专利名称：一种甲氰菊酯农药降解菌的筛选方法
技术领域：
本发明涉及一种甲氰菊酯农药降解菌的筛选方法。
背景技术：
农药甲氰菊酯在土壤中大量蓄积会影响农作物、牲畜和人等生物链，会导致土质和产量的下降并影响相应的经济收入。以微生物为主体的生物修复技术可用于降解各种有机污染物，具有高效、安全、无二次污染、费用低等优点，甲氰菊酯农药降解菌可用于降解、去除农药甲氰菊酯残留，能够达到降低去除毒害和提高产量的目的，起到保障食品安全增加社会效益的效果。但是目前的降解菌筛选方法主要是通过采集样本，富集培养，分离纯化，梯度驯化培养，确定降解率等一系列手段得到甲氰菊酯农药降解菌，花费的时间长，工作量大，成本高。
发明内容
本发明要解决的技术问题是，提供一种方法简便、耗时短、筛选工作量小的甲氰菊酯农药降解菌的筛选方法、能克服现有技术的不足。本发明采用的技术方案
一种甲氰菊酯农药降解菌的筛选方法，采用以下步骤
(1)采集样本；
(2)富集培养；
(3)选择培养基培养；
(4)分离纯化；
(5)得到降解菌株，保藏。所述的一种甲氰菊酯农药降解菌的筛选方法，采集样本取采自农药厂废水排放口附近的活性污泥。所述的一种甲氰菊酯农药降解菌的筛选方法，富集培养置于100 mL基础盐培养基中，基础盐培养基配方甲氰菊酯:100 mg L' NaCl :1. 0 g/L，NH4NO3 :1. 0 g/L，K2HPO4 I. 5 g/L, , KH2PO4 0. 5 g/L，MgSO4 7H20 :0. I g/L，Ph=7.0，于 37 °C, 130 r mirT1 摇床培养ld，以5 mL的接种量转接到基础盐培养基中，共转接3次。所述的一种甲氰菊酯农药降解菌的筛选方法，选择培养基培养取富集液ImL添加到选择培养基中，选择培养基培养配方甲氰菊酯600 mg L' NaCl :1. 0 g/L, NH4NO3 I. 0 g/L, K2HPO4 1. 5 g/L, , KH2PO4 :0. 5 g/L, MgSO4 7H20 0. I g/L，Ph=7.0，于 30 °C, 130r mirT1振荡培养3d。所述的一种甲氰菊酯农药降解菌的筛选方法，分离纯化吸取0. 2mL培养液涂布于加有100 mg L—1甲氰菊酯的基础盐培养基平板，在30°C培养2d，挑取在农药培养基中生长快、菌落规则、传代稳定的单菌落，划线培养3次后转入斜面保存。本发明的有益效果是本发明通过采用选择培养基筛选，避免使用传统的梯度驯化培养，大大节省了筛选的时间和工作量，相应地减少了筛选的成本，大大提高了筛选的效率。采用传统传统筛选方案的流程，需要耗时14飞6天，工作量大，成本也相应增高。而采用本发明的筛选方案，仅耗时12天，工作量较小，成本也较低。
图I:为本发明采用的技术方案的流程图。图2 :为现有传统筛选方案的流程图。
具体实施例方式实施例I :
一种甲氰菊酯农药降解菌的筛选方法，采用以下步骤(I)采集样本；(2)富集培养； (3)选择培养基培养；(4)分离纯化；(5)得到降解菌株，保藏。筛选方法具体步骤为，取采自农药厂废水排放口附近的活性污泥，置于100 mL的基础盐培养基中，基础盐培养基配方甲氰菊酯:100 mg L-1，NaCl :1. 0 g/L, NH4NO3 I. 0 g/L, K2HPO4 1. 5 g/L,，KH2PO4 :0. 5 g/L, MgSO4 7H20 :0. I g/L, Ph=7. 0，于 37 °C,130 r mirT1摇床培养ld，以5 mL的接种量转接到相同的培养基中，共转接3次，取富集液ImL添加到选择培养基中，选择培养基培养配方甲氰菊酯600 mg L_\ NaCl :1. 0 g/L, NH4NO3 1. 0 g/L, K2HPO4 :1. 5 g/L,，KH2PO4 :0. 5 g/L, MgSO4 7H20 :0. I g/L, Ph=7. 0，于30 °C, 130 r mirT1振荡培养3d，吸取0. 2mL培养液涂布于加有100 mg L—1甲氰菊酯的基础盐培养基平板，在30°C培养2d，挑取在农药培养基中生长快、菌落规则、传代稳定的单菌落，划线培养3次后转入斜面保存；将得到降解菌株保藏。
权利要求
1.一种甲氰菊酯农药降解菌的筛选方法，其特征在于采用以下步骤 采集样本； 富集培养； 选择培养基培养； 分离纯化； 得到降解菌株，保藏。
2.根据权利要求I所述的ー种甲氰菊酯农药降解菌的筛选方法，其特征在于采集样本取采自农药厂废水排放ロ附近的活性污泥。
3.根据权利要求I所述的ー种甲氰菊酯农药降解菌的筛选方法，其特征在于富集培养置于100 mL基础盐培养基中，基础盐培养基配方甲氰菊酯100 mg ·じ1, NaCl :1.0g/L, NH4NO3 1. O g/L，K2HPO4 :1. 5 g/L,，KH2PO4 :0. 5 g/L，MgSO4 · 7H20 :0. I g/L，Ph=7.0，于37 °C, 130 r · mirT1摇床培养ld，以5 mL的接种量转接到基础盐培养基中，共转接3次。
4.根据权利要求I所述的ー种甲氰菊酯农药降解菌的筛选方法，其特征在于选择培养基培养取富集液ImL添加到选择培养基中，选择培养基培养配方甲氰菊酯600mg ·じ1，NaCl :1. O g/L, NH4NO3 :1. O g/L, K2HPO4 :1. 5 g/L,，KH2PO4 :0. 5 g/L, MgSO4 · 7H20 0.I g/L, Ph=7. 0，于 30 °C, 130 r · mirT1 振荡培养 3d。
5.根据权利要求I所述的ー种甲氰菊酯农药降解菌的筛选方法，其特征在于分离纯化吸取O. 2mL培养液涂布于加有100 mg·じ1甲氰菊酯的基础盐培养基平板，在30°C培养2d，挑取在农药培养基中生长快、菌落规则、传代稳定的单菌落，划线培养3次后转入斜面保存。
全文摘要
本发明公开了一种甲氰菊酯农药降解菌的筛选方法，采用以下步骤:采集样本；富集培养；选择培养基培养；分离纯化；得到降解菌株，保藏。本方法克服了传统甲氰菊酯农药降解菌的筛选方法耗时、工作量大、成本高的不足，提供了一种简便的方法，缩短了筛选时间，也减少了筛选工作量。
文档编号C12N1/00GK102757897SQ20121026104
公开日2012年10月31日 申请日期2012年7月26日 优先权日2012年7月26日
发明者余磊, 武思齐, 赵杰 申请人:贵阳学院