一种发酵法生产新霉素所使用的发酵培养基的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种发酵法生产新霉素所使用的发酵培养基，该发酵培养基包括有机碳源、有机氮源、无机盐和淀粉酶，有机碳源的浓度为60-110g/L，使用所述发酵培养基生产新霉素，得到新霉素的发酵单位能达到33310U/mL以上，能够大幅提高新霉素生产企业的利润，具有广阔的应用前景。
【专利说明】一种发酵法生产新霉素所使用的发酵培养基
【技术领域】
[0001] 本发明属于微生物发酵【技术领域】，具体涉及一种发酵法生产新霉素所使用的发酵 培养基。
【背景技术】
[0002] 新霉素由弗氏链霉菌（Streptamyces fradiae)产生，是氨基糖苷类广谱抗生素， 对革兰氏阴性菌、阳性菌及结核杆菌都有较好的作用。新霉素对金葡菌、炭疽杆菌、白喉杆 菌、产气杆菌、变形杆菌及痢疾杆菌敏感，对大肠杆菌最敏感，临床上一般口服用于治疗腹 泻，对大肠杆菌引起的小儿腹泻疗效较好，亦可用于腹部及手术前用药。新霉素局部应用， 对敏感菌所致的皮肤粘膜感染如脓疮、疖、溃疡及烧伤等效果也很好。
[0003] 目前新霉素的主要生产方式为生物发酵，国内仅有为数不多的几个厂家生产，主 要由于产量很低，生产成本高，文献中新霉素菌种选育与发酵工艺的研究报道中有机碳源 为玉米淀粉，发酵单位较低，如：新霉素发酵工艺研究Il.Streptomyces fradiae 61-7-12 菌株发酵，最高发酵单位只有2200U/mL。
【发明内容】
[0004] 本发明所要解决的是发酵法生产新霉素，发酵单位较低的技术问题。
[0005] 为了实现本发明的目的，发明人提供了以下技术方案。
[0006] -种发酵法生产新霉素所使用的发酵培养基，包括有机碳源、有机氮源、无机盐和 淀粉酶，所述发酵培养基中有机碳源的浓度为60-110g/L。
[0007] 上述发酵法生产新霉素所使用的发酵培养基，所述发酵培养基中有机碳源的浓度 为 70-100g/L，优选 85-95g/L，最优选 90g/L。
[0008] 上述发酵法生产新霉素所使用的发酵培养基，所述发酵培养基中有机氮源的浓度 为 20-50g/L，优选 40g/L。
[0009] 上述发酵法生产新霉素所使用的发酵培养基，所述有机碳源优选小麦淀粉、糊精、 麦芽糖、玉米淀粉、甘油、葡萄糖中的一种。
[0010] 上述发酵法生产新霉素所使用的发酵培养基，所述有机氮源优选豆柏粉、、酵母 膏、牛肉粉中的一种。
[0011] 上述发酵法生产新霉素所使用的发酵培养基，所述无机盐为硫酸铵、磷酸氢二钠 和碳酸钙。
[0012] 上述发酵法生产新霉素所使用的发酵培养基，所述硫酸铵的浓度为4-10g/L，优选 8g/L。
[0013] 上述发酵法生产新霉素所使用的发酵培养基，所述磷酸氢二钠的浓度为 0· 1-0. 5g/L，优选 0· 1-0. 3g/L。
[0014] 上述发酵法生产新霉素所使用的发酵培养基，所述淀粉酶为α-淀粉酶。
[0015] 上述发酵法生产新霉素所使用的发酵培养基，所述淀粉酶的浓度为lg/L。
[0016] 本发明所述发酵培养基，通过限定有机碳源的浓度可以实现27000U/mL以上。
[0017] 通过限定有机氮源的浓度可以实现33310U/mL以上。
[0018] 所优选的有机碳源能够实现19000U/mL以上。
[0019] 所优选的有机氮源能够实现30200U/mL以上。
[0020] 本发明所述发酵培养基中无机盐选择硫酸铵、磷酸氢二钠和碳酸钙的混合物， 并限定硫酸铵的浓度为4-10g/L，优选8g/L，磷酸氢二钠的浓度为0. 1-0. 5g/L，优选 0. 1-0. 3g/L，碳酸钙的浓度为25g/L，其中，硫酸铵的作用是提供菌体前期生长所需氮源，磷 酸氢二钠的作用是提供合成菌体所需磷源，碳酸钙的作用是调节菌体代谢过程中的pH并 提供一定的钙离子。
[0021] 本发明所述发酵培养基中淀粉酶为α-淀粉酶，其浓度优选lg/L，是由于在此浓 度下淀粉糊化较好。
[0022] 本发明通过筛选发酵法生产新霉素所使用的发酵培养基的组成成分及各成分在 培养基中的浓度，得到的发酵培养基有利于被弗氏链霉菌利用，能大幅提高新霉素的发酵 单位，从而提高新霉素生产企业的经济效益。
【具体实施方式】
[0023] 通过本发明可使发酵单位达到40000U/mL以上，下面结合具体实施例对本发明所 述内容做进一步详细的说明。
[0024] 实施例1
[0025] 称取小麦淀粉90g，豆柏粉40g，硫酸铵8g，磷酸氢二钠0. lg，碳酸钙25g，淀粉酶 lg，饮用水定容至1L，接入新霉素产生菌弗氏链霉菌的种子培养物，接种量为15%，温度 35°C，培养10d放瓶，得到新霉素的发酵单位为33310U/mL
[0026] 实施例2-8
[0027] 发酵培养基的组成如表1所示，发酵方法同实施例1。
[0028] 表 1
[0029]
【权利要求】
1. 一种发酵法生产新霉素所使用的发酵培养基，包括有机碳源、有机氮源、无机盐和淀 粉酶，其特征在于，所述发酵培养基中有机碳源的浓度为60-110g/L。
2. 根据权利要求1所述的一种发酵法生产新霉素所使用的发酵培养基，其特征在于， 所述发酵培养基中有机碳源的浓度为70-100g/L。
3. 根据权利要求1所述的一种发酵法生产新霉素所使用的发酵培养基，其特征在于， 所述发酵培养基中有机氮源的浓度为20-50g/L。
4. 根据权利要求1所述的一种发酵法生产新霉素所使用的发酵培养基，其特征在于， 所述有机碳源为小麦淀粉、糊精、麦芽糖、玉米淀粉、甘油、葡萄糖中的一种。
5. 根据权利要求1所述的一种发酵法生产新霉素所使用的发酵培养基，其特征在于， 所述有机氮源为豆柏粉、酵母膏、牛肉粉中的一种。
6. 根据权利要求1所述的一种发酵法生产新霉素所使用的发酵培养基，其特征在于， 所述无机盐为硫酸铵、磷酸氢二钠和碳酸钙。
7. 根据权利要求6所述的一种发酵法生产新霉素所使用的发酵培养基，其特征在于， 所述硫酸铵的浓度为4-10g/L。
8. 根据权利要求6所述的一种发酵法生产新霉素所使用的发酵培养基，其特征在于， 所述磷酸氢二钠的浓度为〇. 1-0. 5g/L。
9. 根据权利要求1所述的一种发酵法生产新霉素所使用的发酵培养基，其特征在于， 所述淀粉酶为α-淀粉酶。
10. 根据权利要求1所述的一种发酵法生产新霉素所使用的发酵培养基，其特征在于， 所述淀粉酶的浓度为l〇g/L。
【文档编号】C12P19/52GK104195201SQ201410508761
【公开日】2014年12月10日 申请日期:2014年9月28日 优先权日:2014年9月28日
【发明者】张宝荣, 袁昉, 王绘砖, 李敏 申请人:河北圣雪大成制药有限责任公司