专利名称：南方红豆杉中紫杉醇生物酶解法提取工艺的制作方法
技术领域：
本发明属于从植物中提取活性成分技术领域，具体涉及南方红 豆杉中紫杉醇生物酶解法提取工艺。
技术背景紫杉醇具有良好的抗癌活性，尤其对晚期、转移性卵巢癌、乳 腺癌、肺癌有十分显著的疗效，对宫颈癌、食管癌、胃癌、膀胱癌、 恶性黑色素瘤、恶性淋巴瘤亦有疗效。目前提取红豆杉紫杉醇的技 术主要有化学法(包括溶剂浸泡、酸降解、碱降解等方法。这类方 法的缺点是往往导致有效成分变性，产品中的有害残留较高且难以 去除)、物理法(使用低温、冷冻(脆化)、超声波、微波等物理作 用破坏灵芝孢子壁，缺点是有效物质很难提取充分，且设备昂贵)、 机械法(通过碾压、挤压、喷射粉碎、气流粉碎、撞击等机械作用 破坏细胞壁，缺点同物理法一样，但设备造价较低)。由于红豆杉细胞组织中具有一层坚硬的细胞壁外壳，且紫杉醇 通常状态下表现为脂溶性物质，因此釆用常规方法难以使植物细胞 充分破壁，且必须使用有机溶剂，普遍存在提取时间长、收率低、 产品含有机物残留。发明内容本发明的目的是提供一种南方红豆杉中紫杉醇生物酶解法提 取工艺，该方法对紫杉醇提取充分、提取效率高、工艺简单、成本 低、无环境污染。本发明的提取方法特征是以南方红豆杉枝叶为原料，以类酵母菌的D426为酶解微生物，在32-36。C条件下进行酶解，再经过瞬间 冷冻、高速分离、喷雾干燥，得到高含量紫杉醇。上述酶解过程中的酶解微生物是以其活性菌体粉加入的，其制 备方法为将类酵母菌的D426置于菌种培养基斜面培养菌种，菌种 培养基为肉汤琼脂，而后由石腊油封存，3个月后再移植封存，加 大培养基溶液，使其扩群，然后取其浮生藻冻干成活性菌体粉。本发明通过选用特定的微生物菌株对红豆杉进行酶解，使植物 细胞充分破壁，并对其分子结构中的憎水基进行有效的包容，在不 改变其他官能团的前提下，使其具有亲水性质，因而能够以水为溶 剂在酶解后直接进行提取，解决了分子破壁和憎水性的技术难题。 与现有技术相比， 一级提取率高达96%、无有机溶剂残留、无环境 污染。
具体实施方式
实施例1称取清洗后红豆杉的枝叶1000公斤，经打浆榨汁，掺入150 克微生物活性菌体粉，搅拌均匀并在温度为32t:条件下静置5天， 瞬间低温浓缩至25公斤，然后经过高速离心分离、喷雾干燥获得 粉状干物质755. 6克，按照江西德宇集团企业标准(Q/JDY01-2007 ) 方法，测得其紫杉醇的含量为1.63%。实施例2称取清洗后红豆杉的枝叶1000公斤，经打浆榨汁，掺入150 克微生物活性菌体粉，搅拌均匀并在温度为34。C条件下静置5天， 瞬间低温浓缩至25公斤，然后经过高速离心分离、喷雾干燥获得 粉状干物质798. 4克，按照江西德宇集团企业标准(Q/JDY01-2007 ) 方法，测得其紫杉醇的含量为1.53%。实施例3称取清洗后红豆杉的枝叶1000公斤，经打浆榨汁，掺入150 克微生物活性菌体粉，搅拌均匀并在温度为"。C条件下静置5天， 瞬间低温浓缩至25公斤，然后经过高速离心分离、喷雾干燥获得 粉状干物质853. 6克，按照江西德宇集团企业标准(Q/JDYOl-MO7 ) 方法，测得其紫杉醇的含量为1.42%。
权利要求
1、一种南方红豆杉中紫杉醇生物酶解法提取工艺，其特征是以南方红豆杉枝叶为原料，以类酵母菌的D426为酶解微生物，在32-36℃条件下进行酶解，再经过瞬间冷冻、高速分离、喷雾干燥，得到高含量紫杉醇。
全文摘要
本发明涉及一种南方红豆杉中紫杉醇生物酶解法提取工艺，其特征是以南方红豆杉枝叶为原料，以类酵母菌的D426为酶解微生物，在32-36℃条件下进行酶解，再经过瞬间冷冻、高速分离、喷雾干燥，得到高含量紫杉醇。本发明通过选定特定微生物菌株对红豆杉枝叶进行酶解，解决了分子破壁和憎水性的技术难题，一级提取率高达96％、无有机溶剂残留、无环境污染。
文档编号C12R1/645GK101245360SQ200810086379
公开日2008年8月20日 申请日期2008年3月24日 优先权日2008年3月24日
发明者刘浩元, 李晓滨, 詹周荣 申请人:江西德宇集团