专利名称：降胆固醇菌粉，含有该菌粉的降胆固醇复合调味酱及其应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及食品领域，具体涉及降胆固醇菌粉的制备和应用以及降胆固醇复合调味酱的制备。
背景技术：
胆固醇是人类和动物生存所必需的营养成分，具有重要的生理功能，但在体内过量时也会造成危害。随着科技的发展和人们生活水平的提高，现在与胆固醇过量相关引致的动脉粥样硬化、冠心病、脑中风等心脑血管疾病，已严重威胁着人类健康。调查显示，亚洲人体内的胆固醇每增加一单位(lmmol/L)，心血管疾病死亡危险几率就增加35%，和血管有关的中风几率也会增加25%。公知的健康知识显示限制饮食中的脂肪和胆固醇摄入量是必要的。但是，随着人们生活水平的提高和膳食营养的增加，人们往往因不合理膳食，过多摄入高脂肪、高胆固醇食品，导致血液胆固醇含量超标。为了防止心脑血管疾病的发生，许多人不得不限制饮食，这与人们追求生活水平的提高相矛盾。所以，研究不限制饮食、不干扰人体正常代谢、不影响食品风味、经济实用的减少胆固醇吸收的食品及其加工方法，已成为食品加工工业的重要发展方向。减少食物中的胆固醇的方法，目前，主要有3种方法⑴用物理方法去除食品原料中的胆固醇；(2)用化学方法去除食品原料中的胆固醇；(3)用微生物或微生物酶转化食品中的胆固醇，即利用生物转化法处理食品。利用物理、化学方法处理食品，降低食品原料中胆固醇含量的方法目前主要有b_环状糊精吸附包合、食用油和溶剂提取、分子蒸馏、真空蒸馏、电渗析、CO2超临界萃取、琥珀酸酐或皂角苷化学处理等。这些方法分别存在下列缺点环糊精在许多国家不是合法的食品添加剂，必须要用酶分解残余的环糊精，且该法成本较高；有机溶剂法所用溶剂会残留在油中；蒸汽法对设备的要求太高；C02超临界萃取法的投资太大；分子蒸馏很难实现工业化等。并且，这些方法在转移胆固醇的同时会影响食品风味或营养成分。依靠微生物及其酶或活性物质作用为主的生物方法是一种比较经济而有效的降低食品中胆固醇的方法，它效率高、成本较低且能较好保留食品原有营养成分及风味等优点正得到越来越多研究者青睐。目前，在利用微生物降解胆固醇领域，科学工作者们已做过很多有价值的研究。比如许多研究表明乳酸菌发酵的食品可以降低人体的血清胆固醇的含量。Richardson ( 1977 )和Mann研究表明在酸乳中含有一种3-羟基-3-甲基葡萄糖酸和乳清酸可以抑制从乙酸合成胆固醇的因子，在膳食中大量摄入酸乳可以降低血液中的胆固醇。我国学者郭本恒在功能性乳制品中关于乳酸菌的保健功能指出，食用酸奶可以降低人体血清胆固醇水平的功能。许多微生物中都含有胆固醇氧 化酶，能将胆固醇氧化分解从而使之从食品中脱除。但是，从目前微生物中分离出来的胆固醇氧化酶的酶活力较低，大致在60 80μπιο1/(min吨)之间，氧化分解胆固醇的能力不强，同时胆固醇氧化酶的产物胆留-4-烯-3-酮的生物学功能以及对人体健康的影响还有待进一步研究，因此将胆固醇氧化酶用于脱除食品中的胆固醇还未得到很好的应用。
发明内容
本发明的目的就在于针对现有技术的不足，提供一种降胆固醇菌粉，该降胆固醇菌粉含有莫格球拟酵母(TbrWoAsis mogii)新菌种LZKDZ 2011，莫格球拟酵母LZKDZ2011分离出来的胆固醇氧化酶的酶活力高，它可以有效降低肉制品中的胆固醇含量，从而降低人们胆固醇的摄入，保护人们的身体健康。同时本发明还提供了含有降胆固醇菌粉的降胆固醇复合调味酱及其制备方法，它以天然物质为原料，采用生物发酵技术，制备成降胆固醇复合调味酱，不仅能够有效降低肉制品中的胆固醇含量，而且还具有不影响食品风味，使用方便，经济实用的特点。为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是这样的
本发明所述的降胆固醇菌粉含有莫格球拟酵母(TbrWoASi1S mogii )新菌种LZKDZ2011，所述的莫格球拟酵母新菌种LZKDZ 2011已于2012年7月30日保藏于湖北省武汉市武汉大学中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏号为CCTCC M 2012303。本发明所述的降胆固醇菌粉的制备方法，包括以下步骤
(1)制备液体富集培养基按照重量份组成蛋白胨10份，牛肉膏3份，氯化钠5份，蒸馏水1000份称取各原料，将称取的蛋白胨、牛肉膏和氯化钠溶解于蒸馏水中，校正PH值为7±0. 2，在98KPa，121°C的条件下高压灭菌15min得到液体富集培养基；
(2)富集培养从自然发酵的蔬果中进行无菌采样，称取样品Ig加入盛有玻璃珠和IOOml无菌水的锥形瓶中，震荡20min，以10%的接种量接入IOOml液体富集培养基中，在30°C,200rpm的条件下摇床培养20小时得到富集培养液；
(3)稀释富集培养液各量取富集培养液10ml，分别加入90ml、900ml等体积按10倍放大的液体富集培养基中制得4 8个不同稀释度的富集培养稀释液；
(4)制备固体筛选培养基平板按照重量份组成胆固醇2份，磷酸二氢钾1.6份，硫酸镁O. 2份，硫酸锰O. 2份，硝酸铵O. 2份，氯化钠5份，表面活性剂I份，琼脂20份称取各原料，将称取好的原料除琼脂外全部溶解于蒸馏水中，校正PH值为7±0. 2，加入称取好的琼脂，加热至琼脂充分溶解、液体呈半透明状时，分装于锥形瓶中，在98KPa，121 °C的条件下高压灭菌15min得到固体筛选培养基平板；
(5)分离纯化单菌株将4 8个不同稀释度的富集培养稀释液分别涂布到每个固体筛选培养基平板上，在30°C温度下倒置培养18h后，挑去不同菌落形态的菌株进行平板划线分离，得到纯化的单菌株；
(6)筛选菌株测定从4 8个不同稀释度的富集培养稀释液分离纯化得到的单菌株所产生的胆固醇氧化酶的活性高低，筛选出胆固醇氧化酶活性高的菌株；
(7)保藏菌株按照固体筛选培养基平板的制备方法在15X150的试管中制备固体斜面培养基，将筛选出的菌株接种在固体斜面培养基上，待菌株生长至菌落数为IO15 IO16个/ cm2，封闭试管开口，将试管在2 8°C的温度条件下冷冻保藏；
(8)制备液体种子活化培养液从保藏菌株的试管中挑取一环接入IOOmL液体富集培养基中，在30°C，200rpm的条件下摇床培养24小时得到菌株菌落数IO8 IO9个/ ml的液体种子活化培养液；
(9)制备发酵培养基按照重量份组成麦芽粉300份，蒸馏水1000份称取各原料，将称取的麦芽粉加入蒸馏水中加热至38°C保温2h，再升温至45°C保温30min，再提高到50°C保温30min，再升至60°C，糖化I 1. 5h得到糖化液，糖化完毕后将糖化液加热至100°C煮半小时，然后将加热后的糖化液过滤得到澄清液，该澄清液即是发酵培养基；
(10)发酵液培养按5%的接种量将液体种子活化培养液接入发酵培养基中，在30°C，200rpm的条件下摇床培养48h得到发酵液；
(11)制备降胆固醇菌粉将发酵液置于-18±4°c的温度下冷冻18 24小时，冷冻后放入真空干燥冷冻机，在1. 3 13帕的真空状态下，在-25 -40°C的温度条件下冷冻干燥3 4小时至发酵液中90%的水分充分干燥得到发酵块，发酵块粉碎即得降胆固醇菌粉。作为优选，本发明所述的降胆固醇菌粉的制备方法第(2)步骤富集培养中无菌采样的自然发酵蔬果为发酵白菜、酸辣椒、苹果、菠萝、桔子中的一种或几种。发明人通过大量的实验发现本发明制备的降胆固醇菌粉含有莫格球拟酵母(Torulopsis mogii )新菌种LZKDZ 2011，莫格球拟酵母LZKDZ 2011分离出来的胆固醇氧化酶的酶活力高。胆固醇氧化酶酶活力测定方法如下
酶活力定义在37°C，pH7.5的条件下，Imin内催化Iymol胆固醇氧化为胆甾-4-烯-3-酮所需要的酶。测定方法取O. 2mL发酵液，加入O. 05%的聚乙二醇辛基苯基醚溶液，用pH7. 5、
O.lmol/ L的磷酸钾缓冲液稀释10倍后在241nm处用紫外分光光度计进行测定，然后上述混合溶液37°C下保温3min，加入同温预热过的1%胆固醇-乙醇溶液100 L, 37°C下振荡，精确反应15 min,立即加入lmol/L氢氧化钠-乙醇溶液和5mL环己烷，振荡30s，静置萃取2h,吸取ImL上层萃取液于刻度试管中用无水乙醇定容至5mL,在241nm处用紫外分光光度计进行测定。计算公式为酶活力单位(ymol/(min· L)) = (O. D. Ε_0·D. O) +0. 03548X125 + 384+15X1000
式中0. D. E 反应后紫外吸收值；
O.D. O——反应前紫外吸收值；
O.03548—胆甾-4-烯-3-酮紫外吸收标准曲线斜率；
125——稀释倍数；
384-胆甾-4-烯-3-酮相对分子质量；
15——反应时间(min)；
1000——反应体积(ml)。经测定，本发明降胆固醇菌粉中莫格球拟酵母新菌种LZKDZ 2011分离出来的降胆固醇氧化酶的酶活力为90 180 μ mol/ (min · L)。含有本发明降胆固醇菌粉的降胆固醇复合调味酱，包括下述重量份组成的原料小麦麦芽550-600份，食盐300-350份，降胆固醇菌粉5. 6-6. 6份，香辛料粉75-120份和水500-600 份。本发明所述的降胆固醇复合调味酱的制备方法，包括以下生产步骤(O制备小麦麦芽
a.挑选饱满的小麦，用清水浸泡48 72小时，待麦粒充分吸水膨胀后，取出浙干水
分；
b.将浙干的麦粒置于浅底托盘，盖上洁净纱布，每8h喷30°C温水I次，同时略加翻动；
c.2 4天后，观察麦粒长出根部和胚芽情况，待80 90%麦芽长出，除去遮盖物，长出麦芽的麦粒即是小麦麦芽；
(2)按照原料重量份组成称取各原料；
(3)将称取好的小麦麦芽在80-100°C的温度下蒸制30 40min，称量250-300份的水、
2.25份的食盐倒入喷壶中，喷壶中加入称取好的降胆固醇菌粉后喷洒于蒸制后的小麦麦芽上，然后将小麦麦芽放入培养箱中培养24小时；
(4)称量250-300份的水、2.25份的食盐加入到培养后的小麦麦芽中混合均匀破碎，置于液体发酵罐中发酵24-72小时得到发酵物；
(5)将余下的食盐和香辛料粉加入到发酵物中混合均匀，置于陶瓷坛中密封晒制30-60
天;
(6)晒制后陶瓷坛中的物质经高温灭菌、灌装得到降胆固醇复合调味酱。作为优选，所述培养箱的培养条件为温度37土 1°C，相对湿度60%_75% ;所述液体发酵罐的发酵条件为温度37 ± I °C。由于本发明降胆固醇菌粉可以有效降低肉制品中的胆固醇含量，从而降低人们胆固醇的摄入，因此可以将本发明菌粉应用于制备各种降胆固醇的复合物，比如调味酱、保健
合品坐坐M PRO本发明的优点在于
(1)本发明降胆固醇菌粉是从自然发酵蔬果中提取制备得到的具有胆固醇降解能力的莫格球拟酵母新菌种LZKDZ 2011的活体固体物，其降解机理是经过胆固醇菌粉的发酵，莫格球拟酵母新菌种LZKDZ 2011产生降胆固醇氧化酶，降胆固醇氧化酶催化胆固醇降解反应，从而降低食品中的胆固醇含量。本发明降胆固醇菌粉中莫格球拟酵母新菌种LZKDZ2011分离出来的降胆固醇氧化酶的酶活力为90 180 μ mol/ (min · L),能有效的降解肉制品中的胆固醇，降低食物的胆固醇含量；
(2)降胆固醇氧化酶属于小分子蛋白质，抗热性不强，60-80°C即可灭活，且容易被胃蛋白酶和胰蛋白酶降解，对人体不产生危害；
(3)降胆固醇氧化酶氧化游离胆固醇只产生单一产物胆留-4-烯-3-酮，有利于食品安全。目前有大量的研究表明胆留-4-烯-3-酮具有降血脂、减肥的功效，因此将降胆固醇菌粉应用于制备降胆固醇复合物，可以增加降胆固醇复合物的保健功能；
(4)含有降胆固醇菌粉的降胆固醇复合调味酱的制备方法简单，使用方便，按照使用比例加入到肉制品中即可，它不仅不影响食品原有的风味，而且还能够降低食品中的胆固醇含量，保护人们的身体健康。
具体实施例方式为了更加清楚的理解本发明的目的、技术方案及有益效果，下面对本发明做进一步的说明，但并不将本发明的保护范围限定在以下实施例中。
—、制备小麦麦芽
(1)挑选饱满的小麦，用清水浸泡48 72小时，待麦粒充分吸水膨胀后，取出浙干水
分；
(2)将浙干的麦粒置于浅底托盘，盖上洁净纱布，每8h喷30°C温水I次，同时略加翻
动；
(3)2 4天后，观察麦粒长出根部和胚芽情况，待80 90%麦芽长出，除去遮盖物，长出麦芽的麦粒即是小麦麦芽；
二、制备降胆固醇菌粉
(1)制备液体富集培养基按照重量份组成蛋白胨10份，牛肉膏3份，氯化钠5份，蒸馏水1000份称取各原料，将称取的蛋白胨、牛肉膏和氯化钠溶解于蒸馏水中，校正PH值为7±0. 2，在98KPa，121°C的条件下高压灭菌15min得到液体富集培养基；
(2)富集培养从自然发酵的蔬果中进行无菌采样，称取样品Ig加入盛有玻璃珠和IOOml无菌水的锥形瓶中，震荡20min，以10%的接种量接入IOOml液体富集培养基中，在30°C,200rpm的条件下摇床培养20小时得到富集培养液；作为优选，自然发酵蔬果为发酵白菜、酸辣椒、苹果、菠萝、桔子中的一种或几种。(3)稀释富集培养液各量取富集培养液10ml，分别加入90ml、900ml等体积按10倍放大的液体富集培养基中制得4 8个不同稀释度的富集培养稀释液；
(4)制备固体筛选培养基平板按照重量份组成胆固醇2份，磷酸二氢钾1.6份，硫酸镁O. 2份，硫酸锰O. 2份，硝酸铵O. 2份，氯化钠5份，表面活性剂I份，琼脂20份称取各原料，将称取好的原料除琼脂外全部溶解于蒸馏水中，校正PH值为7±0. 2，加入称取好的琼脂，加热至琼脂充分溶解、液体呈半透明状时，分装于锥形瓶中，在98KPa，121 °C的条件下高压灭菌15min得到固体筛选培养基平板；
(5)分离纯化单菌株将4 8个不同稀释度的富集培养稀释液分别涂布到每个固体筛选培养基平板上，在30°C温度下倒置培养18h后，挑去不同菌落形态的菌株进行平板划线分离，得到纯化的单菌株；
(6)筛选菌株测定从4 8个不同稀释度的富集培养稀释液分离纯化得到的单菌株所产生的胆固醇氧化酶的活性高低，筛选出胆固醇氧化酶活性高的菌株；
(7)保藏菌株按照固体筛选培养基平板的制备方法在15X150的试管中制备固体斜面培养基，将筛选出的菌株接种在固体斜面培养基上，待菌株生长至菌落数为IO15 IO16个/ cm2，封闭试管开口，将试管在2 8°C的温度条件下冷冻保藏；
(8)制备液体种子活化培养液从保藏菌株的试管中挑取一环接入IOOmL液体富集培养基中，在30°C，200rpm的条件下摇床培养24小时得到菌株菌落数IO8 IO9个/ ml的液体种子活化培养液；
(9)制备发酵培养基按照重量份组成麦芽粉300份，蒸馏水1000份称取各原料，将称取的麦芽粉加入蒸馏水中加热至38°C保温2h，再升温至45°C保温30min，再提高到50°C保温30min，再升至60°C，糖化I 1. 5h得到糖化液，糖化完毕后将糖化液加热至100°C煮半小时，然后将加热后的糖化液过滤得到澄清液，该澄清液即是发酵培养基；
(10)发酵液培养按5%的接种量将液体种子活化培养液接入发酵培养基中，在30°C，200rpm的条件下摇床培养48h得到发酵液；(11)制备降胆固醇菌粉将发酵液置于_18±4°C的温度下冷冻18 24小时，冷冻后放入真空干燥冷冻机，在1. 3 13帕的真空状态下，在-25 -40°C的温度条件下冷冻干燥3 4小时至发酵液中90%的水分充分干燥得到发酵块，发酵块粉碎即得降胆固醇菌粉。根据胆固醇氧化酶酶活力测定方法，测得降胆固醇菌粉中分离出来的降胆固醇氧化酶的酶活力为90 180 μ mol/ (min · L)。实施例一制备降胆固醇复合调味酱室外温度平均15 20°C
1、称取小麦麦芽550份，食盐300份，降胆固醇菌粉5.6份，香辛料粉75份和水500份；
2、将称取好的小麦麦芽在80°C的温度下蒸制30min，称量250份的水、2.25份的食盐倒入喷壶中，喷壶中加入称取好的降胆固醇菌粉后喷洒于蒸制后的小麦麦芽上，然后将小麦麦芽放入培养箱中培养24小时,其中培养箱的培养条件为温度37土TC,相对湿度60%-75%。；
3、称量250份的水、2.25份的食盐加入到培养后的小麦麦芽中混合均匀破碎，置于液体发酵罐中发酵24小时得到发酵物，其中液体发酵罐的发酵条件为温度37±1°C。；
4、将余下的食盐和香辛料粉加入到发酵物中混合均匀，置于陶瓷坛中密封阳光下晒制45天；
5、晒制后将陶瓷坛中的物质取出蒸汽夹层锅中，边搅拌边加热，在90°C±5°C恒温保持15分钟杀菌；
6、倒入灌装机，在高温下，热合包装。实施例二 制备降胆固醇复合调味酱室外温度平均20 30°C
1、称取小麦麦芽600份，食盐350份，降胆固醇菌粉6.6份，香辛料粉120份和水600
份；
2、将称取好的小麦麦芽在100°C的温度下蒸制40min，称量300份的水、2.25份的食盐倒入喷壶中，喷壶中加入称取好的降胆固醇菌粉后喷洒于蒸制后的小麦麦芽上，然后将小麦麦芽放入培养箱中培养24小时,其中培养箱的培养条件为温度37土 TC,相对湿度60%-75%。；
3、称量300份的水、2.25份的食盐加入到培养后的小麦麦芽中混合均匀破碎，置于液体发酵罐中发酵24-72小时得到发酵物，其中液体发酵罐的发酵条件为温度37±1°C。；
4、将余下的食盐和香辛料粉加入到发酵物中混合均匀，置于陶瓷坛中密封晒制30天；
5、晒制后将陶瓷坛中的物质取出蒸汽夹层锅中，边搅拌边加热，在90°C±5°C恒温保持20分钟杀菌；
6、倒入灌装机，在高温下，热合包装。实施例三制备降胆固醇复合调味酱室外温度平均4 15°C
1、称取小麦麦芽575份，食盐325份，降胆固醇菌粉6份，香辛料粉100份和水560份；
2、将称取好的小麦麦芽在90°C的温度下蒸制35min，称量280份的水、2.25份的食盐倒入喷壶中，喷壶中加入称取好的降胆固醇菌粉后喷洒于蒸制后的小麦麦芽上，然后将小麦麦芽放入培养箱中培养24小时,其中培养箱的培养条件为温度37土TC,相对湿度60%_75%。；
3、称量280份的水、2.25份的食盐加入到培养后的小麦麦芽中混合均匀破碎，置于液体发酵罐中发酵24-72小时得到发酵物，其中液体发酵罐的发酵条件为温度37±1°C。；
4、将余下的食盐和香辛料粉加入到发酵物中混合均匀，置于陶瓷坛中密封晒制60天；
5、晒制后将陶瓷坛中的物质取出蒸汽夹层锅中，边搅拌边加热，在90°C±5°C恒温保持30分钟杀菌；
6、倒入灌装机，在高温下，热合包装。实施例四对比实验(制备不加降胆固醇菌粉的复合调味酱)
室外温度平均20 30°C 1、称取小麦麦芽600份，食盐350份，香辛料粉120份和水600份；
2、将称取好的小麦麦芽在100°C的温度下蒸制40min，称量300份的水、2.25份的食盐倒入喷壶中喷洒于蒸制后的小麦麦芽上，然后将小麦麦芽放入培养箱中培养24小时,其中培养箱的培养条件为温度37 ± I °C，相对湿度60%-75%。；
3、称量300份的水、2.25份的食盐加入到培养后的小麦麦芽中混合均匀破碎，置于液体发酵罐中发酵24-72小时得到发酵物，其中液体发酵罐的发酵条件为温度37±1°C。；
4、将余下的食盐和香辛料粉加入到发酵物中混合均匀，置于陶瓷坛中密封晒制30天；
5、晒制后将陶瓷坛中的物质取出蒸汽夹层锅中，边搅拌边加热，在90°C±5°C恒温保持20分钟杀菌；
6、倒入灌装机，在高温下，热合包装。按照以下指标对实施例一至四制备的调味酱的性能指标进行检测
权利要求
1.一种降胆固醇菌粉，其特征在于所述的降胆固醇菌粉含有莫格球拟酵母 (Torulopsis麗设ii)新菌种LZKDZ 2011，所述的莫格球拟酵母新菌种LZKDZ 2011已于 2012年7月30日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏号为CCTCC M 2012303。
2.根据权利要求1所述的一种降胆固醇菌粉的制备方法，其特征在于所述的制备方法包括下述步骤(1)制备液体富集培养基按照重量份组成蛋白胨10份，牛肉膏3份，氯化钠5份，蒸馏水1000份称取各原料，将称取的蛋白胨、牛肉膏和氯化钠溶解于蒸馏水中，校正PH值为 7±0. 2，在98KPa，121°C的条件下高压灭菌15min得到液体富集培养基；(2)富集培养从自然发酵的蔬果中进行无菌采样，称取样品Ig加入盛有玻璃珠和 IOOml无菌水的锥形瓶中，震荡20min，以10%的接种量接入IOOml液体富集培养基中，在 30°C,200rpm的条件下摇床培养20小时得到富集培养液；(3)稀释富集培养液各量取富集培养液10ml，分别加入90ml、900ml等体积按10倍放大的液体富集培养基中制得4 8个不同稀释度的富集培养稀释液；(4)制备固体筛选培养基平板按照重量份组成胆固醇2份，磷酸二氢钾1.6份，硫酸镁O. 2份，硫酸锰O. 2份，硝酸铵O. 2份，氯化钠5份，表面活性剂I份，琼脂20份称取各原料，将称取好的原料除琼脂外全部溶解于蒸馏水中，校正PH值为7±0. 2，加入称取好的琼脂，加热至琼脂充分溶解、液体呈半透明状时，分装于锥形瓶中，在98KPa，121 °C的条件下高压灭菌15min得到固体筛选培养基平板；(5)分离纯化单菌株将4 8个不同稀释度的富集培养稀释液分别涂布到每个固体筛选培养基平板上，在30°C温度下倒置培养18h后，挑去不同菌落形态的菌株进行平板划线分离，得到纯化的单菌株；(6)筛选菌株测定从4 8个不同稀释度的富集培养稀释液分离纯化得到的单菌株所产生的胆固醇氧化酶的活性高低，筛选出胆固醇氧化酶活性高的菌株；(7)保藏菌株按照固体筛选培养基平板的制备方法在15X150的试管中制备固体斜面培养基，将筛选出的菌株接种在固体斜面培养基上，待菌株生长至菌落数为IO15 IO16 个/ cm2，封闭试管开口，将试管在2 8°C的温度条件下冷冻保藏；(8)制备液体种子活化培养液从保藏菌株的试管中挑取一环接入IOOmL液体富集培养基中，在30°C，200rpm的条件下摇床培养24小时得到菌株菌落数IO8 IO9个/ ml的液体种子活化培养液；(9)制备发酵培养基按照重量份组成麦芽粉300份，蒸馏水1000份称取各原料，将称取的麦芽粉加入蒸馏水中加热至38°C保温2h，再升温至45°C保温30min，再提高到50°C 保温30min，再升至60°C，糖化I 1. 5h得到糖化液，糖化完毕后将糖化液加热至100°C煮半小时，然后将加热后的糖化液过滤得到澄清液，该澄清液即是发酵培养基；(10)发酵液培养按5%的接种量将液体种子活化培养液接入发酵培养基中，在30°C， 200rpm的条件下摇床培养48h得到发酵液；(11)制备降胆固醇菌粉将发酵液置于-18±4°c的温度下冷冻18 24小时，冷冻后放入真空干燥冷冻机，在1. 3 13帕的真空状态下，在-25 -40°C的温度条件下冷冻干燥 3 4小时至发酵液中90%的水分充分干燥得到发酵块，发酵块粉碎即得降胆固醇菌粉。
3.根据权利要求2所述的一种降胆固醇菌粉的制备方法，其特征在于所述的第(2)步骤富集培养中无菌采样的自然发酵蔬果为发酵白菜、酸辣椒、苹果、菠萝、桔子中的一种或几种。
4.一种含有权利要求1所述的降胆固醇菌粉的降胆固醇复合调味酱，其特征在于包括下述重量份组成的原料小麦麦芽550-600份，食盐300-350份，降胆固醇菌粉5. 6-6. 6份，香辛料粉75-120份和水500-600份。
5.根据权利要求4所述的一种降胆固醇复合调味酱的制备方法，其特征在于包括以下生产步骤(O制备小麦麦芽a.挑选饱满的小麦，用清水浸泡48 72小时，待麦粒充分吸水膨胀后，取出浙干水分；b.将浙干的麦粒置于浅底托盘，盖上洁净纱布，每8h喷30°C温水I次，同时略加翻动；c.2 4天后，观察麦粒长出根部和胚芽情况，待80 90%麦芽长出，除去遮盖物，长出麦芽的麦粒即是小麦麦芽；(2)按照权利要求4所述的重量份组成称取各原料；(3)将称取好的小麦麦芽在80-100°C的温度下蒸制30 40min，称量250-300份的水、2.25份的食盐倒入喷壶中，喷壶中加入称取好的降胆固醇菌粉后喷洒于蒸制后的小麦麦芽上，然后将小麦麦芽放入培养箱中培养24小时；(4)称量250-300份的水、2.25份的食盐加入到培养后的小麦麦芽中混合均匀破碎，置于液体发酵罐中发酵24-72小时得到发酵物；(5)将余下的食盐和香辛料粉加入到发酵物中混合均匀，置于陶瓷坛中密封晒制30-60天;(6)晒制后陶瓷坛中的物质经高温灭菌、灌装得到降胆固醇复合调味酱。
6.根据权利要求5所述的一种降胆固醇复合调味酱的制备方法，其特征在于所述培养箱的培养条件为温度37 ± I °C，相对湿度60%-75%。
7.根据权利要求5所述的一种降胆固醇复合调味酱的制备方法，其特征在于所述液体发酵罐的发酵条件为温度37±1°C。
8.权利要求1所述的降胆固醇菌粉在制备降胆固醇复合物中的应用。
全文摘要
本发明公开了降胆固醇菌粉，含有该菌粉的降胆固醇复合调味酱及应用，降胆固醇菌粉含有莫格球拟酵母(Torulopsismogii)新菌种LZKDZ2011，它已于2012年7月30日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏号为CCTCCM2012303。含有该菌粉的降胆固醇复合调味酱包括下述重量份组成的原料小麦麦芽550-600份，食盐300-350份，降胆固醇菌粉5.6-6.6份，香辛料粉75-120份和水500-600份，它可以降低人们胆固醇的摄入，保护人们的身体健康。由于降胆固醇菌粉可以有效降低肉制品中的胆固醇含量，因此可以将该菌粉应用于制备各种降胆固醇的复合物。
文档编号A23L1/29GK103005382SQ20121027488
公开日2013年4月3日 申请日期2012年8月3日 优先权日2012年8月3日
发明者王静 申请人:泸州靠得住食品有限公司