对pcr产物进行纯化的方法
【专利摘要】本发明公开了对PCR产物进行纯化的方法，其特征在于，步骤如下：首先，在进行pcr的时候，预先准备好将其产物进行收集；然后转移到离心管中，10000prm高速离心1分钟，取其沉淀物，弃滤液；然后将沉淀物中加入氯仿，高速离心一分钟；再加入同等体积的无水乙醇；摇晃，振荡，五分钟；室温下静置；用洗涤液进行洗涤，使ＤＮＡ洗脱；琼脂糖凝胶电泳检测，即可回收ＰＣＲ产物；所述琼脂糖凝胶质量百分比为百分之二十；在进行电泳检测之前，需要温浴三分钟，温度为不超过３０摄氏度。本发明的有益效果是：操作简单，成本较低，可以准确进行筛选，重复操作性强，筛选精确。
【专利说明】对PCR产物进行纯化的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及生化实验领域，具体涉及对PCR产物进行纯化的方法。
【背景技术】
[0002]聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction),简称PCR,是一种分子生物学技术，用于放大特定的DNA片段。可看作生物体外的特殊DNA复制。DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链，在DNA聚合酶的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。在实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，加入设计引物，DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。但是，DNA聚合酶在高温时会失活，因此，每次循环都得加入新的DNA聚合酶，不仅操作烦琐，而且价格昂贵，制约了 PCR技术的应用和发展。
【发明内容】
[0003]本发明要解决的技术问题在于，针对现有技术缺陷，提供一种技术方案:
对PCR产物进行纯化的方法，步骤如下:首先，在进行per的时候，预先准备好将其产物进行收集；然后转移到离心管中，1000Oprm高速离心I分钟，取其沉淀物，弃滤液；然后将沉淀物中加入氯仿，高速离心一分钟；再加入同等体积的无水乙醇；摇晃,振荡,五分钟；室温下静置；用洗涤液进行洗 涤，使D N A洗脱；琼脂糖凝胶电泳检测，即可回收P C R产物。
[0004]本发明中，所述琼脂糖凝胶质量百分比为百分之二十。
[0005]本发明中，在进行电泳检测之前，需要温浴三分钟，温度为不超过3 O摄氏度本发明的有益效果是:操作简单，成本较低，可以准确进行筛选，重复操作性强，筛选精确。
【具体实施方式】
[0006]对PCR产物进行纯化的方法，步骤如下:首先，在进行per的时候，预先准备好将其产物进行收集；然后转移到离心管中，1000Oprm高速离心I分钟，取其沉淀物，弃滤液；然后将沉淀物中加入氯仿,高速离心一分钟；再加入同等体积的无水乙醇；摇晃,振荡,五分钟；室温下静置；用洗涤液进行洗涤，使D N A洗脱；琼脂糖凝胶电泳检测，即可回收P C R产物；所述琼脂糖凝胶质量百分比为百分之二十；在进行电泳检测之前，需要温浴三分钟，温度为不超过3 O摄氏度。
[0007]以上所述，仅为本发明较佳的【具体实施方式】，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本【技术领域】的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
【权利要求】
1.对PCR产物进行纯化的方法，其特征在于，步骤如下:首先，在进行per的时候，预先准备好将其产物进行收集；然后转移到离心管中，1000Oprm高速离心I分钟，取其沉淀物，弃滤液；然后将沉淀物中加入氯仿，高速离心一分钟；再加入同等体积的无水乙醇；摇晃，振荡，五分钟；室温下静置；用洗涤液进行洗涤，使D N A洗脱；琼脂糖凝胶电泳检测，即可回收P C R产物。
2.如权利要求1所述的对PCR产物进行纯化的方法，其特征在于，所述琼脂糖凝胶质量百分比为百分之二十。
3.如权利要求1所述的对PCR产物进行纯化的方法，其特征在于，在进行电泳检测之前，需要温浴三分钟，温度为不超过3 O摄氏度。
【文档编号】C12N15/10GK103614367SQ201310539571
【公开日】2014年3月5日 申请日期:2013年11月5日 优先权日:2013年11月5日
【发明者】辛竹 申请人:辛竹