专利名称：一种从莫勒菌中提取双苯恶庚因-11(6h)酮-1，10-二羟基，3 -甲基-7，8-二甲氧的方法
技术领域：
本发明属于新物质提取领域，具体涉及一种从莫勒菌中提取双苯恶庚因-11 (6H)酮-1，10-二羟基，3 -甲基-7，8-二甲氧的方法。
背景技术：
莫勒菌iMoelleriella、是虫生真菌的重要成员，其无性型为类座壳孢(Aschersonia-1ike),由于它能引起粉風和介壳类昆虫群体性流行病的发生,这使得它有可能成为有用的生物防治剂。随着研究的深入，近年来人们发现莫勒菌的代谢产物具有抗菌、抗肿瘤和抗疟原虫等生物活性，这预示该菌在生物农药或医药上存在很大应用价值。由于人们在现代社会患癌症的概率较大，因此，寻找不同来源的抗癌药物已经越 来越得到人们的关注。虫生真菌的代谢产物中含有多肽、生物碱、萜类化合物、留醇等多种具有杀虫、抗肿瘤、抗炎、抗菌等活性物质，因此，充分开发利用虫生真菌，将有利于人类医疗水平的发展。
发明内容
本发明的目的在于提供一种从莫勒菌中提取双苯恶庚因-11 (6H)酮-1，10- 二羟基，3 -甲基-7，8-二甲氧的方法，本发明以繁殖快、周期短的真菌为材料，成本低，操作简单，重复性好，无需昂贵的仪器，通过多次进行硅胶柱层析，得到一种新化合物，通过对人类胃癌细胞株BGC823进行活性测定，得到的数据说明该种新化合物有优异的抗肿瘤活性，促进其药理学的研究和作为先导化合物的开发和应用。为实现上述目的，本发明采用如下技术方案
一种从莫勒菌中提取双苯恶庚因-11 (6H)酮-1，10-二羟基，3 -甲基-7，8-二甲氧的方法包括以下步骤
(1)将莫勒菌(邱君志等，赭色小莫勒菌在中国的发现.菌物学报，2009.28(1):148-150)活化后，取菌块接种PDB培养基中，在160r/min、25°C条件下连续培养7天即初级培养，按10%接种量再次转接到PDB培养基中，继续在160r/min、25°C条件下连续培养28天即次级培养；
(2)减压抽滤得到菌丝体，菌丝体在40°C下恒温干燥后研磨成粉状，过筛，用乙酸乙酯浸泡，超声，重复3次；合并浸泡液，旋蒸得菌丝体浸膏；
(3)将菌丝体浸膏上20(Γ300目硅胶柱，进行粗分；先用石油醚洗脱，之后换石油醚 二氯甲烷体积比=10:1洗脱，收集该部位洗脱液，旋蒸浓缩；
(4)将步骤(3)得到的浓缩物继续上20(Γ300目硅胶柱，以石油醚丙酮体积比=25:1梯度洗脱，收集石油醚丙酮体积比=20:1部位洗脱液，旋蒸浓缩；
(5)将步骤(4)得到的浓缩物进一步上20(Γ300目硅胶柱，先以石油醚洗脱，之后换石油醚丙酮体积比=20:1梯度洗脱，最后以二氯甲烷丙酮体积比=10:1梯度洗脱，收集二氯甲烷丙酮体积比=1:1部位洗脱液，旋蒸浓缩，氯仿洗出，自然挥干，甲醇重结晶，即得到双苯恶庚因-11(6H)酮-1，10-二羟基，3 -甲基-7，8-二甲氧，结构式如下
权利要求
1.一种从莫勒菌中提取双苯恶庚因-1U6H)酮-1，10-二羟基，3 -甲基-7，8-二甲氧的方法，其特征在于所述的方法包括以下步骤(O将莫勒菌活化后，取菌块接种PDB培养基中，在160r/min、25°C条件下连续培养7 天即初级培养，按10%接种量再次转接到PDB培养基中，继续在160r/min、25°C条件下连续培养28天即次级培养；(2)减压抽滤得到菌丝体，菌丝体在40°C下恒温干燥后研磨成粉状，过筛，用乙酸乙酯浸泡，超声，重复3次；合并浸泡液，旋蒸得菌丝体浸膏；(3)将菌丝体浸膏上20(Γ300目硅胶柱，进行粗分；先用石油醚洗脱，之后换石油醚二氯甲烷体积比=10:1洗脱，收集该部位洗脱液，旋蒸浓缩；(4)将步骤(3)得到的浓缩物继续上20(Γ300目硅胶柱，以石油醚丙酮体积比=25:1 梯度洗脱，收集石油醚丙酮体积比=20:1部位洗脱液，旋蒸浓缩；(5)将步骤(4)得到的浓缩物进一步上20(Γ300目硅胶柱，先以石油醚洗脱，之后换石油醚丙酮体积比=20:1梯度洗脱，最后以二氯甲烷丙酮体积比=10:1梯度洗脱，收集二氯甲烷丙酮体积比=1:1部位洗脱液，旋蒸浓缩，氯仿洗出，自然挥干，甲醇重结晶，即得到双苯恶庚因-11(6Η)酮-1，10-二羟基，3 -甲基-7，8-二甲氧，结构式如下
2.根据权利要求1所述的从莫勒菌中提取双苯恶庚因-1U6H)酮-1，10-二羟基，3 -甲基_7，8- 二甲氧的方法，其特征在于所述步骤(I)中接种菌块的大小为O. 5X0. 5cm, 接种量为4块。
3.根据权利要求1所述的从莫勒菌中提取双苯恶庚因-1U6H)酮-1，10-二羟基，3 -甲基-7，8-二甲氧的方法，其特征在于所述步骤(2)中要用3倍体积乙酸乙酯浸泡24小时，超声I小时。
全文摘要
本发明公开了一种从莫勒菌中提取双苯恶庚因-11(6H)酮-1，10-二羟基，3-甲基-7，8-二甲氧的方法，包括1)活化菌株；2)初级培养；3)次级培养；4)减压抽滤得到菌丝体，菌丝体恒温干燥；5)研磨，过筛；6)多次进行200~300目硅胶柱层析，得到的流分旋蒸浓缩，氯仿洗出，自然挥干，甲醇重结晶，得产品。本发明以繁殖快、周期短的真菌为材料，成本低，操作简单，重复性好，无需昂贵的仪器，通过多次进行硅胶柱层析，得到一种新化合物双苯恶庚因-11(6H)酮-1，10-二羟基，3-甲基-7，8-二甲氧，通过对人类胃癌细胞株BGC823进行活性测定，得到的数据说明该种新化合物有优异的抗肿瘤活性。
文档编号C12R1/645GK103014090SQ20121054204
公开日2013年4月3日 申请日期2012年12月14日 优先权日2012年12月14日
发明者邱君志, 李小霞, 费姣, 毛丽慧, 郭庆丰, 何肖云, 涂洁, 邱云锋, 张伟, 谢小聪 申请人:福建农林大学