一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的薄膜载杆的制作方法
【技术领域】
[0001]本实用新型涉及医疗器械领域，具体地说，是一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的薄膜载杆。
【背景技术】
[0002]随着近年来环境污染日益恶化和工作竞争压力逐渐增大等因素导致男性精子质量和数量不断下降，男性不育比例日益增高，其中将近60%?75%的男性不育患者表现为少精、弱精、无精症等精子质量异常。临床上少精症患者可以通过射精获得微量精子，而无精子症患者主要通过睾丸精子抽吸术(TESA)和经皮附睾精子抽吸术(PESA)等获得少量的睾丸或附睾精子，然后可以通过人类单精子卵胞浆注射(ICSI)技术使这些患者的妻子成功受孕。
[0003]这些精子数量有限而且来之不易，如果将这些患者受精当日剩余或取出的微量精子冷冻保存，不但可以避免下个治疗周期因为精子缺乏而造成受精失败或卵子浪费，为取卵当日成功受精提供了一定的保障，同时减少无精症患者反复穿刺取精给患者带来的躯体、精神的痛苦和经济上的负担。传统的精子冷冻方法会造成冻融精子不同程度的丢失，不适合微量精子的冷冻，解决稀少精子冷冻技术将在很大程度上改善临床治疗少、弱精症和无精症患者的不育问题。寻找合适冷冻载体是目前稀少精子冷冻的研宄重点之一。
[0004]因为从无精症患者的穿刺标本或者严重少精症患者射出精液中获得的精子都是极少量的，为了能在解冻后很快的找到这些精子，有必要事先选择合适的微型载体，在冷冻前将这些精子集中放在微型载体上冷冻。目前使用的微型冷冻载体主要包括:空的卵透明带(Zona pellucida)、冷冻环(Cryoloop)、无载体液滴(droplet)、ICSI显微注射针、微麦管(Mic-Straw)、及冷冻薄膜(Cryotop)等。
[0005]空卵透明带(Zona pellucida)内精子冻融后在显微镜下容易观察和寻找，而且单个或少量精子冻融后的存活率和活动率都取得较好的结果，但是人空卵透明带不易获得(只有进入辅助生殖治疗周期的病人经促排卵获得卵子后，有不成熟卵子者才有望获得空卵透明带)，而且制作较复杂，人力以及经济成本较高；鼠源性的空卵透明带其生物安全性又被质疑；因此限制了该冷冻方法的应用。
[0006]冷冻环(Cryoloop)属于开放式载体，避免不了与液氮的直接接触，会造成一定程度的污染。
[0007]无载体液滴(droplet)在冷冻及复温操作上较难控制。将微滴直接投入液氮会存在与液氮直接接触带来的微生物污染等问题。
[0008]ICSI显微注射针是直径极细微(仅容纳一个精子进出)的玻璃针，极易在冷冻和复苏中造成破损，造成精子的丢失。
[0009]微麦管(Mic-Straw)是广泛应用于人类胚胎和卵子程序化慢速冷冻的载体。微麦管可以保证精液和液氮的隔离，可以避免微生物污染，是比较安全干净的冷冻载体。但是微麦管冻存微量精子会有空气同时被封闭在麦管中，在经从液氮(一 196°C )到水浴(37°C )的复苏过程中易造成炸管，造成标本的损失。
[0010]冷冻薄膜(Cryotop)目前广泛应用于人类胚胎和卵子的玻璃化快速冷冻中，自身带有帽套可使薄膜上冻存物与液氮有效隔绝，而且解冻时帽套可以在液氮中取下，不会造成炸管。Endo Y等报告他们用Cryotop作为微载体，借助ICSI显微注射仪，在微载体内冷冻5?10个精子，采用玻璃化冷冻，复苏后也取得了很好的复苏效果。
[0011]由于目前商品化的Cryotop是为玻璃化冷冻人类胚胎和卵子设计的，因此其薄膜部(材料为聚丙烯)设计的较小，对于大多数稀少精子症和无精症患者的穿刺精液标本，经过离心管离心富集后，一般都有20?30微升的体积量，但其薄膜部装载量太小，仅2?3微升。
【发明内容】
[0012]本实用新型的目的是针对现有技术中冷冻薄膜装载量太小这一问题，提供一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的薄膜载杆。
[0013]为实现上述目的，本实用新型采取的技术方案是:一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的薄膜载杆，包括帽套、冷冻薄膜和操作手柄，其特征在于，所述的冷冻薄膜是长为25?35毫米，宽为0.8?1.2毫米的长方形，所述的冷冻薄膜固定连接在所述的操作手柄的一端。
[0014]本实用新型优点在于:
[0015]本实用新型在不改变既有的塑料操作手柄和帽套大小的前提下，通过增加冷冻薄膜的面积，大大改善薄膜载杆的装载量，使其在保留原有玻璃化冷冻人类胚胎和卵子的功能外，还可以满足目前临床上稀少精子冻存的体积量和快速冻融的技术要求，而且便于生产。
【附图说明】
[0016]附图1是本实用新型的结构示意图。
【具体实施方式】
[0017]下面结合实施例并参照附图对本实用新型作进一步描述。
[0018]附图中涉及的附图标记和组成部分如下所示:
[0019]1.帽套；2.冷冻薄膜；3.操作手柄。
[0020]如附图1所示，一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的薄膜载杆，包括帽套1、冷冻薄膜2和操作手柄3，其特征在于，所述的冷冻薄膜2是长为25?35毫米，宽为0.8?1.2毫米的长方形，所述的冷冻薄膜2固定连接在所述的操作手柄3的一端。本实用新型优选地，冷冻薄膜2的长为32毫米，宽为1.15毫米，帽套I长为40毫米，操作手柄3长85晕米。
[0021]本实用新型的冷冻薄膜2为透明的聚丙烯材质，聚丙烯具有安全无毒，抗弯曲疲劳性强的特点。在实际操作使用中可装载5?10微升的精液。在精液冻融中冰晶的形成是最重要的冷冻损伤，而提高冷冻和复苏的速度被认为可以有效减少冰晶的形成，现在通过增加冷冻薄膜的面积，使精液标本可以凭借其液体的表面张力均匀分布在薄膜上，与液氮和复苏液的接触面积更大，与微麦管(其内装精液堆积成圆柱状)相比，精液在冻融中可以获得更快的降温和复温速度，从而减少冷冻损伤。
[0022]首先用移液器吸取5?10微升的处理过的精子标本均匀涂布于薄膜载杆的冷冻薄膜2上，通过操作手柄3将标本移置液氮上方4厘米(一 120°C )处3?4分钟，待标本成为固态后置于液氮中盖上帽套I保存。在进行单精子卵胞浆注射(ICSI)之前，在液氮中取下冷冻薄膜2上的帽套1，将冷冻薄膜2直接浸没在经37°C预热的覆盖有矿物油的Falcon1006皿(即ICSI所用)中的5微升培养基中。在Falcon 1006皿中可以做2滴5微升培养基，最后冷冻薄膜2在培养基中洗2次，可增加精子回收率。
[0023]需要说明的是，本实用新型除了可以作为冷冻精子的载体，还可以作为冷冻人类胚胎和卵子的载体。
[0024]以上所述仅是本实用新型的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本实用新型原理的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为本实用新型的保护范围。
【主权项】
1.一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的薄膜载杆，包括帽套、冷冻薄膜和操作手柄，其特征在于，所述的冷冻薄膜是长为25?35毫米，宽为0.8?1.2毫米的长方形，所述的冷冻薄膜固定连接在所述的操作手柄的一端。
【专利摘要】本实用新型涉及一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的薄膜载杆，包括帽套、冷冻薄膜和操作手柄，其特征在于，所述的冷冻薄膜是长为25～35毫米，宽为0.8～1.2毫米的长方形，所述的冷冻薄膜固定连接在所述的操作手柄的一端。其优点表现在：本实用新型在不改变既有的塑料操作手柄和帽套大小的前提下，通过增加冷冻薄膜的面积，大大改善薄膜载杆的装载量，使其在保留原有玻璃化冷冻人类胚胎和卵子的功能外，还可以满足目前临床上稀少精子冻存的体积量和快速冻融的技术要求，而且便于生产。
【IPC分类】A01N1/02
【公开号】CN204616880
【申请号】CN201520231461
【发明人】王旻, 王永卫, 吴正沐
【申请人】中国福利会国际和平妇幼保健院
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2015年4月16日