肉与肉制品中猪源成分的检测方法、牛源成分的检测方法及羊源成分的检测方法
【专利摘要】本发明提供了一种用于检测肉与肉制品中猪源成分的试剂盒，包括：如SEQ ID No.1所示的上游引物和如SEQ ID No.2所示的下游引物。本发明还提供了一种肉与肉制品中猪源成分的检测方法。本发明提供了一种用于检测牛源成分的试剂盒，包括：如SEQ ID No.3所示的上游引物和如SEQ ID No.4所示的下游引物。本发明还提供了一种牛源成分的检测方法。本发明提供了一种用于检测羊源成分的试剂盒，包括：如SEQ ID No.5所示的上游引物和如SEQ ID No.6所示的下游引物。本发明还提供了一种羊源成分的检测方法。本发明具有较高的特异性，能够保证检测方法的灵敏度和准确性。
【专利说明】肉与肉制品中猪源成分的检测方法、牛源成分的检测方法 及羊源成分的检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于食品检测【技术领域】，尤其涉及一种肉与肉制品中猪源成分的检测方 法、牛源成分的检测方法及羊源成分的检测方法。
【背景技术】
[0002] 随着市场经济的不断深入发展，部分不法商贩为了谋求不正当利益，在肉或肉制 品中掺杂其他价格便宜的肉种，在肉及肉制品市场出现了一种以次充好、以假乱真的现象。 肉或肉制品中掺有标称以外的其他价格便宜的动物源性成分，有的甚至全部为标称以外的 其他价格便宜的动物源性成分，这极大地损害了消费者的利益，扰乱了流通市场秩序和健 康发展，同时也对民族宗教信仰造成一定的潜在冲突。
[0003] 传统一般采用感官方法对肉或肉制品的色泽、气味、组织形状等参数进行判断，但 是其可靠性较差，尤其是添加了色素和芳香剂等添加剂或者经过其它加工处理的肉及肉制 品而言，感官方法判断准确性更低。
【发明内容】
[0004] 有鉴于此，本发明的目的在于提供一种肉与肉制品中猪源成分的检测方法、牛源 成分的检测方法及羊源成分的检测方法，本发明提供的检测方法结果准确、可靠。
[0005] 本发明提供了一种用于检测肉与肉制品中猪源成分的试剂盒，包括：如SEQ ID No. 1所示的上游引物和如SEQ ID No. 2所示的下游引物。
[0006] 本发明以Genbank上已经登录公布的所有猪的Cytb基因序列为基础，运用生物软 件DnaStar进行序列比对分析，找出来自不同国家、地区、品种猪、的Cytb基因种内保守序 列区域，用于设计上下游扩增引物，将所设计出的各物种PCR扩增引物进行再次比对，排除 种间交叉性，保证扩增的特异性。同时，找出猪的Cytb基因序列中共有的同源序列，设计哺 乳动物检测引物，用以对各检测体系进行监控。最后，将获得的各物种上下游扩增引物序列 提交Gembank，进行Blast确认，以确保所设计的引物序列对目前已经公布的DNA序列没有 非特异性检测扩增，并选定上游引物和下游引物。本发明选用特定的上游引物和下游引物 用于检测肉与肉制品中的猪源成分，其具有良好的特异性，从而能够实现对猪源成分的检 测。
[0007] 以如SEQ ID No. 1所示的上游引物和如SEQ ID No. 2所示的下游引物进行PCR扩 增，其扩增位点及扩增片段大小如表1所示：
[0008] 表1猪源成分的扩增位点及扩增片段大小
[0009]
【权利要求】
1. 一种用于检测肉与肉制品中猪源成分的试剂盒，其特征在于，包括：如SEQ ID No. 1 所示的上游引物和如SEQ ID No. 2所示的下游引物。
2. -种肉与肉制品中猪源成分的检测方法，包括以下步骤： 提取肉样品或肉制品样品的DNA ; 以所述DNA为模板进行PCR扩增，所述PCR扩增反应体系中的上游引物如SEQ ID No. 1 所示，下游引物如SEQ ID No. 2所示； 对所述PCR扩增产物进行电泳，鉴定所述扩增产物。
3. 根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，还包括： 对所述扩增产物进行酶切。
4. 一种用于检测肉与肉制品中牛源成分的试剂盒，其特征在于，包括：如SEQ ID No. 3 所示的上游引物和如SEQ ID No. 4所示的下游引物。
5. -种肉与肉制品中牛源成分的检测方法，包括以下步骤： 提取肉样品或肉制品样品的DNA ; 以所述DNA为模板进行PCR扩增，所述PCR扩增反应体系中的上游引物如SEQ ID No. 3 所示，下游引物如SEQ ID No. 4所示； 对所述PCR扩增产物进行电泳，鉴定所述扩增产物。
6. 根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于，还包括： 对所述扩增产物进行酶切。
7. -种用于检测肉与肉制品中羊源成分的试剂盒，其特征在于，包括：如SEQ ID No. 5 所示的上游引物和如SEQ ID No. 6所示的下游引物。
8. -种肉与肉制品中羊源成分的检测方法，包括以下步骤： 提取肉样品或肉制品样品的DNA ; 以所述DNA为模板进行PCR扩增，所述PCR扩增反应体系中的上游引物如SEQ ID No. 5 所示，下游引物如SEQ ID No. 6所示； 对所述PCR扩增产物进行电泳，鉴定所述扩增产物。
9. 根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于，还包括： 对所述扩增产物进行酶切。
【文档编号】C12Q1/68GK104263836SQ201410532343
【公开日】2015年1月7日 申请日期:2014年10月10日 优先权日:2014年10月10日
【发明者】侯晓林, 王蕾, 郑志明, 陆彦, 孙英健, 姚华, 张永红 申请人:北京农学院