一种脱腥骨多肽的制备方法
【专利摘要】本发明公开一种脱腥骨多肽的制备方法，包括以下步骤(1)破碎动物骨骼；(2)清洗碎骨；(3)浓缩清洗液；(4)合并浓缩液及清洗后碎骨，水煮脱脂；(5)蛋白酶酶解；(6)浓缩干燥，即得。步骤(3)中使用N-取代聚丙烯酰胺或N-取代聚丙烯酰胺共聚物凝胶在10℃-25℃浓缩清洗液，LCST以上温度回收凝胶，反复利用。本发明使用温敏凝胶浓缩碎骨清洗液，在回收蛋白的同时脱除腥味物质和无机盐，所得产品腥味小，咸味轻，同时有效降低环境排污压力。
【专利说明】_种脱腊骨多肽的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及保健食品领域一种多肽的制备方法，特别涉及一种骨多肽的制备方 法。
【背景技术】
[0002] 多肽除了作为营养物具有促进机体新陈代谢、生长发育功能外，还赋予调节机体 生理功能和免疫力的双重功能。因此，多肽已经成为促进人体健康的重要产品，受到广大消 费者的青睐。
[0003] 骨多肽系利用动物骨骼经脱脂酶解等工艺得到的多肽产品，其保健功能显著优于 植物性多肽。骨多肽生产的基本方法是将动物鲜骨粉碎，清洗，脱脂后加入蛋白酶制剂对骨 液酶解，经干燥后获得。清洗是其中关键控制点和难点之一，清洗水量和次数少会导致最终 产品腥味重，口感偏咸，清洗水量大，蛋白损失可达15%-25%，甚至更多，实际生产对此难 以平衡。
[0004] 骨中腥味物质比较复杂，基础研宄显示氨气、三甲胺、甲硫醇、硫化氢、吲哚和杂环 氨含氮化合物、中级醛类、呋喃类等均可能造成腥味，其共同的特点是均为小分子化合物。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种骨多肽的制备方法。其包括以 下步骤：
[0006] (1)破碎动物骨骼；（2)清洗碎骨；（3)浓缩清洗液；(4)合并浓缩液及清洗后碎 骨，水煮脱脂；（5)蛋白酶酶解；(6)浓缩干燥，即得。其中，步骤⑴中骨骼与水的质量比为 1 : 1-1 : 3,破碎粒度 l-8cm;
[0007] 步骤（2)使用纯化水清洗破碎骨粒，纯化水用量为骨骼重量的2-10倍，优选为4 倍。
[0008] 步骤（3)使用温敏凝胶浓缩回收清洗液中的水溶性蛋白，温敏凝胶系聚N-取代丙 烯酰胺或聚N-取代丙烯酰胺共聚物，其基本结构为[-Ch 2-CHRCONR 'R"-]m[-A-]n[-B-]x， 其中R为H或1-5个碳原子的烷基；R'为H或2-5个碳原子的烷基；R"为2-5个碳原子的 烧基；优选R为H或甲基，R'和R' '为2-4个碳的烧基；-A-为可选基团，来源于亲水性单 体，优选的，-A-摩尔占比1-5% ;-B-基团来源于单体双功能交联剂，摩尔占比0.5-10%。 η可以为0，m和X的变动范围比较宽，根据单体和交联剂摩尔比确定。优选凝胶为聚N-异 丙基丙烯酰胺、聚（N-异丙基丙烯酰胺-Co-甲基丙烯酸）钠盐，以N，N'-亚甲基双丙烯 酰胺（BIS)为交联剂。
[0009] 步骤（3)所用凝胶为颗粒状，其膨胀和收缩温度应在5°C范围内，最小可膨胀为其 原始体积的5倍。步骤（3)浓缩时温度应低于所用温敏凝胶的最低临界相变温度（LCST)， 优选 10°C -25°C。
[0010] 步骤（3)所用温敏凝胶膨胀后可升温收缩，回收利用，收缩温度高于最低临界相 变温度（LCST)。其收缩后体积为膨胀体积的5%-20%。可使用温敏凝胶反复浓缩，直至蛋 白浓度达15% -25%。
[0011] 步骤（3)浓缩使用的设备为双层圆柱状大桶，内层大桶盛装温敏凝胶，侧壁开40 目筛孔，并可自由从外层桶中取出，搅拌桨深入内层桶以便搅动温敏凝胶。
[0012] 步骤（4)中水煮脱脂温度为80-120°C，时间2-8h，优选为110°C，3h ;
[0013] 步骤（5)中所采用的酶解方式是加入木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶或风味蛋 白酶中的一种或两种，如果采用单酶酶解，木瓜蛋白酶的用量为骨骼重量的1. 0%。-2. 0%。， 优选为1.5%。。胃蛋白酶的用量为骨骼重量的1.0%-2.0%，优选为1. 5%。胰蛋白酶的用量 为骨骼重量的1. 〇% -2. 0%，优选为1. 5%。风味蛋白酶的用量为骨骼重量的1. 5%。-3. 0%。， 优选为2. 0%。。如果采用双酶酶解，最佳方案为先用木瓜蛋白酶酶解，再用风味蛋白酶酶 解；
[0014] 步骤（6)中浓缩骨液相对密度为I. lg/ml?I. 3g/ml，采用的喷雾干燥条件为进风 温度为150°C?170°C，排风温度为65°C?85°C。
[0015] 与现有技术相比，本发明具有以下优点和有益效果：
[0016] (1)本发明所得产品蛋白回收率和（多肽）含量高。使用温敏凝胶回收碎骨清洗 步骤中损失的蛋白，提高了蛋白回收率，同时除去了分子量低于10, 〇〇〇道尔顿的小分子水 溶性杂质，提高了产品的蛋白（多肽）含量。
[0017] (2)本发明所得产品腥味小，含盐量低，口感和色泽好。使用温敏凝胶基本脱除了 分子量小于500的腥味物质，降低了骨中带入的无机盐含量，极大地提高了产品的可口度。
[0018] (3)本发明使工艺排污量减小，避免废水富营养化，有利于环境净化，同时凝胶可 回收反复利用，成本低，效率高。
【具体实施方式】
[0019] 下面详细叙述本发明的实施例，需要说明的是，本实施例是叙述性的，不是限定性 的，不能以此限定本发明的保护范围。
[0020] 比较实施例1
[0021] 分别采用不同清洗方式进行实验，比较最终产品的收率、多肽含量、气味、色泽。步 骤如下：
[0022] (1)破碎动物骨骼；（2)清洗碎骨；(3)脱脂；(4)蛋白酶酶解；（5)浓缩干燥，即得。
[0023] 步骤（2)中采用的清洗（回收）方式及对应获得的产品如表中所示：
[0024]
【权利要求】
1. 一种骨多肽的制备方法，包括以下步骤：（1)破碎动物骨骼；（2)清洗碎骨；（3)浓缩 清洗液；(4)合并浓缩液及清洗后碎骨，水煮脱脂；(5)蛋白酶酶解；(6)浓缩干燥，即得，其 特征在于，步骤（3)使用聚丙烯酰胺温敏凝胶浓缩回收清洗液中的水溶性蛋白。
2. 根据权利要求1所述骨多肽的制备方法，其特征在于，所述聚丙烯酰胺温敏凝胶基 本结构为[_CH2-CHRCONR 'R"-]n[-A-]m[-B-]p，其中R为H或1-5个碳原子的烷基；R'为 H或2-5个碳原子的烷基；R"为2-5个碳原子的烷基；优选R为H或甲基，R'和R' '为2-4 个碳的烧基；-A-为可选基团，来源于亲水性单体，优选的，-A-摩尔占比1-5% ;_B_基团来 源于单体双功能交联剂，摩尔占比0. 5% -10%。
3. 根据权利要求1所述的骨多肽的制备方法，其特征在于，所述聚丙烯酰胺温敏凝胶 为聚N-异丙基丙烯酰胺凝胶。
4. 根据权利要求1所述的骨多肽的制备方法，其特征在于，所述聚丙烯酰胺温敏凝胶 为聚（N-异丙基丙烯酰胺-co-甲基丙烯酸）钠盐。
5. 根据权利要求3或4所述的骨多肽的制备方法，其特征在于，所述的聚N-异丙基丙 烯酰胺凝胶和聚（N-异丙基丙烯酰胺-co-甲基丙烯酸）钠盐采用N，N'-亚甲基双丙烯 酰胺（BIS)为交联剂制得。
6. 根据权利要求1所述的骨多肽的制备方法，其特征在于，步骤⑶浓缩时温度低于所 用温敏凝胶的最低临界相变温度，优选l〇°C -25°C。
7. 根据权利要求1所述的骨多肽的制备方法，其特征在于，步骤（3)使用温敏凝胶反复 浓缩，直至蛋白浓度达15% -25%。
8. 根据权利要求1所述的骨多肽的制备方法，其特征在于，步骤（4)蒸煮脱脂温度 100°C _120°C，时间2-6小时；步骤（5)中所使用的蛋白酶选自木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋 白酶和风味蛋白酶中的一种或两种；步骤（6)中浓缩骨液相对密度为1. lg/ml-1. 3g/ml，采 用的喷雾干燥条件为进风温度为150°C _170°C，排风温度为65°C -85°C。
9. 根据权利要求8所述的骨多肽的制备方法，其特征在于，步骤（5)中所使用的蛋白酶 为木瓜蛋白酶和风味蛋白酶。
10. -种骨多肽，其特征在于，该骨多肽是根据权利要求1-9中任意一项所述的方法制 备得到的。
【文档编号】A23J1/10GK104489238SQ201410842376
【公开日】2015年4月8日 申请日期:2014年12月24日 优先权日:2014年12月24日
【发明者】林波, 于秀玲, 明跃升, 宫晓辉, 韩风雨, 孔新颖, 李洪泽 申请人:内蒙古天奇生物科技有限公司, 内蒙古天奇中蒙制药股份有限公司, 赤峰陆尔草中蒙药科技有限公司