以专一性脂酶催化的单脂肪酸甘油酯制备sn-1,3-DAG的方法
【专利摘要】以专一性脂酶催化的单脂肪酸甘油酯制备sn-1,3-DAG的方法，步骤如下：（1）按摩尔比为2-4∶1比例称取反应底物游离脂肪酸、sn-1(3)-单甘脂并放入反应器中；（2）按反应底物游离脂肪酸与sn-1(3)-单甘油酯总质量的20%的量，加入脂酶TLIM，密闭反应器，在反应温度50℃、搅拌转速220转/分钟条件下，反应0.5-96h；（3）对步骤（2）中反应得到的产物通过滤膜过滤方式除去固定化的脂酶，得到sn-1,3-DAG。本发明避免了大量游离脂肪酸抑制酯酶活性的副反应；产物sn-1,3-DAG含量高达68％；反应速度快，纯度较高；有效减少了反应的步骤以及试剂的使用，大大减少了生产成本。
【专利说明】以专一性脂酶催化的单脂肪酸甘油酯制备sn-1,3-DAG的 方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于食用油【技术领域】，涉及以无溶剂体系中酶催化合成的sn-1，3甘油二 酯制备方法。
【背景技术】
[0002] sn-1, 3甘油二酯（Diacylglycerol, DAG)是由一分子甘油与两分子脂肪酸酯化后 得到的产物。sn-l，3-DAG是天然油脂中的微量成分及体内脂肪代谢的内源中间产物。在日 常生活中可完全取代食用油脂，不影响口感且能抑制体重的增长，促进体内脂肪减少，防止 内脏脂肪堆积，降低人和动物餐后血浆甘油，最重要的是在体内不会产生蓄积作用。因此， 成为了近年来油脂开发的主要发展方向之一。sn-1，3-DAG作为油脂的天然成分，同时也是 一种多功能添加剂，在食品、医药、化工等行业有广阔的应用前景。
[0003] 目前，制备sn-1, 3-DAG方法主要分为化学法和生物酶法。传统化学法生产 sn-1，3-DAG具有成本低，运行经济，容易实现规模生产等特点。然而由于反应缺乏专一性， 所得产品为sn-1，2-DAG、l，3-DAG的混合物，反应产率低。虽然通过特异的化学反应也可生 产结构特殊的sn-1，3-DAG，但需保护剂，反应步骤繁杂冗长，且需大量的化学试剂或有机溶 齐U，这显然不符合当今清洁生产、绿色环保的要求。由于脂肪酶具有较强的选择性(脂肪酸 专一性、位置专一性、结构专一性、光学异构专一性)，生物酶催化法可对产物实现较为精确 的控制，并可方便的开发具有特殊结构的产品。与此同时，酶法反应条件温和，所得产品质 量好(如色泽、活性等)，而且能耗低。另外，由于酶的高度选择性，转化率高，副反应少，产品 纯度高，使得反应更有效。具有既可降低纯化费用，又可减少环境污染等优点。目前，国内 外多采用以酯酶催化水解甘油酯法和脂酶催化甘油与游离脂肪酸法进行合成sn-1，3-DAG， 但产率都较低，不利于工业化生产。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的旨在提供一种以专一性脂酶催化的单脂肪酸甘油酯制备 sn-1，3-DAG的方法，以sn-1 (3)-单甘酯为甘油骨架供体，以游离脂肪酸为酰基供体，建立 一种无溶剂体系中酶催化合成sn-1，3-DAG的制备方法。
[0005] 本发明所述的以专一性脂酶催化的单脂肪酸甘油酯制备sn-1，3-DAG的工艺步骤 如下。
[0006] (1)原料准备：按摩尔比为2-4:1比例称取反应底物游离脂肪酸、sn-1 (3)-单甘脂 并放入反应器中。
[0007] (2)脂酶催化的部分酯化换反应：按反应底物游离脂肪酸与sn-Ι (3)-单甘油酯总 质量的20%的量，加入脂酶TLM (Lipozyme)，密闭反应器，在反应温度50°C、搅拌转速220 转/分钟条件下，反应0. 5-96h。
[0008] 部分酯化的反应机理如下式所示：
【权利要求】
1.以专一性脂酶催化的单脂肪酸甘油酯制备sn-1，3-DAG的方法，其特征是步骤如下： (1) 按摩尔比为2-4:1比例称取反应底物游离脂肪酸、sn-Ι (3)-单甘脂并放入反应器 中； (2) 按反应底物游离脂肪酸与sn-Ι (3)-单甘油酯总质量的20%的量，加入脂酶TLIM， 密闭反应器，在反应温度50°C、搅拌转速220转/分钟条件下，反应0. 5-96h ; (3) 对步骤（2)中反应得到的产物通过滤膜过滤方式除去固定化的脂酶，得到 sn_l，3_DAG〇
【文档编号】C12P7/64GK104152502SQ201410406076
【公开日】2014年11月19日 申请日期:2014年8月18日 优先权日:2014年8月18日
【发明者】朱雪梅, 黄楚楚, 龚斌, 熊华, 胡蒋宁, 喻芸, 冯越, 梁媛 申请人:南昌大学