一种用于黄龙病防控的药剂的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种用于黄龙病防控的药剂，并采用树干输液的方法施药。每100ml药剂的主要构成是：氨苄青霉素0.5?1克；环戊基哌嗪利福霉素，0.2?0.5克；稳定剂：1,2? 丁二醇0.5?2mL；防冻剂：乙二醇，0.1?2 mL；新型助渗剂：氮酮，0.1?2 mL；分散剂：木质素磺酸钠，0.1?2克；乳化剂：十二烷基苯磺酸钠，0.1?2克；助溶剂：DMSO，0.1?2 mL；其余：去离子水补充至100ml。本发明的组合物是根据黄龙病防控的客观需要，通过利用两种杀菌机制不同的杀菌剂进行合理的混配，并采用树干输液的方法施药，可使制剂优势互补，并具备高效、低毒、安全、经济、多功能的特性，可更好的防控黄龙病。
【专利说明】
一种用于黄龙病防控的药剂
技术领域
[000?]本发明涉及一种氨节青霉素杀菌剂与环戊基哌嗪利福霉素 Rifapentine杀菌剂的 组合物，并采用树干输液的方法施药，用于黄龙病防控。
【背景技术】
[0002] 柑橘黄龙病是无法治愈的毁灭性病害，也是世界柑橘生产上最为严重的病害。柑 橘植株被侵染后，一般在染病2-3年后即失去商业价值。自发现以来，该病借助苗木嫁接调 运和虫媒介体-柑橘木虱迅速传播，现已广泛分布于东南亚、非洲、阿拉伯半岛、印度、巴西 和美国佛罗里达和加利福利亚等50多个国家和地区。世界上已超1亿株柑橘树被黄龙病摧 毁。在我国有柑橘栽培的20个省(市，地区）中已有10多个主产省受到该病的严重危害。
[0003] 目前尚无任何可用的抗黄龙病的柑橘品种。但研究发现:黄龙病的病原为韧皮部 杆菌属细菌(Candidatus Liberibacter)。这种细菌对抗生素较为敏感。氨节青霉素钠是一 种高效、低毒、应用广泛的半合成的广谱青霉素，对多种病原细菌均有很好的抑制作用，其 分子中含有青霉烷、能破坏细菌的细胞壁并在细菌细胞的繁殖期起杀菌作用。环戊基哌嗪 利福霉素为半合成广谱杀菌剂，最低抑菌浓度低。该药可与依赖DNA的RNA多聚酶的亚单位 牢固结合，抑制细菌RNA的合成，防止该酶与DNA连接，从而阻断RNA转录过程，使DNA和蛋白 的合成停止。黄龙病的防控有其独特性:如果只施用单一品种的杀菌剂虽然可以短时间降 低黄龙病浓度，但黄龙病菌会很快产生抗药性，从而大大减弱杀菌剂的药效。因此本发明的 两种不同杀菌机制的杀菌剂协同混配使用方法对黄龙病的防控极为关键。
[0004] 传统的杀菌剂外施方法，简单易行。但是柑橘黄龙病菌是一种比较特殊的病原菌， 其特异地寄生于柑橘的韧皮部，传统的杀菌剂外施方法较难渗入柑橘外表皮，因此药效较 差。而采用树干输液的方法施药，可使药剂直接进入树体，避开柑橘外表皮，到达病菌寄生 处，大大提高了药剂的有效性，并具备安全、低污染的特性，可更好的防控黄龙病。
[0005] 根据检索相关的研究及专利文献，未见有氨苄青霉素杀菌剂与环戊基哌嗪利福霉 素混配加工成树干注射剂的相关文献报道。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的在于提供一种用于黄龙病防控的药剂。
[0007] 为实现上述目的，本发明采用如下技术方案： 本发明公开了一种含有氨节青霉素杀菌剂与环戊基哌嗪利福霉素 Rifapentine杀菌剂 的组合物，并采用树干输液的方法施药。每l〇〇ml药剂的主要构成是:氨苄青霉素0.5-1克； 环戊基哌嗪利福霉素，0.2-0.5克;稳定剂：1，2- 丁二醇0.5-2mL;防冻剂：乙二醇，0.1-2 mL;新型助渗剂:氮酮，0.1-2 mL;分散剂:木质素磺酸钠，0.1-2克;乳化剂:十二烷基苯磺酸 钠，0.1-2克;助溶剂:DMS0,0.1-2 mL;其余:去离子水补充至100ml。
[0008] 该药剂采用树干输液的方法施药。
[0009] 制备方法:称取氨苄青霉素、环戊基哌嗪利福霉素、木质素磺酸钠、十二烷基苯磺 酸钠原药适量，一起加入到锥型混合机中混合2小时，将混合后的物料加入到气流粉碎机中 进行粉碎，粉碎后的物料再加入到锥型混合机中混合2小时，使用10目和60目的标准筛进行 筛分，取两筛中间的物料，加入适量去离子水充分搅拌溶解，然后加入适量1，2-丁二醇、乙 二醇、氮酮、DMSO,充分搅拌溶解，最后用去离子水调配至合适浓度，然后加入离心瓶， 12000g离心30分钟，取上清液即制得药剂。
[0010]本发明的优点在于:本发明的组合物是根据黄龙病防控的客观需要，通过利用两 种不同杀菌机制的杀菌剂进行合理的混配，并采用树干输液的方法施药，可使制剂优势互 补，并具备高效、低毒、安全、经济、多功能的特性，可更好的防控黄龙病。
【具体实施方式】
[0011]下面结合具体实施例对本发明做进一步的说明： 实施例1. 2014年5月在广东省广州市白云区钟落潭镇柑橘场随机选取40棵柑橘树，进行黄龙病 检测，结果发现:其黄龙病发病率为100%。试验设计遵循随机选取原则，随机选取10株作为 处理组，采用树干输液法，输入药剂(每l〇〇ml药剂的主要构成是氨苄青霉素1克;环戊基哌 嗪利福霉素，0.2克;稳定剂：1，2- 丁二醇lmL;防冻剂：乙二醇，0.2 mL;新型助渗剂:氮酮， 0.5 mL;分散剂:木质素磺酸钠，0.5克;乳化剂:十二烷基苯磺酸钠，0.5%克;助溶剂:DMS0， 0.5mL)，另随机选取10株输入清水做对照，从5月1日开始施药，每月初施药一次，每次施药 300mL，共计输液4次。施药前采集柑橘叶片样品，每个月取样一次，采集的样品提取DNA后进 行实时荧光定量PCR方法测定植株的黄龙病菌Ct值数量的变动情况。 表1处理组柑橘中黄龙病菌CT值随时间的变化
*注同列数据具有差异显著（T-test) 表2柑橘样品中黄龙病菌浓度*105 (病原菌个数/每克柑橘病样）随时间的变化
*注同列数据具有差异显著（T-test) 结果发现处理组与对照组的黄龙病菌Ct值以及黄龙病菌浓度值在处理前无显著差异 (P>0.05)，而两组的Ct值在处理30天、60天、90天和120天后显著增大(PS0.05)，以及病原 浓度值显著降低(P<〇.05,结果见表1，表2)。表明输液处理对抑制柑橘病树的黄龙病菌浓 度有较好的作用。
[0012] 实施例2. 2014年4月在广东省广州市大丰柑橘基地随机选取20棵柑橘树，进行黄龙病检测，结果 发现:其黄龙病发病率为100%。试验设计遵循随机选取原则，随机选取10株作为处理组，采 用树干输液法，输入药剂(每l〇〇ml药剂的主要构成是氨苄青霉素0.5克;环戊基哌嗪利福霉 素，0.5克;稳定剂：1，2- 丁二醇0.5mL;新型助渗剂:氮酮，0.5 mL;分散剂:木质素磺酸钠， 〇. 5克;乳化剂:十二烷基苯磺酸钠，0.5克;助溶剂:DMSO，1 mL)，另随机选取10株输入清水 做对照，从4月1日开始施药，每月初施药一次，每次施药300mL，共计输液4次。施药前采集 两组植株枝端的叶片样品，每个月取样一次，采集的样品提取DNA后进行实时荧光定量PCR 方法测定植株的黄龙病菌Ct值数量的变动情况。
[0013]表3处理柑橘盆栽苗中黄龙病菌CT值随时间的变化
*注同列数据具有差异显著（T-test) 表4柑橘样品中黄龙病菌浓度*104 (病原菌个数/每克柑橘病样）随时间的变化
*注同列数据具有差异显著（T-test) 结果发现处理组与对照组的黄龙病菌CT值与黄龙病菌浓度值在处理前无显著差异(P> 0.05)，而两组的Ct值在处理30天、60天、90天和120天后显著增大(P<0.05)，以及病原浓度 值显著降低(P<〇.05,结果见表3,表4)。表明输液处理对抑制柑橘病树的黄龙病菌浓度有 较好的作用。
[0014]以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与 修饰，皆应属本发明的涵盖范围。
【主权项】
1. 一种用于黄龙病防控的药剂，其特征在于:每l〇〇ml药剂的主要组成为:氨苄青霉素 〇. 5-1克;环戊基哌嗪利福霉素0.2-0.5克;稳定剂：1，2- 丁二醇0.5-2mL;防冻剂：乙二醇， 0.1-2 mL;新型助渗剂:氮酮，0.1-2 mL;分散剂:木质素磺酸钠，0.1-2克;乳化剂:十二烷基 苯磺酸钠，〇. 1-2克;助溶剂:DMSO，0.1-2 mL;其余:去离子水补充至100ml。2. 如权利要求1所述的一种用于黄龙病防控的药剂的制备方法，其特征在于:称取氨苄 青霉素、环戊基哌嗪利福霉素、木质素磺酸钠、十二烷基苯磺酸钠原药适量，一起加入到锥 型混合机中混合2小时，将混合后的物料加入到气流粉碎机中进行粉碎，粉碎后的物料再加 入到锥型混合机中混合2小时，使用10目和60目的标准筛进行筛分，取两筛中间的物料，加 入适量去离子水充分搅拌溶解，然后加入1，2-丁二醇、乙二醇、氮酮、DMSO，充分搅拌溶解， 最后用去离子水调配至合适浓度，然后加入离心瓶，12000g离心30分钟，取上清液即制得药 剂。
【文档编号】A01N43/90GK106070262SQ201610459019
【公开日】2016年11月9日
【申请日】2016年6月23日
【发明人】赵弘巍, 邱智涛
【申请人】南京农业大学