芸薹属游离小孢子再生植株的培养基配方的制作方法

文档序号:593979阅读:245来源:国知局
专利名称:芸薹属游离小孢子再生植株的培养基配方的制作方法
技术领域
本发明涉及园艺作物芸薹属的小孢子再生植株的培养基配方的改进,属于 生物工程领域。
背景技术
传统的小孢子培养均是采用MS和F培养基,MS与F培养基无机盐浓度 较高,成本较高;且激素的浓度不合理,种类不齐全,因此诱导分化率较低。

发明内容
本发明就是针对上述问题,提供一种诱导成胚率高、分化率高的芸薹属游 离小孢子再生植株的培养基配方。
为实现上述目的,本发明采用如下技术方案,本发明的培养基包括胚状体 诱导培养基、分化培养基和生根培养基,所述的胚状体诱导培养基包括大量元 素、微量元素和有机元素,所述的大量元素包括KNO380-200mg,Ca(NO)2 4H20 400—600 mg, KH2P04 80—200 mg, FeS04 7H20 22-30 mg, EDTA Na2 28-42 mg; 所 述的微量元素包括KI 0.5-1.0 mg,CoCl2 6H20 0. 01-0. 05 mg, H3B03 5-8 mg,Na2Mo04 2H20 0.1-0. 5 mg, MnS04 4H20 18—25 mg, CuS04 5H20 0.01-0.05 mg, ZnS04 7H20 6—10 mg;所述的有机元素包括肌醇60-150 mg,烟酸2-10 mg, 吡哆醇0.2-0.7mg,硫胺素0. 2-0. 7 mg,甘氨酸1. 5-2. 5 mg,叶酸0.2-0.7mg, 生物素0. 01-0. 1 mg,谷氨酰胺600-1000 mg,丝氨酸60-150 mg,谷光甘肽20-40 mg, 6-苄基腺嘌呤0. 5-1. 5 mg,蔗糖50-200 g,活性炭0. 1-0. 5 g,用水定容 至1L,pH6. 0-6.5;
所述的分化培养基包括大量元素、微量元素和有机元素,所述的大量元素 包括NH4N031500-2000 mg, KN031800-2000 mg, CaCl2 2H20 300-500 mg, MgS02 7H20200-500 mg, KH2P04 100-250 mg, FeS04 7H20 25-30mg, EDTA Na2 25-45 mg, 所述的微量元素包括KI0.5-1.0 mg,CoCl2 6H20 0.01-0.05 mg, H3B03 5-8 mg,Na2Mo04 2H20 0.1-0. 5 mg, MnS04 4H20 18-25 mg, CuS04 5H20 0. 01_0.05 mg, ZnS04 7H20 6-10 mg,所述有机元素包括肌醇60-150 mg,烟酸0. 2-0. 8 mg, 吡哆醇0. 2-0. 7 mg,硫胺素0. 1-0. 15 mg,甘氨酸1. 5-2. 5 mg,蔗糖20-50g, 琼脂8-12 g,用水定容至lL,p朋.O-6.5;
生根培养基包括大量元素、微量元素和有机元素,其中大量元素是分化培 养基大量元素的浓度的一半,微量元素与分化培养基微量元素的浓度一致,所 述的有机元素包括肌醇60-150 mg,烟酸0.2-0.8 mg,吡哆醇0. 2-0. 7 mg, 硫胺素O. 1-0. 15 mg,甘氨酸1. 5-2. 5 mg,蔗糖10-20g,琼脂8-10g,用水定 容至1L, pH5. 8-5.9;
作为另一种优选方案所述的分化培养基中添加激动素0. 01-5卯m、 6苄基 嘌呤0.01-5ppm、萘乙酸0.01-5ppm。
本发明的有益效果
1. 基因型适应性广,出胚率较高;且由于一个胚代表着一种遗传基因型, 所以本发明为育种提供了大量的新基因型纯系,极大地丰富了芸薹属的育种资 源;
2. 可将常规育种中纯合材料的获取时间由8 — 10年降低为2年,且遗传背 景完全纳合;可加快育种步伐,大大的縮短育种时间,应用前景广阔。
具体实施例方式
下述实施例中所用方法如无特别说明均为常规方法,所有培养基均用蒸馏 水配制。
实施例l 具体配方见表1:表l _芸薹属游离小孢子的培养基配方及灭菌方式
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实施例2
具体配方见表2:
表2 芸薹属游离小孢子培养的培养基配方及灭菌方式
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权利要求
1、芸薹属游离小孢子再生植株的的培养基配方,其特征在于培养基包括胚状体诱导培养基、分化培养基和生根培养基,所述的胚状体诱导培养基包括大量元素、微量元素和有机元素,所述的大量元素包括KNO380-200mg,Ca(NO)2·4H2O 400-600mg,KH2PO4 80-200mg,FeSO4·7H2O 22-30mg,EDTA·Na2 28-42mg;所述的微量元素包括KI 0.5-1.0mg,CoCl2·6H2O0.01-0.05mg,H3BO35-8mg,Na2MoO4·2H2O 0.1-0.5mg,MnSO4·4H2O 18-25mg,CuSO4·5H2O 0.01-0.05mg,ZnSO4·7H2O 6-10mg;所述的有机元素包括肌醇60-150mg,烟酸2-10mg,吡哆醇0.2-0.7mg,硫胺素0.2-0.7mg,甘氨酸1.5-2.5mg,叶酸0.2-0.7mg,生物素0.01-0.1mg,谷氨酰胺600-1000mg,丝氨酸60-150mg,谷光甘肽20-40mg,6-苄基腺嘌呤0.5-1.5mg,蔗糖50-200g,活性炭0.1-0.5g,用水定容至1L,pH6.0-6.5。所述的分化培养基包括大量元素、微量元素和有机元素,所述的大量元素包括NH4NO31500-2000mg,KNO31800-2000mg,CaCl2·2H2O300-500mg,MgSO2·7H2O200-500mg,KH2PO4 100-250mg,FeSO4·7H2O 25-30mg,EDTA·Na225-45mg,所述的微量元素包括KI0.5-1.0mg,CoCl2·6H2O 0.01-0.05mg,H3BO3 5-8mg,Na2MoO4·2H2O 0.1-0.5mg,MnSO4·4H2O 18-25mg,CuSO4·5H2O 0.01-0.05mg,ZnSO4·7H2O6-10mg,所述有机元素包括肌醇60-150mg,烟酸0.2-0.8mg,吡哆醇0.2-0.7mg,硫胺素0.1-0.15mg,甘氨酸1.5-2.5mg,蔗糖20-50g,琼脂8-12g,用水定容至1L,pH6.0-6.5。生根培养基包括大量元素、微量元素和有机元素,其中大量元素是分化培养基大量元素的浓度的一半,微量元素与分化培养基微量元素的浓度一致,所述的有机元素包括肌醇60-150mg,烟酸0.2-0.8mg,吡哆醇0.2-0.7mg,硫胺素0.1-0.15mg,甘氨酸1.5-2.5mg,蔗糖10-20g,琼脂8-10g,用水定容至1L,pH5.8-5.9。
2、根据权利要求1所述的芸薹属游离小孢子再生植株的培养基配方,其特 征在于所述的分化培养基中添加激动素0. 01-5ppm、 6苄基嘌呤0.01-5ppm、萘 乙酸0. 01-5ppm。
全文摘要
芸薹属游离小孢子再生植株的培养基配方涉及园艺作物芸薹属的小孢子再生植株的培养基配方的改进,属于生物工程领域。本发明就是提供一种诱导成胚率高、分化率高的芸薹属游离小孢子再生植株的培养基配方。本发明的培养基包括胚状体诱导培养基、分化培养基和生根培养基,所述的胚状体诱导培养基、分化培养基和生根培养基均包括大量元素、微量元素和有机元素。本发明为育种提供了大量的新基因型纯系,极大地丰富了芸薹属的育种资源。
文档编号C12N5/04GK101433184SQ20071015812
公开日2009年5月20日 申请日期2007年11月15日 优先权日2007年11月15日
发明者刘祥军 申请人:刘祥军
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