杂交兰生长的研究
[0173] 1、试验材料
[0174] (1)植物：建兰（Cymbi dium ens i fo 1 ium (L · ) Sw ·)与大花蕙兰（Cymb idium hubridum)杂交种一台北小姐。每盆种植母株3~5株于3.5寸塑料花钵内，以石子混合发酵 花生壳为基质培养。
[0175] (2) 15 %多效唑(PP333)粉剂和50 % 丁酰肼(B9)粉剂。
[0176] 2、试验设计
[0177] (1)植物延缓剂施用方案同上文黄金彩虹。唯一区别在于开始处理的时期不同。每 处理6芽，三次重复。丁酰肼设三个不同浓度，分别为丁酰肼2000mg/L、4000mg/L、6000mg/L。 与黄金彩虹一致。因为台北小姐具有母本大花蕙兰的特性，其叶片细软纤长，叶长可达 80cm，所以设置开始的处理时期为植株高13cm左右(处理新发生的叶芽），处理次数为4次， 处理时间间隔为20天。试验设计如表15,分别在不同时期喷施不同浓度的药剂，共喷施3次。
[0178] 表15多效唑试验设计
[0179]
[0180] (2)处理方式:植物生长延缓剂施用为采用叶喷方式（以全部处理叶片表面湿润为 原则），以清水为对照;一盆约3~6株，新叶芽2~4芽，每芽施用延缓剂10ml;每处理6芽，三 次重复。
[0181] 3、测定项目、测定方法以及数据分析，同实施例3。
[0182] 4、实验结果与分析
[0183] (1)植物生长延缓剂对杂交兰台北小姐生长情况的影响
[0184] 1)多效唑对台北小姐生长速率的影响：如图15所示，P1、P2处理组均能降低台北小 姐植株的株高及叶长，同时也使其叶片展幅减小，说明P1、P2处理均能达到优良的矮化效 果。P1、P2处理叶长、株高都差不多，P2处理组株高略低于P1组。从图中斜率可知各处理组植 株的生长速率，P1、P2处理都可使台北小姐的株高、叶长、展幅的增长速率明显减小，推测处 理组植株会提前停止生长。
[0185] 2)丁酰肼对台北小姐生长情况的影响：由图16可知，经过丁酰肼处理后的植株高 度、叶片长度及叶片展幅降幅很小，且三个处理组叶片生长速率与对照相差都不大，说明三 种浓度的丁酰肼处理对杂交兰台北小姐矮化效果较弱。
[0186] (2)植物生长延缓剂对杂交兰台北小姐形态指标的影响
[0187] 表16显示了经三种延缓剂处理80天后黄金彩虹的生长状况。株高降低最多的两个 组为P2、P1组，达到极显著差异水平。而对叶长降低最多的处理组为P1组，同样达到极显著 差异；因此矮化效果最好的处理为P1处理。施用丁酰肼的三个处理组虽都将株高有所降低， 但除B2外，B1、B3处理均小幅增加了叶片的长度，说明丁酰肼的合适矮化浓度应为6000mg/L 及以上。除B3处理小幅增加了叶片展幅外，其余各处理组均减小了展幅，其中降低最多的是 卩1组，达到显著性差异』3、？1、？2处理还增加了植株的假茎粗，其中？2组增加了18.2%，达 到显著性差异。而各处理对叶宽的影响不一致，且都没达到显著性差异。
[0188] 表16 丁酰肼、多效唑对杂交兰台北小姐形态指标的影响
[0189]
[0190] (3)植物生长延缓剂对杂交兰台北小姐生物量的影响
[0191] 由表17,所有处理均降低了台北小姐的鲜重及干重，并且都达到显著性差异。其中 矮化效果较好的P1处理生物量降低最多。但P2处理少量增加了单位干物质量，说明这种处 理有利于植株积累营养成分。其余各处理均使单位干重降低，且均达到显著性差异，说明这 些处理有利于植株水分的积累。
[0192] 表17 丁酰肼、多效唑对台北小姐生物量的影响
[0193]
[0194]
[0195] (4)植物生长延缓剂对杂交兰台北小姐抗氧化酶活性及丙二醛(抗逆性指标)含量 的影响：如图17所示，各处理组没有显著改变台北小姐P0D活性(A图）。与对照相比B2处理组 使SOD活性显著升高19.5%，B1、B3处理组变化不大，而施用多效唑的两个处理组PI、P2则降 低了SOD活性，其中P2降幅达到显著性差异水平15.2% (B图）。植物生长延缓剂对台北小姐 CAT活性的影响比对SOD及POD的活性大，各处理组均降低了 CAT活性，说明植物生长延缓剂 的这种处理方式并没有使植株积累多余的过氧化氢，未对植株造成胁迫，所以相应的酶活 性也没有升高(C图）。各处理MDA含量都与对照组含量相差不大，说明各处理方式并没有使 台北小姐积累过多氧化性物质，对植株无害(D图）。
[0196] (5)植物生长延缓剂对杂交兰台北小姐可溶性糖和可溶性蛋白含量的影响：如图 18所示，与对照相比，各处理组可溶性糖的含量变化不显著(A图）。各处理组的可溶性蛋白 含量都比对照组低，且都达到了显著性差异，说明生长延缓剂的施用会使台北小姐可溶性 蛋白的积累减小(B图）。
[0197] 综合考虑，P1和P2处理组可溶性糖及可溶性蛋白含量较其他处理更好，说明选择 多效唑P1、P2的处理方式对植物叶片生长更加有利。
[0198] (6)植物生长延缓剂对杂交兰台北小姐叶绿素含量的影响如图19,综合比较，处理 组PI、B3较其他处理更优。
[0199] (7)植物生长延缓剂对杂交兰台北小姐光合生理的影响如图20所示，B3、P1、P2三 个处理均使台北小姐的净光合速率显著增高，显著提高光合作用。综上所述，多效唑P1、P2 两种处理方式在使植株保持良好的叶片展幅的情况下均明显的降低了株高和叶长，达到很 好的矮化效果，优化了台北小姐的株型，使株型矮小挺拔、叶片缩短变厚、植株光合能力增 强。因此，PI、P2两种处理方式对杂交兰台北小姐的矮化效果最好，建议用于生产实践。
【主权项】
1. 多效唑在调控国兰株型或在制备调控国兰株型的制剂方面的应用。2. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述国兰为墨兰、建兰或建兰与大花蕙兰 的杂交种。3. -种利用多效唑调控国兰株型的方法，其特征在于，是利用叶喷的方式，将多效唑喷 施在国兰叶片上，至处理叶片表面湿润。4. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述多效唑的浓度为500mg/L~1500mg/L。5. 根据权利要求4所述的方法，其特征在于，是待到植株长至5~15cm时，开始用500~ 1500mg/L的多效唑进行处理，每隔10~20天处理一次，处理3~4次。6. 根据权利要求5所述的方法，其特征在于，待到植株长至9~1 lcm时开始处理。7. 根据权利要求5所述的方法，其特征在于，每隔20天处理一次。8. 根据权利要求5所述的方法，其特征在于，共处理3次。9. 根据权利要求5所述的方法，其特征在于，是待到植株长至10~13cm时进行第一次多 效唑叶喷处理，多效唑喷施浓度200mg/L;待植株长至15~18cm时，进行第二次多效唑叶喷处 理，多效唑喷施浓度700mg/L;待植株长至20~22cm时，进行第三次多效唑叶喷处理，多效唑 喷施浓度1200mg/L; 或待到植株长至15~17cm时进行第一次多效唑叶喷处理，多效唑喷施浓度500mg/L;待 植株长至18~22cm时，进行第二次多效唑叶喷处理，多效唑喷施浓度1000mg/L;待植株长至 22~25cm时，进行第三次多效唑叶喷处理，多效唑喷施浓度1500mg/L。10. 权利要求3~9任一所述方法在调控国兰株型方面的应用。
【文档编号】A01P21/00GK106070234SQ201610450748
【公开日】2016年11月9日
【申请日】2016年6月17日
【发明人】李菲菲, 叶庆生, 李虬
【申请人】华南师范大学