检测存在于草药产品和植物药中的马兜铃材料的方法

文档序号:564989
专利名称:检测存在于草药产品和植物药中的马兜铃材料的方法
技术领域
本发明涉及一种鉴别草药产品和植物药的方法。尤其涉及到 一个以分 子学方法鉴别马兜铃属的植物材料与来自其他科的植物。这种方法是基于
叶绿体DNA的trnL - trnF片段和psbA - trnH片段的序列。
背景技术
来自马兜铃属的中草药材料已知含有可诱发肾病和癌症的马兜铃酸 及相关化合物。在传统中医药(TCM)中,来自马兜铃种的材料有时被 用来作为诸如木香、木通、防己、白英、马兜铃和朱砂莲之类的其他草药 产品和植物性药物的替代品或伪品。有关资料如下
1)中药木香可以是来自木香(Aucklandia lappa)和其他物种的菊科 (Compositae )以及青木香(Aristolochia debilis )及相关马兜铃种的才艮部。
2 )中药木通可以是来自木通(Akebia quinata)、三叶木通(Aucklandia trifoliata)、三p十木通(Aucklandia trifoliata var. australis)、 川木通(Clematis armandii)、铁线莲(Clematis montana)、关木通(Aristolochia manshuriensis ) 及相关马兜铃种的根部。
3 )中草药防己可以是来自粉防己(Stephania tetrandra)和广防己 (Aristolochia fangchi)及相关马兜铃种的才艮部。
4)中药白英应来自白英(Solanum lyratum ),但它有时与来自绵毛 马兜铃(Aristolochia mollissima)和相关马兜铃种的另 一药草寻骨风相混 淆。
5)中药马兜铃可以来自马兜铃(Aristolochia contorta )及青木香(Aristolochia debilis )的果实,或来自百合科大百合(Cardiocrinum)及 相关类群的果实或种子。
6 )中草药朱砂莲可以来自马兜铃植物Aristolochia kaempferi及马兜 铃的相关物种的根部,并可能与薯蓣科的薯蓣(Dioscorea cirrhosa)和相 关的物种产生混淆。
自90年代初以来,在世界上许多地方有数以百计因进食了来自或含 有马兜铃的草药和植物药而致的食物中毒个案。在马兜铃植物中的有毒物 质为马兜铃酸及相关化合物。在许多国家和地区,植物材料源自马兜铃属 的中草药产品和植物药也被禁止使用,例如香港和台湾。但是在中国大
陆,有些马兜铃种仍被允许使用作为草药产品和植物药。在那些允许使用 马兜铃材料的地方,应提醒说这类材料的真正来源身份须被确定,这可以 使部分医生和病人用药时特别谨慎。所有禁止使用马兜铃材料的国家,也 有机会出现无心之装运或混合来自马兜铃种材料的情况。因此,能测定某 一特定草药产品和含有植物性原料来自马兜铃属植物是重要的。准确和
彻底的方法来揭露其存在的草药产品和植物性药物是需要的,以帮助保护 消费者,以加强其优良制造规范(GMP),并产生证据进行法律诉讼。
现有确定中药材的方法往往是基于感官的做法,是十分依赖督察或配 药员的主观判断。形态特征鉴定的价值通常有限,因为真正的中草药物种 及其伪品通常是非常相似。结构及化学鉴定(如薄层色谱法,高效液相色 谦,气相色谱-MS)的研究会受不同因素影响,如生长阶段和收获后的加 工等。

发明内容
本发明的目的在于提供一种能够判断中草药材料是否来源于马兜铃 属植物或者草药产品和植物药中是否含有源自马兜铃植物的原料的方法。
本发明的上述目的和其他目的通过以下方式实现利用叶绿体DNA 的trnL - trnF片段和psbA - trnH片段的序列信息来将马兜铃材料与传统 中草药中常用的其他中草药材料进行区分。根据本发明的实施方式,所述方法包括以下步骤(a)获得一套标 准DNA序列;(b )从一个或多个中药样品中提取总DNA; ( c )采用聚合 酶链式反应(PCR)技术或其他技术扩增trnL - tmF片段和/或psbA - tmH 片段;(d)确定已扩增的DNA片段的核苷酸序列;(e)将所述样品的核 苷酸序列的trnL - tmF片段和psbA - trnH片段(或部分片段)与标准DNA 序列进行对照,以及(f)可选地根据所述样品的核苷S吏序列的trnL-trnF 片段和psbA - trnH片段和所述的标准序列生成树状图。在一种典型的实 施例中,经DNA提取,PCR扩增和DNA序列分析步骤,就可以将得到 的所述样品的trnL - tmF和/或psbA - trnH序列与马兜铃草本植物的标准 DNA序列进行比较和匹配,如果相匹配,则所述样品属于马兜铃。
本文所用的术语"标准DNA序列",是指这样的DNA序列,该序 列是已鉴定的植物物种的草药原料的叶绿体DNA的trnL - tmF片段或 psbA - trnH片段,或者是包含了已鉴定的植物物种的草药原料的叶绿体 DNA的trnL - tmF片段或psbA - trnH片段,或者是已鉴定的植物物种的 草药原料的叶绿体DNA的trnL - tmF片段或psbA - trnH片段的一部分。
适合于扩增trnL - trnF和/或psbA - trnH片段的方法和技术是众所周 知的,并且是本领域普通技术人员所知晓的;这正如采用诸如BioEdit和 MEGA之类的用于电脑程序进行DNA序列对照和生成树状图的方法和技 术一样。
总之,采用本发明的方法,任何来自马兜铃属的中药材都可以从来自 其他植物物种的中药材中被^r测和区分开,以下将通过实施例予以具体说 明。


图la显示木香和相关马兜铃种的trnL-tmF序列对照。 图lb显示根据trnL - trnF序列对照构建的木香和相关马兜铃种的树 状图。
图2a显示木香和相关马兜铃种的psbA-trnH序列对照。
7图2b显示根据psbA - trnH序列对照构建的木香和相关马兜铃种的树 状图。
图3a显示木通及相关马兜铃物种的trnL-trnF序列对照。 图3b显示根据tmL - trnF序列对照构建的木通及相关马兜铃物种的 树状图。
图4a显示木通及相关马兜铃物种的psbA-trnH序列对照。 图4b显示根据psbA - trnH序列对照构建的木通及相关马兜铃物种的 树状图。
图5a显示防己及相关马兜铃种的trnL-trnF序列对照。 图5b显示根据tmL - tmF序列对照构建的防己及相关马兜铃种的树 状图。
图6a显示防己及相关马兜铃种的psbA - tmH序列对照。 图6b显示根据psbA - tmH序列对照构建的防己及相关马兜铃种的树 状图。
图7a显示白英及相关马兜铃种的trnL - trnF序列对照。 图7b显示根据trnL - trnF序列对照构建的白英及相关马兜铃种的树 状图。
图8a显示白英及相关马兜铃种的psb A - trnH序列对照。
图8b显示根据psbA - tmH序列对照构建白英及相关马兜铃种的树状图。
图9a显示马兜铃和相关物种的trnL-trnF序列对照。
图9b显示根据trnL - trnF序列对照构建的马兜铃和相关物种的树状图。
图10a显示马兜铃和相关物种的psb A - trnH序列对照。 图10b显示根据psbA - trnH序列对照构建的马兜铃和相关物种的树 状图。
图lla显示朱砂莲及相关物种的tniL-tmF序列对照。
图lib显示根据trnL - tmF序列对照构建的朱砂莲及相关物种的树状图。
图12a显示朱砂莲及相关物种的psbA-trnH序列对照。图12b显示根据psbA - tmH序列对照构建的朱砂莲及相关物种的树 状图。
图13显示马兜铃掺杂品或替代品和真正的马兜铃物种的trnL - trnF 序列。
图14显示马兜铃掺杂品或替代品和真正的马兜铃物种的psbA - trnH 序列。
具体实施例方式
为了便于理解本发明,以下将结合本发明的具体实施方式
作为示例进 行详细说明。尽管本领域技术人员明白,为了清楚起见,对于本发明的理 解不是特别重要的某些特征可以不显示,但是对于本发明的示例性实施方 式进行了详细说明。另一方面,有关特定实施方式的具体细节仅仅是为了 举例说明,在不偏离本发明的精神和范围的情况下,本领域技术人员可以 据此进行各种变化和修改。
实施例1 :木香
根据中华人民共和国药典(2005年版)中,中药"木香"源自木香 (Aucklandia lappa)和菊科的某些物种。而且有时掺杂了青木香 (Aristolochiadebilis)的根部,后者含有致癌的马兜铃酸。利用trnL - trnF
序列(如图la和lb所示)及psbA-trnH序列(如图2a及2b所示),
可以用来区分真正的木香与被掺杂的木香。
通过对照马兜铃的tniL - trnF序列与那些真正的木香物种的trnL-trnF序列(如图la和lb所示),很清楚地有许多分歧;更为突出的分歧 廿口下所示
(1 )在马兜铃品种中为'TTAAAA',但在真正木香种中为 "TTAATAAAA"(即图la中的碱基93-101 ),被称为分子标记1 ;通过对照马兜铃的trnL-trnF序列和那些真正的木通物种的tmL-trnF 序列(如图3a及3b),分歧是显而易见的,更为突出的分歧如下所示
(1) 在马兜铃品种中为'AGAGTGGGA',但在真正木通种中为 'AGAAAGGA'(即图3a中的碱基299-307 ),被称为分子标记5 ;
(2 )在马兜铃品种中为'GACTATCA',但在真正木通种中为'AGTCA' (即图3a中的碱基498-505 ),被称为分子标记6 。
同样,通过对照该马兜铃的psbA - trnH序列与那些真正木通种的 psbA隱trnH序列(如图4a和4b),可以看到,在众多的分歧点中比4交突 出的如下所示
(1 )在马兜铃品种中缺失,但在真正木通种中存在'GAAAC '(即图 4a中的碱基421-425 ),被称为分子标记7;
(2) 在马兜铃品种中缺失,但在真正木通种中存在'TTTGAG'(即 图4a中的碱基608-613 ),被称为分子标记8 。
实施例3 :防己
根据中华人民共和国药典(2005年版),防己来自粉防己(Stephania tetrandra),而且有时掺杂了广防己(Aristolochia fhagchi)及相关马兜铃 种,其中含有致癌的马兜铃酸。防己也会与来自Cocculus trilobus及相关 Cocculus物种的木防己混淆。trnL - trnF序列(如图5a和5b所示)及psbA -tmH序列(如图6a和6b所示)可以用来区分马兜铃物种与其他用作防 己的植物物种。
通过对照马兜铃的trnL - trnF序列和那些真正的防己种的trnL - trnF 序列(如图5a和5b所示),4艮清楚,有许多分歧,较为突出的分歧如下 列所述
(1 )在马兜铃品种中为'GTGGGA ',但在真正的防己种中为 'AAAGGA '(即图5a中的碱基298-303 ),被称为分子标记9;(2)在马兜铃品种中为'GTACTGAAATA ',但在真正木香种中为 'ATAATA'(即图la中的碱基367-377 ),被称为分子标记2 。
同样地,对照马兜铃的psbA-tmH序列与那些真正木香物种的psbA -trnH序列(如图2a及2b所示),显示有不少分歧点;更为突出的分歧 如下所示
(1 )在马兜铃品种中为'GAAGGA',但在真正木香种中为 'GAACTAAAAAAGGA'(即图2a中的碱基106-119 ),被称为分子标记3 ; (2 )在马兜铃品种中为'CAGG',但在真正木香种中为
AAAATAAAATATAGTAATAGTAGATAATACTAGATAATAGG '(即图 2a中的碱基335-468 ),被称为分子标记4 。
实施例2 :木通
根据中华人民共和国药典(2005年版),木通来自植物品种木通 (Akebia quinata )、三p十木通(Akebia trifoliata )、三p十木通(Akebia trifoliate var. australis), 也可包括川木通(Clematis armandii)和铁线莲(Clematis montana)。木通有时掺杂了被称为关木通(Aristolochia manshuriensis )的 根部,其中含有致癌物质马兜铃酸。trnL-trnF序列(如图3a及3b所示) 及psbA-trnH序列(如图4a和4b所示)可以用来区分真正的木通和掺 杂种的木通。虽然木通(Akebia quinata )的trnL - trnF片l殳的序列(GenBank 登录AY651844; AF335297),三叶木通(Akebia trifoliata)的trnL -加F 片段的序歹'J ( GenBank登录AF335294 )及关木通(Aristolochia manshuriensis)的trnL - trnF片段的序列(GenBank登录AY689184 )已 经分别由三个独立的研究小组(即Quandt等人于2004年;Wang等人于 2002年;Neinhuis等人于2005年)发表用于系统发育研究,但这些序列 从来没有被考虑过任何用作鉴定的目的。
ii(2) 在马兜铃品种中为'ATCGACTATCA ',但在真正防己种中为 'ATCAGTCA'(即图5a中的碱基479-489 ),被称为分子标记10;
(3) 在马兜铃品种中为'TTTTTCACTTACT',但在真正防己种中为 TTTCTCGTTCACT '(即图5a中的碱基764-776 ),被称为分子标记11;
(4) 在马兜铃物种中为'TCCATATATGG ',但在真正防己种中为 'TCT'(即图5a中的碱基868-878 ),被称为分子标记12;
(5) 在马兜铃品种中为'ATT',但在真正防己种中为'ATTCCAAGG' (即图5a中的碱基981-988 ),被称为分子标记13;
(6) 在马兜铃品种中为'TAGTAGGA ',但在真正防己种中为 'TATGGGGA'(即图5a中的碱基1096-1103 ),被称为分子标记14 。
同样,通过对照马兜铃的psbA - trnH序列与那些真正的防己种的 psbA-tmH序列(如图6a和6b所示),明显存在许多分歧,较为突出的 分歧如下列所述
(1 )在马兜铃品种中为'CGT',但在真正防己种中为'CGTTGAA'(即 图6a中的碱基102-108),称为分子标记15;
(2 )在马兜铃品种中缺失,但在真正防己种中存在 'GTTTCCCGACATC '(即图6a中的碱基385-397 ),称为分子标记16 。
实施例4:白英
根据中华人民共和国药典(1977年版),白英来自茄科植物白英 (Solanum lyratum)。 而且有时掺杂了寻骨风(Aristolochia mollissima), 后者含有致癌物质马兜铃酸。trnL-trnF序列(如图7a及7b所示)和psbA -trnH序列(如图8a及8b所示)可以用来区分真正的白英与掺杂的品种。
对照马兜铃的trnL - trnF序列和那些真正的白英物种的trnL - trnF序 列(如图7a及7b所示),显示有许多分歧,较为突出的分歧如下列所述 (1 )在马兜铃品种中为'TAAAAA ',但在真正白英种中为 ,TAACAAAAA '(即图7 a中的碱基94-102 ),被称为分子标记17;(2)在马兜铃品种中为'GAAATA ',但在真正白英种中为 'GAATACTATA '(即图7 a中的碱基370-379 ),被称为分子标记18;
(3 )在马兜铃品种中为'ACTGTG ',但在真正白英种中为 'ACAAGCCTTTATG '(即图7a中的碱基827-839 ),被称为分子标记19;
(4)在马兜铃品种中为'TTTATTTAGGTAAGTTA',但在真正白英 种中为'TTTGAGAAAATTTTTTA '(即图7a中的碱基991-1007 ),被 称为分子标记20;
(5 )在马兜铃品种为'GAGAAT ',但在真正白英种中为 'GAGATTGGAAT '(即图7中的碱基1108-1119a),被称为分子标记210。
同样,通过对照马兜铃的psbA - tmH序列与那些真正白英的psbA -trnH序列(如图8a及8b),显然有许多分歧,较为突出的分歧如下列所 述
(1 )在马兜铃品种中为'GAAGGA ',但在真正的白英种中为 'GAAAAGAAAGG'(即图8a中的碱基106-117),称为分子标记22;
(2)在马兜铃品种中缺失,但在真正白英种中存在 TGTTCCTCTTGTTGCTAAT GTTACTATATCTTTTTTATTTCATTTC
(即图8a中的碱基327-419),称为分子标记23;
(3 )在马兜铃品种中缺失,但在真正白英种中存在
CTTTA '(即图8a中的碱基434-483 ),称为分子标记24 。
实施例5 :马兜铃
根据中华人民共和国药典(2005年版),马兜铃来自植物物种马兜 铃Aristolochia contorta和Aristolochia debilis ,其中含有致癌物质马免铃 酸,因此必须使用得更审慎。它的替代品包括大百合(Cardiocrinum giganteum)和相关的百合科植物。tmL - tmF序歹'J (如图9a及9b )和psbA-trnH序列(如图10 a和10b )可以用来区分真正的马兜铃物种和马兜 铃的替代物种。
通过对照马兜铃的trnL - trnF序列与那些大百合物种的trnL - trnF序 列(如图9a及9b),显然有许多分歧,较为突出的分歧如下列所述
(1) 在马兜铃品种中为'TTTCACAAA ',但在大百合物种中为 'TTTAGTCTC '(即图9 a的碱基807-815 ),称为分子标记25;
(2 )在马兜铃种中为'TACGTACAAATGCCCATCCATATATGG ', 但在大百合物种中缺失(即图9a中的碱基865-891 ),称为分子标记26 。
同样,通过对照马兜铃的psbA - tmH序列与那些大百合种的psbA -trnH序列(如图10a和10b),明显地存在许多分歧,较为突出的分歧如 下列所述
(1 )在马兜铃品种中为'CG ',但在大百合种中为'CATTCT '(即图 10a中的碱基82-87),被称为分子标记27;
(2) 在马兜铃品种为'TACCCAA ',但在大百合物种中为
图10a中的碱基120-164 )被称为分子标记28;
(3 )在马兜铃品种中为'AAGG ',但在大百合物种中为 'AAGCTAAAATCTTTT AGCTAGA '(即图10a中的碱基412-433 )被称 为分子标记29 。
实施例6 :朱石少莲
据"关木通肾毒性研究",朱砂莲来自Aristolochiakaempferi和相关的 物种。它的替代品包括来自被成为薯莨(Dioscorea cirrhosa)的根部以及 Dioscoreaceae科的相关物种。trnL - trnF序列(如图1 la和11 b )和psbA -trnH序列(如图12a及12b)可以用来区分真正的朱砂莲和朱砂莲的替 代物种。
14通过对照马兜铃的trnL - trnF序列和薯莱物种的trriL - trnF序列(如 图lla和llb),显然有许多分歧,较为突出的分歧如下列所述
(1 )在马兜铃品种中为'ATCCTGTT ',但在薯莨中为 'ATCTTTATTTGTT TTGTT '(即图lla中的碱基118-135 ),被称为分子 标记30;
(2)在马兜铃品种中为'TCAGAAGCAGA ',但在薯莱中为 TCAACCGAAGTTGA'(即图1 la中的碱基471-484 ),被称为分子标记 31;
(3 )在马兜铃品种中为'ATCGACTATCACACCAGA ',但在薯策中 为'ATCATTGATTCTAGA '(即图lla中的碱基512-529 ),被称为分子 标记32;
(4)在马兜铃品种中为'TGCATCGAGAATGGTCGG',但在薯莱中 为'TGCGAGAAAAGAAAATGGTTGGG '(即图lla中的碱基1074-1098) , ^皮称为分子标记33 。
同样,通过对照马兜铃的psbA - trnH序列与那些薯莨的psbA - trnH 序列(如图12a及12b),显然有许多分歧,较为突出的分歧如下列所述
(1 )在马兜铃品种中为'ACCTGGC ',但在薯莨中为'ACTTAGC '(即 图12a中的碱基38-44),称为分子标记34;
(2 )在马兜铃品种中为'ATACCCAAT ',但在薯莱中为 'ATATCAATA'(即图12 a中的碱基115-123 ),称为分子标记35 。
当把上述6个中草药例子中的所有序列排在一起,可以发现,在一般 情况,当与木香、木通、防己、白英、大百合和朱砂莲的其他植物种比较 时,马兜铃的trnL - trnF片段具有表征马兜铃属的特定的序列片段(如图 13)。特征片段的一些例子如下
(1 )马兜铃种的'AGTGGGATG'(即图11中的碱基313-321 ),称 为分子标记36;
(2)马兜铃种的'AATTTCAGAAG'(即图11中的碱基472-482), 称为分子标记37;(3)马兜铃种的'ACTATCACACC'(即图11中的碱基525-535 ), 称为分子标记38 。
同样,当与木香、木通、防己、白英、大百合和朱砂莲的其他植物种 比较时,马兜铃的psbA - trnH片段具有表征马兜铃属的特定的序列片段 (图14)。其中一个例子是
(1 )马兜铃种的'CTCAATTCACTA '(即图12中的碱基172-183 ), 称为分子标记39 。
在上述情况中,每个分子标记(即分子标记1-39 )包含许多序列, 每一个序列用于在相应的附图中所定义和对照的特定物种。每一个分子标 记的各序列具有相同或不同的长度,还在相应的图有详细说明。
前述实施例所举例的本发明的方法在很多情况下可用于确定在植物 药或草药产品中是否存在马兜铃,该方法通过以下步骤从所关注的样品
中提取总DNA,然后利用聚合酶链式反应(PCR)扩增trnL - trnF片段 和/或psbA - tmH片段,然后进行DNA序列测定。通过将所获得的trnL -trnF序列和/或psbA - tmH序列与马兜铃材料的tmL - trnF和psbA -trnH序列进行比较和匹配,便知道相匹配的样品属于马兜铃。如前述的例 子示范,在trnL-trnF片段及psbA-trnH的片段内有许多表征马兜铃属 植物的序列片段。在特定情况下,可不必扩增整个trnL-trnF片段和/或整 个psbA - trnH片段,而只需要扩增和测序trnL - trnF片段和/或psbA - trnH 片段中的部分片段就足以在特定情况下达到某一特定目的。
对于trnL - trnF片段的PCR和DNA序列测定而言,正向引物是Tab C ( 5 '画CGAAATCGGTAGACGCTACG -3 '),反向引物是Tab F ( 5'-ATTTGAACTGGTGACACGAG -3 ')。对于psbA - tmH片革殳的PCR和 DNA序列测定而言,正向引物是(5 ' - GGTATGCATGAACGTAATGCTC -3'),反向引物是(5 ' - CGCGCATGGTGGATTCACAAATC-3 ')。尽管本发明仅描述和指出了用于优选实施方式的基本的新特征,但 是,可以理解,本领域普通技术人员在不偏离本发明的精神的前提下,可 以对所举例说明的工艺和方法的形式和细节进行各种省略、替换或者变 化。对于以实质上相同的方式执行实质上相同的功能从而取得实质上相同
本发明不仅限于仅用作示例的上述实施方式,在所附的权利要求书所 限定的保护范围之内可以通过各种方式对上述实施方式进行变化。
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<formula>formula see original document page 20</formula>GTCAATACTGACMCMTGAAATITCTAGTAAGAGGAAAATCCGTCGACnTAGAAATCG TCAGGGTrCMGTCCCTCTATCCCCAATAAAATAAAAATCCCCAATAAAATAAAAGGCCT ArnTACTCCCTMGCATTTATCCTCrmTmTCATCAGTGGTTCAAAATrAGATTAG ATATGrmTCACnACTCTACTCnTCACAMTGGATCCAACCTGAAATCTTTCTCTCT TCTCACTGTGATAGATATGATCTACGTACAAATGCCCATCCATATATGGATGGGCAAAGA ATCTCTATrACGGAACCCTrCGCAGnCATATCATTACTCTTACACITCCATITACAAAG TCTCCCTnTGAAGATCCAAGAAATTACCGACnTAnTAGGTMGITMTGCnnTGA GTACrnTCATTGACATAGACCCMGCCmTCTTTTAGTAGGATCATGCATGGAGMTG GTCGGGATAGCTCAGCTGGTAGAGCAGAGGACTGAMATCaCGTGTCACCAGTTCAAAT
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〈223〉广防己G4n'Wo/oc/ z'a/a"gcW)的/r"L-fr"F片段 〈400〉 3
CGAMTCGGTAGACGCTACGGACTTGATTGGATTGAGCCTrGGTATGGAAACCTACTAAG
TGGTAACTrCCAAAnCAGAGAGACCCTGGAATTAAAAATGGGCMTCCTGAGCCAAATC
CTGTnTCAGAAAMAAAAGGATAGGTGCAGAGACTCAACGGAAGCTGTTCTAACGAATG
GGGTrGACnTACTACAlTGGTAGAAGMTCCITCTATCGAAACTCCAGAGTGGGATGAC
CCTAGATATGTACGTATACGTACTGMATATCAAAGATTAATCACGACCCGMTCCATAT ,rnTm.nTCTAAAMrrrCAGMGCAGMGGMGMTCGMTAGTCAGTGATCAMTC
GACTATCACACCAGAGTCTGATAGATCnTnMGGATTGATTAATCGAGTGAGACGAGA AT嵐GATAGAGTCCCATrCTACATGTCAATACTGACAACMTGAAATTTATAGTMGAG GAAAATCCGTCGACnTAGAAATCGTGAGGGTTCAAGTCCCTCTATCCCCMTAAAATAA AAATCCCCAATAAAATAAAAGGCCTArnTACTCCCTAAGCATTTATCCTa'lTiTlT丄T TCATCTGTGGrrCAAMTTAGATrAGATATGrnTTCAOTACTCTACTCnTCACAAAA GGATCCMCCTGAAATCnTCTCTCTTCTCACTGTGATAGATATGATCTACGTACAAATG CCCATCCATATATGGATGGGCAMGAATCTCTATTACGGAACCCTTCGCAGTrCATATCA TrACTaTACACTTCCATTrAC嵐GTCTCCCTnTGMGATACAAGAAATTAACGACTT TATITAGGTAAGTrAATGCTnTTGAGTACrnTCATrGACATAGACCCAAGCCrnTCT TITAGTAGGATCATGCATCGAGMTGGTCGGGATAGCTCAGCTGGTAGAGCAGAGGACTG AAAATCCTCGTGTCACCAGTTC嵐T
〈210〉 4 〈211〉 957 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉:马兜铃C4n'加/oc/n'"麵; /e"')的亂-加F片段 〈400〉 4
CGAMTCGGTAGACGCTACGGACnGATTGGATTGAGCCTTGGTATGGAMCCTACTAAG TGGTAAdTCCAAATrCAGAGAAACCCTGGAATTGAAAATGGGCMTCCTGAGCCAAATC CTGTnTCAGAAAAAAAAAAGGATAGGTGCAGAGACTCMCGGMGCTGTTCTMCGAAT GGGGTTGACnTACTACATTGGTAGAAGAATCaTCTATCGAAACTCCAGAGTGGGATGA CCCTACGTATGTACGTATACGTACTGAAATATCAAAGATTAATCACGACCCGAATCCATA Tl'iTi'ri'i'i'CTAAAAATITCAGAAGCAGAAGGAAGAATCGMTAGTCAGTGATC嵐TCG ACTATCACACCAGAGTCTGATAGATCnTTTMGGATTGATTAATCGAGTGAGACGAGAA TAAAGATAGAGTCCCATTCTACATGTCAATACTGACAACMTG嵐TTTATAGTAAGAGG AAAATCCGTCGACTTTAGAAATCGTGAGGGTTCMGTCCCTCTATCCCCAATAAAAGGCC TATnTACTCCCTMGCAnTATCCTCn'i'n'iTnT丄'ATCCGTGGTTCAAAAlTAGATA TGTTnTCACTTACTCTACTCnTCACAAATGGATCCGGCCAGAAATCnTCTCTCITCT CACTGTGATAGATATGATATACGTACAMTGCCCATCCATATATGGATGGGCAAAGAATC TCCATTACGGAACCnTCACAGTrCATATCATTACTCnACAOTACATTTACAAAGCCT CCTTnTGAAGATCCAACAAATTACCGACnTAnTAGGTAAGTrAATGOTnTAAGTC
21CCnTCATrGACATAGACCCAAGCTmTCmTAGTAGGATCATGCATCGAGAATGGTC GGGATAGCTCAGCTGGTAGAGCTGAGGACTGAAAATCCTCGTGTCACCAGTTCAMT
〈210〉 5 〈211〉 984 〈212〉 DNA 〈213〉植物、
〈223〉关木通(/4W加/oC附a"sAw/"/era/j)的,a""L-,a"mF片段 〈400〉 5
CGAAATCGGTAGACGCTACGGAOTGATTGGATTGAGCaTGGTATGGMACCTACTMG TGGTAAaTCCAAATTCAGAGAMCCCTGGMTTAMAATGGGCAATCCTGAGCCAAATC CTGrnTCAGAMAAAAAMGGATAGGTGCAGAGACTCAACGGAAGCTGTTCTAACGTCT AACGAGMGCTGTTCTMCGAATGGGGTTGACnTACTACATrGGTAGMGMTCaTCT ATCGAAACTCCAGAGTGGGATGACCCTAGATATGTACGTATACGTACTGAAATATCAMG ATrAATCATGACCCGAATCCATA'i'iT丄Ti'i'lTCTATGATAAAAAnTCAGAAGCAGMGG AAGAATCGAATAGTCAGTGATC嵐TCGACTATCACACCAGAGTCTGATAGATCnnTA AGGATTGATTMTCGAGTGAGACGAGAAAAAAGATAGAGTCCCATTCTACATGTCAATAC TGACAACAATGAAAnTATAGTMGAGGAAAATCOGTCGACnTAG嵐TCGTGAGGGTT CAAGTCCCTCTATCCCCMTAAAAGGCCTATnTACTCCCTMGCATrTATCCTCnnT TTnTATCAGTGGTTCMAATrAGATATGTmTCACnACTCTACTCTITCACAAATGG ATCCGGCCAGAAATCnTCTCTCTTATCACTGTGATAGATATGATATACGTACAAATGCC CATCCATATATGGATGGGCAAAGMTCCTCATTACGGAACCnTCACAGTTCATATCATT ACTCTTACACTTACAnTACAAAGTCTCCnnTGAAGATCCAACAAATTACCGACnTA nTAGGTAAGTTMTGCTnTTGAGTCCCnTCATrGACATAGACCCAAGaTnTCnT TAGTAGGATCATGCATCGAGMTGGTCGGGATAGCTCAGCTGGTAGAGCAGAGGACTGAA MTCCTCGTGTCACCAGTTC嵐T
〈210〉 6 〈211〉 956 〈212〉 DNA 〈213> :植物
〈223〉:寻骨风(Jn'Wo/oc/n'a wo/fos/附a)的fr"L-fr"F片段 〈400〉 6
CGAAATCGGTAGACGCTACGGAClTGATTGGATrcAGCaTGGTATGGAAACCTACTAAG TGGTAACTrCCAAATTCAGAGAMCCCTGGAATTAAAAATGGGCAATCCTGAGCCAMTC CTGTnTCAGAMAAAAAAAGGAT八GGTGCAGAGGCTCAACGGAAGCTGTTCTAACGAAT GGGGTTGACnTACTACATTGGTAGAAGAATCCnCTATCGAAACTCCAGAGTGGGATGA CCCTAGATATCTACGTATACGTACTGAAATATCAAAGATTAATCACGACCCGMTCCATA Ti'丄TlTlTi'CTAAAAATTTCAGAAGCAGAAGGAAGAATCGAATAGTCAGTGATC嵐TCG ACTATCACACCAGAGTCTGATAGATCTmTAAGGATTGATTAATCGAGTCAGACGAGAA TAAAGATAGAGTCCCATTCTACATGTCAATACTGACAACMTGAAAnTATAGTAAGAGG AAAATCCGTCGACnTAGAAATCGTGAGGGTTCMGTCCCTCTATCCCCMTAAAAGGCC TATnTACTCCCTAAGCAnTATCCTCn'n'n'n'n'ATCAGTGGTTCAAAATTAGATAT GrmrCACnACTCTACTCnTCACAAATGGATCCGGCCAGAAATCnTCTCTCTTCTC ACTGTGATAGATATGATATACGTACAAATGCCCATCCATATATGGATGGGCAMGAATCT CCATrACGGMCCnTCACAGTTCATATCATTACTCTTACACTrACATITACAAAGTCTC CTTnTGMGATCCAACAAATTACCGACnTATITAGGTAAGTr嵐GaTnTAAGTCC CnTCATTGACATAGACCCAAGCrnTTCmTAGTAGGATCATGCATCGAGAATGGTCG GGATAGCTCAGCTGGTAGAGCAGAGGACTGAAAATCCTCGTGTCACCAGTTCAAAT
〈210〉 7 〈211〉 964 〈212〉 DNA〈213〉植物
〈223> :木香(Jz/cWa"Jz'a/appa)的^"L- r"F片段 〈400> :7
CGAMTCGGTAGACGCTACGGACTrAATrGGATTCAGCCITGGTATGGAAACTTACTAAG TGATAACnTCAAATTCAGAGAAACCCTGGMlTAATAAAAATGGGCMTCCTGAGCCM ATCACGTnTCCGAAAAC雄CAAAGGlTCAG嵐GCGAAAATAAMAAGGATAGGTGCA GAGACTCGATGGAAGCTGlTCTAACGAATGGAGnGAlTGTaTACGTrGGTAGAGGAAT CCTTCTATCGAAACTTCATAMAGATGAAGGATAAACCTGTATACATAATATAGAAGAAT TGTTGTGAATCGATTCCG嵐GAATCGMTATTCATTGATCAAACAAnCACTCCATAAT CTGATAGATCTnTGAAGAACnATTMTCGGACGAGAATAMGATAGAGTCCCGTrCTA CATGTCMTACCGGCAACAATGAAAnTATAGTAAGAGGAAMTCCGTCGATTTAAAAM TCGTGAGGGTTCAAGTCCaCTATCCCCMTAAAATAAAMTCCCCAATAAAATAAAAGG CCTATnTACTCCCTMGCATITATCaa'丄Ti'iTr丄'丄'l'CATCAGTGGTrCAAAATTAGA TTAGATATGTTnTCACTTACTCTACTCnTCACAAAAGGATCCAACCTGMATCnTCT CTCITCTCACTGTGATAGATATGATCTACGTACAAATGCCCATCCATATATGGATGGGCA MGMTCTCTATTACGGAACCaTCGCAGTrCATATCAnACTCTTACACTTCCATITAC AAAGTCTCCCTnTGMGATACAAGAAATTMCGACTTTAnTAGGTMGTTAATGCnT TTGAGTACnnTATTGACATAGACCCAAGCCrnTCrnTAGTAGGATCATGCATCGAG AATGGTCGGGATAGCTCAGCTGGTAGAGCAGAGGACTGAAAATCCTCGTGTCACCAGTTC 嵐T
〈210〉 8 〈211〉 963 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉灰毛川木香(K/WmzWa var./m'ra6/fc)的化"L-加F片段
〈400〉 8
CGAAATCGGTAGACGCTACGGACITAATrGGATTGAGCCTTGGTATGGAAACnACTAAG TGATMCTTTCAAAnCAGAGAAACCCTGGAATTMTAAAMTGGGCAATCCTGAGCCM ATCACGrnTCCGAAAACAAACAMGGTTCAGAAAGCGAAMTCAAAAAGGATAGGTGCA GAGACTCGATGGMGCTGTTCTMCGAATGGAGTTGATrGTOTACGTTGGTAGAGGAAT CCTTCTATCG嵐CITCATAAAAGATGAAGGAT嵐CCTGTATACATMTATAGMGMT TGTTGTGAATCGATrCCATATTGAAGAAAGAATCGAATATrCATrGATCAAACMTrCAC TCCATAATCTGATAGATCTnTGMGAAOTATrMTCGGACGAGMTAMGATAGAGTC CCGTTCTACATGTCMTACCGGCMCAATGAAAnTATAGTMGAGGAAMTCCGTCGAT TrAAAAAATrGTGAGGGTrCAAGTCCCTCTATCCCCAAAAATACCATITGACTCCCTMT TATrraCGTATCCTmTAnTATnTATCC'nTlT丄'CCTrAGCGGTTCAAAATTCCTr ATCmTCnTCTCATrCACTACTCnTATACATCATTCTCTGCTCnTATACAAATGGA TCTGAGCGGAAATGCTGTTCTOTATCACATGTGATATATATGATACATGTAC嵐TGAA CATCnTGAGCAAGGAATCCCCATITGAATGATrCACGATCGATATTnTATrCATACTG AAACTTACAAAGTTGTTCTnTGACAAATTATAGGACCTGGATGAGGCnTGTAATACCC TITCAA1TGACATAGACCCAAGTTATCTAGTAAAATGAAAGTGAGGATGAGACATCAGGA ATAGTCGGGATAGCTCAGTTGGTAGAGCAGAGGACTGAAAATCCTCGTGTCACCAGTTCA AAT
〈210〉 9 〈211〉 1010 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉木通(i6—w'M她)的fr"L-fr"F片段 〈400〉 9
CGMATCGGTAGACGCTACGGACTTGAATGGATTGAGCCTTGGTATGGAAACCTACTAGG TGATMCnTCAAATTCAGAGAAACCCTGGMTGAAAMTGGGCAATCCTGAGCCAAATCCTGTnrCAGAAAAAAAAAGGTTCAGAAAGCGAGATTAAAAAAATAAAGGAAGGATAGGT GCAGAGACTCMTGGAAGCTGnCTMTGMTGGAGTTGGCTGCGTTGCGTrCGTAGAGG AATCCTTCTATTGAAACTCCAGAAAGGATGAAGGATGAACCTATATACGTACGTATACGT ACTGAAATATCAAAAGAnMTGACGATCAAAATArnTmTATATGAAAAACGGMGA ATTATTGTGAATCAATTTCAAGTrGMGGAAAAATCGAATATrCACTGATCAAATCAGTC ATTCCATAGTCTGATAGATCTnTGAAGMCTGACTMTCGGACGAGAATAAAGATAGAG TCCCATTCTACATGTCAATACCGACAATAATG磁nTATAGTAAGAGGAAAATCCGTCG ACnTAGAAATCGTGAGGGTTCAAGTCCaCTATCCCCAAGAAAAAGGCCCGTnTACTC aTAACTATACTATGTrATCC'丄Tn.iT丄'GTCAGCGGTTCCAAATTCGCTAAGnTCTCAT TCACTCCACTCTTTCACAAATGGATCGGAGCATAMTGTITCTaaTATCACAAGTCAA GTCITGTGATATATACGTACAAATGCACACCTATGAGCAAGGAATCCCCATrrGMTCAT TTAAnTACAGTCCATATGAnTACTrAAAaTACAAAGTTACAMGTCnUnTTTGM GATGCAAG组TTCCCGGGCCTGGGTACGACnTGTAATGCrn'lT丄GAATCTCnTAAT TCACAT嵐CTCMGCCCTCTAGTGGTATAGAGATGATGCATCGGGAAAGGTCGGGATAG CTCAGCTGGTAGAGCAGAGGACTGAAAATCCTCGTGTCACCAGTTCAAAT
〈210〉10
〈211〉1010
〈212〉DNA
〈213〉植物
〈223〉三叶木通
〈400〉10
的^T7L-^"F片段
CGAAATCGGTAGACGCTACGGAOTGATTGGATTGAGCaTGGTATGGAAACCTACTAAG TGATAACnTCAAATTCAGAG嵐CCCTGGAATGAAAMTGGGCMTCCTGAGCCAAATC CTGTnTCAGAAAAMAAAGGTrCAGAAAGCGAGATTAAAAAAATAAAGGATGGATAGGT GCAGAGACTCMTGGAAGCTGITCTAACGAATGGAGlTGGCTGCGrrGCGITCGTAGAGG MTCOTCTATTGAAACTCCAGAAAGGATGAAGGATGAACCTATATACGTACGTATACGT ACTGAAATATCAAAAGATTAATGACGATCAAAATATnTTnTATATGAAMACGGMGA AnAlTGTGAATCMTTrCAAGCTGMGGAMAATCGAATATTCACTGATCAAATCAGTC ATTCCATAGTCTGATAGATCTnTGMGAACTGACTMTCGGACGAGMTAAAGATAGAG TCCCATTCTACATGTCAATACCGACMTAATGAAATITATAGTAAGAGGAAAATCCGTCG ACnTAGMATCGTGAGGGTrCMGTCCCTCTATCCCCAAGAAMAGGCCCGTnTACTC CTTAACTATAaATGTTATCCnTn'iTGTCAGCGGlTCCAAArrCGCTAAGnTCTCAT TCACTCCACTCnTCACAAATGGATCGGAGCATAAATGnTCTCTOTATCACMGTCM GTCTTGTGATATATACGTACAAATGCACACCTATGAGCAAGGAATCCCCAnTGAATCAT TTAAnTACAGTCCATATGATTTACTr嵐OTACAAAGTTACAAAGTCTTCnnTGAA GATGCAAGAMITCCCGGGCCTGGGTACGACnTGTMTGCnTnTGAATCTCTTTAAT TGACATAAACTCAAGCCCTCTAGTAGTATAGAGATGATGCATCGGGAAAGGTCGGGATAG CTCAGCTGGTAGAGCAGAGGACTGAAAATCCTCGTGTCACCAGTTCAAAT
〈210〉 11 〈211〉聽 〈212〉 DNA 〈213〉竺物
〈223> :三叶木通(Jfe6Za的/o/z'ato var. awWrafo)的fr"L々"F片段 〈400> :11
GG嵐TCGGTAGACGCTACGGAOTGATTGGAITGAGCCTTGGTATGGAAACCTACTMG TGATMCnTCAAATTCAGAGAAACCCTGGMTGAAAAATGGGCAATCCTGAGCCAAATC CTGTnTCAGAAAAAAAAAGGTrCAGAAAGCGAGATTAAAAAMTAAAGGAAGGATAGGT GCAGAGAaCAATGGAAGCTGTrCTMCGAATGGAGTTGGCTGCGTTGCGTTCGTAGAGG MTCCTTCTATTG嵐CTCCAG嵐GGATGAAGGATGAACCTATATACGTACGTATACGT ACTGAAATATCAAAAGATTAATGACGATCAAAATAITCTnTATATGAAAAACGGAAGAA TTATrGTGAATCAAnTCAAGTTGAAGGAAAAATCGAATATTCACTGATCAMTCAGTCA TTCCATAGTCTGATAGATCTnTGMGAACTGACTAATCGGACGAGAATAAAGATAGAGTCCCATTCTACATGTCMTACCGACAATAATGAAATTTATAGTMGAGGAAAATCCGTCGA CnTGGAMTCGTCAGGGnCAAGTCCCTCTATCCCCAAGAAMAGGCCCGTnTACTCC nAACTATACTATGnATCCrnTnTGTCAGCGGTTCCAAATTCGCTAAGTITCTCArr CACTCCACTCnTCACAAATGGATCGGAGCATAAATGnTCTCTCTTATCACAAGTCAAG TCrTGTGATATATACGTAC嵐TGCACACCTATGAGCAAGGAATCCCCATITGAATCAIT TMnTACAGTCCATATGAnTAOTAAAaTACAAAGmCAAAGTaTCnnTGATG ATGCAAGAMTTCCCGGGCCTGGGTACGACnTGTAATGCnTnTGMTCTCnTAATT GACATAAACTCAAGCCCTCTAGTAGTATAGAGATGATGCATCGGGAAAGGTCGGGATAGC TCAGCTGGTAGAGCAGAGGACTGAAAATCCTCGTGTCACCAGnCAAAT
〈210〉12
〈211〉779
〈212〉DNA
〈213〉植物
〈223〉铁线莲
〈400〉12
的/mL-fr"F片段
CGAAATCGGTAGACGCTACGGAOTGGlTGGATTGCAGCdTGCATATGGCAAACATACT AAGGTGATAACTTTCAAATTCAGAGAAACCCCGGMTAAAMATGGGCMTCCTGAGCCA MTCCTnTTTCAGAAAACAAAAGGGOTCAGAAAGCMGAATAAAMMAAAGGATAGG TGCAG織CTAAATGGAAGCTGTTCTAACGMTAGAGTTGACTGCGlTGATCGAGGArrC ClTCTAnT嵐CTACAGAAAGGATGAACCCGTATACATATAAAAATATMAAGATrAAT GACAATCAAAATArnTnTOTATATGATATGCAAAATGTAAGAArraTGTGATGTGA ATTCATTCAAAGnTAAGTAAGAATCGAATAlTCACTGATCAAATAAGTCACTCTATAAT CTGATAGATCrnTAAAGAACTMTTGGACGAGMTAAAGATAGAGTCCCATTATACATG TCAACATCMTACTGACAAAAATG嵐TITATAGTAAGAGGAAAATCCGTCGACnnTA AATCGTGAGGGnCAAGTCCCTCTATCCCCAAAAAAMGnTACTGTACCCCCCMCTAT
rrAGTrAArrMTTcn'n'n'n'no'n'nTCTMGACTrnTAATGcn'rnTAGTCT
ArnMrrGATATACCCAACMGCACTCTAAATAGAGTGGGGATGCCGCATCGAGMGAG TCGGGATAGCTCAGTTGGTAGAGCAGAGGACTGAAAATCCTCGTGTCACCAGTTCAAAT
〈210〉 13 〈211〉 776 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉川木通(C/emafe wjo"ta"a)的fr"L-fr"F片段 〈400〉 13
CGAAATCGGTAGACGCTACGGAOTGGTTGGATrGAGCaTGATATGGAAACATACTAAG TGATAAOTTCAAATrCAGAG嵐CCCCGGMTAAAAAATGGGCMTCCTGAGCCMATC CnTnTCAGAAAACAAAAGGGOTCAGAAAGCAAGAATAAAAAAAAAGGATAGGTGCAG AGACTAAATGGAAGCTGTTCTMCGAATAGAGTTGACTACGTrGATCGAGGArrCCTrCT ATITAMCTACAGAMGGATGAACCCGTATACATATAAAAATATAAMGATrAATCACAA TCAAAATATTTTnTCTTATATGATATGCAAAATGTAAGAATTCTrGTCATGTGAATCGA TTCAAAGnTAAGTAAGAATCAAATA7TCACTGATCAAATAAGTCACTCTATAATCTGAT AGATCTnTAAAGMCTAATTGGACGAGAATAAAGATAGAGTCCCATTATACATGTCAAC ATCAATACTGACAAAAATGAAATTTATAGTAAGAGGAAAATCCGTCGACrnTTAAATCG TCAGGGTTCMGTCCCTCTATCCCCAAAAAAAAGTITACTGTACCCCCCAACTATrTAGT
TAATTMTTa'n'n'rrn'm'cnTn'rcTMGAcnTTTMTGcn'n'n'AGTCTAiT
TAAnGATATACCCAACAAGCACTCTAMTAGAGTGGGGATGCCGCATCGGGAAGAGTCG GGATAGCTCAGTTGGTAGAGCAGAGGACTGAAAATCCTCGTGTCACCAGTTCAAAT
〈210〉 14 〈211〉 1034 〈212〉 DNA
25〈213〉植物
〈223〉木防己(Coccm/us or6Zcw/aftw)的^"L-Zr"F片段 〈400〉 14
CGAAATCGGTAGACGCTACGGACTTGATTCGATrcAGCaTGGTATGGAMCCTACTAAG TGAAAACTTTCAAATTCAGAGAAACCCTGGAATTAAAAATGGGCMTCCTGAGCC嵐TC CTGrnTCAGAMACAAAAAAGAGrrCAGAAAGCGAGACTCAAAMTGGATAGGTGCAGA GACTCMTGGAAGCTGTTCTAACAAATGGAGTTGATrGCGlTGCGTrAGTAGAGTAATCC TTCTATTG嵐CTCCAGAAAGGATGAACTTATCTATATACATACGTCTACGTACTG嵐T ATCAAAGATrCATGATGATCCGAATCTGTAnTATGMAMTGGAAGAATTnTGTGAAT CMCTCCMGrTAAAGGMGAGTCGMCATTCACTGATCAMTCAGTCACTCCATAGTCT GATAGATCTnTGMGMCTGACTAATCGGACGAGMTAAAGATAGAGTCCCAlTCTACA TGTCMTACCGACAACAATG嵐nTATAGTAAGAGGAAAATCCGTCGACnTAGAAATC GTGAGGGTTCAAGTCCCTCTATCCCCAATAAAMTAAAAGGCCCACnTACTCCCTAATr AGTTATCCITGTATrcnTCTnTCGGCAGCAATrCAAAAmGCTATGnTCTCGrrCA CTCTACTCnTCACMATGGATCGGMGGGMG丁GTTTCTCTOTATCACMGTATTGTG ATATATACACTATACGTACAAATGAGCATCTATGGGCMGGMTCCCMnTGMTCATT CACAGTCCGTATCATrArnTAAACGTCMAAGTATTCTGnTGAAGATCCMGAMTTC CMGGACTGGGTAAAACnTGTTTrcTAATGCn'n'iTAGCCTCTTTATl'nT歸CTC nTMTCGACATAGGCCCMGAATTGACATAGGCCCMGCCCTCTAGTAGTATGGGGATG ATGCATCGAGAGGGGCCGGGATAGCTCAGTTGGTAGAGCAGAGGACTGMAATCCTCGTG TCACCAGTTCAAAT
〈210〉 15 〈211〉 1022 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉防己OSte/^a"Za fe/ra"flfra)的&ml-fr"F片段 〈400〉 15
CGAAATCGGTAGACGCTACGGACTrGATrGGATTGAGCCTTGGT八TGG八TACCTACTAAG TGMAACnTCAAAlTCAGAGMCCCCTGGAATTAMAATGGGCAATCCTGAGCCAAATC CTGrnTCAGAAAACAMAAAGGGTTTAGMTAGGAGACTCAAAMTGGATAGGTGCAGA GACTCAATGGAAGCTGTTCTAAGAAATGGAGTTCAnGanTGCGlTAGTGGAGGAATCC TTCTATTG嵐CTCCAGTAAAGGATGAAOTATCTATATACATACGTCTACGTACTG嵐 TATCAMGAnCATGATGATCCGAATCTGTATTTATGAAAAATGGAAGAATITGTGTTTT TGTAAATCAATTCCAAGTrGAAGGAAGMTCGMCATrCACTGATCAAATCAGTCACTCC ATAGTCTGATAGGTCnTTGAAGAACTGACTMTCGGACGAGAATAAAGATAGAGTCCCA TTCTACGTGTCMTACCGACAACAATGAAAnTATAGTAAGAGGAAMTCCGTCGACnT AG嵐TCGTGAGGGTTCAAGTCCCTCTATCCCCMGAAAAATAAAAGGCCAATnTACTC
CCTAACGAGrrATa'rn'rn'n'n'n'n'cnTCTnTCGGCAGCAGTTCCAAATTCGCT
ATGTTTCTCGrrCACTCTACTCnTCCCAAACCAAATGGATGGGAAGAGAAATGTTTCTC TnTATCACAATACTTGTGATATATACGTACAAATGAGCATCTATGGGCAAGGAATCCCA AnTGMTCAnCACAGTCCGTATTATATTCTAATnTGAACGCCAAAAGTATTCTGTIT GATGMGATCCMGAAATTCCAAGMCTGGGTMGATnTGTnTGCMTGCrnnTAG TCTCTnMITGACATAGGTCCAAGCCCTCTAGCAGTATGGGGATGACGCATCGAGAGAG GGGCCGGGATAGCTCAGTTGGTAGAGCAGAGGACTGAAMTACTCGTGTCACCAGTTCM AT
〈210〉 16
〈211> :
〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉欧白英(So/a"ww t/w/ca附ara)的?r"L-fr"F片段
〈400〉 16CGAAATCGGTAGACGCTACGGACITAATTGGATrGAGCCrrcGTATGGAAACTrACTAAG TGATCACTTTC嵐rrCAGAGAAACCCTGGAATTMCAAAAATGGGCAATCCTGAGCCAA ATCCTGTnTCTGAAAACAMCAAAGGTTCAGAAAAAAAGGATAGGTGCAGAGACTCAAT GGMGCTATrCTAACAAATGGAAlTAAATGCGTrGGTAGAGGACTCnTACATCGAAACT TCAGAAAGAAAAAGMTGMGTGAAGGATAAACGTATATACATACGTATTGAATACTATA TCAAATGATTAATGACGACCCGAATCCGTAGTmTCTATAAAAAATCGMGAAnGGTG TGAATCCATTCTACAnGAAGAAAGAATCGAATAnCAlTGATCAAATCAnCACTCCAT AGTCTGATAGATCrnTGAAGAACTGAnMTCGGACGAGAATAAAGATAGAGTCCCGTT CTACATCTCMTACCGGCAACMTGAMnTCTAGTAMAGGAAAATCCGTCGACTTTM AAATCGTGAGGGTTCMGTCCCTCTATCCCCAAAAAGACTAnTAACTCCCCAACTATIT ATCCGACCCCCnTCCTrAGCGGTTGCAAATrCCTTATCnTATCATrCACTCTATTCTT TTAGAMTGGA'nT丄'丄TiTCTAAGCGTAAATGGrnTCTOTATAACAAGCCnTATGAT ATCTATGATACACATAAAAATGAACATCnTGAGCAAGGMTCCCTAGTTGAATGAnCC CGATCAATACAATATCATTACTCATACTGAAACTTACAAAGTCATCnTTTGAAGATCGA AGAAATTACCCGGnTGAGAAAA'n'lTn'AATCTACnTGTGTCCmTAArrGACATAG CCCCCAGnCTATGATAMATGAGGATACCACGC嵐GGACTAAAMTCCTCAGGTTAGC GGTTCCAATCGAGATrGGGMTAGCCGGGATAGCTCAGTTGGTAGAGCAGAGGACTGAM ATCCTCGTGTCACCAG1TCAAAT
〈210〉 17 〈211〉 1041 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉白英(Soto"Mw/yra仏w)的/r"L-ZmF片段 〈400〉 17
CGAMTCGGTAGACGCTACGGACTrMTrGGArrGAGCClTGGTATGG嵐CTTACTAAG TGATCACnTC嵐TTCAGAGAAACCCTGGAATTMCAAAMTGGGCAATCCTGAGCCAA ATCCTGrnTCTGAMACAAACAAAGGTTCAGAAAAAMGGATAGGTGCAGAGACTCAAT GGMGCTATTCTAACAAATGGAGTTAAATGCGITGGTAGAGGACTCnTACATCAAAACT TCAGAAAGAAAAAGAATGMGTGMGGATAAACGTATATACATACGTAnGAATACTATA TCAMTGATTAATGACGACCCGMTCCGTAGrmTCTATMMAATCGAAGMTTGGTG TGAATCCATTCTACAnGAAGAAAGAATCGAATArrCArrGATCAAATCATrCACTCCAT AGTCTGATAGATCTnTGAAGAACTGATTMTCGGACGAGAATAAAGATAGAGTCCCGlT CTACATGTCAATACCGGCAACAATGAMTITATAGTAAMGGAAAATCCGTCGACnTAA AAATCGTGAGanTCAAGTCCCTCTATCCCCAAAAAGACTATITAACTCCCCAACTAnT ATCCGACCCCCnTCCTTAGCGGTTCCAAATTCCITATCnTaCATTCACTCTATTCTT TTAGAAATGGATiTiTn'CTMGCGTAAATGGrnTCTCTTATCACAAGCCnTATGATA TCTATGATACACATAGAAATGAACATCnTGAGCAAGGAATCCCTAGTTGAAAGATTCCC GATCAATACAATATCATrAOTATACTGAAAaTACMAGTCATCnnTGMGATCGAA GAAATrCCCCGGnTGAGAAAA'l'i'i'riTAATCTAmTAGTCCTnTAATrGACATAGAC CCCAGTTCTATGATAAAATGAGGATACCATGCAAAGGACTAAAAATCaCAGGTrAGCGG nCCAATCGAGATTGGGMTAGCCGGGATAGCTCAGTTGGTAGAGCAGAGGACTGAAAAT CCTCGTCTCACCAGTTCAMT
〈210〉 18 〈211〉 847 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉:大百合(Cardiocrinum giganteum)的trnL-trnF片段 〈400〉 18
CGAAATCGGTAGACGCTACGGACITGArrAAATrGAGCCTrGGTATGGAAACCTGCTMG TGATAACCTCCAAATTCAGAGAAACCCCGGAATTAAAMTGGGCAATCCTGAGCCAAATC TITATnTGAGAAAAAGGGTnMnTATAGTnTTATAATATAAAACTACMTAAAAAA AGATAGGTGCAGAGACTCAATGGMGCTGrrCTAACGAATGAAGTTGATTACGTrGCGCTGGTAGCCGGAATCC1TCTATCAMATTACGGAGAGGATGCCCGCCCTATATACGTATATA TACATACTGACATAGTMACGATTGATTAATCACGGCCCGAATCCA1TATATAATATATA TATATATGAAAAATITMGAGlTATrGTAAATCCATrCCATATrcCAATCAAAGTITMG GMGAATCAAATATrCAGTGATCAMTrATTCGnCCAGAGTCTGTATAGATCTnTTAA AAACTGATTATTCGGACGAGAATAAAGAGAGAGTCCCATnTACGTCTCAATACCGACAA CAATGAAAnTATAGTAAAAGGAAMTCCGTCGACnTATAAGTCGTGAGGGTTCAAGTC CCTCTATCCCCAATAAAAGCCCATnTAAGTACTMaTAACTATACTTCCTAACTACIT TTTATCTTATCrnTnTAATCTAAGAAAITCAGGGGCTGGGTAAGATn.iTl'AGTACTr TCnMnTnTAGTaCTTTMTTGACATAGGTAMGTGCTCTACTAGGATAATGCGCG AGAAMGGTCGGGATAGCTCAGTTGGTAGAGCAGAGGACTGAAAATCCTCGTGTCACCAG TTCAAAT
〈210〉 19 〈211〉 847 〈212〉 DNA 〈213〉寧物
〈223〉云南大百合(Cardiocrinum yunanense)的trnL-trnF片段 〈400〉 19
CG嵐TCGGTAGACGCTACGGAOTGATTAAATTGAGCaTGGTATGGAAACCTGCTMG TGATAAaTCCAAAlTCAGAGAAACCCCGGMITAAAAATGGGCMTCCTGAGCCAMTC TITArnTGAGAAAAAGGGrnMnTATAGTmTATMTATAAAACTACAATAAAMA AGATAGGTGCAGAGACTCAATGGAAGCTGTTCTMCGAATGAAGlTGATrACGTrGCGCT GGTAGCCGGMTCOTCTATCAAAATTACGGAGAGGATGCCCGCCCTATATACGTATATA TACATACTGACATAGTAAACGATTGAnAATCGCGGCCCGAATCCATTATATAATATATA TATATATGAAAAATITMGAGTrATTGTAAATCCAITCCATArrCCAATCAAAGTTrAAG GMGAATCAAATATrCAGTGATCAAArrArrCAlTCCAGAGTCTGTATAGATCrmTM AMCTGATTATrCGGACGAGAATAAAGAGAGAGTCCCATTCTACGTGTCAATACCGACAA CAATGAAAnTATAGTAMAGGAAAATCCGTCGACnTATAAGTCGTGAGGGTTCAAGTC CCTCTATCCCCAATAAAAGCCCATnTAAGTACTMOTAACTATACrrCCTMCTACTT nTATOTATCTnmTMTCTAAGAAATTCAGGGGCTGGGTAAGATnnTAATACn TOTMTnTTTAGTCTCnTMTrGACATAGATAAAGTGCTCTACTAGGATAATGCGCG AGAAMGGTCGGGATAGCTCAGTTGGTAGAGCAGAGGACTGAAAATCCTCGTGTCACCAG TTCAAAT
〈210> :20 〈211〉 819 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉薯蓣(Dioscorea cirrhosa)的trnL-trnF片段 〈400〉 20
CGAAATCGGTAGACGCTACGGAOTGATTGAATTCAG(nTGGTATGGAAACCTGCTAAG TGATMOTCCAAATrCAGAGAAACCCTGGAAnTGAMTGGGCAATCCTGAGCCAAATC TTTATITGTnTG'iTlTlTATAAACCCnTGGnTATAAAAAAACAAAACAAACTAGAAT CAAAMTCAAAAAGGATAGGTGCAGAGACTCAATGGAAGCTGTTCTAACGAATGGAATTG ACTACGnATGnGGTAGTTGGAAAACCTACATrGAAATTATGAMAGGGGAGTTCTATA TACCCAATACGTACGTATACATACTMCATATTAAAGGATTMTCACGACCCGAATCCAT TATnTAnTATATATAnATGAAAAAATGGAAAGTTATATrGTGAATCTAnTCAACCG MGTKMGGAAGAATCAAATATnMTGATCAAATCATTGAnCTAGAGTCTGATAGAT CmTGAAAAACGAATTAATCGGACGAGAATAAAGAGAGAGTCCTGCTCTACATGTCAAT ACTGACAACAATGAAATTTATAGTAAGAAGAAAATCCGTCGACTTTAGAAATCGTGAGGG TTCAAGTCCCTCTATCCCCAAAAAAGTCCArnTAnTCCTAATTATITATACTCTnTT TTTGMGATCGAAGGACTGGATAAGATnnTMGAGTCCCCTTAATrGAGATAGATAGA TATAAGTACTCTAGCAGGATGATGCGAGAAAAGAAAATGGTTGGGATAGCTCAGTTGGTA GAGCAGAGGACTGAAAATCCTCGTGTCACCAGTTCAAAT
28〈210〉 21 〈211〉 343 〈212> :DNA 〈213〉植物
〈223〉马兜铃(Aristolochia contorta)的psbA-tmH片段 〈400〉 21
GGTATGCATGMCGTAATGCTCACAACTrCCCTCTAGACCTGGCTGCTOTGAAGCTCCA TCTACAAATGGATAATACATCGTTAnTGTGTATACGAGTCGTTGAAGGAGCAATACCCA ATCCTnTGrraTATCMGAGGTGGGTATrGTrcCGCTCAATrCACTATCMCTCATTA GAGTnTACTCATATnTACTCATTnTACTCATATCGCATATATATTATATGTATATGC ATnTATCCATAGnTAAAGnAAAAAAMAAMAAAGGAAAGGCCAGGGGCGGATGTAG CCMGTGGATCAAGGCAGTGGATITGTGAATCCACCATGCGCG
〈210〉 22 〈211〉 349 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉:青木香(Aristolochia debilis)的psbA-tmH片段 〈400〉 22
GGTATGCATGAACGTAATGCTCACMC1TCCCTCTAGACCTGGCTGCTCTTGMGCTCCA TCTACAAATGGATMTACATCGlTATrAGTGTATACGAGTCGTrGMGGAGCAATACCCA ATCCTnTGTraTATCAAGAGGTGGGTATTGTTCCGCTCAATrCACTAGAGrnTACTC ATATnTACTCATATCGCATATATMTATATTATATGCTATGCATnTATCCA'n'iT丄Ti' AGTITAAAGTTAAAAAAAAAAATGAAAAAGGAAAGGTrAAAAAGGAAAGGCCAGGGGCGG ATGTAGCCAAGTGGATCMGGCAGTGGATTTGTGMTCCACCATGCGCG
〈210〉 23 〈211〉 276 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉:广防己(Aristolochia fangchi)的psbA-trnH片段 〈400〉 23
GGTATGCATGAACGTAATGCTCACAACITCCCTCTAGACCTGGCTGCTCnGAAGCCCCA TCCACAAATGGATAATAOTCGGTATTAGTGTATACGAATCGTTGAAGGAGCAATACCCA ATraTGrnTTATCAAGAGGTGGGTATTGTrCTGCTCAAlTCACTAGTGTnTACTCAT TACAGCGGATTACTCCnTnTGMGTTAAAG嵐GGGCAGGGGCGGATGTAGCCMGTG GATCAAGGCAGTGGATTTGTGAATCCACCATGCGCG
〈210〉 24 〈211〉 261 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉:马兜铃(Aristolochia kaempferi)的psbA-trnH片段 〈400〉 24
GGTATGCATGMCGTAATGCTCACAAaTCCCTCTAGACCTGGCTGCTaTGAAGCTCCA TCCAC嵐TGGATAATACTTCGGTAnAGTGTATACGAATCGTTGAAGGAGCMTACCCA ArrCTTGTmTATCAAGAGGTGGGTATrGTTCTGCTCAATTCACTAGTGTnTACTCCT nnTnTAAGTTAAAGAAAGGGCAGGGGCGGATCTAGCCMGTGGATCMGGCAGTGGA TTTGTGAATCCACCATGCGCG〈210〉 25 〈211〉 274 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉关木通(Aristolochia manshuriensis)的psbA-trnH片段 〈400〉 25
GGTATGCATGAACGTAATGCTCACMaTCCCTCTATACCTGGCTGCTOTGAAGCTCCA TCCACAAATGGATAATACATTCGGTATTAGTGTATACGAATCGTTGAAGGAGCAATACCC AATrCTTGrmTATCAAGAGGCGGGTAITGTrCTGCTCAATrcACTAGTGTnTACTCG CGGATTACTCCnnnTnTAAGlTAAAGAAAGGGCAGGGGCGGATGTAGCCAAGTGGA TCAAGGCAGTGGATTTGTGMTCCACCATGCGCG
〈210〉 26 〈211〉 260 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉寻骨风(Aristolochia mollissima)的psbA-trnH片段 〈400〉 26
GGTATGCATGAACGTAATGCTCACAAOTCCCTCTAGACaGGCTGCTCTrGMGCTCCA TCCACAAATGGATAATACTTCGGTATTAGTGTATACGMTCGTTGMGGAGCMTACCCA ATTCTTGrmTATCAAGAGGTGGGTATrerrCTGCTCMnCACTAGTGrnTACTCCT TTnTmTAGTTAAAGAAAGGGCAGGGGCGGATGTAGCAAGTGGATCAAGGCAGTGGAT TTGTGAATCCACCATGCGCG
〈210〉 27 〈211〉 517 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉:木香(Aucklandia lappa)的psbA-trnH片段 〈400〉 27
GGTATGCATGAACGTMTGCTCATAAnTCCCTCTAGACITAGCTGCTATCGAAGCTCCA TCTACAAATGGATAAGACnTGGTCTCATTGTATAGGAGTmTGMCTAAAAAAGGAGC AATAGCTrCCacrrGTTTTATCMGAGGGCGTTATTGCTCCn'n'n'rATITAGTAGTA TTTACCTrACATAGTTTCnTAAAAATAACAAGGGGGTnTATAGnTGGTrCGATTAGC ATGTTTTATCnTGTATrAATITCTATrATAGGTITATATATCCTnTCCCMTCGTITA TCAAGTnTArrTCCAACTCMTITCAATCTAAAATAGATAAAAATrATMTnTGATrA TITATrGCTnTATITCAGAAATAAGAAAGAAATAATATGCTCnTnnTATGTrMTG GAAAAATAAMTATAGTAATAGTAGATMTACTAGATAATAGGGGCGGATGTAGCCMGT GGATCAAGGCAGTGGATTTGTGAATCCACCATGCGCG
〈210〉 28 〈211〉 518 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉灰毛川木香(Vladimiria souliei var. mirabilis)的psbA-trnH片段 〈400〉 28
GGTATGCATGAACGTAATGCTCATAATITCCaCTAGACTTAGCTGCTATCGAAGCTCCA TCTACAAATGGATAAGACnTGGTCTGATTGTATAGGAGTnTTGMCTAAAAAAGGAGC AATAGCTTCCCTCTTGTnTATCAAGAGGGCGTTATTGCTCCnTTTTTAnTAGTAGTA TITACaTACATAGnTCnTAAAAATMCAAGGGGGGTnTATAGnTGGrrCGArrAG CGTGTnTATCnTGTArrMTITCTATrATAGGTTTATATATCCrnTCCCMTCGTTrATGAAGTnTAnTCCAACKMnrCMTATAMATAGATAAAAATTATAATnTGAn ATITATrGCrnTAnTCAG嵐TAAGAAAGAAATAATATGCTCrriTlTn'ATGTrMT GGAAAAATAAAATATAGTMTAGTAGATAATACTAGATMTAGGGGCGGATGTAGCCAAG TGGATCAAGGCAGTGGATITGTGAATCCACCATGCGCG
〈210〉 〈211〉 〈212〉 〈213> 〈223〉 〈400〉
29
617
DNA
植物
木通(Akebia quinata)的psbA-tmH片段 29
GGTATGCATGAACGTMTGCTCACAACrrCCCTCTAG八CCTAGCrGCTGTCGAAGCTCCA GCGACAAATGGATMGATrrCCGTOTAGTGTATCCGAGTrATTGMGGTCAAGGAGTAA TACCCAATTTCITGTrCTATCAAGAGGACGGGTAlTGTrCCTTCATrTAGTnTAGTAGT TTTTACTCGCAGAATCTGCTCTiT丄'i,riTr丄'丄'AnTATnTAACTAAAATAAAAATGAAT ATAGGnTATrCATrAlTGAGTATCATACTnTGrrCTGTATAAAATATATAATITATGA AnTATATATGTTATATGrrCCTCG纖'丄'丄T丄TGAOTGAaT丄'rri'CATAAATrATGG AMTrATGAAACTAAAGCTACTTmTATAMGGATrGGTCTTGCATGCCCAATATCTGT ATOTAGTATATaTAGTATCMGAAMGTAAGAACTACTCMTTAAAAAACTCAATTAA AAMTGAAAAATAACAAAAAAAGAAATrCAAnTCTACCATATGGTi'i'丄Ti.iT丄'ArmT TTGTGAGTTTGAGGGAGTAGGGGGGCGGATGTAGCCAAGTGGCTCAAGGCAGTGGATITG TGAATCCACCATGCGCG
〈210〉30
〈211〉617
〈212〉DNA
〈213〉植物
〈223〉三叶木通
〈400〉30
(Akebia trifoliate)
的psbA-trnH片段
GGTATGCATGAACGTAATGCTCACAACTTCCCTCTAGACCTAGCTGCTGTCGMGCTCCA GCGACAAATGGACAAGAnTCCGTCTTAGTGTATCCGAG!TATTGMGGTGAAGGAGTAA TACCCAATTTaTGTrCTATCMGAGGACGGGTATTGTrCOTCATITAGTnTAGTAGT rnTACTCGCAGAATCTGCTCnTn'n'n'rAnTATnTMCTAAAATAAAAATGMTA TAGGnTATTCATrATTGAGTATCATACTmmTCTGTATAAAATATATMHTATGM nTATATATGTTATATGTTCCTCGAAATlTnTGAOTGACnTrn'CATAAATrATGGA AATTATGAAACTAAAGCTACTiTiTi'ATAAAGGATrGGTOTGCATGCCCMTATCTGTA TaTAGTATATOTAGTATCAAGAMAGTMGAACTACTCAATTAMAAATAAAAAATGA AAMTMCAAAAAAAGAAATTCAATTTCTACCATATGG'n'n'n'nTn'n'nTATrnT TTGTGAGnTGAGGGAGTAGGGGGGCGGATGTAGCCAAGTGGCTCAAGGCAGTGGAnTG TGAATCCACCATGCGCG
〈210〉 〈211〉 〈212〉 〈213〉 〈223〉 〈400〉
31
608
DNA
a物
三叶木通(Akebia trifoliata var. australis)的psbA-tmH片段 31
GGTATGCATGAACGTAATGCTCACAACnCCCTCTAGACCTAGCTGCTGTCGMGCTCCA GCGACAAATGGATAAGAmCCGTCTTAGTGTATCCGAGTTMTGAAGGTGAAGGAGTAA TACCCAAnTdTGITCTATCAAGAGGACGGGTATrGnCCTTCATTTAGTnTAGTAGT TnTACTCGCAGMTCTGCTCnTiTnTiTiTATITArnTAACTAMATAAAAATGM TATAGGnTATrCATTATTGAGTATCATACTnTGTTCTGTATAAAATATATAAnTATG
31AATnATATATGTrATATGrrCCTCGAAA'nTn'rGAOTGACn'n'n'CATAMTrATG GAMTTATGAAACTAAAGCTACnTnTATAAAGGAnGGTCTTGCATGCCCAATATCTG TATCTTAGTATATCTTAGTATCMGAMAGTAAGAACTACTCAAITAAMAATGAAAAAT AACAAAAAAAGAAATTCAATTrCTACaTATGGlTi.n.i,i'i'iTn'ATi'n'iTi'GTGAGTT TGAGGGAGTAGGGGGGCGGATGTAGCCAAGTGGCTCMGGCAGTGGATITGTGAATCCAC CATGCGCG
〈210〉32
〈211〉456
〈212〉DNA
〈213〉植物
〈223〉铁线莲
〈400〉32
(Clematis armandii)
的psbA-tmH片段
GGTATGCATGAACGTAATGCTCACAACTCCCCTCTAGATCTAGCGGCTGTTGMGITCCA TCTACMATGGCTAAGACrrAGGTCTTAGTGTATGCTAGTOTAGTGTATATGAGTCGlT GMGTTGCAGGAGTMTACCCCMlTCrrGCTCTGTCAAGAGGCCGGGCArrGCTCCTGC GTnTGTnTAATAGTGTnTAnTGCArmTCATMTGATl,nTl'A'lTi.i'丄TriTGM GTCAnTCATmTGMTrTGAAGTAAAAAAAAAAAATGACTCGAATGGGGGAlTGGTTG TTGMTTC1TGATTATCATACTCTCGTTCTGTACGTATATAAACCMTCCMTATAATAT GlTCCTAAAMrnTGAAACMTTTAnTGAGAAAGCGGAGGGGCGGATGTAGCCAAGTG GATCMGGCAGTGGATTTGTGMTCCACCATGCGCG
〈210〉 33 〈211〉 447 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉川木通(Clematis montana)的psbA-tmH片段 〈400〉 33
GGTATGCATGAACGTAATGCTCACAAC1TCCCTCTAGATCTAGCGGCTGTTGAAGTTCCA TCTACAAATGGCTAAGACTTAGGTClTAGTGTAGGCTAGTCTrAGTGTATATGAGTCGTr GAAGrrGCAGGAGCAATACCTCAATTaTGTTCTGTCAAGAGGCCGGGCATTGCTCCTGC GTnTGTnTAATAGTGTnTATTTGCATnTGCATAATGATiTiT丄'Cn'i'lTlTi'iTGA AGTAAnTMnTGAAGTAAAAAAAAAATGACTCGAATGGAGGATTGGTTGGTGAAlTa TGATrATCATACTCTCGTrCTGTACATATATAMCCAATCCMTATAATATGTTCCTAAA AATTrGGAAACAATTTAnTGAGAAAGOGGAGGGGCGGATGTAGCCAAGTGGATCAAGGC AGTGGATTTGTGAATCCACCATGCGCG
〈210〉 34 〈211〉 643 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉木P方己(Cocculus orbiculatus)的psbA-tmH片段 〈400〉 34
GGTATGCATGMCGTAATGCTCACMOTCCCTCTAGATCTAGCAGCTGTreAAGCTCCA TCTACAAATGGCTMGATrrCGGTOTAGTGTATACGAGTCGTrGAAGTrGAAAGAGCAA TACCCMTl'n'丄'丄'GTTCTGTCMGGGGGCGGGTATrGCTCaTCAAnAGGGTTAGTATT GTnTGTnTACTCACATAAGCA'n'n'nTCATnTCTAnTATTTAnTCAAOTATAA AATTCAGAMAAAGCATrCAATTAATAAGGArmnTGAGTArnTATTATGCCnGAT TCTGCACTAACGAATTTGTAAnTCTATATGTTATTrAGGTGATAGGTITCCCGACATCT TnTOTCCTAAAGTTCTnTATrATrCnTGAnnTnTCATATnTATITCTATTAG TITAGTnTAACTAAACTAGAAAAATAAAATAAAAGATrCCCTnTAGGTACAATATCTr TATnCAGTATATrCTAAAGAGATGCGTAAGTTAGG雄GACTTAACTTAAACATGTAAA<formula>formula see original document page 33</formula>ATCAITGAAATAAGAAAGMGAGAAATATTCGMCnTACTCTnTGTnTCGMTITAA ATAATGTAAAAATGGACTGTAAGTAGTCGAGGGGGCGGATGTAGCCAAGTGGATCAAGGC AGTGGATTTGTGAATCCACCATGCGCG
〈210〉 38 〈211〉 489 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉大百合(Cardiocrinum giganteum)的psbA-trnH片段 〈400> :38
GGTATGCATGAACGTAATGCTCACMTITCCCTCTAGACTAGCTGCTGTTGAAGrrCCAT CTACAAATGGATAAGACnCCATTCTGTOTAGTGTATACGMTCArrGATGGAGCAATA TCnTGTATaTGCTMAGATArrGCTCCCn'n'rn'GGCCMTCAITGTGGGTATMTG GTAGATGCCCTAGACCAAGTGACTATTATTTCnTCTCCTCCCTTATGnTAGTnTrCA ATTnTGCCGATAMTGAlTAGCTACAAAAGGA'rrn丁i'm'ATrGAACGTGTCACAGGG GArrACTCCnTATTACATTACArmTAMAlTGGCATTCTATGCCCMTATATCGATC TAAGTATGMGGTMGAATAMTACAATMTGATGMTGGAAAAAGAAMAAGCTAAAAT CnTTAGCTAGATAAGGGGCGGATGTAGCCAAGTGATCAGGCAGTGGAnTGTGAATCCA CCATGCGCG
〈210〉 39 〈211〉 492 〈212〉 DNA 〈213〉粤物
〈223〉云南大百合(Cardiocrinum yunanense)的psbA-trnH片段 〈400〉 39
GGTATGCATGAACGTAATGCTCACAATrrCCCTCTAGACCTAGCTGCTGTrGAAGTTCa TCTACAAATGGATAAGACTTCCATTCTGTOTAGTCTATACGAATCATrGATGGAGCAAT ATCnTGTATCTrGCTAAAGATATTGCTCCCnTnTTGGCCAATCATTGTGGGTATAAT GGTAGATGCCaAGACCMGTGACTArrAnTCnTCTCCTCCOTATGnTAGTmTC AATTnTGCCGATAAATGATTAGCTACAAMGGATnTn'n'iAnGAACGTGTaCAGG GGATTACTCCnTATTACATTACArmTAAAATrGGCATTCTATGCCCMTATATCGAT CTMGTATGAAGGTAAGMTAMTACAATAATGATGAATGGAAAAAGAAAAMGCTAAAA TCmTAGCTAGATMGGGGCGGATGCAGCCAAGTGGATCMGGCAGTGGATITGTGAAT CCACCATGCGCG
〈210〉 40 〈211〉 401 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉薯蓣(Dioscorea cirrhosa)的psbA-trnH片段 〈400〉 40
GGTATGCATGAACGTAATGCTCACAACnTCCnTAGAOTAGCTGCTGrrGAAGTTCCA TCTACAAATGGATAAGACrnTGTOTAATGTATATGMTCGnGAAGGAGCAATATCAA TATCTTGTrCGAGCAAGMGnTGGTATTGCTCCCCTnTCAArnTrCCCGATAAATGA TCAACTACAAAAGGA'rnTlTlTrAGTGAACGTGTCACAGCGGAlTACTCCnTATTnT TACArmTMGATTGGCAlTCTATGlTCAATATCTCGATCTAATMGGTMGAATAAAT TTAAATACAATAATGATGMTGGAAAAAGAGAMATCCnTAGCTAGGGCGGATGTAGCC AAGTGGATCAAGGCAGTGGATTTGTGAATCCACCATGCGCG
权利要求
1. 一种用于判断未经鉴定的植物材料是否源于马兜铃属植物的方法,包括下述步骤(a)从所述未经鉴定的植物材料中获得DNA样品,所述DNA包括叶绿体DNA的片段,该片断位于叶绿体DNA的trnL-trnF区间或位于psbA-trnH区间;(b)确定所述片段的DNA序列;以及(c)将所述DNA序列进行分析并判断其是否包括马兜铃属的表征片段,以评估所述未经鉴定的植物材料是否属于马兜铃属物种。
2. 如权利要求1的方法,其中步骤(c)通过比较上述DNA序列与 含有马兜铃属的表征片段的标准DNA序列而实现。
3. 如权利要求2的方法,其中标准DNA序列是叶绿体DNA的tmL -trnF片段或psbA - tmH片段,或者包含了叶绿体DNA的trnL - tmF片段 或psbA - tmH片段,或者属于叶绿体DNA的trnL - tmF片段或psbA - tmH片段的一部分。
4. 如权利要求2的方法,其中所述未经鉴定的植物材料源于木香、木 通、防己、白英、马兜铃或朱砂莲。
5. 如权利要求2的方法,其中,所述片段包括选自分子标记1至分子 标记39的分子标记序列。
6. 如权利要求4的方法,其中,所述片段包括选自分子标记1至分子 标记39的分子标记序列。
7. 如权利要求2的方法,其中,所述标准DNA序列选自SEQIDNO:l 至SEQ ID NO:40的序列,或者包含选自SEQ ID NO:l至SEQ ID NO:40 的序列,或者是选自SEQIDNO:l至SEQIDNO:40的序列的一部分。
8. 如权利要求7的方法,其中,所述标准DNA序列包含选自分子标 记1至分子标记39的分子标记序列。
9. 如权利要求2的方法,其中,所述标准DNA序列选自SEQIDNO:l 至SEQ IDNO:40序列。
10. 如权利要求7的方法,其中,所述标准DNA序列是选自SEQID NO:l至SEQIDNO:40序列的一个序列的全部或一部分,并且所述部分至 少占所选序列长度的80%。
11. 如权利要求1的方法,其中,所述马兜铃属的表征片段位于trnL-trnF 片^殳之内。
12. 如权利要求l的方法,其中,所述马兜铃属的表征片段位于psbA 一trnH片萃殳之内。
13. 如权利要求3的方法,所述标准DNA序列是叶绿体DNA的trnL -trnF片段,或者包含叶绿体DNA的trnL - trnF片段,或者是叶绿体DNA 中的trnL — trnF片段的一部分。
14. 如权利要求3的方法,所述标准DNA序列是叶绿体DNA中的 psbA - trnH片段,或者包含叶绿体DNA中的psbA - trnH片段,或者是 叶绿体DNA中的psbA - trnH片段的一部分。
15. —种用于如权利要求1的方法的基因序列,选自SEQ ID NO:l至 SEQ ID NO:40的序列,或者包含选自SEQ ID NO: 1至SEQ ID NO:40的序 列,或者是选自SEQ ID NO:l至SEQ ID NO:40的序列的一部分。
16. 如权利要求15中所述的基因序列,选自SEQIDNO:l至SEQIDNO:40中的一个序列的全部或一部分,并且所述部分至少占所选序列长度 的80 % 。
全文摘要
一种用于检测在草药产品和植物药中的马兜铃属草药或植物的方法,可基于trnL-trnF片段和/或psbA-trnH片段的序列信息。叶绿体DNA的trnL-trnF片段和/或psbA-trnH片段包含了一些可高度表征马兜铃属植物的片段。通过这种方法,比较材料不明的草药或植物与已知材料的标准DNA序列在上述片段中的一个片段或者多个片段的相近似度可用于鉴别未知的材料。
文档编号C12Q1/68GK101440398SQ20081009421
公开日2009年5月27日 申请日期2008年4月22日 优先权日2007年4月23日
发明者明 李, 林晓岚, 毕培曦, 毕颖骞, 邵鹏柱 申请人:香港赛马会中药研究院有限公司
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