一种蛭弧菌在消除禽蛋及肉类携带的常见致病菌的应用的制作方法

专利名称：一种蛭弧菌在消除禽蛋及肉类携带的常见致病菌的应用的制作方法
技术领域：
本发明属于生物技术领域，涉及细菌及其应用，具体是指一种蛭弧菌在 消除禽蛋及肉类携带的常见致病菌的应用，特别适用于畜禽养殖环境、禽蛋 肉的保藏及其加工过程中常见致病菌的消除。
背景技术：
食品安全已经成为全世界共同关注的问题，世界卫生组织(WHO)将食品 安全看作是一个世界性的挑战。近年来，全球食品安全恶性事件频发，食源 性疾病已成为影响公共健康的重要问题。据WH0统计，发达国家每年约有三分 之一的人感染食源性疾病，而一些发展中国家，食源性疾病往往是致人非正 常死亡的主要原因。多方面的研究和调査结果显示，除意外事故和人为因素 以外，食源性疾病主要是由微生物和化学药物所引起的。根据中美两国CDC 近10年的统计结果，在中美两国由微生物引起的食源性疾病均占总数的50% 左右，而化学物质引起的食源性疾病占总数的比率在美国是1%左右，在中国 是27%左右。国内外的各种资料和统计数据表明微生物是引起食源性疾病的罪 魁祸首。近20年来，我国的畜牧业和水产养殖业得到了迅猛的发展，其产品 占整个食品行业的比重越来越大，肉、乳、蛋和水产品是动物性食品中的主 要种类。根据全国饲料工作办公室的统计结果，我国肉类产品2003年的产量 为6920万吨、禽蛋量为2606.8万吨，肉类和蛋类的年产量均为全世界第一。 但是，我国肉类的年出口量仅为60多万吨，不到总量的1%，禽蛋类的出口 量更是微乎其微，其原因之一是微生物污染等食品安全问题。引发食源性疾 病的微生物普遍存在，但并不是时时刻刻都会引起食源性疾病，这些致病微 生物与其周围的非致病菌及环境存在着相互制约的关系，处于微生态的平衡 状态，而当这种平衡被打破以后，致病的微生物大肆生长，从而导致食源性 疾病暴发。我国环境的恶化和生态的破坏使这一问题日益突出。
对于禽蛋及肉类携带的致病菌的控制，目前还没有任何资料报道，现有 的资料只是从畜禽养殖过程中采取一些措施，例如使用抗生素，以消除或
者减少其活体携带的致病菌，虽然这种源头措施或有一定的预防效果，但是 对畜禽有副作用，直接影响了禽蛋及肉的质量。例如抗生素的滥用，导致了
致病菌对抗生素产生抗药性；疫苗的使用虽然是个途径，但免疫效果不明显， 特别是目前人们为了增强疫苗的免疫效果，选用的毒株越来越强，反而有潜 在的致病危险。然而，蛭弧菌作为一类具有裂解致病菌的特殊细菌，不仅可 应用到畜禽从养殖到食用前的全过程，而且不会导致细菌出现抗性，也无噬 菌体疗法中宿主过于专一的缺点，因此蛭弧菌作为一类致病菌的生物消除剂 具有相当的优势。
如能在畜禽从养殖、畜禽产品运输、食用或加工前，先进行致病菌的生 物消除工作，则可以减少或消除食物中毒的机率，特别是可为禽蛋及肉产品 的加工提供优质原材料和加工上的便利。因此，利用蛭弧菌消除禽蛋及肉类 携带的致病菌以提高和改善禽蛋及肉的安全性，对人类健康和我国禽蛋及肉 类加工业的发展具有十分重要的意义。

发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的弊端，通过研发找出适用于消除禽蛋 及肉类携带的常见致病菌的蛭弧菌，从而提供一种高效、无毒无副作用的蛭 弧菌在消除禽蛋及肉类携带的常见致病菌的应用。
为了达到上述目的，本发明的主要技术方案如下
一种蛭弧菌在消除禽蛋及肉类携带的常见致病菌的应用，其特征在于 应用方法包括以下具体步骤及其条件 步骤一蛭弧菌的分离纯化
对采集的水体或底泥进行预处理，接种增殖蛭弧菌的嗜水气单胞菌，倒 双层平板，在含宿主菌的双层平板上出现噬菌斑，挑取不断扩大的单斑，再 按微生物学方法液体增殖培养、双层平板检验，再次挑取不断扩大的单斑， 并重复若干次，至单噬菌斑传代形成形状、大小、透明度均一致的噬菌斑， 即为一株蛭弧菌纯菌株，按同一时间内单斑大小计，分离出2株蛭弧菌纯菌株，
所述蛭弧菌于2008年1月13日在位于中国武汉市武汉大学内的中国典型培养 物保藏中心保藏，^/e77op^力rio5^ BDFOl，保藏编号为CCTCCNO: M 208008 和^/eWow77rio 5"p. BDF02，保藏编号为CCTCC NO: M 208009;
步骤二蛭弧菌液的制备
将2株蛭弧菌分别进行发酵培养，分别制成浓度为102 1012pfWml的蛭 弧菌液，待用；
步骤三蛭弧菌在消除禽蛋及肉类携带的常见致病菌的应用 采用上述2株蛭弧菌按任意比例混合的蛭弧菌混合液或单株蛭弧菌液， 以喷洒或者擦涂或者浸渍的方法处理携带有致病菌的禽蛋及肉类产品，其中 采用浸渍的方法蛭弧菌浓度至少达到102pfo/ml，其优选范围为104 106pfu/ml;采用喷洒或者擦涂的方法使用浓度》l(^pfii/ml的蛭弧菌液时， 直接用于禽蛋及肉类产品，其使用量至少达到15ml/kg,优选使用量范围为 35-55ml/kg;应用于环境，其使用量至少达到10ml/m2。
所述蛭弧菌混合液的最佳混合比例为BDF01:BDF02为1:1。 所述应用环境包括畜禽养殖场养殖环境、保藏环境和禽蛋及肉类产品运 输工具、加工过程。
所述应用方法用于畜禽养殖场养殖环境致病菌的消除时，采用喷洒的方 法当使用浓度》l(^pfii/ml的蛭弧菌液时，优选使用量范围为35 55ml/m2。 所述应用方法用于禽蛋及肉类保藏或运输环境中致病菌的消除时，采用 喷洒的方法当使用浓度^l(^pfii/ml的蛭弧菌液时，优选使用量范围为30 50ml/m2。
本发明与现有技术相比，具有如下突出的优点和显著的效果 1、采用本法消除禽蛋及肉类携带的致病菌的效果显著 本应用克服了抗生素滥用带来的副作用，也克服了疫苗免疫效果不明显 而噬菌体疗法中宿主过于专一的缺点，为消除禽蛋及肉类所携带的食源性致
病菌提供了一种新方法，该方法可适用于从"养殖到餐桌"包括禽蛋肉类加 工在内的全过程。
(1) 用于畜禽养殖场养殖环境致病菌的消除时，可明显的减少养殖环境 中的致病菌的数量，可以防止或减少畜禽动物的患病率，从而提高畜禽养殖 环境的质量以及改善畜禽动物产品的品质，同时也防止人患猪链球菌病的可 能。从根本上减少乃至杜绝致病菌所引发的食源性疾病，确保人的健康安全。
(2) 用于禽蛋及肉类保藏、运输环境中致病菌的消除时，以新鲜的鸡蛋、 鸭蛋、猪肉、猪肉为例，检测结果如图1和图2所示，对沙门氏菌(5Wmo^/^
Sp)，猪链球菌(S&印toCOCCWS SM&)，梭状芽胞杆菌(C70S^TiVj'i/i77Sp)及大肠
杆菌(五^/^r/c/z^ co/z')的清除率均可达99%以上。可有效地延长在常温或者低 温下的保藏时间，防止或延缓禽蛋及肉腐败变质，同时避免使用化学防腐剂， 方便、安全且效果好，直接提高了产品品质。
(3)本应用方法特别适用于禽蛋及肉类加工过程中，为加工提供优质原 材料和加工上的便利，确保禽蛋类加工产品的优质，有效地解决了食品安全 问题。
2、 采用本发明消除禽蛋及肉类携带致病菌安全性好 蛭弧菌消除禽蛋肉类携带的沙门氏菌，猪链球菌，梭状芽胞杆菌及大肠
杆菌的方法是生物的方法，蛭弧菌具有可侵染、裂解宿主细菌的特性，使之 适合作为抑止或清除生物体及其环境中致病菌的生物净化因子，且其在裂解 完宿主细菌后，会因饥饿而自动消亡，因此对人和动物无毒副作用。有效地 减少或消除化学药物如抗生素的残留，确保禽畜产品的优质，从根本上避免 禽类产品食物中毒事件的发生。提高了消费者食用禽蛋及肉的安全系数，保 护了消费者的健康。
3、 本发明还可延伸推广应用于其它动物性产品和水产品，特别有利于减 少或消除化学药物如抗生素的使用和残留，确保水产品和其它动物性产品的 优质，对提高食用安全性，保障人类健康具有十分重要的意义；同时为出口 贸易保驾护航。


图1为蛭弧菌及其混合液在消除鸡蛋表面携带四种致病菌的试验效果比 较图。
图2为蛭弧菌及其混合液在消除猪肉加工过程中表面携带的四种致病菌 的试验效果比较图。
具体实施例方式
实施例1
蛭弧菌在消除禽蛋场新鲜鸡蛋携带的常见致病菌的应用试验
试验包括以下具体步骤及其条件 步骤一蛭弧菌的分离纯化
对采集的水体或底泥进行预处理，接种增殖蛭弧菌的嗜水气单胞菌，倒 双层平板，在含宿主菌的双层平板上出现噬菌斑，挑取不断扩大的单斑，再 按微生物学方法液体增殖培养、双层平板检验，再次挑取不断扩大的单斑， 并重复若干次，至单噬菌斑传代形成形状、大小、透明度均一致的噬菌斑，
即为一株蛭弧菌纯菌株，按同一时间内单斑大小计，分离出2株蛭弧菌纯菌 株，所述蛭弧菌于2008年1月13日在位于中国武汉市武汉大学内的中国典 型培养物保藏中心保藏，5fife〃ov/Z^0平BDF01,保藏编号为CCTCC NO: M 208008和5&〃ow'6Wo平BDF02,保藏编号为CCTCC NO: M 208009。 步骤二蛭弧菌液的制备
步骤一得到的菌株号分别为BDF01、 BDF02的蛭弧菌，与嗜水气单胞 菌液混合后加入到含有DNB培养基的三角锥瓶中，恒温摇床250 rpm、28 。C 培养24 h。培养物经过6000 rpm、4 。C离心20 min，取上清液，再16000 rpm、 4 'C条件下离心20 min，弃上清液，加入适量DNB液体培养基重新悬浮蛭 弧菌沉淀物，制成浓度为102 1012pfu/ml的蛭弧菌液，将上述2株菌以任 意比例混合均称为蛭弧菌混合液。
步骤三消除沙门氏菌、猪链球菌、梭状芽胞杆菌及大肠杆菌的应用实
验
(1) 沙门氏菌，猪链球菌，梭状芽胞杆菌及大肠杆菌的制备 用普通营养肉汤(NB)培养基摇床培养，160 rpm 28 。C培养12-16 h
分别增殖沙门氏菌，猪链球菌，梭状芽胞杆菌及大肠杆菌，培养液经5000rpm、 4X:离心20min，弃上清液，沉淀菌体用无菌水重新悬浮，使其浓度为 109cfii/ml，最后制备上述四种菌的混合液，每种菌的终浓度为105cfu/ml。
(2) 分别施用BDF01或BDF02蛭弧菌液和分别按BDF01:BDF02为 1:1、 1:2、 2:1的比例混合的蛭弧菌混合液对沙门氏菌，猪链球菌，梭状芽胞 杆菌及大肠杆菌的消除试验
试验所用材料为鸡蛋，试验均设对照和实验组。对照设三个平行样，每 个平行样有鸡蛋10个；实验组中，把鸡蛋浸渍于步骤三(1)的4种致病菌 混合液中，30秒后取出沥干。然后将每10个鸡蛋分成一个小组，浸渍于浓 度为102pfu/ml、 104pfu/ml、 106pfu/ml、 108pfu/ml、 1010pfu/ml或1012pfu ml 的蛭弧菌液中。不同浓度的蛭弧菌液均设单株即BDF01或BDF02和蛭弧菌 混合液。鸡蛋在不同蛭弧菌液浸渍后，30秒后取出沥干，在室温下放置4小 时，之后分别检测上述四种致病菌的含量。沙门氏菌、猪链球菌、梭状芽胞 杆菌及大肠杆菌的具体检测方法是取经无菌生理盐水湿润的灭菌拭子(棉花
签)在蛋表面上均匀的涂抹4次后，置含无菌生理盐水的无菌离心管中振荡、 混匀，然后采用MPN (most probable number)方法对细菌进行计数(单位为 cfii/ml/鸡蛋)。其中猪链球菌的检测采用透明指示选择性培养基，沙门氏菌 的检测采用XLD(xylose-lysine-deoxycholate)选择性培养基，梭状芽胞杆菌检 测采用卵黄琼脂培养基，大肠杆菌的检测采用TBX (Tryptone Bile X-glucuronide)选择性琼脂培养基。
以BDF01或BDF02最低浓度(102pfu/ ml)的蛭弧菌液和混合比1:1的 蛭弧菌混合液的试验组的结果为例，对消除效果进行说明。检测结果如图1 所示。图1表明，在使用蛭弧菌混合液的实验组，在4小时的试验结束时， 致病菌几乎检测不到，即完全消除；而施用同样浓度的单株蛭弧菌(BDF01 或BDF02)的实验组对四种致病菌的消除稍慢，此时仍可检测到致病菌的数 量为2-3 cfii/ml鸡蛋，消除效果比2株蛭弧菌混合液的效果略差。
比较四种致病菌的初始浓度与终浓度，可知单株或2株蛭弧菌混合液对 沙门氏菌，猪链球菌，梭状芽胞杆菌及大肠杆菌消除率均可达到99%以上。 由于其它试验小组的效果相同或更好，故在此不再赘述。
实施例2
蛭弧菌在消除畜肉类携带的常见致病菌的应用试验 试验包括以下具体步骤及其条件 步骤一、二及步骤三(1)均同实施例1
步骤三(2) 2株蛭弧菌蛭弧菌对消除猪肉加工过程中表面携带的沙门氏 菌，猪链球菌，梭状芽胞杆菌及大肠杆菌试验
分割出每块重量相近的实验样品猪块，每块重约0.25kg，试验设对照组 和实验组，其中对照组三块，为三个平行样，剩下猪肉块为实验组，每小组 三块，为三个平行样。将它们浸渍于步骤三(1)的致病菌混合液中，致病菌 混合液是指沙门氏菌、猪链球菌、梭状芽胞杆菌及大肠杆菌的终浓度分别达 到1x105cfu/ml， 30秒后取出沥干。然后对实验组每个小组的猪肉再直接均 匀喷洒不同量的不同浓度的蛭弧菌液。每小组的蛭弧菌液的喷洒量为 15ml/kg、 35ml/kg、 55ml/kg、 75ml/kg或100ml/kg;蛭弧菌液的浓度为 102pfu/ml、 104pfu/ml、 106pfu/ml、 108pfu/ml、 1010pfu/ml或1012pfu ml。不同浓度的蛭弧菌液均按1:1、 3:2、 2:3进行混合，制备蛭弧菌混合液。
经上述蛭弧菌液喷洒后的猪肉块置于室温下，试验时间为4小时，之后 分别检测致病菌的含量，四种致病菌的浓度检测方法采用MPN检测法(单 位为cfU/kg)。检测所用特异性培养基同实施例l。
以BDF01、 BDF02最低浓度(102pfu/ ml)的蛭弧菌液和混合比1:1、 喷洒量最小(15ml/kg)的蛭弧菌混合液的试验组为例，对消除效果进行说明。 检测结果如图2所示。从图2可以看出，在使用蛭弧菌混合液的实验组，在 4小时的试验结束时，致病菌检测不到，即完全消除；而施用同样浓度的单 株蛭弧菌(BDF01或BDF02)的实验组对四种致病菌的消除略慢，此时仍 可检测到致病菌的数量为10cfu/kg，消除效果比2株蛭弧菌混合液的效果稍 差。
比较四种致病菌的初始浓度与终浓度，可知2株蛭弧菌混合液对沙门氏 菌，猪链球菌，梭状芽胞杆菌及大肠杆菌消除率可达到99%以上。由于其它 试验小组的清除效果相同或更好，故在此不再赘述。
关于对肉品质的评价，除了上述从肉的卫生安全方面做出检测外，还包 括从持水力、pH、嫩度、肉色以及硬度及湿度几个方面来考査。
持水力按照目前通用的48小时滴水法，将肉制品悬挂在(TC-4'C悬挂贮 存48小时后计算失重率，使用蛭弧菌的实验组的猪肉在悬挂48h持水率均 较高，失重率平均为2.2%,而对照组的失重率则为11%。由此明显看出对 照组猪肉品质的下降。
从肉色来评价，使用蛭弧菌的猪肉呈现鲜红色，稍有光泽，而未使用蛭 弧菌的猪肉肉色灰白，光泽暗淡，且不断有水外渗。主观评价可以看出感染 致病菌的猪肉(对照组)肉色明显的劣于实验组。
从pH值测定来看，感染致病菌的猪肉(对照组)的pH都接近5，这是 肌肉的持水力下降的标志，此时的pH值对猪肉的风味产生较大影响，而使 用蛭弧菌的实验组pH值维持在6.5左右，这说明肉的品质保持的比对照组 的要好。
嫩度主要是通过嫩度仪来评估的，评估的结果两者之间没有很明显的区 别，实验组嫩度略微的优于对照组。
主观评价硬度主要是通过切面是否容易变形来确定的，而评价湿度主要
是通过切面液体渗出的多少来确定的，4h时对照组的猪肉切面很容易变形， 而且还有水渗出，可以鉴定等级为渗出。实验组的猪肉切面不容易变形，也 没有水渗出，可以鉴定等级为潮湿。
从以上肉品质的综合鉴定来看，实验组的猪肉品质明显的优于对照组。 这说明蛭弧菌在消除禽蛋肉类携带的常见致病菌方面效果显著，可以推广应 用于禽蛋肉类的保藏和加工工业。
实施例3
蛭弧菌在消除养猪场环境中的常见致病菌的应用试验
试验包括以下具体步骤及其条件 步骤一及二均同实施例1 步骤三(1)致病菌的消除试验
以某一养猪场为例，在未施用蛭弧菌前之一年，由于猪养殖卫生条件不
好，养殖环境中的猪链球菌、大肠杆菌等较多，经常达1(^cfu/cr^以上。因
此为控制它们的病害，养殖场常在饲料中添加抗生素，如此导致猪肉的品质 下降，出口贸易受到限制。同时，养殖卫生条件不好，肉猪易出现肠炎、猪 肺疫等病害。
为了探索健康、绿色的养猪方法，该养猪场试用本发明的应用方法，分 成多个不同试验组，对猪的栏圈、用具、词料、猪身上均匀喷洒浓度为l(^pfU/ml 的2株蛭弧菌任意混合液(本实施例采用1:1)，喷洒使用量则按试验组的 不同分别为15ml/m2、 35ml/m2、 55 ml/m2、 75 ml/m2、或100ml/m2，每隔2 天喷洒一次。在随后的环境病菌检测中，仅在喷洒量为15ml/r^试验组中检 测到少量的大肠杆菌，其他喷洒量的试验组致病菌几乎检测不到。如此使用， 一年下来，虽然抗生素停止了使用，但猪的病害基本没有发生。作为肉猪售 出时的各项检测均合格，达到了出口标准，其肉质比在饲料中加了抗生素的 要好。
本试用研究的结果表明蛭弧菌在消除畜禽养殖环境中致病菌、甚至防治 其病害方面的效果显著，可改善猪的体质，防治猪的病害的发生，消除药物 或者抗生素的使用，提升猪肉品质。由此可见，蛭弧菌菌剂可以广泛地推广 应用于畜禽养殖基地。
实施例4
蛭弧菌在消除禽蛋及肉类的保藏环境、运输工具携带的常见致病菌的应 用试验
试验包括以下具体步骤及其条件 步骤一及二均同实施例1 步骤三(1)致病菌的消除试验
采用本发明的应用方法，分成多个不同试验组，对保藏禽蛋及肉类的冷
库地面和墙体、运输禽蛋及肉类集装箱内表面，均匀喷洒浓度为102pfii/ml 的2株蛭弧菌按1:1混合的混合液，喷洒使用量则按试验组的不同分别为 10ml/m2、 30ml/m2、 50 ml/m2、 70 ml/m2、或100 ml/m2，每天喷洒一次，连 续喷洒两天，在随后的环境病菌检测中，仅在喷洒量为10ml/m2试验组中检 测到少量的猪链球菌，其他喷洒量的试验组没有检测到沙门氏菌，猪链球菌， 梭状芽胞杆菌及大肠杆菌等常见致病菌。本试用研究的结果表明蛭弧菌在消 除保藏、运输过程中致病菌方面的效果显著，可确保禽蛋及肉类产品品质。 由此可见，蛭弧菌可以广泛地推广应用于禽蛋及肉类产品的保藏与运输。
权利要求
1、一种蛭弧菌在消除禽蛋及肉类携带的常见致病菌的应用，其特征在于应用方法包括以下具体步骤及其条件步骤一蛭弧菌的分离纯化对采集的水体或底泥进行预处理，接种增殖蛭弧菌的嗜水气单胞菌，倒双层平板，在含宿主菌的双层平板上出现噬菌斑，挑取不断扩大的单斑，再按微生物学方法液体增殖培养、双层平板检验，再次挑取不断扩大的单斑，并重复若干次，至单噬菌斑传代形成形状、大小、透明度均一致的噬菌斑，即为一株蛭弧菌纯菌株，按同一时间内单斑大小计，分离出2株蛭弧菌纯菌株，所述蛭弧菌是指在中国典型培养物保藏中心保藏，Bdellovibrio sp.BDF01，保藏编号为CCTCC NOM 208008和Bdellovibrio sp.BDF02，保藏编号为CCTCC NOM 208009；步骤二蛭弧菌液的制备将2株蛭弧菌分别进行发酵培养，分别制成浓度为102～1012pfu/ml的蛭弧菌液，待用；步骤三蛭弧菌在消除禽蛋及肉类携带的常见致病菌的应用采用上述2株蛭弧菌按任意比例混合的蛭弧菌混合液或单株蛭弧菌液，以喷洒或者擦涂或者浸渍的方法处理携带有致病菌的禽蛋及肉类产品，其中采用浸渍的方法蛭弧菌浓度至少达到102pfu/ml；采用喷洒或者擦涂的方法使用浓度≥102pfu/ml的蛭弧菌液时，直接应用于禽蛋及肉类产品，其使用量至少达到15ml/kg；应用于环境，其使用量至少达到10ml/m2。
2、 根据权利要求1所述的一种蛭弧菌在消除禽蛋及肉类携带的常见致病 菌的应用，其特征在于所述蛭弧菌混合液的混合比例为BDF01:BDF02 为1:1。
3、 根据权利要求1所述的一种蛭弧菌在消除禽蛋及肉类携带的常见致病菌的应用，其特征在于所述应用环境包括畜禽养殖场养殖环境、保藏环境 和禽蛋及肉类产品运输工具、加工过程。
4、 根据权利要求1或3所述的一种蛭弧菌在消除禽蛋及肉类携带的常见致病菌的应用，其特征在于所述应用方法用于畜禽养殖场养殖环境致病菌的消除时，采用喷洒的方法当使用浓度≥10 2 pfu/ml的蛭弧菌液时，使用量范围为35 55ml/m2。
5、 根据权利要求1或3所述的一种蛭弧菌在消除禽蛋及肉类携带的常见 致病菌的应用，其特征在于所述应用方法用于禽蛋及肉类保藏或运输环境 中致病菌的消除时，采用喷洒的方法当使用浓度≥102 pfu/ml的蛭弧菌液时，使用量范围为30 50ml/m2。
6、 根据权利要求1所述的一种蛭弧菌在消除禽蛋及肉类携带的常见致病菌的应用，其特征在于所述应用方法用于消除禽蛋及肉类加工过程中所携带的致病菌时，采用浸渍的方法蛭弧菌浓度范围为10 4 10 6pfu/ml，采用喷洒或者擦涂的方法使用浓度≥10 2pfu/ml的蛭弧菌液时，使用量范围为 35—55ml/kg。
全文摘要
本发明公开了一种蛭弧菌在消除禽蛋及肉类携带的常见致病菌的应用，用蛭弧菌液以喷洒或者擦涂或者浸渍的方法处理携带有致病菌的禽蛋及肉类，采用浸渍的方法时蛭弧菌浓度至少达到10²puf/ml，采用喷洒或者擦涂的方法使用浓度≥10²pfu/ml的蛭弧菌液时，使用量至少达到15ml/kg。公开的2株蛭弧菌可分别独立使用，但混合使用效果更佳。采用本应用方便、安全且无副作用，消除禽蛋及肉类携带的常见致病菌效果显著，致病菌清除率均在99％以上。可适用于从“养殖到餐桌”包括禽蛋肉类加工在内的全过程，直接提高了产品品质。对提高食用安全性，保障人类健康具有十分重要的意义。
文档编号A23B5/00GK101341901SQ200810030158
公开日2009年1月14日 申请日期2008年8月13日 优先权日2008年8月13日
发明者蔡俊鹏, 马小花 申请人:华南理工大学