一种以太行菊为主要原料的防霉抗氧化食品保鲜剂的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于食品领域，涉及食品保鲜剂，具体涉及一种以太行菊为主要原料的防 霉抗氧化食品保鲜剂。
【背景技术】
[0002] 食品保鲜剂是指用于防止食品在储存、流通过程中，由于微生物繁殖引起的变质， 或由于储存销售条件不善，食品内在品质发生劣变、色泽下降，为提高保存期，延长食用价 值而在食品中使用的添加剂。
[0003] 太行菊，又称野菊花，为菊科太行菊属下的一个种，多年生草本植物。生于山坡岩 石上，为中国特有。太行菊为国家第二批珍稀濒危保护植物，与太行花、独根草并称为三大 绝壁奇花。太行菊产在南太行的山西陵川、晋城、河南济源、新乡、辉县、林州市茶店镇等太 行山区。据科学研究，太行菊清肝明目比菊花效果要好。太行菊富含黄酮等抗氧化成分。
[0004] 重叶莲为毛茛科植物太白美花草的全草。夏季采收，阴干。原植物为多年生草本， 全体无毛。根茎暗褐色，有多数须根。羽状复叶;基生叶3~5枚，具长柄，基部扩大成鞘状，小 叶片羽状深裂，轮廓近圆形，常呈覆瓦状重迭;茎生叶具鞘状短柄。花单一，顶生；萼片5,带 蓝紫色；花瓣7~13，白色，近倒卵形，基部有短爪，橘红色;雄蕊多数；心皮多数，有胚珠一 颗。瘦果多数，聚合成球果状。生于高山山坡草丛。分布陕西等地。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供一种以太行菊为主要原料的防霉抗氧化食品保鲜剂，该防 霉抗氧化食品保鲜剂主要原料为天然植物太行菊和重叶莲，该提取物具有非常强的自由基 清除作用和防霉变作用。
[0006] 上述目的是通过如下技术方案实现的：
[0007] -种防止食品氧化和霉变的太行菊提取物，由以下步骤制备：（a)将干燥的太行菊 和重叶莲混合，粉碎，用60~70 %乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液； (b)对步骤(a)浓缩液依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用大孔树脂富集，先用5~15%乙 醇冲洗10~14个柱体积除去大极性物质，再用65~75%乙醇洗脱11~15个柱体积，收集65 ~75 %乙醇洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥；其中，重叶莲占太行菊与重叶莲总重的5 %~ 15%〇
[0008] 进一步地，太行菊提取物制备方法中步骤(a)中所述热回流提取采用的乙醇浓度 为 65%。
[0009] 进一步地，所述的太行菊提取物制备方法中，步骤(C)中所述大孔树脂为AB-8型大 孔树脂。
[0010] 进一步地，所述的太行菊提取物制备方法中，步骤(C)中先用10%乙醇冲洗12个柱 体积除去大极性物质。
[0011] 进一步地，所述的太行菊提取物制备方法中，步骤(c)中除去大极性物质后，再用 70 %乙醇洗脱13个柱体积，收集70 %乙醇洗脱液。
[0012] -种防霉抗氧化食品保鲜剂，含有权利要求1~5任一所述的太行菊提取物。
[0013] 本发明的有益效果：
[0014] 本发明提供的防霉抗氧化食品保鲜剂主要原料为天然植物太行菊和重叶莲，该提 取物具有非常强的自由基清除作用和防霉变作用，对食品的防霉抗氧化效果非常好。
【具体实施方式】
[0015] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0016] 药材来源:药材太行菊和重叶莲购自安徽亳州中药材市场。
[0017]主要试剂:食品级乙醇购自上海凌峰化学试剂有限公司；AB-8型大孔树脂购自天 津波鸿树脂有限公司；乙腈为HPLC级，购于TEDIA;甲酸为HPLC级，购于TEDIA;色谱用纯净水 为哇哈哈纯净水。所用试剂和材料均为可以购买到的常规商品。
[0018]实施例1:提取物1的制备
[0019] (a)将5kg干燥的太行菊和重叶莲（占总重10%)混合，粉碎，用65%乙醇热回流提 取3次(25LX3次），每次2小时，合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液(3L);(b)对步骤(a) 浓缩液依次用石油醚(3L X 3次）、乙酸乙酯（3L X 3次)和水饱和的正丁醇(3L X 3次)萃取，分 别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用AB-8型大孔树 脂富集，先用10%乙醇冲洗12个柱体积除去大极性物质，再用70 %乙醇洗脱13个柱体积，收 集70 %乙醇洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥。
[0020]实施例2:提取物2的制备
[0021] (a)将5kg干燥的太行菊和重叶莲（占总重5% )混合，粉碎，用60 %乙醇热回流提取 3次(25LX3次），每次2小时，合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液(3L);(b)对步骤(a)浓 缩液依次用石油醚(3LX3次）、乙酸乙酯(3LX3次)和水饱和的正丁醇(3LX3次)萃取，分别 得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用AB-8型大孔树脂 富集，先用5 %乙醇冲洗14个柱体积除去大极性物质，再用65 %乙醇洗脱15个柱体积，收集 65 %乙醇洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥。
[0022]实施例3:提取物3的制备
[0023] (a)将5kg干燥的太行菊和重叶莲（占总重15 % )混合，粉碎，用70 %乙醇热回流提 取3次(25LX3次），每次2小时，合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液(3L);(b)对步骤(a) 浓缩液依次用石油醚(3L X 3次）、乙酸乙酯（3L X 3次)和水饱和的正丁醇(3L X 3次)萃取，分 别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用AB-8型大孔树 脂富集，先用15%乙醇冲洗10个柱体积除去大极性物质，再用75 %乙醇洗脱11个柱体积，收 集75 %乙醇洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥。
[0024]实施例4:实施例1的对比，不含重叶莲
[0025] (a)将5kg干燥的太行菊粉碎，用65%乙醇热回流提取3次(25L X 3次），每次2小时， 合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液（3L);(b)对步骤(a)浓缩液依次用石油醚（3LX 3 次）、乙酸乙酯（3LX 3次)和水饱和的正丁醇（3LX 3次)萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸 乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用AB-8型大孔树脂富集，先用10%乙醇冲洗 12个柱体积除去大极性物质，再用70 %乙醇洗脱13个柱体积，收集70 %乙醇洗脱液，减压浓 缩，喷雾干燥，得提取物4。
[0026]实施例5:实施例1的对比，重叶莲占总重
[0027] (a)将5kg干燥的太行菊和重叶莲（占总重20 % )混合，粉碎，用65 %乙醇热回流提 取3次(25LX3次），每次2小时，合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液(3L);(b)对步骤(a) 浓缩液依次用石油醚(3L X 3次）、乙酸乙酯（3L X 3次)和水饱和的正丁醇(3L X 3次)萃取，分 别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用AB-8型大孔树 脂富集，先用10%乙醇冲洗12个柱体积除去大极性物质，再用70 %乙醇洗脱13个柱体积，收 集70 %乙醇洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥，得提取物5。
[0028]实施例6:自由基清除作用试验
[0029] 按照实施例1~5制备得到提取物1~5。分别用纯净水溶解，配制成每毫升含Img提 取物的供试品溶液1~5。
[0030] 参考Fenton反应体系模型，利用H2O2与Fe 2+混合产生· OH，但由于· OH具有很高的 反应活性，存活时间短，若在体系中加入水杨酸，就能有效地捕捉· 0H，并产生有色产物。该 产物在波长510nm处有强吸收，若在反应体系中加入具有清除· OH功能的被测物，便会与水 杨酸竞争· 0H，而使有色产物生成量减少。采用固定反应时间法，在相同体积的反应体系 (8·8mmol · L-1IfeCfeCLSmLdmmol · L-1FG2+CLSmLdmmol · L-1 水杨酸-乙醇溶液0.4mL)中分别 加入供试品溶液1~5各0.1 mL，并以蒸馏水为参比，与试剂空白液比较，在510nm处测量各浓 度下的吸光度Ax，便能测定被测物对· OH的清除作用，计算公式为：
[0031 ]消除率（％ ) = (Aq-Ax)/Aq X 100%。
[0032]其中Ao为空白对照液的吸光度，Ax为加入供试品溶液后的吸光度。
[0033]试验结果表明，供试品溶液1~3均具有非常高的自由基清除作用，清除率约为 85% ;供试品溶液4和5对自由基清除率仅为22%，显著低于供试品溶液1~3。
[0034]实施例7:防霉作用试验
[0035]按照实施例1~5制备得到提取物1~5。分别用纯净水溶解，配制成每毫升含Img提 取物的供试品溶液1~5。
[0036] 量取IOmL新鲜牛奶置于经过灭菌处理的塑料杯中，分别添加供试品溶液1~5各 ImL(液面直径5. Ocm)，于35 °C培养箱中自然生菌，以添加 ImL质量体积分数0.01 %山梨酸钾 溶液的新鲜牛奶作为阳性对照，以不添加任何物质的新鲜牛奶作为空白对照。培养72h后， 按照文献方法(杜敏华等，超声波提取油菜花黄色素及其防腐作用研究，中国油料作物学 报，2007年02期)观察牛奶表面的霉变程度，根据菌斑数量和级别计算病情指数，并统计霉 菌孢子数。按直径(D)可将霉斑大小分为5个级别：I级，D < Imm; Π 级，lmm〈D < 2mm; ΙΠ 级，2_ 〈0仝3111111;1￥级，3111111〈0<6111111;/^级，0>61111]1。病情指数(1〇的计算公式为 ：
[0037] K= Σ (各级霉斑数X各级级别)/M
[0038] 其中，M =观察样面面积/各级霉斑面积X最高级别=(π X625)/(31 X9) X 5 = 347。
[0039]向培养72h的牛奶样品中加入玻璃球，振荡搅拌均匀后，取1滴牛奶于载玻片上制 片，每个样品制片3张，在SZXlO显微镜（日本Olympus公司生产）下观察，每个载玻片随机选 取3个视野，统计霉菌孢子数，计算平均值。结果见表1。
[0040]表1提取物1~5防霉变能力分析结果(X±SD，n = 9)
[0042] 结果表明：供试品溶液1~3能使牛奶中各级霉斑数总体上均减少，霉斑总数也减 少，病情指数也随之减小，牛奶中的霉菌孢子数也减少。供试品溶液1~3的防霉效果接近于 阳性对照山梨酸钾。供试品溶液4和5防霉效果较差，明显不如供试品溶液1~3。
[0043] 上述实施例的作用在于说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明的保护 范围。本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换， 而不脱离本发明技术方案的实质和保护范围。
【主权项】
1. 一种防止食品氧化和霉变的太行菊提取物，其特征在于由以下步骤制备：（a)将干燥 的太行菊和重叶莲混合，粉碎，用60~70%乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味得 到浓缩液；（b)对步骤(a)浓缩液依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到 石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用大孔树脂富集，先用5 ~15%乙醇冲洗10~14个柱体积除去大极性物质，再用65~75 %乙醇洗脱11~15个柱体 积，收集65~75%乙醇洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥;其中，重叶莲占太行菊与重叶莲总重的 5% ~15%〇2. 根据权利要求1所述的太行菊提取物，其特征在于：步骤(a)中所述热回流提取采用 的乙醇浓度为65 %。3. 根据权利要求1所述的太行菊提取物，其特征在于:步骤(c)中所述大孔树脂为AB-8 型大孔树脂。4. 根据权利要求1所述的太行菊提取物，其特征在于:步骤(c)中先用10%乙醇冲洗12 个柱体积除去大极性物质。5. 根据权利要求1所述的太行菊提取物，其特征在于:步骤(c)中除去大极性物质后，再 用70 %乙醇洗脱13个柱体积，收集70 %乙醇洗脱液。6. -种防霉抗氧化食品保鲜剂，其特征在于:含有权利要求1~5任一所述的太行菊提 取物。
【专利摘要】本发明公开了一种以太行菊为主要原料的防霉抗氧化食品保鲜剂，含有太行菊提取物。太行菊提取物由以下步骤制备：(a)将干燥的太行菊和重叶莲混合，粉碎，用60～70％乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液；(b)对步骤(a)浓缩液依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(c)正丁醇萃取物用大孔树脂富集，先用5～15％乙醇冲洗10～14个柱体积除去大极性物质，再用65～75％乙醇洗脱11～15个柱体积，收集65～75％乙醇洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥；其中，重叶莲占太行菊与重叶莲总重的5％～15％。
【IPC分类】A23L3/3472
【公开号】CN105707645
【申请号】CN201610124280
【发明人】吴正锋
【申请人】吴正锋