一种红色海杆菌及分离培养方法和发酵工艺与用途的制作方法

文档序号:543106阅读:556来源:国知局
专利名称:一种红色海杆菌及分离培养方法和发酵工艺与用途的制作方法
技术领域
本发明涉及一种细菌及其分离培养方法和发酵工艺与用途,特别是一种新海洋细菌属的细菌及其分离培养方法和发酵工艺与用途。
背景技术
灵菌红素(prodigiosin,又名灵杆菌素)及其衍生物近年在国际上广泛被应用于临床,对多种疾病有效。已报道的关于它的药理作用包括激活脑下垂体——肾上腺皮质系统(包括噬细胞、体液抗体、溶酶体、淋巴细胞、浆细胞、多形核白细胞、单核细胞等),抗御病原微生物病毒的侵袭;刺激机体产生体液抗体,使白细胞总数增加、吞噬功能加强;刺激机体产生多种细胞因子,包括白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-2(IL-2)、干扰素,它们调节造血干细胞的发育和成熟,控制造血干细胞分化的全过程,是造血微环境中最主要成分。用于肿瘤治疗,尤其是因为它具有很强的免疫调节功能和诱导肿瘤细胞凋亡作用,能激活巨噬细胞的活性,同时具有特异性免疫增强功能,使抗体增加,并激活脑下垂体-肾上腺皮质系统的作用,用于治疗癌症、病毒性疾病、白血球减少等顽症,因而备受关注。
灵菌红素在多年前已经被发现,但其药理功能的开发应用在近10多年来才越来越受到关注。新的药理功能不断被认识,除上述所列的功能外,目前,正在被研究的药理功能包括疟疾原虫抑制、糖尿病改善、自动免疫症抑制等等。
国内已注意到该药的生产和应用。不少医院开始试用这类药物,但国内目前并无生产此药,有的医院是自己培养沙雷铁氏菌制备灵菌红素做实验。原因主要是大生产技术不过关,尤其是至今没有寻找到理想的生产菌种。
迄今生产灵菌红素多用沙雷铁氏菌(Serratia sp.)。由于沙雷铁氏菌为条件致病菌,可感染人体,对人体键康有危险性,给生产带来不便,成本也相应增加。并且一般菌种缺乏生产需要的优良特性,如色素不稳定产量低等。不经过遗传选育或改良的菌种很难用于生产,因此目前仅见到一些小型的制备报道。随着市场需要的增加,寻找新的生产途径是十分需要的。

发明内容
本发明的目的在于提供一种能生产灵菌红素的新菌种,并提供该新菌种的分离培养方法和发酵工艺。
本发明所述的红色海杆菌(Rhodomarinobacter sp.Nov)菌株D105001(CCTCC No.M203005)是发明人从南海沉积物中分离到的一株细菌,经分子鉴定表明它属于与海洋杆菌(Marinobacter sp.)相似但又有区别的类群,定名为红色海杆菌(Rhodomarinobactersp.nov)。该菌分类位置较独立。这是一株生长环境和条件完全不同于沙雷铁氏菌的海洋细菌,发明人已针对该菌发展了一套培养技术,能从该菌稳定生产灵菌红素及其衍生物。
本发明所述的红色海杆菌(Rhodomarinobacter sp.Nov D105001),已于2003年1月17日保藏在中国典型培养物保藏中心,其简称为CCTCC,保藏编号为CCTCC NO.M203005。
本发明所述的红色海杆菌(Rhodomarinobacter sp.nov)菌株D105001(CCTCC NO.M203005),是新分离的一个新海洋细菌属的细菌1、菌落形态特征在2116E培养基或海水LB培养基上生长良好,菌落紫红色,扁平,边缘不整齐。
2、菌体形态特征细胞杆状,大小为0.7~1.0×2.0~4.0μM,革兰氏阴性,端生鞭毛。
3、主要生理生化特征在2116E培养基和海水LB培养基中能产生紫红色的灵菌红素,能还原硝酸盐,可分解酪蛋白,氧化发酵葡萄糖和蔗糖,可利用淀粉,液化明胶;氧化酶阴性,半乳糖苷酶阴性,赖氨酸脱羧酶阴性,尿素酶阴性,乙酰甲基甲醇试验阴性,精氨酸双水解酶阴性,色氨酸脱氨酶阴性,鸟氨酸脱羧酶阴性,不氧化发酵的底物包括阿拉伯糖、甘露醇、鼠李糖、苦杏二苷、肌醇、蜜二糖和山梨醇;不利用柠檬酸盐,不产生吲哚。正常生长NaCl浓度0.2-10%,生长必须有Na+;生长温度10-38℃。
4、遗传学特征该菌株CCTCC NO.M203005的16S rDNA全基因序列(1500bp)已向美国国家生物技术信息中心(NCBI)的Genbank基因序列数据库提交,登录号为AJ315452,16S rDNA的序列为1AGACTTTGAT CCTGGCTCAG ATTGAACGCT GGCGGCAGGC CTAACACATG CAAGTCGGGC61 GGTAACAGGA GAGCTTGCTC TTGCTGACGA GCGGCGGACG GGTGAGTAAT GCATAGGAAT121 CTGCCCATGG GTGGGGGATA GCCCGGAGAA ATCCGGATTA ATACCGCATA TGCCCTGAGG181 GGTAAAGCAG GGGATCTTAG GACCTTGCGC CGATGGATGA GCCTATGTCG GATTAGCTAG241 TTGGTAGGGT AAAGGCCTAC CAAGGCGACG ATCCGTAGCT GGTCTGAGAG GATGATCAGC301 CACACTGGGA CTGAGACACG GCCCAGACTC CTACGGGAGG CAGCAGTGGG GAATATTGGA361 CAATGGGGGC AACCCTGATC CAGCCATGCC GCGTGTGTGA AGAAGGCTTT CGGGTTGTAA421 AGCACTTTCA GCAGGGAGGA AAGGTTGCGG GTTAATACCT CGTAGCTGTG ACGTTACCTG481 CAGAAGAAGC ACCGGCTAAC TCCGTGCCAG CAGCCGCGGT AATACGGAGG GTGCAAGCGT541 TAATCGGAAT TACTGGGCGT AAAGCGTGCG TAGGCGGTTT ACTAAGCTGG ATGTGAAATC601 CCCGGGCTTA ACCTGGGAAC TGCATTCATA ACTGGTAGGC TAGAGTATGG CAGAGGCGAG661 TGGAATTTCC TGTGTAGCGG TGAAATGCGT AGATATAGGA AGGAACACCA GTGGCGAAGG721 CGACTCGCTG GGTCAATACT GACGCTGAGG TACGAAAGCG TGGGTAGCAA ACAGGATTAG781 ATACCCTGGT AGTCCACGCC GTAAACGATG AGAACTAGCC GTTGGGATCC ATGTAGGTCT841 TGGTGGCGCA GCTAACGCAC TAAGTTCTCC GCCTGGGGAG TACGGNCGCA AGNTTAAAAC901 TCAAATGAAT TGACGGGGGC CCGCACAAGC GGTGGAGCAT GTGGTTTAAT TCGAACAACG961 CGAAAACCCT TACCTGGCCT TGGCATCCTG CGAACACTTT AGAGATAGAG TGGTGCCTTC1021 GGGAGCGCAG AGACAGGTGC TGCATGGCTG TCGTCAGCTC GTGTCGTGAG ATGTTGGGTT1081 AAGTCCCGTA ACGAGCGCAA CCCTTGTCCT TAGTTACCAG CATGTAATGG TGGGGACTCT1141 AAGGAGACTG CCGGTGACAA ACCGGAGGAA GGTGGGGACG ACGTCAAGTC ATCATGGCCC1201 TTACGGCCAG GGCTACACAC GTGCTACAAT GGGGCGAACA GGGGGTTGCC AAGCTGCGAA1261 GTGGAGCTAA TCTCTTAAAA CGTCTCGTAG TCCGGATTGG AGTCTGCAAC TCGACTCCAT1321 GAAGTCGGAA TCGCTAGTAA TCGCGAATCA GAATGTCGCG GTGAATACGT TCCCGGGCCT1381 TGTACACACC GCCCGTCACA CCATGGGAGT GGGTTGCACC AGAAGTAGCT AGTCTAACCT1441 TCGGGAGGAC GGTTACCACG TGTGATTCAT GACTGGGGTG AAGTCGTAAC AAGGTAGCCG根据《Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology(Ninth Edition)》(John G.Holt et al.1994),以及形态和生理生化特征,D105001(即M203005)菌株与海杆菌属(Marinobacter sp.)、假单胞菌(Pseudomonas)有相似性,但用Phylip软件包对其16S rDNA序列进行系统学分析,并应用邻接法(Neigbor-Joining)或简约法(Parsimony)构建的系统树,无论那一种方法,菌株D105001(即M203005)都不与假单胞菌同类,而两种方法构建的系统树中,D105001与海杆菌(Marinobacter)总是属同一类群,关系最紧密。16S rDNA序列分析表明,与Genbank国际基因序列数据库中记录的最相似的菌株Aeromarinobacter lutaoensis(AF288157)、海杆菌Marinobacter aquaeolei(AJ000726)和海杆菌Marinobactersp.(AF238495)的相似性分别为91.5%、90%和89%,均达不到同属的相似性。
本发明所述菌株M203005在生理生化特征上与海杆菌也有差别,见表1。
表1红色海杆菌(M203005)与海杆菌(Marinobacter)的生理生化特征比较

鉴于上述分子分类学和生理生化特征上的差别,发明人认为菌株D105001是一种新的海洋细菌,定名为Rhodomarinobacter daya sp.nov,在中国典型培养物保藏中心的名称为Rhodomarinobacter sp.nov,D105001,保藏号为CCTCC NO.M203005。
本发明所述的红色海杆菌(Rhodomarinobacter sp.nov)CCTCC NO.M203005如表2所述,与目前常用的灵菌红素产生菌沙雷铁氏菌(Serratia sp.)有很大的差别
表2红色海杆菌CCTCC NO.M203005与沙雷铁氏菌(Serratia sp.)的比较

本发明所述的一种分离培养红色海杆菌(Rhodomarinobacter sp.nov)CCTCC NO.M203005的方法1、无菌采集海洋样品,接种子2116E培养基平板;2、该平板置于20~35℃培养3~5天;3、挑取红色或紫红色细菌菌落,于相同培养基平板划线纯化分离,置于20~35℃培养3~5天。
所述的2116E培养基为蛋白胨5.0g,酵母膏1.0g,磷酸高铁0.01g,固化时加琼脂20g,海水1000ml,pH7.0~7.8。
所述的海水包括浓的或稀释的天然海水、陈海水或人工海水,或NaCl浓度在1%~4%之间的水溶液。
本发明所述的一种红色海杆菌(Rhodomarinobactersp.nov)CCTCC NO.M203005的发酵工艺1、纯菌种接种于2116E或LB培养基斜面,在28℃培养3-5天;2、培养瓶内按1/5~1.5/5体积比加入种子培养基,接种斜面种子,于25~30℃以150~200r/m转速振荡培养24~30小时,即为二级种子液;3、搅拌式发酵罐内按2.5/5~3.5/5体积比加入发酵培养基,0.02%消泡剂,常规蒸汽灭菌30分种冷却至28℃,按2~4%接入二级种子液,通气量为1∶0.5,保压培养3-4天,获得发酵物。
所述种子培养基为蛋白胨1%,酵母膏0.5%,以海水或人工海水或其稀释液溶解制成,pH7.4。
所述发酵培养基为蛋白原料0.2~1.0%,酵母膏或酵母粉0.1~0.5%,淀粉0.2~1.0%,以海水或人工海水或其稀释液配制。
所述的海水为采自海洋或其它咸水水源的天然海水,或者是含有1~4%NaCL、含或不含其他微量元素的人工海水溶液。
所述蛋白原料指大豆粉、鱼粉和蚕蛹粉或由这些原料制备的蛋白胨。
本发明所述的利用红色海杆菌(Rhodomarinobacter sp.nov)CCTCC NO.M203005发酵生产灵菌红素的用途。该菌能稳定地产生含量较高的灵菌红素及其衍生物。灵菌红素及其衍生物具有广泛的药理活性。
本发明所述的红色海杆菌(Rhodomarinobacter sp.nov)CCTCC NO.M203005产生至少2个灵菌红素及其衍生物。其中灵菌红素(I)分子量经液相色谱—质谱联用(LC-MS)测定为323,其结构经质谱(MS)、核磁共振(NMR)分析确定,与已知灵菌红素一致;灵菌红素(II)分子量为351,结构与灵菌红素(I)相比,多了两个甲基,分别加在吡咯环的不同N上。本色素溶于甲醇、乙醇、丙酮等溶剂,不溶于水;在酸性条件下较稳定,100℃C保温1小时,保留80%色价。Ca,K,Zn等金属离子对色素影响不大。产品溶液在波长534附近有一吸收峰。产品对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、铜绿色假单胞菌、酵母菌等有抑制活性。这些特征与来自沙雷铁氏菌的灵菌红素相似。
与现有的灵菌红素生产菌——沙雷铁氏菌相比,本发明所述的红色海杆菌(Rhodomarinobacter sp.nov)CCTCC NO.M203005不是人体致病菌,避免了生产过程中的不便,设备要求相应降低,生产成本也相应降低。而且,该红色海杆菌具备生产灵菌红素所需的优良特性,色素稳定,产量经实验室研究达到较高水平。该红色海杆菌还可进一步遗传选育或改良得到更优良的工业生产用菌。对于目前需求量日益增加的灵菌红素,本发明为之找到了一条新的更好的生产途径。
具体实施例方式
实施例1红色海杆菌(Rhodomarinobacter sp.nov)CCTCC NO.M203005的分离培养方法1、无菌采集海洋样品,接种于2116E培养基平板;2、该平板置于20℃培养5天;3、挑取红色或紫红色细菌菌落,于相同培养基平板划线纯化分离,置于20℃培养5天。
2116E培养基为蛋白胨5.0g,酵母膏1.0g,磷酸高铁0.01g,固化时加琼脂20g,海水1000ml,pH7.0~7.8。
海水为浓的或稀释的天然海水、陈海水。
实施例2红色海杆菌(Rhodomarinobacter sp.nov)CCTCC NO.M203005的分离培养方法1、无菌采集海洋样品,接种于2116E培养基平板;2、该平板置于35℃培养3天;3、挑取红色或紫红色细菌菌落,于相同培养基平板划线纯化分离,置于35℃培养3天。
2116E培养基为蛋白胨5.0g,酵母膏1.0g,磷酸高铁0.01g,固化时加琼脂20g,人工海水1000ml,pH7.0~7.8。
实施例3红色海杆菌(Rhodomarinobacter sp.nov)CCTCC NO.M203005的分离培养方法1、无菌采集海洋样品,接种于2116E培养基平板;2、该平板置于25℃培养4天;3、挑取红色或紫红色细菌菌落,于相同培养基平板划线纯化分离,置于25℃培养4天。
2116E培养基为蛋白胨5.0g,酵母膏1.0g,磷酸高铁0.01g,固化时加琼脂20g,1%~4%的NaCl溶液1000ml,pH7.0~7.8。
实施例4一种红色海杆菌(Rhodomarinobacter sp.nov)CCTCC NO.M203005的发酵工艺1、纯菌种接种于2116E培养基斜面,在28℃培养5天;2、将斜面种子接于盛于500ml三角瓶的150ml种子培养基中,于25℃以200r/m转速振荡培养24小时,即为二级种子液;3、50升搅拌式发酵罐内加入30升发酵培养基,0.02%消泡剂,常规蒸汽灭菌30分种冷却至28℃,按2%接入二级种子液,通气量为1∶0.5,保压培养3天,获得发酵物。
2116E培养基为蛋白胨5.0g,酵母膏1.0g,磷酸高铁0.01g,固化时加琼脂20g,海水1000ml,pH7.0~7.8。
种子培养基为蛋白胨1%,酵母膏0.5%,以海水或人工海水或其稀释液溶解制成,pH7.4。
发酵培养基为蛋白原料0.2~1.0%,酵母膏或酵母粉0.1~0.5%,淀粉0.2~1.0%,以海水或人工海水或其稀释液配制。
海水为采自海洋或其它咸水水源的天然海水。
蛋白原料指大豆粉、鱼粉和蚕蛹粉。
实施例5一种红色海杆菌(Rhodomarinobacter sp.nov)CCTCC NO.M203005的发酵工艺1、纯菌种接种于2116E培养基斜面,在28℃培养5天;2、将斜面种子接于盛于1000ml三角瓶的300ml种子培养基中,于30℃以150r/m转速振荡培养30小时,即为二级种子液;3、100升搅拌式发酵罐内加入50升发酵培养基,0.02%消泡剂,常规蒸汽灭菌30分种冷却至28℃,按4%接入二级种子液,通气量为1∶0.5,保压培养3天,获得发酵物。
2116E培养基为蛋白胨5.0g,酵母膏1.0g,磷酸高铁0.01g,固化时加琼脂20g,海水1000ml,pH7.0~7.8。
种子培养基为蛋白胨1%,酵母膏0.5%,以海水或人工海水或其稀释液溶解制成,pH7.4。
发酵培养基为蛋白原料0.2~1.0%,酵母膏或酵母粉0.1~0.5%,淀粉0.2~1.0%,以海水或其稀释液配制。
海水为含有1~4%NaCL、不含其他微量元素的人工海水溶液。
蛋白原料指由大豆粉、鱼粉和蚕蛹粉这些原料制备的蛋白胨。
实施例6一种红色海杆菌(Rhodomarinobacter sp.nov)CCTCC NO.M203005的发酵工艺1、纯菌种接种于LB培养基斜面,在28℃培养5天;2、将斜面种子接于盛于500ml三角瓶的100ml种子培养基中,于27℃以180r/m转速振荡培养48小时,即为二级种子液;3、50升搅拌式发酵罐内加入30升发酵培养基,0.02%消泡剂,常规蒸汽灭菌30分种冷却至27℃,从种子培养基中取20ml发酵液接种到1升发酵培养基中,通气量为1∶0.5,180rpm摇床培养96小时,获得发酵物。
2116E培养基为蛋白胨5.0g,酵母膏1.0g,磷酸高铁0.01g,固化时加琼脂20g,海水1000ml,pH7.0~7.8。
种子培养基为蛋白胨1%,酵母膏0.5%,以海水或人工海水或其稀释液溶解制成,pH7.4。
发酵培养基为蛋白原料0.2~1.0%,酵母膏或酵母粉0.1~0.5%,淀粉0.2~1.0%,以海水或人工海水或其稀释液配制。
海水为含有1~4%NaCL、含其他微量元素的人工海水溶液。
蛋白原料指大豆粉、鱼粉和蚕蛹粉或由这些原料制备的蛋白胨。
实施例7红色海杆菌(Rhodomarinobacter sp.nov)CCTCC NO.M203005在实施例4、5、6的基础上制备灵菌红素的方法1、1升发酵液经6800g离心15分钟,收集菌体;2、菌体添加2倍体积的丙酮-酸性甲醇(7∶2)混合溶剂,抽提三次,合并抽提液,用旋转蒸发仪浓缩;3、浓缩液通过已经用石油醚平衡的硅胶柱,进行硅胶柱层析。
4、用2倍柱体积的乙酸乙酯洗柱三次,然后氯仿∶甲醇(95∶5)梯度洗脱,同时利用分光光度计跟踪,收集在OD534峰值最大时的洗脱液,其体积为500ml.
5、测定浓缩的上清液在534nm和655nm下光吸收特征,计算洗脱液中灵菌红素的含量;6、将浓缩液真空干燥,得粉状产品110mg。
实施例8红色海杆菌(Rhodomarinobacter sp.nov)CCTCC NO.M203005在实施例4、5、6的基础上制备灵菌红素的方法1、30升发酵液经6800g离心15分钟,收集红色菌体;2、加入等体积丙酮和酸性甲醇(7∶2)混合液抽提色素3次,合并抽提液,经真空浓缩;3、浓缩液通过硅胶柱层析分离,乙酸乙酯洗柱三次,石油醚-乙酸乙酯-甲醇梯度洗脱;4、收集红色组份(534nm处有吸收峰),浓缩结晶,得灵菌红素3500mg。
实施例9本发明所述的红色海杆菌(Rhodomarinobacter sp.nov)CCTCC NO.M203005所产生的灵菌红素(I)分子量经LC-MS测定为323,其结构经MS,NMR分析确定,与已知灵菌红素一致;灵菌红素(II)分子量为351,结构与(I)相比,多了两个甲基,分别加在吡咯环的不同N上。本色素溶于甲醇、乙醇、丙酮等溶剂,不溶于水;在酸性条件下较稳定,100℃保温1小时,保留80%色价。Ca,K,Zn等金属离子对色素影响不大。产品溶液在波长534附近有一吸收峰。产品对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、铜绿色假单胞菌、酵母菌等有抑制活性。这些特征与来自沙雷铁氏菌的灵菌红素相似。
权利要求
1.红色海杆菌(Rhodomarinobacter sp.nov)CCTCC NO.M203005,是新分离的一个新的海洋细菌属的细菌,其特征在于A、在2116E培养基或海水LB培养基上生长良好,菌落紫红色,扁平,边缘不整齐。B、细胞杆状,大小为0.7~1.0×2.0~4.0μM,革兰氏阴性,端生鞭毛。C、在2116E培养基和LB培养基中可产生紫红色的灵菌红素,可还原硝酸盐,可分解酪蛋白,可氧化发酵葡萄糖和蔗糖,可利用淀粉,可液化明胶;氧化酶阴性,接触酶阴性,半乳糖苷酶阴性,赖氨酸脱羧酶阴性,尿素酶阴性,乙酰甲基甲醇试验阴性,精氨酸双水解酶阴性,色氨酸脱氨酶阴性,鸟氨酸脱羧酶阴性,不氧化发酵的底物包括阿拉伯糖、甘露醇、鼠李糖、苦杏二苷、肌醇、蜜二糖和山梨醇;不利用柠檬酸盐,不产生吲哚。D、菌株M203005的16S rDNA全基因序列(1500bp)(Genbank登录号为AJ315452),与Genbank国际基因序列数据库中记录的最相似的菌株Aerornarinobacter lutaoensis(AF288 157)、海杆菌Marinobacter aquaeolei(AJ000726)和海杆菌Marinobactersp.(AF238495)的相似性分别为91.5%、90%和89%,均达不到同属的相似性。
2.一种分离培养红色海杆菌(Rhodomarinobacter sp.nov)CCTCC NO.M203005的方法,其特征在于A、无菌采集海洋样品,接种于2116E培养基平板;B、该平板置于20~35℃培养3~5天;C、挑取红色或紫红色细菌菌落,于相同培养基平板划线纯化分离,置于20~35℃培养3~5天。
3.根据权利要求2所述的一种分离培养红色海杆菌(Rhodomarinobactersp.nov)CCTCC NO.M203005的方法,其特征在于所述的2116E培养基为蛋白胨5.0g,酵母膏1.0g,磷酸高铁0.01g,固化时加琼脂20g,海水1000ml,pH7.0~7.8。
4.根据权利要求3所述的一种分离培养红色海杆菌(Rhodomarinobacter sp.nov)CCTCC NO.M203005的方法,其特征在于所述的海水包括浓的或稀释的天然海水、陈海水或人工海水,或NaCl浓度在1%~4%之间的水溶液。
5.一种红色海杆菌(Rhodomarinobacter sp.nov)CCTCC NO.M203005的发酵工艺,其特征在于A、纯菌种接种于2116E或LB培养基斜面,在28℃培养3-5天;B、培养瓶内按1/5~1.5/5体积比加入种子培养基,接种斜面种子,于25~30℃下以150~200r/m转速振荡培养24~30小时,成为二级种子液;C、搅拌式发酵罐内按2.5/5~3.5/5体积比加入发酵培养基,0.02%消泡剂,常规蒸汽灭菌30分种冷却至28℃,按2~4%接入二级种子液,通气量为10.5,保压培养3-4天,获得发酵物。
6.根据权利要求5所述一种红色海杆菌(Rhodomarinobacter sp.nov)CCTCC NO.M203005的发酵工艺,其特征是所述种子培养基为蛋白胨1%,酵母膏0.5%,以海水或人工海水或其稀释液溶解制成,pH7.4。
7.根据权利要求5所述的一种红色海杆菌(Rhodomarinobacter sp.nov)CCTCC NO.M203005的发酵工艺,其特征在于所述发酵培养基为蛋白原料0.2~1.0%,酵母膏或酵母粉0.1~0.5%,淀粉0.2~1.0%,以海水或人工海水或其稀释液配制。
8.根据权利要求7所述的一种红色海杆菌(Rhodomarinobacter sp.nov)CCTCC NO.M203005的发酵工艺,其特征在于所述的海水为采自海洋或其它咸水水源的天然海水,或者是含有1~4%NaCL、含或不含其他微量元素的人工海水溶液。
9.根据权利要求7或8所述的一种红色海杆菌(Rhodomarinobacter sp.nov)CCTCC NO.M203005的发酵工艺,其特征在于所述蛋白原料指大豆粉、鱼粉和蚕蛹粉或由这些原料制备的蛋白胨。
10.红色海杆菌(Rhodomarinobacter sp.nov)CCTCC NO.M203005用于发酵生产灵菌红素及其衍生物的用途。
全文摘要
本发明涉及一种一种能生产灵菌红素的新菌种,是发明人从南海沉积物中分离到一株细菌,经分子鉴定表明它属于与海洋杆菌(Marinobacter sp.)相似的类群,定名为红色海杆菌(Rhodomarinobacter sp.nov)。已针对该菌发展了一套培养技术,能从该菌稳定生产灵菌红素及其衍生物。红色海杆菌(Rhodomarinobacter sp.nov)的发酵产物对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、铜绿色假单胞菌、酵母菌等有抑制活性。
文档编号C12P17/16GK1513982SQ0313988
公开日2004年7月21日 申请日期2003年7月23日 优先权日2003年7月23日
发明者周世宁, 蔡创华, 戴欣, 林永成, 袁保红 申请人:中山大学
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