专利名称：耐受除草剂的植物的制作方法
耐受除草剂的植物相关申请的交叉引用本申请要求专利系列号61/314，901 (2010年3月17日提交);61/410，802 (2010年11月5日提交);和61/417，132 (2010年11月24号)的美国临时申请的优选权，这些文献的公开内容通过提及而以其整体合并入本文。
背景技术：
乙酰羟酸合酶(AHAS ；EC 4. I. 3. 18)是催化缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸这些支链氨基酸的生物化学合成的第一个酶(Singh B. K. , 1999Biosynthesis of valine, leucine, andisoleucine, Singh B. K.(编辑)Plant amino acids. Marcel Dekker Inc. New York, N.Y.第227-247页)。AHAS是四个结构上不同的除草剂家族的作用位点，所述四个除草剂家族包括横酸服类(LaRossa RA 和 Falco S C，1984Trends Biotechnol. 2:158-161 )、咪唑 啉酮类(Shaner 等人，1984Plant Physiol. 76:545-546)、三唑并卩密唳类(Subramanian 和Gerwick, 1989 Inhibition of acetolactate synthase by triazolopyrimidines,(编辑)Whitaker J R, Sonnet P E Biocatalysis in agricultural biotechnology.ACSSymposium Series, American Chemical Society. Washington, D. C.第 277-288 页)和喃P定基苯甲酸酯类(Subramanian等人，1990Plant Physiol 94:239-244)。由于它们在非常低的施用率时的有效性和在动物中的相对无毒性，咪唑啉酮类(IMI)和磺酰脲类(SU)除草剂被广泛地用于现代农业。通过抑制AHAS活性，这些除草剂家族阻止易感植物(包括许多杂草物种)的进一步生长和发育。通过用咪唑啉酮类除草剂进行诱变和选择，已经开发出了耐受咪唑啉酮类的卡诺拉油菜(S. Tan等人，Pest Management Science 61，200d. Z4b)。基于两个最耐受:的突变体PMi和PM2，开发出了商业品种，并且目前以Clearfield 商标进行销售。已知pmi仅对于咪唑啉酮类耐受，而PM2对于咪唑啉酮类和磺酰脲类两者是交叉耐受的。尽管PM2突变型基因可以提供一定水平的对于咪唑啉酮类和/或磺酰脲类除草剂的耐受性，但是那些迄今所报道的包含单个PM2突变型基因的油籽油菜(OSR)植物展示出不足的对于SU除草剂的耐受性。例如，向包含PM-突变型基因的春性欧洲油菜(B. napus)栽品种45A77的噻吩磺隆施用显示出导致减少的卡诺拉油菜生物量、除草剂损伤症状或延迟的成熟(R. Degenhardt 等人，Weed Technology 19,2005,608)。另外，存在有四个商购可得的冬油籽油菜(WOSR)品系，它们在本领域中被认为提供了对于作为来自先前的小麦或豌豆作物的遗留物而存在的磺酰脲类除草剂土壤残留物的耐受性。这四个品系为来自Kansas State University的欧洲油菜品种“Sumner” ；来自 DeKalb 的 Roundup Ready 品系 DKW46-15 和 DKW47-15;和来自 Croplan Genetics 的Roundup Ready 品系 HyClass 115W。但是，已发现耐受遗留物的WOSR植物展示出有限的对于以超过遗留物水平(即超过从所施用的除草剂剂量剩余的大约O. 5x的残留浓度)存在的土壤SU除草剂残留物的耐受性。因此，本领域中仍然存在对于这样的冬性芸苔属植物的需要，所述冬性芸苔属植物展示出对于大于遗留物水平的磺酰脲类除草剂的耐受性。
发明简述本发明提供了表达一个或多个耐受除草剂的AHASL基因的耐受除草剂的(HT)冬性芸苔属(Brassica)植物以及使用此类植物的方法。包含一个或几个编码PM2或类似突变的AHASL基因的本发明的HT冬性芸苔属植物，当与通常引起非耐受性植物展示出显著损伤的SU除草剂量相接触时，出人意料地未展示出显著的损伤。例如，当与Ix率的SU除草剂相接触时，在I至10的定级标准上(其中I表示没有可见的损害，而10表示植物死亡)，本文的HT芸苔属植物展示出I的得分。本发明基于出人意料的发现，即包含提供咪唑啉酮类耐受性的突变型AHAS基因或者包含通常提供不足的SU除草剂耐受性(例如，在春性OSR中)的突变型AHAS基因的 冬性芸苔属作物(如通过冬油籽油菜(WOSR)即冬性欧洲油菜卡诺拉所例示的)，令人吃惊地展示出商业上有用的水平的对于某些磺酰脲类除草剂(即一亚类的磺酰脲类除草剂)的耐受性。然而，当相同基因存在于相同芸苔属作物的春性类型中时，即使它们提供了商业上有用的水平的咪唑啉酮类除草剂耐受性，仍发现这些作物对于这些商业水平的磺酰脲类除草剂是易感的。由本发明的冬性芸苔属植物所展示出的令人吃惊地高的水平的SU除草剂耐受性可以在当耐受除草剂的目的AHASL基因存在于芸苔属A基因组中时(优选地，当这样的HT-AHASL基因是变体并且位于植物的A基因组天然AHASL基因座中时)发生。在一些实施方案中，这样的HT-AHASL是通过诱变(例如，芸苔属A基因组AHASL的随机诱变)而获得的那种。当耐受除草剂的目的AHASL基因仅存在于除了芸苔属A基因组之外的其他基因组中时，发现冬性芸苔属植物对于商业水平的此类SU除草剂是易感的。还发现在芸苔属A基因组中具有耐受除草剂的目的AHASL基因的相同芸苔属作物的春性类型对于此类水平的SU除草剂是易感的。本发明的HT冬性芸苔属植物可以包括具有至少一个耐受除草剂的AHASL(HT-AHASL )基因的芸苔属植物，其中所述植物中的HT-AHASL基因之中仅一个编码选自P197X和W574X的磺酰脲类除草剂耐受性(SU-HT)突变并且为单-SU-HT-AHASL基因，其任选地可以编码“其他HT突变”，并且其中所述单-SU-HT-AHASL基因位于所述芸苔属植物的A基因组中。具有这样的单-SU-HT-AHASL基因的本发明的冬性芸苔属植物可以在其任何基因组中进一步包含不编码P197X或W574X置换但编码不同的HT置换(例如“其他HT突变”)的第二个HT-AHASL基因。例如，在A基因组中具有纯合地、半合地或杂合地编码W574L的HT-AHASL基因的本发明的冬性芸苔属植物也可以在芸苔属C基因组中具有第二个HT-AHASL基因，例如编码S653N突变的AHAS基因。本发明提供了使用此类HT冬性芸苔属植物的方法，包括用于控制杂草的方法，用于选择HT冬性芸苔属植物的方法，和用于向冬性芸苔属作物提供产量保护的方法。这些方法可以包括施行本发明的HT冬性芸苔属植物的苗后处理或苗前除草剂处理。附图
简述图I提供了编码PM2突变的欧洲油菜AHASL基因(BnAHASLlA_PM2)的部分核苷酸序列(SEQ ID NO: I)。图2提供了编码PMl突变的欧洲油菜AHASL基因(BnAHASLlC_PMl)的部分核苷酸序列(SEQ ID NO: 2)。
图3提供了具有PM2突变的欧洲油菜AHASL (BnAHASLlA_PM2)的部分氨基酸序列(SEQ ID N0:3)。图4提供了具有PMl突变的欧洲油菜AHASL (BnAHASLlC_PMl)的部分氨基酸序列(SEQ ID N0:4)。图5提供了编码PM2突变的芸苔属AHASL基因(AHASL1A_PM2)的第二个核苷酸序列(SEQ ID NO:5)。图6提供了具有PM2突变的芸苔属AHASL (AHASL1A_PM2)的第二个氨基酸序列(SEQ ID N0:6)。图7是显示了在咪唑啉酮类除草剂存在下AHAS酶活性的图。图8是显示了在磺酰脲类除草剂存在下AHAS酶活性的图。·
发明详述定义如本文中所使用的，将使用氨基酸的标准单字母缩写，例如A表示丙氨酸，P表示脯氨酸，W表示色氨酸，X表示任意氨基酸，等等。相比于野生型序列而言的突变将通过指明野生型氨基酸和位置并随后给出在突变体中存在的氨基酸来表示。例如，P197X将用于表示，在位置197处的脯氨酸可以用任意氨基酸进行置换。如本文中所使用的，氨基酸位置涉及质体芸苔属AHAS酶的大亚基(AHASL)的多肽。在本文中所涉及的芸苔属AHASL中的氨基酸位置根据相应于在拟南芥(Arabidopsisthaliana) (At)AHASL序列中的那些残基的残基工业标准编号来进行编号，并且可以用(At)标示。例如，P197 (Ay)是指在芸苔属AHASL中在相应于处于拟南芥AHASL的位置197处的脯氨酸的位置处的脯氨酸残基。如本文中所使用的，“耐受...的”或“耐受除草剂的”是指在通常在非耐受性(例如，野生型)植物或其部分中引起生长抑制的除草剂量存在下能够生长的植物或其部分。通常抑制非耐受性植物生长的除草剂水平是已知的，并且可由本领域技术人员容易地确定。实例包括由制造商推荐用于施用的量。最大比率是通常会抑制非耐受性植物生长的除草剂量的实例。如本文中所使用的，“耐受除草剂的(HT) AHASL"是指在植物细胞中从AHASL基因的一个HT AHASL等位基因，和/或从同一 HT AHASL基因的两个同源等位基因之一或两者(即在所述植物细胞的同一基因组中)表达出的AHASL多肽，由此该HT-AHASL可以给所述植物细胞的AHAS酶提供除草剂耐受性。HT-AHASL基因可以是重组的，或者可以通过应用诱变方法、育种方法或其他本领域中已知的方法来获得。这样的基因可以是半合的、杂合的或纯合的。如本文中所使用的，“AHAS”和“AHASL”分别是指功能性的质体AHAS酶和其AHASL多肽，即其在本文中所描述的芸苔属植物的细胞之中是有功能的。类似地，诸如“基因”和“多核苷酸”的术语，当关于编码这样的“AHAS”和“AHASL”的那些进行使用时，是指其功能性基因，即在此类细胞中可表达的基因。如本文中关于在其各种实施方案中有用的除草剂而使用的，诸如AHAS抑制剂、ACCase抑制剂、PPO抑制剂、EPSPS抑制剂、咪唑啉酮类、磺酰脲类等的术语，是指那些在本领域中认可的在农艺学上可接受的除草剂活性成分(A. I.)。类似地，诸如杀真菌剂、杀线虫齐U、杀虫剂等的术语，是指其他在本领域中认可的在农艺学上可接受的活性成分。当关于特定的突变型酶或其突变型多肽进行使用时，诸如“耐受除草剂的(HT)”和“除草剂耐受性”的术语是指此类酶耐受通常会使所述酶的野生型(非突变型)形式的活性失活或抑制所述酶的野生型(非突变型)形式的活性的除草剂A. I.的能力(或者所述多肽赋予其酶以耐受上述除草剂A. I.的能力的能力)。当特别地关于AHAS酶或AHASL多肽进行使用时，它特别地是指耐受AHAS抑制剂的能力。AHAS抑制剂的类别包括，磺酰脲类、咪唑啉酮类、三唑并嘧啶类、磺酰基氨基羰基三唑啉酮类和嘧啶基苯甲酸酯类。如本文中所使用的，“重组体”是指这样的生物，其由于人工应用致重组(recombinogenic)技术而具有来自不同来源的遗传物质。如本文中所使用的，“经诱变的”是指具有相比于相应野生型生物的遗传物质而言经改变的遗传物质的生物，其中所述在遗传物质中的改变通过人工作用来进行诱导和/或选择。可以用于产生经诱变的生物的人工作用的实例包括但不限于在亚致死浓度的除草剂(例如，磺酰脲类除草剂)中进行的植物细胞(例如，愈伤组织)的组织培养；用化学诱变剂 处理植物细胞，并随后用除草剂(例如，磺酰脲类除草剂)进行选择；或者，用X-射线处理植物细胞，并随后用除草剂(例如，磺酰脲类除草剂)进行选择。可以使用本领域中已知的任何方法来诱导突变。诱导突变的方法可以在遗传物质中的随机位置处诱导突变，或者可以在遗传物质中的特定位置处诱导突变(即，可以为定向诱变技术)。如本文中所使用的，“基因改造生物”(GMO)是其遗传特征已经通过人工努力(所述人工努力引起插入来自另一来源生物的遗传物质)而被改变的生物，或者保留了所插入的遗传物质的其后代。来源生物可以为不同的生物类型(例如，GMO植物可以包含细菌的遗传物质)，或者来自相同的生物类型(例如，GMO植物可以包含来自另一植物的遗传物质)。如本文中所使用的，“重组体”和“GM0”被认为是同义词，并且表明来自不同来源的遗传物质的存在；然而，“经诱变的”表明经改变的来自相应野生型生物的遗传物质，而不是来自另一来源生物的遗传物质。如本文中所使用的，“野生型”或“相应野生型植物”表示生物或其遗传物质的典型形式，正如它通常出现的那样，其区别于例如经诱变的和/或重组的形式。如本文中所使用的，诱导除草剂耐受性的突变“HT-突变”为赋予对于一种或多种除草剂(即磺酰脲类除草剂、咪唑啉酮类除草剂，等等)的耐受性的在AHASL酶的氨基酸序列中的改变。在一些实施方案中，HT-突变可以为“SU-ΗΤ-突变”，即选自P197X和W574X的突变。在一些实施方案中，SU-HT-突变可以选自 P197S、P197A、P197E、P197L、P197Q、P197R、P197S、P197V、P197W、P197Y、P197I、P197H、P197C 和 P197G。在其他实施方案中，SU-HT-突变可以选自P197S、P197L和P197T。在一些实施方案中，SU-HT-突变可以选自W574L、W574M、W574C、W574S、W574R、W574G、W574A、W574F、W574Q 和 W574Y。在一些实施方案中，SU-HT-突变可以包含W574L。在一些实施方案中，HT-突变可以为“其他HT-突变”。如本文中所使用的，“其他HT-突变”为赋予对于一种或多种除草剂(即磺酰脲类除草剂、咪唑啉酮类除草剂，等等)的耐受性的在AHASL酶的氨基酸序列中的改变，其中所述改变位于除了脯氨酸197或色氨酸574之外的其他位置处。下面的表I提供了用于“其他HT-突变”的可能位点、允许的置换、优选的置换和更优选的置换的列表。X表示任意氨基酸。表1. “其他” HT突变
权利要求
1.用于在冬性芸苔属作物中控制杂草的方法，所述方法包括 施行所述作物的耐受除草剂的(HT)芸苔属植物的苗后处理，这通过以在从O. 25x至大约4x SU的范围内的剂量率向所述植物和其紧邻的附近施用包含磺酰脲类(SU)的除草剂组合物来进行，其中， (A)所述除草剂组合物 (1)包含选自下列的SU:酰嘧磺隆、氟啶嘧磺隆、甲酰胺磺隆、唑吡嘧磺隆、碘磺隆、甲磺胺磺隆、烟嘧磺隆、噻吩磺隆和苯磺隆，其农艺学上可接受的盐和酯，以及其组合，和 (2)包含不超过显著量的任何其他SU;和 (B)所述芸苔属植物包含至少一个耐受除草剂的AHASL(HT-AHASL)基因，其中所述植物中的HT-AHASL基因之中仅一个编码选自P197X和W574X的磺酰脲类除草剂耐受性(SU-HT)突变并且为单-SU-HT-AHASL基因，其任选地可以编码“其他HT突变”，并且其中所述单-SU-HT-AHASL基因位于所述芸苔属植物的A基因组中；并且 其中，所述芸苔属植物能够耐受以Ix SU的剂量率来进行的所述苗后SU处理，其中没有显著的来自所述处理的由SU除草剂诱导的损伤。
2.用于在冬性芸苔属作物中控制杂草的方法，所述方法包括 施行所述作物的耐受除草剂的(HT)芸苔属植物的苗前处理或植前0-30天时的处理，这通过以在从大于O. 5x至大约4x SU的范围内的剂量率向其种子种植地点和其紧邻的附近施用包含磺酰脲类(SU )的除草剂组合物来进行，其中， (A)所述除草剂组合物 Cl)包含选自下列的SU :酰嘧磺隆、氟啶嘧磺隆、甲酰胺磺隆、唑吡嘧磺隆、碘磺隆、甲磺胺磺隆、烟嘧磺隆、噻吩磺隆和苯磺隆，其农艺学上可接受的盐和酯，以及其组合，和 (2)不包含显著量的其他SU ;和 (B)所述芸苔属植物包含至少一个耐受除草剂的AHASL(HT-AHASL)基因，其中所述植物中的HT-AHASL基因之中仅一个编码选自P197X和W574X的磺酰脲类除草剂耐受性(SU-HT)突变并且为单-SU-HT-AHASL基因，其任选地可以编码“其他HT突变”，并且其中所述单-SU-HT-AHASL基因位于所述芸苔属植物的A基因组中；并且 其中，所述芸苔属植物能够耐受以Ix SU的剂量率来进行的所述苗后SU处理，其中没有显著的来自所述处理的由SU除草剂诱导的损伤。
3.权利要求I或2的方法，所述方法进一步包括在用除草剂组合物进行处理之前，选择所述耐受除草剂的芸苔属植物。
4.权利要求I或2的方法，所述方法进一步包括选择能够产生所述耐受除草剂的芸苔属植物的种子，种植所述种子，和从所述种子生长出所述耐受除草剂的芸苔属植物。
5.权利要求I或2的方法，其中所述单-SU—HT-AHASL基因 Ca)编码P197X或W574X中的仅一个，并且纯合地或半合地编码它； (b)编码P197X或W574X中的仅一个，并且在一个等位基因中编码它，并且在同源等位基因中分别编码野生型P197P或W574W残基； (c)杂合地编码两个不同的P197X突变，并且对于野生型W574W残基而言是纯合的； (d)杂合地编码两个不同的W574X突变，并且对于野生型P197P残基而言是纯合的；或者(e)编码下述两者(i)在一个等位基因中，一个P197X突变和野生型W574W残基，和(ii)在同源等位基因中，一个W574X突变和野生型P197P残基。
6.用于选择HT冬性芸苔属植物的方法，所述方法包括 (I)根据权利要求I的第(A)和(B)项，施行芸苔属植物的苗后处理，这通过以在从O. 25x至大约4x SU的范围内的剂量率向所述植物和其紧邻的附近施用包含磺酰脲类(SU)的除草剂组合物来进行；和 (II)选择这样的芸苔属植物，该芸苔属植物能够耐受以至少IxSU的剂量率来进行的所述苗后SU处理，其中没有显著的来自所述处理的由SU除草剂诱导的损伤。
7.用于选择HT冬性芸苔属植物的方法，所述方法包括 (I)根据权利要求2的第(A)和(B)项，施行芸苔属植物的苗前处理或植前0-30天时的处理，这通过以在从大于O. 5x至大约4x SU的范围内的剂量率向其种子种植地点和其紧邻的附近施用包含磺酰脲类(SU)的除草剂组合物来进行；和 (II)选择这样的芸苔属植物，该芸苔属植物能够耐受以IxSU的剂量率来进行的所述苗后SU处理，其中没有显著的来自所述处理的由SU除草剂诱导的损伤。
8.向在磺酰脲类(SU)除草剂组合物存在下生长的冬性芸苔属作物提供产量保护的方法，所述方法包括 在SU除草剂组合物存在下种植冬性芸苔属植物的种子；和 在能够产生该冬性芸苔属植物的条件下使所述种子生长； 其中所述芸苔属植物包含至少一个耐受除草剂的AHASL (HT-AHASL)基因，其中所述植物中的HT-AHASL基因之中仅一个编码选自P197X和W574X的磺酰脲类除草剂耐受性(SU-HT)突变并且为单-SU-HT-AHASL基因，其任选地可以编码“其他HT突变”，并且其中所述单-SU-HT-AHASL基因位于所述芸苔属植物的A基因组中；并且 其中所述产量等于或大于由相同类型的冬性芸苔属植物的野生型形式所提供的产量。
9.向冬性芸苔属作物提供产量保护的方法，所述方法包括 种植冬性芸苔属植物的种子； 在能够产生该冬性芸苔属植物的条件下使所述种子生长；和 施行所述植物的除草剂处理，这通过向所述植物和其紧邻的附近施用包含磺酰脲类(SU)的除草剂组合物来进行； 其中所述芸苔属植物包含至少一个耐受除草剂的AHASL (HT-AHASL)基因，其中所述植物中的HT-AHASL基因之中仅一个编码选自P197X和W574X的磺酰脲类除草剂耐受性(SU-HT)突变并且为单-SU-HT-AHASL基因，其任选地可以编码“其他HT突变”，并且其中所述单-SU-HT-AHASL基因位于所述芸苔属植物的A基因组中；并且 其中所述产量等于或大于由相同类型的冬性芸苔属植物的野生型形式所提供的产量。
10.权利要求8或9的方法，所述方法进一步包括在所述除草剂处理之前，选择所述冬性芸苔属植物的所述种子。
11.权利要求I至10中任一项的方法，其中所述除草剂组合物进一步包含一种或多种咪唑啉酮类除草剂。
12.权利要求11的方法，其中所述咪唑啉酮类为咪草啶酸或者其农艺学上可接受的盐或酯。
13.权利要求I至10中任一项的方法，其中所述除草剂组合物包含碘磺隆和甲磺胺磺隆的组合。
14.权利要求I至10中任一项的方法，其中所述SU-HT突变选自P197S、P197A、P197E、P197L、P197Q、P197R、P197S、P197V、P197W、P197Y、P197I、P197H、P197C、P197G。
15.权利要求14的方法，其中所述SU-HT突变选自P197S、P197L和P197T。
16.权利要求I至10中任一项的方法，其中所述SU-HT突变选自W574L、W574M、W574C、W574S、W574R、W574G、W574A、W574F、W574Q 和 W574Y。
17.权利要求16的方法，其中所述SU-HT突变为W574L。
18.权利要求I至10中任一项的方法，其中所述芸苔属植物包含选自A122X、R199X、A205X、S653X、G654X以及其组合的“其他HT-突变”。
19.权利要求I至10中任一项的方法，其中所述芸苔属植物包含选自A122T、A122V、A122D、A122P、A122Y、R199A、R199E、A205V、A205C、A205D、A205E、A205R、A205T、A205W、A205Y、A205N、S653N、S653I、S653F、S653T、G654Q、G654C、G654E、G654D 以及其组合的“其他HT-突变”。
20.权利要求I至10中任一项的方法，其中所述芸苔属植物包含一个HT-AHASL/197/574 基因，其 SU-HT 突变为 W574X。
21.权利要求20的方法，其中所述芸苔属植物进一步包含至少一个“其他HT-突变”。
22.权利要求21的方法，其中所述“其他HT-突变”选自A122X、R199X、A205X、S653X、G654X以及其组合。
23.权利要求22的方法，其中所述“其他HT-突变”选自A122T、A122V、R199A、R199E、A205V、S653N、G654E 以及其组合。
24.权利要求22的方法，其中所述“其他HT-突变”为S653X。
25.权利要求24的方法，其中所述“其他HT-突变”为S653N。
26.权利要求21的方法，其中所述“其他HT-突变”由位于所述植物的芸苔属A-基因组中的HT-AHASL基因编码。
27.权利要求21的方法，其中所述“其他HT-突变”由所述单-SU-AHASL基因编码。
28.权利要求8至10中任一项的方法，所述方法进一步包括收获由所述冬性芸苔属植物所产生的种子。
29.权利要求8至10中任一项的方法，其中所述SU除草剂组合物包含 (A)选自下列的SU:酰嘧磺隆、氟啶嘧磺隆、甲酰胺磺隆、唑吡嘧磺隆、碘磺隆、甲磺胺磺隆、烟嘧磺隆、噻吩磺隆和苯磺隆，其农艺学上可接受的盐和酯，以及其组合，和 (B)不超过显著量的任何其他SU。
30.权利要求8至10中任一项的方法，其中通过所述SU除草剂组合物来控制存在于所述冬性芸苔属植物的紧邻的附近处的杂草。
31.权利要求8或10的方法，其中所述SU除草剂组合物作为施用给先前作物的SU除草剂组合物的土壤残留物而存在。
32.权利要求8至10中任一项的方法，其中所述冬性芸苔属作物的产量高于相应的野生型同品系的且在包含相同除草剂的条件下生长的冬性芸苔属植物的作物的产量。
33.权利要求8至10中任一项的方法，其中所述冬性芸苔属作物的产量实质上等价于当所述冬性芸苔属作物在所述SU除草剂组合物不存在下生长时的产量。
34.权利要求10的方法，其中所选择出的芸苔属植物能够耐受以至少IxSU的剂量率来进行的所述除草剂处理，其中没有显著的来自所述处理的由SU除草剂诱导的损伤。
35.权利要求1-34中任一项的方法，其中所述除草剂组合物包含至少一种选自下列的进一步的A. I. =EPSPS-抑制剂，草甘膦；谷氨酰胺合成酶抑制剂，草铵膦；ACCase抑制剂，dim类、fop类或den类；PP0_抑制剂，苯嘧磺草胺；杀真菌剂，吡唑醚菌酯；或者其农艺学上可接受的盐或酯；并且所述芸苔属植物表达对于所述进一步的A. I.的耐受性性状。
36.用于在冬性芸苔属作物中控制杂草的方法，所述方法包括 施行所述作物的耐受除草剂的(HT)芸苔属植物的苗后处理，这通过以在从O. 25x至大约4x SU的范围内的剂量率向所述植物和其紧邻的附近施用包含磺酰脲类(SU)的除草剂组合物来进行，其中， (A)所述除草剂组合物 Cl)包含选自下列的SU :酰嘧磺隆、氟啶嘧磺隆、甲酰胺磺隆、唑吡嘧磺隆、碘磺隆、甲磺胺磺隆、烟嘧磺隆、噻吩磺隆和苯磺隆，其农艺学上可接受的盐和酯，以及其组合，和 (2)任选地，包含至多丰实量的总“其他SU”含量；和 (B)所述芸苔属植物包含至少一个耐受除草剂的AHASL(HT-AHASL)基因，其中所述植物中的HT-AHASL基因之中仅一个编码选自P197X和W574X的磺酰脲类除草剂耐受性(SU-HT)突变并且为单-SU-HT-AHASL基因，其任选地可以编码“其他HT突变”，并且其中所述单-SU-HT-AHASL基因位于所述芸苔属植物的A基因组中；并且 其中，所述芸苔属植物能够耐受以Ix SU的剂量率来进行的所述苗后SU处理，其中没有显著的来自所述处理的由SU除草剂诱导的损伤。
37.权利要求36的方法，其中所述除草剂组合物(A)任选地包含至多中等量的“其他SU ”。
38.权利要求36的方法，其中所述除草剂组合物(A)任选地包含至多少量的“其他SU”。
39.权利要求36的方法，其中所述除草剂组合物(A)任选地包含至多微小量的“其他 SU ”。
40.权利要求36的方法，其中所述除草剂组合物(A)任选地包含至多最小量的“其他SU ”。
41.权利要求I的方法，其中所述除草剂组合物(A)任选地包含至多痕量的“其他SU”。
42.权利要求I的方法，其中所述除草剂组合物(A)任选地包含大约0wt%的“其他SU”。
43.用于产生种子的方法，所述方法包括施行权利要求I至42中任一项的方法，并且从所述芸苔属植物收获种子。
44.从根据权利要求I至42中任一项的方法进行处理的芸苔属植物收获的种子。
45.用于在冬性芸苔属作物中控制杂草的方法，所述方法包括 施行所述作物的耐受除草剂的(HT)芸苔属植物的苗后处理，这通过以在从O. 25x至大约4x SU的范围内的剂量率向所述植物和其紧邻的附近施用包含磺酰脲类(SU)的除草剂组合物来进行，其中， (A)所述除草剂组合物 (I)包含选自下列的SU :酰嘧磺隆、氟啶嘧磺隆、甲酰胺磺隆、唑吡嘧磺隆、碘磺隆、甲磺胺磺隆、烟嘧磺隆、噻吩磺隆和苯磺隆，其农艺学上可接受的盐和酯，以及其组合，和 (2)不包含显著量的其他SU ;和 (B)所述芸苔属植物 Cl)包含至少一个耐受除草剂的AHASL (HT-AHASL)基因，其中所述HT-AHASL基因之一编码选自P197X和W574X的磺酰脲类耐受性HT (SU-HT)突变，以及至少一个选自G121X、A122X、M124X、V196X、R199X、T203X、A205X、F206X、K256X、M351X、H352X、R373X、D375X、D376X、R377X、M570X、V571X、F578X、S653X 和 G654X 的另外的突变；或 (2)包含至少两个耐受除草剂的AHASL (HT-AHASL)基因，其中第一个HT-AHASL基因编码选自P197X和W574X的磺酰脲类耐受性(SU-HT)突变，并且第二个HT-AHASL基因编码选自 G121X、A122X、M124X、V196X、R199X、T203X、A205X、F206X、K256X、M351X、H352X、R373X、D375X、D376X、R377X、M570X、V571X、F578X、S653X 和 G654X 的突变； 其中，所述芸苔属植物能够耐受以Ix SU的剂量率来进行的所述苗后SU处理，其中没有显著的来自所述处理的由SU除草剂诱导的损伤。
全文摘要
本发明提供了耐受除草剂的冬性芸苔属植物。本发明还提供了用于通过施用本发明的耐受除草剂的植物所耐受的除草剂来控制杂草生长的方法。本发明的植物表达对于一种或多种AHAS酶抑制剂的作用耐受的AHAS酶。
文档编号C12N9/88GK102947443SQ201180019608
公开日2013年2月27日 申请日期2011年3月17日 优先权日2010年3月17日
发明者H·梵铁吉姆, M·普芬宁, H·布雷默, R·克勒, A·舍恩哈默 申请人:巴斯夫农业化学产品公司