专利名称：一种花生蛋白提取方法
技术领域：
本发明涉及一种从在超声波辅助条件下，采用碱提酸沉法从低温冷榨花生蛋白粉 中提取低变性花生分离蛋白的方法，属于花生分离蛋白加工方法技术领域。
背景技术：
花生是中国六大油料作物之一，产量高居世界首位。据《本草纲目拾遗》载花生 悦脾和胃，润肺化痰，滋养补气，清咽止痒。《滇南本草》载花生盐水煮食制肺痨，炒用燥火 行血，制腹内冷积肚疼。《药性考》载本品炒熟食用清胃醒脾，滑肠润燥。脂肪和蛋白质是 花生中的第一和第二大营养素，目前我国花生加工和综合利用主要用于榨油，而对于花生 蛋白的利用很有限，且花生蛋白是比较理想的食用蛋白资源，因此开发和利用花生蛋白资 源，对于改善人们的膳食结构具有很重要的意义。目前国际上花生蛋白产品根据蛋白的含 量可以分为花生蛋白粉、花生浓缩蛋白、花生分离蛋白。其中尤以花生分离蛋白纯度最高 (85% -96% )。制备花生分离蛋白的方法主要有碱提酸沉制备法和超滤膜制备法，我国工业上生 产分离蛋白主要应用碱提酸沉的方法，目前除了研究开发更多的新分离方法外，人们已经 开始重视各种技术辅助分离方法，超声波本身在化学领域有广泛的应用，对其应用各种分 离显示了许多优越性。本分明在碱提酸沉提取花生分离蛋白的基础上，采用超声辅助的方 法，对花生分离蛋白的提取工艺进行优化，最终确定最佳工艺条件。
发明内容
本发明所要解决的问题就是提供一种低变性花生分离蛋白的制备方法，以克服现 有条件下，花生分离蛋白容易变性，分离时间长，分离温度高，分离蛋白得率低，纯度低等现象。本发明采用以下技术方案来实现在碱提酸沉的基础上采用超声波辅助的方法从低变性花生蛋白粉中提取花生分 离蛋白。具体地说，本发明的制备方法如下低变性花生蛋白粉，碱溶均勻，超声提取，离心，二次超声提取，合并上清液，酸沉， 离心，取沉淀物，醇洗次，再水洗3次，冷冻干燥，花生分离蛋白粉。优选的，本发明所述花生分离蛋白制备方法为低变性花生蛋白粉，以PH值9的NaOH溶液溶解均勻，料液比为1 10，超声提取， 离心，二次超声提取，合并上清液，pH为4. 5盐酸沉淀，离心，取沉淀物，以95%的乙醇洗脱 2次，再以蒸馏水水洗3次，300 ，-50°C冷冻干燥，花生分离蛋白粉。超声波辅助提取花生分离蛋白的最佳条件为超声功率为210W，超声波频率 ^HZ,超声时间为25min，超声温度为35°C。所述的低变性花生蛋白粉通过低温冷榨法制备，在制备蛋白粉的过程中，最高温度不超过60度。(低温冷榨法是否是公知的？如果不是公知的，需要写入说明书；如果是 公知的，需要说明出处。)采用本发明所述的方法，花生蛋白的提取率高达80. 09%左右。本方法具有提取时 间短，生产成本低的优点。
图1超声波频率对花生分离蛋白提取率及得率的影响图2超声温度对花生分离蛋白提取率及得率的影响图3超声时间对花生分离蛋白提取率及得率的影响图4料液比对花生分离蛋白提取率及得率的影响图5碱液pH对花生分离蛋白提取率及得率的影响图6超声功率对花生分离蛋白提取率及得率的影响实验例实验例1在单因素实验的基本条件的基础上改变超声频率来考察超声频率对分离蛋白得 率及提取率的影响。结果表明(图1)超声波频率在^KHz时花生分离蛋白的得率和提取 率最高，在45KHz时变化不大，在IOOKHz时得率和提取率最低，原因超声波频率越大，波长 就会越短，在传播的过程中衰弱的也就越快，能量利用率越低。一般常见超声装置频率的选 择比较少，因此在做响应面分析时可以直接固定超声频率为^KHz。实验例2超声温度对花生分离蛋白提取率及得率的影响。由图2可知，随温度的升高，花 生分离蛋白的提取率及得率在不断升高，温度达到35°C之后，蛋白得率升高，蛋白提取率有 所下降，提取温度过高蛋白质有可能变性，因此在提取过程中温度不宜选择过高，因此最终 试验选择提取花生分离蛋白的最佳温度为35°C。实验例3超声时间对花生分离蛋白提取率及得率的影响。由图3可知，随时间的增加花生 蛋白的提取率和得率不断升高，当提取时间达到25min时，花生分离蛋白得率和提取率达 到最高，25min之后，继续延长超声提取时间，提取率和得率升高不明显，因此选择最佳提取 时间为25min。实验例4料液比对花生分离蛋白提取率及得率的影响。由图4可知，蛋白得率和提取率随 料液比的增加而增加当料液比达到1 10时得率和提取率均达到较高水平，继续增加料液 比对得率以及提取率的提高不明显，因为单位碱液只能溶解一定量的蛋白，所以随碱液量 增加蛋白的溶解量增加，但是碱液对于蛋白的溶解量不能无限度的增加因此选择最佳的料 液比为1 10。实验例5pH值对花生分离蛋白提取率及得率的影响。花生蛋白粉中的全部球蛋白和清蛋白 都可溶于稀碱溶液中，并且蛋白质溶解度随PH值增高而增大，蛋白质溶出增多，花生蛋白 粉在PH值小于等于10. 5时不会发生变性，且蛋白粉易溶于碱性溶液，因此在弱碱性溶液范围内考察蛋白提取率，由实验结果(图5)可知，随碱液pH的升高蛋白质的提取率及得率 不断升高，当PH为9时蛋白提取率及得率趋于平缓，不再增加，由于碱液PH值对蛋白的得 率以及提取率影响较小，因此在做响应面分析时，可以直接固定碱液PH值为9。实验例6超声波功率对花生分离蛋白提取率及得率的影响。由图6可以看出随着超声波的 功率增加，提取率随之增加。功率增加，搅拌作用增强，细胞膜、细胞壁等结构被破坏，提高 了细胞的破碎程度，增大比表面积，花生蛋白与碱液的接触面积增大；同时，超声波的震动 加强，原料颗粒的运动加强，破碎速度加快，提取物在溶剂中的扩散加快，到210W之后，提 取率的增加趋于平缓，且在节约能源的方面考虑，应该选择最佳的超声提取功率为210W。
具体实施例方式以下结合实施例对本发明作详细描述。实施例1低变性花生蛋白粉，以PH值9碱溶均勻，料液比为1 10，以功率为210W，超声波 频率^HZ,温度为35°C，超声提取25min，离心，二次超声提取，合并上清液，pH为4. 5盐酸 沉淀，离心，取沉淀物，以95%的乙醇洗脱2次，再以蒸馏水水洗3次，冷冻干燥，花生分离蛋 白粉，经凯氏定氮仪检测提取率为80. 09%。
权利要求
1.一种花生蛋白提取方法，采用如下步骤低变性花生蛋白粉，碱溶均勻，超声提取，离心，二次超声提取，合并上清液，酸沉，离 心，取沉淀物，醇洗次，再水洗3次，冷冻干燥，花生分离蛋白粉。
2.根据权利要求1所述的花生蛋白提取方法，其特征在于，所述的超声波条件为功率 为210W，超声波频率^HZ,超声时间为25min，超声温度为35°C。
3.根据权利要求1所述的花生蛋白提取方法，其特征在于，所述的制备方法如下 低变性花生蛋白粉，以PH值9的NaOH溶液溶解均勻，超声提取，离心，二次超声提取，合并上清液，PH为4. 5盐酸沉淀，离心，取沉淀物，以95%的乙醇洗脱2次，再以蒸馏水洗3 次，300 ，-50°C冷冻干燥，花生分离蛋白粉；所述的超声波条件为功率为210W，超声波频率^HZ,超声时间为25min，超声温度为 35 "C。
4.根据权利要求1-3任一权利要求所述的花生蛋白提取方法，其特征在于，所述的料 液比为1 10。
5.根据权利要求1-3任一权利要求所述的花生蛋白提取方法，其特征在于，所述的低 变性花生蛋白粉通过低温冷榨法制备，在制备蛋白粉的过程中，最高温度不超过60度。
全文摘要
本发明公开了一种花生蛋白提取方法，包括以下步骤低变性花生蛋白粉，碱溶均匀，超声提取，离心，二次超声提取，合并上清液，酸沉，离心，取沉淀物，醇洗次，再水洗3次，冷冻干燥，花生分离蛋白粉。本方法具有提取时间短，生产成本低的优点。
文档编号A23J1/14GK102048021SQ20101055991
公开日2011年5月11日 申请日期2010年11月15日 优先权日2010年11月15日
发明者于丽娜, 孙杰, 张会翠, 张初署, 朱凤, 杨庆利, 毕杰, 高俊安 申请人:山东省花生研究所