专利名称:一种利用泰乐菌素药渣生产酵母培养物的方法
技术领域:
本发明涉及一种利用泰乐菌素药渣的方法,尤其是涉及一种利用泰乐菌素药渣生
产酵母培养物的方法。
背景技术:
中国是大环内酯类抗生素生产第一大国,年产量超过世界总产量的2/3。然而在抗 生素生产过程中,会产生大量的废弃药渣,这些药渣主要是发酵醪液进行固液分离时形成 的菌饼部分,其主要成分是微生物菌丝体、未代谢利用完的有机物、无机盐、少量未分离完 的抗生素及其降解产物。长期以来,抗生素废弃药渣多采用简单晾晒或烘干后,作为动物饲 料或肥料使用,经济附加值较低。与此同时,药渣中因存在未分离完的抗生素,使其直接作 为饲料或肥料使用受到人们的质疑。 酵母培养物通常是指用固体或液体培养基经酵母菌发酵后,含培养物和酵母菌的 混合物,富含B族维生素、矿物质、消化酶、促生长因子和较齐全的氨基酸,是集营养与保健 为一体的饲料添加剂。酵母培养物无毒无副作用,它可预防和治疗畜禽消化系统疾病,促进 幼龄动物胃肠发育和功能的完善,有效提高畜禽的生长和生产性能。目前,我国酵母培养物 年产量较少,但需求量却较大,因而存在较大的市场开发前景。由于酵母培养物生产原料主 要是小麦、玉米等经济作物,价格较高,因而造成酵母培养物的生产成本还处在一个比较高 的水平,难以达到实际且实惠的应用。 目前还没有一种能利用泰乐菌素药渣生产酵母培养物的方法。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足,提供一种生产成本低、制备工艺简单独特、 使泰乐菌素废弃药渣得以高值化利用、有效避免泰乐菌素废弃药渣不合理利用对环境造成 危害的一种利用泰乐菌素药渣生产酵母培养物的方法。
本发明通过如下方式实现 —种利用泰乐菌素药渣生产酵母培养物的方法,其特征在于该方法包括如下步 骤 a.酵母菌种子的制备将啤酒酵母、热带假丝酵母和EM原露分别按质量比为1% 的接种量接入酵母复壮培养基,菌株经活化和扩大培养后,按质量比为1 5%的接种量接 入酵母菌种子培养基,28 32t:厌氧培养36 48h后,可制得生产酵母培养物的酵母菌种 子; b.降解菌种子的制备将降解药渣泰乐菌素的降解菌,按质量比为1%的接种量 接入降解菌复壮培养基,降解菌经活化和扩大培养后,按质量比为5 10%的接种量接入 一级降解菌种子培养基,28 32t:厌氧培养48 72h后再转接入二级降解菌种子培养基, 28 32。C厌氧培养48 72h后再转接入三级降解菌种子培养基,28 32。C厌氧培养48 72h后,可制得降解药渣泰乐菌素的降解菌种子;
c.将上述步骤a制备的生产酵母培养物的酵母菌种子和上述步骤b制备的降解药 渣泰乐菌素的降解菌种子分别按质量比为1 5%和5 10%的接种量接入固体药渣培养 基,搅拌均匀后压实,28 32t:厌氧培养20 25天,即微生物固体厌氧发酵生产酵母培养 物结束; d.将上述步骤c发酵产物在50 7(TC条件下干燥,粉碎后即为酵母培养物;
所述酵母菌复壮培养基,降解菌复壮培养基,酵母菌种子培养基,一级、二级或三 级降解菌种子培养基,固体药渣培养基的配制方法分别是 1)酵母菌复壮培养基将下述重量的原料混合即可得酵母菌复壮培养基蛋白胨 10g,酵母浸膏10g,葡萄糖20g,水1000ml ; 2)降解菌复壮培养基将下述重量的原料混合即可得降解菌复壮培养基酵母浸 出粉10g,蛋白胨10g,泰乐菌素药渣浸出液1000ml ; 3)酵母菌种子培养基将下述重量的原料混合即可得酵母菌种子培养基蛋白胨 10g,酵母浸膏5g,葡萄糖5g,水1000ml ; 4) —级、二级或三级降解菌种子培养基将下述重量的原料混合即可得一级、二 级或三级降解菌种子培养基泰乐菌素湿药渣200g,酵母浸膏10g,蛋白胨20g,葡萄糖20g, 水1000ml ; 5)固体药渣培养基将下述重量的原料混合即可得固体药渣培养基泰乐菌素湿 药渣90 96kg,玉米面8 2kg,硫酸铵2kg ; 所述泰乐菌素药渣浸出液按下述方法制备而成取泰乐菌素湿药渣100g,加入 600ml水,搅拌均匀后在室温下浸泡24h,然后2000r/min离心15min,取上清液,经抽滤弃去 漂浮的杂质后即可; 所述酵母培养物中粗蛋白质含量^ 45%,总氨基酸含量> 33%。
本发明有如下效果 1)制作方法简单、独特本发明提供的酵母培养物是利用泰乐菌素废弃药渣为主 要原料,通过固体厌氧发酵、烘干、粉碎后制得。在厌氧发酵生产酵母培养物的同时,可降解 废弃药渣中泰乐菌素,经高效液相色谱法测定,酵母培养物中泰乐菌素含量不超过10 i! g/
g 5 2)粗蛋白质与氨基酸含量高利用本发明配方进行固体厌氧发酵生产的酵母培 养物具有很高的粗蛋白质和氨基酸含量,同时氨基酸种类较多,不仅适用于发酵行业,而且 还适用于饲料养殖产业; 3)成本低本发明酵母培养物在发酵原料的选择上主要是以泰乐菌素生产过程 中产生的废弃药渣为主,配以少量玉米面、硫酸铵为辅料,不仅来源丰富而且价格低廉。此 外,本发明实现了厌氧发酵工艺条件的优化,降低了生产酵母培养物的成本,增加了投产后 的产品竞争力; 4)本发明针对目前大量抗生素废弃药渣治理和再利用现状,以选育优化的啤酒酵 母、热带假丝酵母和EM原露为酵母培养物的生产菌株,所产生的酵母培养物中粗蛋白质与 总氨基酸含量较高,同时氨基酸种类也较多,不仅使泰乐菌素废弃药渣得以资源化利用,而 且还提高其经济附加值,变废为宝。 5)采用本发明得到的酵母培养物,各种指标符合标准
1.感官指标固体型为棕黄色粉末,有特殊的酵母香味。
2.卫生指标(每千克成品中含) 大肠杆菌,固体酵母培养物为阴性; 沙门氏菌,固体酵母培养物为阴性; 铅《30mg ; 无机砷《10mg。 6)本发明产品的粗蛋白质及总氨基酸含量相对稳定,长期放置会有所损失,但损 失不大,此外,本发明可以有效的利用泰乐菌素废弃药渣,减少其大量堆放对环境造成的危害。
具体实施方式
实施例1 : a.酵母菌种子的制备将啤酒酵母、热带假丝酵母和EM原露分别按质量比为1% 的接种量接入酵母菌复壮培养基,菌株经活化和扩大培养后,按质量比为1%的接种量接入 酵母菌种子培养基,32t:厌氧培养48h后,制得生产酵母培养物的酵母菌种子;
b.降解菌种子的制备将降解药渣泰乐菌素的降解菌,按质量比为1%的接种量 接入降解菌复壮培养基,降解菌经活化和扩大培养后,按质量比为5%的接种量接入一级降 解菌种子培养基,32t:厌氧培养72h后再转接入二级降解菌种子培养基,32t:厌氧培养72h 后再转接入三级降解菌种子培养基,32t:培养72h后,制得降解药渣泰乐菌素的降解菌种 子; c.将上述步骤a制备的生产酵母培养物的酵母菌种子和上述步骤b制备的降解药 渣泰乐菌素的降解菌种子分别按质量比为1%和5%的接种量接入固体药渣培养基中,搅 拌均匀后压实,32t:厌氧培养25天,即微生物固体厌氧发酵生产酵母培养物结束;
其中所用固体药渣培养基按下述重量的原料混合而成泰乐菌素湿药渣96kg,玉 米面2kg,硫酸铵2kg; d.将上述步骤c发酵产物在5(TC下干燥,粉碎后即为酵母培养物,并测定氨基酸、 粗蛋白质和泰乐菌素的含量; e.经凯氏定氮仪测定,酵母培养物中粗蛋白含量为50. 4%;经氨基酸分析仪测定, 酵母培养物中总氨基酸含量为36. 6% ;经高效液相色谱仪测定,酵母培养物中泰乐菌素含 量为7 ii g/g。
实施例2 : a.酵母菌种子的制备将啤酒酵母、热带假丝酵母和EM原露分别按质量比为1% 的接种量接入酵母菌复壮培养基,菌株经活化和扩大培养后,按质量比为2. 5%的接种量接 入酵母菌种子培养基,3(TC厌氧培养42h后,制得生产酵母培养物的酵母菌种子;
b.降解菌种子的制备将降解药渣泰乐菌素的降解菌,按质量比为1%的接种量 接入降解菌复壮培养基,降解菌经活化和扩大培养后,按质量比为7. 5%的接种量接入一级 降解菌种子培养基,3(TC厌氧培养60h后再转接入二级降解菌种子培养基,3(TC厌氧培养 60h后再转接入三级降解菌种子培养基,3(TC培养60h后,制得降解药渣泰乐菌素的降解菌 种子;
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c.将上述步骤a制备的生产酵母培养物的酵母菌种子和上述步骤b制备的降解 药渣泰乐菌素的降解菌种子分别按质量比为2. 5%和7. 5%的接种量接入固体药渣培养基 中,搅拌均匀后压实,3(TC厌氧培养22. 5天,即微生物固体厌氧发酵生产酵母培养物结束;
其中所用固体药渣培养基按下述重量的原料混合而成泰乐菌素湿药渣93kg,玉 米面5kg,硫酸铵2kg; d.将上述步骤c发酵产物在6(TC下干燥,粉碎后即为酵母培养物,并测定氨基酸、 粗蛋白质和泰乐菌素的含量; e.经凯氏定氮仪测定,酵母培养物中粗蛋白含量为51. 7%;经氨基酸分析仪测定, 酵母培养物中总氨基酸含量为36. 9% ;经高效液相色谱仪测定,酵母培养物中泰乐菌素含 量为6 ii g/g。
实施例3 : a.酵母菌种子的制备将啤酒酵母、热带假丝酵母和EM原露分别按质量比为1% 的接种量接入酵母菌复壮培养基,菌株经活化和扩大培养后,按质量比为5%的接种量接入 酵母菌种子培养基,28t:厌氧培养36h后,制得生产酵母培养物的酵母菌种子;
b.降解菌种子的制备将降解药渣泰乐菌素的降解菌,按质量比为1%的接种量 接入降解菌复壮培养基,降解菌经活化和扩大培养后,按质量比为10%的接种量接入一级 降解菌种子培养基,2『C厌氧培养48h后再转接入二级降解菌种子培养基,2『C厌氧培养 48h后再转接入三级降解菌种子培养基,28t:培养48h后,制得降解药渣泰乐菌素的降解菌 种子; c.将上述步骤a制备的生产酵母培养物的酵母菌种子和上述步骤b制备的降解药 渣泰乐菌素的降解菌种子分别按质量比为5%和10%的接种量接入固体药渣培养基中,搅 拌均匀后压实,28t:厌氧培养20天,即微生物固体厌氧发酵生产酵母培养物结束;
其中所用固体药渣培养基按下述重量的原料混合而成泰乐菌素湿药渣90kg,玉 米面8kg,硫酸铵2kg; d.将上述步骤c发酵产物在7(TC下干燥,粉碎后即为酵母培养物,并测定氨基酸、 粗蛋白质和泰乐菌素的含量; e.经凯氏定氮仪测定,酵母培养物中粗蛋白含量为51. 8%;经氨基酸分析仪测定, 酵母培养物中总氨基酸含量为37. 3% ;经高效液相色谱仪测定,酵母培养物中泰乐菌素含 量为4ii g/g。 上述实施例中的酵母菌复壮培养基,降解菌复壮培养基,酵母菌种子培养基,一 级、二级或三级降解菌种子培养基的配制方法分别是 1)酵母菌复壮培养基将下述重量的原料混合即可得酵母菌复壮培养基蛋白胨 10g,酵母浸膏10g,葡萄糖20g,水1000ml ; 2)降解菌复壮培养基将下述重量的原料混合即可得降解菌复壮培养基酵母浸 出粉10g,蛋白胨10g,泰乐菌素药渣浸出液1000ml ; 3)酵母菌种子培养基将下述重量的原料混合即可得酵母菌种子培养基蛋白胨 10g,酵母浸膏5g,葡萄糖5g,水1000ml ; 4) —级、二级或三级降解菌种子培养基将下述重量的原料混合即可得一级、二 级或三级降解菌种子培养基泰乐菌素湿药渣200g,酵母浸膏10g,蛋白胨20g,葡萄糖20g,
6水1000ml ; 上述泰乐菌素药渣浸出液按下述方法制备而成取泰乐菌素湿药渣100g,加入 600ml水,搅拌均匀后在室温下浸泡24h,然后2000r/min离心15min,取上清液,经抽滤弃去 漂浮的杂质后即可。
权利要求
一种利用泰乐菌素药渣生产酵母培养物的方法,其特征在于该方法包括如下步骤a.酵母菌种子的制备将啤酒酵母、热带假丝酵母和EM原露分别按质量比为1%的接种量接入酵母复壮培养基,菌株经活化和扩大培养后,按质量比为1~5%的接种量接入酵母菌种子培养基,28~32℃厌氧培养36~48h后,可制得生产酵母培养物的酵母菌种子;b.降解菌种子的制备将降解药渣泰乐菌素的降解菌,按质量比为1%的接种量接入降解菌复壮培养基,降解菌经活化和扩大培养后,按质量比为5~10%的接种量接入一级降解菌种子培养基,28~32℃厌氧培养48~72h后再转接入二级降解菌种子培养基,28~32℃厌氧培养48~72h后再转接入三级降解菌种子培养基,28~32℃厌氧培养48~72h后,可制得降解药渣泰乐菌素的降解菌种子;c.将上述步骤a制备的生产酵母培养物的酵母菌种子和上述步骤b制备的降解药渣泰乐菌素的降解菌种子分别按质量比为1~5%和5~10%的接种量接入固体药渣培养基,搅拌均匀后压实,28~32℃厌氧培养20~25天,即微生物固体厌氧发酵生产酵母培养物结束;d.将上述步骤c发酵产物在50~70℃条件下干燥,粉碎后即为酵母培养物。
2. 如权利要求1所述的一种利用泰乐菌素药渣生产酵母培养物的方法,其特征在于所述酵母菌复壮培养基,降解菌复壮培养基,酵母菌种子培养基,一级、二级或三级降解菌种子培养基,固体药渣培养基的配制方法分别是1) 酵母菌复壮培养基将下述重量的原料混合即可得酵母菌复壮培养基蛋白胨10g,酵母浸膏10g,葡萄糖20g,水1000ml ;2) 降解菌复壮培养基将下述重量的原料混合即可得降解菌复壮培养基酵母浸出粉10g,蛋白胨10g,泰乐菌素药渣浸出液1000ml ;3) 酵母菌种子培养基将下述重量的原料混合即可得酵母菌种子培养基蛋白胨10g,酵母浸膏5g,葡萄糖5g,水1000ml ;4) 一级、二级或三级降解菌种子培养基将下述重量的原料混合即可得一级、二级或三级降解菌种子培养基泰乐菌素湿药渣200g,酵母浸膏10g,蛋白胨20g,葡萄糖20g,水1000ml ;5) 固体药渣培养基将下述重量的原料混合即可得固体药渣培养基泰乐菌素湿药渣90 96kg,玉米面8 2kg,硫酸铵2kg。
3. 如权利要求2所述的一种利用泰乐菌素药渣生产酵母培养物的方法,其特征在于所述泰乐菌素药渣浸出液按下述方法制备而成取泰乐菌素湿药渣100g,加入600ml水,搅拌均匀后在室温下浸泡24h,然后2000r/min离心15min,取上清液,经抽滤弃去漂浮的杂质后即可。
4. 如权利要求1所述的一种利用泰乐菌素药渣生产酵母培养物的方法,其特征在于所述酵母培养物中粗蛋白质含量^ 45%,总氨基酸含量> 33%。
全文摘要
本发明涉及一种利用泰乐菌素药渣的方法,尤其是涉及一种利用泰乐菌素药渣生产酵母培养物的方法,其特征在于该方法包括如下步骤a.酵母菌种子的制备、b.降解菌种子的制备、c.将上述步骤a制备的生产酵母培养物的酵母菌种子和上述步骤b制备的降解药渣泰乐菌素的降解菌种子分别按质量比为1~5%和5~10%的接种量接入固体药渣培养基中,搅拌均匀后压实,28~32℃厌氧培养20~25天,即微生物固体厌氧发酵生产酵母培养物结束、d.将上述步骤c发酵产物在50~70℃下干燥,粉碎后即为酵母培养物;本发明生产成本低、制备工艺简单独特、使泰乐菌素废弃药渣得以高值化利用、有效避免泰乐菌素废弃药渣不合理利用对环境造成的危害。
文档编号C12N1/18GK101724575SQ20091011772
公开日2010年6月9日 申请日期2009年12月15日 优先权日2009年12月15日
发明者刘力嘉, 谢丽, 马志强, 马玉龙 申请人:宁夏大学