专利名称：一种分离精子的装置的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及一种分离精子的装置。
背景技术：
受精是精子与卵子结合在一起的过程，是一种重要的生命现象。哺乳动物的精子 刚射出后不能与卵子结合，必须在雌性动物生殖管道停留一段时间后，或者在适当的培养 液中培养一定时间后，才具有与卵子结合的能力，这个过程称为获能。获能是自然生殖的一 个非常关键的环节。目前，获能机制尚未阐明，大多数资料是在体外用适当的培养液中培养 精子所获得的。小鼠和大鼠是研究获能使用较多的动物，一般取小鼠或大鼠附睾尾部的精 子进行获能机制研究。现在存在的问题有两个。1.从附睾尾部取精子时，附睾表面的小血 管难以完全剔除，得到的精子溶液中总有部分血细胞。2.精子溶液中有少量死亡或运动能 力很差的精子。血细胞、死亡的精子和运动能力很差的精子对精子获能机制的研究有一定 影响。为了去除精子培养液中的血细胞、死亡的精子和运动能力很差的精子，一般采用上游 法(swim up)，即将精子放置在离心管中37°C 5% CO2培养一定时间，然后取上层培养液中 的精子。用常规上游法处理精子后，有时上层培养液中仍存在部分血细胞，有运动能力精子 的百分率一般在80-90%。已公开的分离精子的发明装置还有“一种双管式浮游筛选精子管”(专利号 200920019260. 8)，包括两根立管，第一立管通过横管与第二立管联通，第一立管的下部侧 壁上设置环形凸块，环形凸块的凸块侧壁与水平面的夹角是0，60度< α <85度，第一立 管和第二立管的直径相等，都是D，横管的直径是d，2d = D，此装置的制作比本发明装置复 杂，不实用。为了获得高质量的精子，我们设计了一种简单实用的分离精子的装置，而且摸 索出了分离效果很好的操作程序，获得的精子中有运动能力精子的百分率在95%左右，收 集液中一般没有血细胞。
实用新型内容本实用新型的目的在于提供一种简单、快速分离精子的装置，该装置特别适合于 小鼠和大鼠精子的筛选，为精子获能机制的研究提供高质量的精子。一种分离精子的装置，所述的装置由1.5ml Eppendorff离心管、分离管和橡皮圈 组成，所述的分离管处于离心管内部，且呈上下相通的漏斗形，其底部开口的内径为2mm，顶 部开口的内径为6mm，分离管的长度为14-16mm，所述的橡皮圈缠绕于分离管的外壁上并与 分离管底部的距离为分离管总长度的1/3-1/2，橡皮圈紧贴于离心管的内壁使所述的分离 管的外壁以及底部和离心管的内壁均留有空隙。本分离装置由1. 5ML Eppendorff离心管、分离管和橡皮圈组成，橡皮圈紧贴于离 心管的内壁使所述的分离管的外壁以及底部和离心管的内壁均留有空隙。放置在离心管底 部的精子只有进入分离管底部开口，向上穿过分离管，才能到达由分离管外壁、离心管内壁 和橡皮圈围成的空隙。培养液液面高度只高于分离管顶部1mm，使得从分离管顶部开口进入空隙内的精子不易返回分离管内。分离管底部开口较小，内径为2mm，没有运动能力的精子 不易进入分离管底部开口，分离管呈上下相通的漏斗形，漏斗形使得精子容易向上运动而 不容易向下运动。本发明装置操作简单，分离精子效果好，获得的精子中有运动能力精子的 百分率在95%左右，比使用现有技术的装置高出5-10%，而且收集液中一般没有血细胞。
图1为本实用新型的装置示意图；图中1为离心管；2为分离管，3为橡皮圈。
具体实施方式
下面结合实施例进一步说明本实用新型，而非限制本实用新型。实施例1本实用新型的分离精子的装置，由1.5 ml Eppendorff离心管1、分离管2和橡皮 圈3组成，分离管2处于离心管1内部，且呈上下相通的漏斗形，其底部开口的内径为2mm， 顶部开口的内径为6mm，橡皮圈3缠绕于分离管2的外壁上并与分离管2底部的距离为分离 管2总长度的1/3-1/2，橡皮圈3紧贴于离心管1的内壁使所述的分离管2的外壁以及底部 和离心管1的内壁均留有空隙。采用上述装置进行分离精子的过程如下(1)按常规方法取0. 2ml精子溶液放置在1. 5ml的EppendorfT离心管底部。(2)将精子分离管放在离心管中，分离管上的橡皮圈与离心管内壁要贴紧。(3)将培养液通过分离管口加至离心管中，培养液液面高度约高于分离管顶部 Imm0(4)轻轻盖住离心管盖，将离心管置于37°C 5% CO2培养箱中培养15min。(5)将分离管外壁与离心管之间的培养液转移至新离心管中，300g离心lOmin，弃 上清，用培养液重悬精子，调节精子至合适浓度。获得的精子中有运动能力精子的百分率在 95%左右，收集液中一般没有血细胞。
权利要求一种分离精子的装置，其特征在于，所述的装置由1.5ml Eppendorff离心管、分离管和橡皮圈组成，所述的分离管处于离心管内部，且呈上下相通的漏斗形，其底部开口的内径为2mm，顶部开口的内径为6mm，分离管的长度为14 16mm，所述的橡皮圈缠绕于分离管的外壁上并与分离管底部的距离为分离管总长度的1/3 1/2，橡皮圈紧贴于离心管的内壁使所述的分离管的外壁以及底部和离心管的内壁均留有空隙。
专利摘要本实用新型公开了一种简单、高效的分离精子的装置。所述的装置由1.5ml Eppendorff离心管、分离管和橡皮圈组成，分离管处于离心管内部，且呈上下相通的漏斗形，其底部开口的内径为2mm，顶部开口的内径为6mm，分离管的长度为14-16mm；橡皮圈缠绕于分离管的外壁上并与分离管底部的距离为分离管总长度的1/3-1/2，橡皮圈紧贴于离心管的内壁使所述的分离管的外壁以及底部和离心管的内壁均留有空隙。采用该装置获得的精子中有运动能力精子的百分率在95％左右，收集液中一般没有血细胞，适合于体外获能实验。
文档编号C12M1/24GK201695034SQ201020199269
公开日2011年1月5日 申请日期2010年5月21日 优先权日2010年5月21日
发明者曾海涛, 李洁, 胡维新 申请人:中南大学