专利名称：卡特兰花粉萌发培养基的制作方法
技术领域：
本发明涉及ー种花粉萌发培养基，尤其涉及ー种卡特兰花粉萌发培养基。
背景技术：
卡特兰，属兰科(familyOrchideceae)、树兰亚科(subfamily Epidendroideae)、树兰族(tribe Epidendreae)、蕾莉亚亚族(subtribe Laeliinae),又名嘉德丽亚兰，附生复茎性兰类。其花色五彩斑斓、花型硕大多姿、气息芬芳可人，颜色丰富多彩，在国际上有“洋兰之王”的美称。原产于美洲热带和亚热带，其中哥伦比亚和巴西野生最多，哥伦比亚、巴西、哥斯达黎加等国更以卡特兰为国花。卡特兰在泰国、新加坡、印度尼西亚、马来西亚、菲律宾和我国台湾都有规模性生产，这些地区成为世界卡特兰的主产区。目前报道的卡特兰原生种约有110种(http://apps. kew. org/wcsp/home. do),但其与近缘属Brassavola (白拉索兰)、Laelia (蕾利亚兰)、Sophronitis (索芙罗兰)等成功进行了属间杂交，已育成大量的杂交种，目前所指的卡特兰是泛指Cattleya属及其它相关近缘属的所有原种及杂交种，包括卡特兰属原种及属内杂交种，卡特兰近缘属及属内杂交种，卡特兰属与近缘属的杂交种，以及卡特兰近缘属之间的杂交种，形成了庞大的卡特兰家族品种。由于各种类卡特兰花期不一致，在杂交育种过程中，常出现花期不遇，需要对采集的花粉块进行贮藏，贮藏后花粉生活力对杂交育种的成功具有重要影响。由于兰科植物的花粉外面包裹类脂膜，使得花粉粒粘连成花粉块，使花粉不易分散，这不利于对花粉萌发进行观察。现有技术中，对卡特兰花粉的萌发没有过研究，在兰科植物中，仅见于对大花蕙兰(Cymbidium h ybridium)和台湾金线莲(Anoectochilus formosanus)花粉的萌发进行了研究，并且使用的都是固体培养基，大花蕙兰的花粉在固体培养基上培养4天才能萌发，台湾金线莲花粉块固体培养时需要48小时才能萌发。耗时长，萌发率低，而且固体培养基配制繁琐
发明内容
本发明的目的是提供一种耗时短、萌发率高的卡特兰花粉萌发培养基。本发明的目的是通过以下技术方案实现的本发明的卡特兰花粉萌发培养基，该培养基为液体培养基，所述液体培养基中包含蔗糖、H3B03、CaCl2。由上述本发明提供的技术方案可以看出，本发明提供的卡特兰花粉萌发培养基，由于该培养基为液体培养基，所述液体培养基中包含蔗糖、H3B03、CaCl2。耗时短、萌发率高，大大提高了工作效率。
具体实施例方式下面将对本发明实施例作进ー步地详细描述。
本发明的卡特兰花粉萌发培养基，其较佳的具体实施方式
是该培养基为液体培养基，所述液体培养基中包含蔗糖、H3B03、CaCl2。优选的组合为所述蔗糖、H3BO3, CaCl2在液体培养基中的浓度分别为100gじ1、40mg r\l50mgじ1。采用本发明的卡特兰花粉萌发培养基，在3小时后就可以观察到花粉的萌发现象，24小时后花粉块完全溶解在培养液中，可清晰地观察到花粉的萌发，所以使用本发明的卡特兰花粉萌发培养基能够大大提高效率。同吋，也为有效开展卡特兰杂交育种研究提供技术支撑，如果再加入合适的激素或其它活性物质，卡特兰萌发所用时间可能更短，萌发率可能会更高。
具体实验例首先通过单因子试验，研究了蔗糖、硼、钙、镁、钾等因素对杂种卡特兰花粉萌发的影响。在单因子试验的基础上，选取对杂种卡特兰花粉萌发影响较大的蔗糖、H3BO3和CaCl23个因子，各设5水平，设计正交试验。结果表明，蔗糖的作用极显著，H3BO3次之，CaCl2是在蔗糖和H3BO3的主导作用下起辅助作用。卡特兰花粉培养的最佳组合为蔗糖IOOgr1+H3B0340mg ^+CaCl2ISOmgじ1，在此培养液中培养花粉块，3小时后就可以观察到花粉管的萌发，但此时萌发量小，而且花粉相互粘连，不利于观察计数。在培养24小时后，花粉块能够充分溶解在培养液中，花粉也大量萌发，萌发率最高能达到68. 7%。以后随着培养时间的延长，营养液中微生物含量逐渐增加，对观察效果产生影响。蔗糖浓度是影响兰花花粉在人工培养基上萌发的重要而且独立的因素，蔗糖在花粉萌发过程中，除了能够为花粉提供能源外，还能起到调节渗透压的作用，但若浓度过高，则会造成原生质体脱水，反而抑制了花粉萌发。本申请的研究结果表明，蔗糖是影响杂种卡特兰花粉萌发的主要因子，当蔗糖浓度为IOOgじ1时最有利于花粉的萌发。硼能促进糖的吸收与代谢，并促使花粉管的伸长生长。Ca2+主要影响花粉萌发速度和花粉管的生长速度。本申请的研究结果表明，杂种卡特兰花粉萌发的适宜H3BO3浓度为40mgじ1，CaCl2浓度为150mgじ1，H3BO3和CaCl2浓度过高和过低，都不利于花粉管的萌发和生长。当钙和硼酸与糖共同存在时，糖起主要作用，硼酸起次要作用，钙处于附属地位。在优选出的最佳培养液蔗糖IOOg r1+H3B0340mg ^+CaCl2ISOmgじ1中培养花粉块，3小时后就可以观察到花粉管的萌发，但此时萌发量小，而且花粉相互粘连，不利于观察计数。在培养24小时后，花粉块能够充分溶解在培养液中，花粉也大量萌发。以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式
，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应该以权利要求书的保护范围为准。
权利要求
1.ー种卡特兰花粉萌发培养基，其特征在干，该培养基为液体培养基，所述液体培养基中包含蔗糖、H3B03、CaCl2。
2.根据权利要求I所述的卡特兰花粉萌发培养基，其特征在于，所述蔗糖、H3B03、CaCl2在液体培养基中的质量浓度分别为=IOOg r\40mgじ1、150mgじ1。
全文摘要
本发明公开了一种卡特兰花粉萌发培养基，该培养基为液体培养基，所述液体培养基中包含蔗糖、H3BO3、CaCl2。优选的组合为所述蔗糖、H3BO3、CaCl2在液体培养基中的浓度分别为100g L-1、40mg L-1、150mg L-1。采用本发明的卡特兰花粉萌发培养基，在3小时后就可以观察到花粉的萌发现象，24小时后花粉块完全溶解在培养液中，可清晰地观察到花粉的萌发，能够大大提高效率。
文档编号C12N5/04GK102618483SQ201210066900
公开日2012年8月1日 申请日期2012年3月14日 优先权日2012年3月14日
发明者王雁, 郑宝强 申请人:中国林业科学研究院林业研究所