专利名称：食品化妆品企业污水中致病菌快检试剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种食品化妆品企业污水中致病菌快检试剂，用于快速检测污水中是否有痢疾杆菌、沙门氏杆菌等致病菌存在，鉴别污水是否达到消毒卫生安全，利用培养试验鉴别细菌的种类和消毒效果。监督鉴别诊断的关键在于准确、快速、简便。而细菌接种量大小，会直接影响检测结果。往往需要将样本通过不同方法进行增菌培养，来进行细菌种类的鉴别，这是目前微生物实验室最常用的手段。由于目前培养条件的应用范围所限，供污水痢疾杆菌、沙门氏杆菌等致病菌增菌培养的诊断试剂没有特效的，存在所需接种量大、培养时间长、易出现假阳性或假阴性等问题。随着生物研究的进展，国内外对细菌鉴别的增菌诊断试剂的研究也在不断的发展中。生物工作者一直希望能有一种能克服上述不足的快速检验食品化妆品企业污水中致病菌快检试剂，使食品化妆品企业污水废水排放达到国家规定的标准。
背景技术：
食品化妆品企业污水的病原微生物主要有:病原性细菌，肠道病毒、蠕虫卵和原虫四类。具体包括沙门氏菌属、痢疾杆菌、霍乱弧菌、致病性大肠杆菌、传染性肝炎病毒、脊髓灰质炎病毒、柯萨基病毒、蛔虫卵、钩虫卵、血吸虫卵、阿米巴原虫。我国大多数食品化妆品企业污水中细菌总数每毫升达几百万至几千万个，其中大肠菌群数每毫升污水大多在20万个以上，肠道致病菌检出率达30% 100%，食品化妆品企业每天排出成百上千吨废水，这些废水如不及时处理，通过市政污水管道进入污水处理厂后，造成处理后水的质量下降，影响人民身体健康。而对于这些最危险的多种疾病的潜在传染源，只有通过污水处理，从污水中检验出，才可被发现和制止。防治食品化妆品企业污水废水污染是废水防治的首要目标。具体而言，就是要使食品化妆品企业污水废水排放达到国家规定的标准。消毒是用来抵抗各种方法处理后残留细菌污染物的最后防御手段，氯氧消毒是目前最先进的消毒手段。氧系消毒剂具有杀菌快速、彻底、广谱等特点。氯系消毒剂是最常用的消毒剂，在防止水传播疾病中起重要作用。氯投加到不含有机物的纯净水中后，很快就形成冷氯酸，冷氯酸杀灭大肠杆菌只需几分钟，但杀灭某些病毒却要一个小时；如水中存在有机物，氯会与这些物质起反应，除非投氯量大，否则水中不会出现游离氯。消毒剂必须与细菌有效接触才能杀灭细菌，为了保证最佳效果的杀菌，要有一定的接触时间，良好的混合是提闻杀菌效率的必要条件之一。氯氧消毒剂兼具各种消毒剂的优点，具有互补和协同作用，其杀菌速度、效率、广谱性是任何一 种单一型消毒剂所无法比拟的。当混合消毒剂投加到水体中后，强氧化性的C102和03最先发生作用，它们首先和水中的还原性物质(有机物)反应，既消除了处理中可能产生的氯代有机物，又为混合消毒剂高效地发挥杀菌作用扫除了障碍。接触反应完成以后余氯的存在是影响消毒效果及持续杀菌能力的主要因素。余氯不足达不到预定的消毒目的，余氯量太高，造成消毒剂的浪费。消毒效果的鉴定是检测消毒后的污水，有无致病性的痢疾杆菌、沙门氏杆菌等致病菌存在，而痢疾杆菌、沙门氏杆菌的诊断往往需要3-4天的培养时间，给污水处理工作带来很大不便。本发明的目的在于提供一种能克服已有鉴别诊断试剂不足的快速检验食品化妆品企业污水中致病菌快检试剂。与其它同类诊断试剂相比具备下列特点:所需接种量小，少量细菌即可迅速繁殖，在通常室温下或37°C培养5-6小时即可观察结果；不易出现假阳性和假阴性；能破坏标本中存在的抑菌物质，使细菌生长不受抑制。发明内容本发明的要点在于选择合适的组分，并进行合理混配，经加温、溶解、混合、冷却、分装、高温灭菌等工艺而成。本发明选择的配方如下(组分及其重量百分比％ ):酵母膏1.0-2.0;甘氨酸1.0-2.0 ;硫代硫酸钠2.0-3.0 ;胰蛋白胨1.8-2.2 ;枸橼酸钠0.4-0.5 ;去氧胆酸钠
0.04-0.06 ;磷酸二氢钾0.14-0.16 ;磷酸氢二钾0.38-0.42 ;氯化钠0.4-0.5 ;葡萄糖
0.10-0.12 ;甘露醇0.15-0.25 ;小牛血清0.4-0.5 ;蒸馏水加至100ml。本诊断试剂含有枸橼酸钠和去氧胆酸钠，对革兰氏阴性菌有抑制作用，大肠杆菌，绿脓杆菌及变形杆菌，在接种6小时内生长缓慢，而痢疾杆菌可相对地得到增殖.氯化钠用于调整渗透压；磷酸二氢钾用于调节pH。胰蛋白胨、小牛血清、葡萄糖、甘露醇是诊断试剂中的营养和支持成分。甘氨酸、硫代硫酸钠为中和剂。标本接种后即计算时间，在通常室温下或37°C培养，均有增菌作用.增菌培养6小时后，即用划线法移种到肠道选择性诊断试剂上以分离致病菌。本发明产品的制备方法是:I)、将酵母膏、甘 氨酸、硫代硫酸钠、胰蛋白胨、枸橼酸钠、去氧胆酸钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、氯化钠、葡萄糖、甘露醇按比例加入蒸馏水中，再加热溶解，矫正PH至7.0矫正pH至6.8,用滤纸过滤；2)、压力蒸汽灭菌0.70kgl5分钟；3)、无菌条件下，加入无菌小牛血清，分装安培瓶，每瓶约5ml，存于冰箱中备用。本发明具有以下优点:(I)食品化妆品企业污水中致病菌快检试剂所需接种量小，培养时间短，少量细菌即可迅速繁殖，在通常室温下或37°C培养5-6小时即可观察结果；(2)不易出现假阳性或假阴性；(3)能破坏标本中存在的残存消毒剂的抑菌作用。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的详细说明:按照下表所列数据(重量百分比％ )及其所述步骤进行配置:
配方一:酵母膏1.0-2.0;甘氨酸1.0-2.0;硫代硫酸钠2.0-3.0;胰蛋白胨1.8-2.2;枸橼酸钠0.4-0.5；去氧胆酸钠0.04-0.06;磷酸二氢钾0.14-0.16;磷酸氢二钾0.38-0.42;氯化钠0.4-0.5；葡萄糖0.10-0.12；廿露醇0.15-0.25；小牛血清0.4-0.5；蒸馏水加至100ml。
配方二:酵母膏1.0-1.5; H氨酸1.0-1.8;硫代硫酸钠2.0-2.5;胰蛋白胨1.8-2.0;枸橡酸钠0.4-0.5；去氧胆酸钠0.05-0.06；磷酸二氢钾0.15-0.16；磷酸氢二钾0.4-0.42；氯化钠0.4-0.5;葡萄糖0.11-0.12;甘露醇0.2-0.25;小牛血清0.4-0.5;蒸馏水加至100ml。
权利要求
1.本发明涉及一种食品化妆品企业污水中致病菌快检试剂，其特征在于具有如下的配方(组分及其重量百分比％ ):酵母膏1.0-2.0 ;甘氨酸1.0-2.0 ;硫代硫酸钠2.0-3.0 ；胰蛋白胨1.8-2.2 ;枸橼酸钠0.4-0.5 ;去氧胆酸钠0.04-0.06 ;磷酸二氢钾0.14-0.16 ;磷酸氢二钾0.38-0.42 ;氯化钠0.4-0.5 ;葡萄糖0.10-0.12 ;甘露醇0.15-0.25 ;小牛血清0.4-0.5 ;蒸懼水加至IOOmlo
2.—种权利要求1所 述一种食品化妆品企业污水中致病菌快检试剂，其特征在于具有如下的制备工艺: 1)、将酵母膏、甘氨酸、硫代硫酸钠、胰蛋白胨、枸橼酸钠、去氧胆酸钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、氯化钠、葡萄糖、甘露醇按比例加入蒸馏水中，再加热溶解，矫正pH至7.0矫正pH至6.8,用滤纸过滤； 2)、压力蒸汽灭菌0.70kgl5分钟； 3)、无菌条件下，加入无菌小牛血清，分装安培瓶，每瓶约5ml，存于冰箱中备用。
全文摘要
本发明涉及一种食品化妆品企业污水中致病菌快检试剂，用于快速检测污水中是否有痢疾杆菌、沙门氏杆菌等致病菌存在，鉴别污水是否达到消毒卫生安全，利用培养试验鉴别细菌的种类和消毒效果。具有以下优点(1)食品化妆品企业污水中致病菌快检试剂所需接种量小，培养时间短，少量细菌即可迅速繁殖，在通常室温下或37℃培养5-6小时即可观察结果；(2)不易出现假阳性或假阴性；(3)能破坏标本中存在的残存消毒剂的抑菌作用。
文档编号C12R1/01GK103194522SQ20121000163
公开日2013年7月10日 申请日期2012年1月5日 优先权日2012年1月5日
发明者曲剑英, 王伟栋, 丁宗博 申请人:曲剑英, 王伟栋, 丁宗博