专利名称：利用氨基转移酶合成手性环状烷基氨基酸的方法
技术领域：
本发明涉及合成手性环状烷基氨基酸的方法，特别是利用氨基转移酶合成手性环状烷基氨基酸的方法。
背景技术：
:不对称生物催化由于其经济效益高，同时由于酶的专一特性，使得这种方法具有高的立体选择性、化学及光学专一性的优点，因此已经成为工业上合成化学品、医药及农药中间体的重要方法。其中，制备手性氨基酸的方法中，主要是基于通过液相层析拆分外消旋混合物，通过化学拆分的方法进行拆分。
各种拆分方法都存在难于进行工业化生产、成本相对较高且收率较低的缺点，理论收率值可达到50%，实际应用过程中收率仅为10%-20%，因此，应用该类方法的生产成本非常昂贵。有时化学拆分法还使用价格昂贵的手性拆分剂，大大地增加了生产成本；另外所采用的化学试剂操作较为复杂，且后处理不利用环境保护。
发明内容:本发明的目的在于提供一种利用氨基转移酶合成手性环状烷基氨基酸的方法，通过利用氨基转移酶或其全细胞进行不对称生物催化，提供一种制备高光学纯度的手性氨基酸的方法，选用已经在市场上商业化的原料酮酸或其可溶性酮酸盐类化合物为初始
原料，酮酸结构式为
权利要求
1.利用氨基转移酶合成手性环状烷基氨基酸的方法，其特征在于具体步骤如下: (1)投料:向反应釜中加入主原料酮酸或其可溶性铜酸盐类化合物，其中酮酸结构式为
2.根据权利要求1所述利用氨基转移酶合成手性环状烷基氨基酸的方法，其特征在于所述步骤(I)中主原料酮酸或其可溶性酮酸盐类化合物与磷酸盐缓冲液的用量比为lg/30 80mL。
3.根据权利要求1所述利用氨基转移酶合成手性环状烷基氨基酸的方法，其特征在于所述步骤(2)中主原料酮酸或其可溶性酮酸盐类化合物与氨基供体的摩尔比为1:1 8eq。
4.根据权利要求1所述利用氨基转移酶合成手性环状烷基氨基酸的方法，其特征在于所述步骤(3)中主原料酮酸或其可溶性酮酸盐类化合物与辅酶磷酸吡哆醛的摩尔比为1:0.01 0.08 ;主原料酮酸或其可溶性酮酸盐类化合物与氨基转移酶主酶的用量比为lg/0.05 0.5g。
5.根据权利要求1所述利用氨基转移酶合成手性环状烷基氨基酸的方法，其特征在于所述步骤(4)中反应温度为25 35°C，搅拌速度为180rpm 220rpm，反应时间为32 72h。
6.根据权利要求1所述利用氨基转移酶合成手性环状烷基氨基酸的方法，其特征在于所述步骤(5)中酮酸或其可溶性酮酸盐类化合物与离子交换树脂的用量比为6 13:1。
7.根据权利要求1所述利用氨基转移酶合成手性环状烷基氨基酸的方法，其特征在于所述步骤(I)中酮酸或其可溶性酮酸盐类化合物与磷酸盐缓冲液的用量比为lg/40 60mL ;所述步骤(2)中酮酸或其可溶性酮酸盐类化合物与氨基供体的摩尔比为1:1 5eq ；所述步骤(3)中酮酸或其可溶性酮酸盐类化合物与辅酶磷酸吡哆醛的摩尔比为1:0.01 0.05 ;酮酸或其可溶性酮酸盐类化合物与氨基转移酶酶主酶的用量比为lg/0.05 0.3g ;所述步骤(4)中反应温度为27 33°C，搅拌速度为190rpm 210rpm，反应时间为32 50h ;所述步骤(5)中酮酸或其可溶性酮酸盐类化合物与离子交换树脂的用量比为8 12:1o
8.根据权利要求1所述利用氨基转移酶合成手性环状烷基氨基酸的方法，其特征 在于所述步骤(I)中酮酸
9.根据权利要求1所述利用氨基转移酶合成手性环状烷基氨基酸的方法，其特征在于所述步骤(2)中L-氨基酸为L-谷氨酸、L-天冬氨酸、L-赖氨酸或L-高苯丙氨酸；D，L-氨基酸为D，L-谷氨酸、D, L-天冬氨酸、D, L-赖氨酸或D，L-高苯丙氨酸。
10.根据权利要求1所述利用氨基转移酶合成手性环状烷基氨基酸的方法，其特征在于所述步骤(5)中酸为浓盐酸或磷酸；可形成可溶性盐的无机碱为4mol/L NaOH或KOH溶液。
全文摘要
一种利用氨基转移酶合成手性环状烷基氨基酸的方法，选用已经在市场上商业化的原料酮酸或其相应的可溶性酮酸盐类化合物为初始原料，将初始原料溶解于磷酸盐缓冲液；然后加入氨基供体；将磷酸吡哆醛(PLP)和氨基转移酶主酶加入到含氨基供体及主原料酮酸或其相应的可溶性酮酸盐类化合物的体系中，恒温条件下反应，得到较高ee值的产品n=1,2,3,4,5，或n=0,1。该方法工艺条件稳定，操作简单，收率高，成本低，且利于环境保护，适用于规模化生产，为制备手性氨基酸化合物提供了一种新的思路和方法。
文档编号C12P13/04GK103194501SQ20131010583
公开日2013年7月10日 申请日期2013年3月29日 优先权日2013年3月29日
发明者洪浩, 郑长胜, 高峰, 李雁飞, 吕丽慧, 吕彤, 李艳君 申请人:凯莱英医药集团(天津)股份有限公司, 凯莱英生命科学技术(天津)有限公司, 天津凯莱英制药有限公司, 凯莱英医药化学(阜新)技术有限公司, 吉林凯莱英医药化学有限公司