本发明涉及猪用抗霉菌毒素饲料添加剂，还涉及所述猪用抗霉菌毒素饲料添加剂的制备方法及其在脱除猪饲料中霉菌毒素的应用，属于猪用抗霉菌毒素饲料添加剂的制备领域。
背景技术：
霉菌及霉菌毒素污染是现代饲料工业和畜牧业需要共同面对的生产问题。由于谷物是畜禽的主要饲料粮，霉菌毒素的污染会严重降低畜禽的生产性能，且多数霉菌毒素具有强烈致癌性、致突变性，容易通过食物链危害人类健康甚至生命。另外，在当前日益高涨的饲料原料价格形势下，受霉菌毒素污染的饲料原料及饲料无法正常使用，将使饲料及养殖企业蒙受巨大经济损失。因此，尽可能的消除由于诸多因素导致的饲料原料及饲料中霉菌和霉菌毒素的污染，提高饲料质量，保障畜禽生产性能及畜产品安全性，对于现代饲料工业和畜牧业十分必要。
目前市场上的脱毒剂以霉菌毒素吸附剂为主，但霉菌毒素吸附剂在饲料工业和畜牧业中的迅速推广，造成当前霉菌毒素吸附剂产品繁杂，品质参差不齐。因此，开发一种能够有效去除饲料中多种霉菌毒素的猪用抗霉菌毒素饲料添加剂，对现代畜牧业具有重要的意义。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题是提供一种猪用抗霉菌毒素饲料添加剂，该猪用抗霉菌毒素饲料添加剂能够有效脱除饲料中的多种霉菌毒素，防止霉菌毒素对猪只产生的毒害作用。
为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：
本发明首先公开了一种猪用抗霉菌毒素饲料添加剂，包括以下各组分：鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)菌剂、煅烧贝壳和玉米秸秆炭；各组分的重量份为：鼠李糖乳杆菌菌剂1-30份、煅烧贝壳10-80份、玉米秸秆炭1-50份；优选的，各组分的重量份为：鼠李糖乳杆菌菌剂12份、煅烧贝壳70份、玉米秸秆炭45份。
本发明所述鼠李糖乳杆菌的保藏编号为ATCC 53103。本发明对鼠李糖乳杆菌的具体菌株没有特殊限制，所述的鼠李糖乳杆菌可以是市售商品，也可以通过培养获得，不影响本发明猪用抗霉菌毒素饲料添加剂的实施；但为达到更好的效果，所述鼠李糖乳杆菌的活菌数要求在200亿个/克以上。
本发明进一步公开了一种所述猪用抗霉菌毒素饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤：将煅烧贝壳、玉米秸秆炭粉碎，然后与鼠李糖乳杆菌混合均匀，即得。本发明对所述粉碎没有特殊限制，可以根据实际需要进行调整，作为参考，粉碎至100-300目。
本发明由鼠李糖乳杆菌菌剂、煅烧贝壳和玉米秸秆炭制备的猪用抗霉菌毒素饲料添加剂能够吸附霉菌毒素，使毒素经过动物肠道时不被动物吸收，直接排出体外。在鼠李糖乳杆菌、煅烧贝壳和玉米秸秆炭的基础上添加以下原料时，能够显著提高对霉菌毒素的去除率：栀子和牡丹皮；各组分的重量份为：栀子10-35份、牡丹皮10-30份；优选的，各组分的重量份为：栀子32份、牡丹皮25。
栀子，为茜草科植物栀子Gardenia jasminoides Ellis的干燥成熟果实。性味苦，寒。归心、肺、三焦经。功能主治：泻火除烦，清热利尿，凉血解毒。
牡丹皮，为毛茛科植物牡丹Paeonia suffruticosa Andr.的干燥根皮。性味苦、辛，微寒。归心、肝、肾经。功能主治：清热凉血，活血化瘀。
栀子中含有如羟异栀子苷、栀子酮苷等多种环烯醚萜类，多糖、有机酸类等多种生物活性成分；牡丹皮中含有酚及酚苷类、甾醇及其苷类、黄铜、有机酸等多种有效成分。进一步添加栀子和牡丹皮能够进一步提高本发明猪用抗霉菌毒素饲料添加剂对霉菌毒素的吸附效果，还有助于提高猪的生产性能。
本发明还公开了一种上述猪用抗霉菌毒素饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤：将煅烧贝壳，玉米秸秆炭、栀子、牡丹皮粉碎，然后与鼠李糖乳杆菌菌剂混合均匀，即得。本发明对所述粉碎没有特殊限制，可以根据实际需要进行调整，作为参考，粉碎至100-300目。
本发明将鼠李糖乳杆菌菌剂、煅烧贝壳和玉米秸秆炭制备的猪用抗霉菌毒素饲料添加剂对霉菌毒素的有一定的脱除效果，对玉米赤霉烯酮、AFB1、伏马毒素B1、呕吐毒素和T-2毒素的吸附率分别为64.31％、70.62％、65.33％、69.65％和70.24％；而在鼠李糖乳杆菌、煅烧贝壳和玉米秸秆炭的基础上进一步添加栀子和牡丹皮，对霉菌毒素的脱除率显著提高，对玉米赤霉烯酮、AFB1、伏马毒素B1、呕吐毒素和T-2毒素的吸附率分别达到94.85％、98.13％、96.30％、95.74％和96.68％，霉菌毒素的脱除率比添加其他原料的添加剂组提高了19个百分点以上，而且与毒素结合更紧密，解吸率显著降低，脱毒更为彻底。证明，鼠李糖乳杆菌、煅烧贝壳、玉米秸秆炭与栀子、牡丹皮之间具有明显的协同增效作用。
本发明所述猪用抗霉菌毒素饲料添加剂能够应用于脱除猪饲料中的霉菌毒素。其中，所述猪用抗霉菌毒素饲料添加剂的添加量为猪饲料质量的0.1-1％；优选为0.2％。本发明所述霉菌毒素包括但不限于：玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、黄曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A、烟曲霉毒素、伏马毒素B1或T-2毒素中的任意一种或多种。
本发明所述猪用抗霉菌毒素饲料添加剂能够用于受霉菌毒素污染的玉米、谷物等原料及配合饲料等的脱毒，防止霉菌毒素对猪只产生的毒害作用。另外，本发明所述猪用抗霉菌毒素饲料添加剂不吸附营养元素，不影响猪只的正常生长，而且由于鼠李糖乳杆菌能够调节肠道内微生态的菌群平衡，以及栀子和牡丹皮中含有的多种生物活性成分，因此本发明猪用抗霉菌毒素饲料添加剂还能够提高猪的生产性能。
本发明在AFB1污染的基础日粮中添加本发明猪用抗霉菌毒素饲料添加剂饲喂仔猪，仔猪腹泻率仅2.5％，仔猪的平均日增重、平均日采食量和料重比与空白对照组差异不显著，而且仔猪的料重比略低于空白对照组，证明本发明猪用抗霉菌毒素饲料添加剂不仅能够有效脱除饲料中的AFB1，从而降低其对仔猪生长性能的危害，而且还能够提高仔猪的生长性能。而饲喂AFB1污染的基础日粮组仔猪食欲不振，背毛粗糙，腹泻率高达47.5％，且仔猪平均日增重、平均日采食量均显著低于空白对照组，料重比显著高于空白对照组，说明AFB1对仔猪生长性能有明显危害。
本发明技术方案与现有技术相比，具有以下有益效果：
本发明猪用抗霉菌毒素饲料添加剂的配伍合理，原料李糖乳杆菌、煅烧贝壳、玉米秸秆炭与栀子、牡丹皮之间具有明显的协同增效作用，不仅能够有效地吸附饲料中的霉菌毒素如黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、T-2毒素等，同时还能抑制霉菌的生长，防止霉菌毒素的产生，消除霉菌毒素对猪只的毒害作用，提高饲料报酬。另外，本发明猪用抗霉菌毒素饲料添加剂的无毒副作用，无污染，符合畜牧业发展的需要。
具体实施方式
下面结合具体实施例来进一步描述本发明，本发明的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但是应理解所述实施例仅是范例性的，不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改或替换均落入本发明的保护范围。
1、原料
鼠李糖乳杆菌，菌株保藏编号为ATCC 53103；
煅烧贝壳粉，购自天津鸿雁天山石业纳米技术有限公司。
预备实施例1玉米秸秆炭的制备
以玉米秸秆为原料，采用缺氧热解法，将秸秆洗净、风干粉碎后，填满于密封坩埚中，放入预热的马弗炉，在300-700℃厌氧加热6h，即得到玉米秸秆炭。
实施例1猪用抗霉菌毒素饲料添加剂
培养鼠李糖乳杆菌，要求活菌数在200亿个/克或以上。
按照以下比例称取各组分(Kg)：鼠李糖乳杆菌菌剂1、煅烧贝壳10、玉米秸秆炭1；
将煅烧贝壳、玉米秸秆炭粉碎至100目，然后与鼠李糖乳杆菌菌剂混合均匀，即得。
实施例2猪用抗霉菌毒素饲料添加剂
培养鼠李糖乳杆菌，要求活菌数在200亿个/克或以上。
按照以下比例称取各组分(Kg)：鼠李糖乳杆菌菌剂30、煅烧贝壳80、玉米秸秆炭50；
将煅烧贝壳、玉米秸秆炭粉碎至300目，然后与鼠李糖乳杆菌菌剂混合均匀，即得。
实施例3猪用抗霉菌毒素饲料添加剂
培养鼠李糖乳杆菌，要求活菌数在200亿个/克或以上。
按照以下比例称取各组分(Kg)：鼠李糖乳杆菌菌剂12、煅烧贝壳70、玉米秸秆炭45；
将煅烧贝壳、玉米秸秆炭粉碎至200目，然后与鼠李糖乳杆菌菌剂混合均匀，即得。
实施例4猪用抗霉菌毒素饲料添加剂
培养鼠李糖乳杆菌，要求活菌数在200亿个/克或以上。
按照以下比例称取各组分(Kg)：鼠李糖乳杆菌菌剂1、煅烧贝壳10、玉米秸秆炭1、栀子10、牡丹皮10；
将煅烧贝壳，玉米秸秆炭、栀子、牡丹皮粉碎至100目，然后与鼠李糖乳杆菌菌剂混合均匀，即得。
实施例5猪用抗霉菌毒素饲料添加剂
培养鼠李糖乳杆菌，要求活菌数在200亿个/克或以上。
按照以下比例称取各组分(Kg)：鼠李糖乳杆菌菌剂30份、煅烧贝壳80份、玉米秸秆炭50份、栀子35份、牡丹皮30；
将煅烧贝壳，玉米秸秆炭、栀子、牡丹皮粉碎至300目，然后与鼠李糖乳杆菌菌剂混合均匀，即得。
实施例6猪用抗霉菌毒素饲料添加剂
培养鼠李糖乳杆菌，要求活菌数在200亿个/克或以上。
按照以下比例称取各组分(Kg)：鼠李糖乳杆菌菌剂12、煅烧贝壳70、玉米秸秆炭45、栀子32、牡丹皮25；
将煅烧贝壳，玉米秸秆炭、栀子、牡丹皮粉碎至200目，然后与鼠李糖乳杆菌菌剂混合均匀，即得。
试验例1猪用抗霉菌毒素饲料添加剂脱除霉菌毒素的效果观察
1、实验方法
培养鼠李糖乳杆菌菌剂，要求活菌数在200亿个/克或以上。
按照以下组合分别制备猪用抗霉菌毒素饲料添加剂(g)：
添加剂1：鼠李糖乳杆菌菌剂12、煅烧贝壳70、玉米秸秆炭45；
添加剂2-8分别在添加剂1的基础上添加以下原料：
添加剂2：栀子32、姜黄25；
添加剂3：栀子32、茵陈25；
添加剂4：栀子32、牡丹皮25；
添加剂5：黄芩32、牡丹皮25；
添加剂6：茜草32、牡丹皮25；
添加剂7：马齿苋32、丁香25；
添加剂8：青蒿32、白术25。
各添加剂的制备方法同实施例6。对以上8组添加剂分别进行霉菌毒素的脱毒效果试验。霉菌毒素分别为玉米赤霉烯酮、黄曲霉毒素B1(AFB1)、呕吐毒素、T-2毒素、伏马毒素B1，取离心管加入l0ml上述霉菌毒素标准溶液(具体见表1)，再在离心管中分别加入上述10组添加剂样品25mg，使添加剂样品在溶液中的浓度为2.5mg/ml。同时设置空白组(未添加任何脱毒剂)，所有样品设2个重复。所有样品于37℃恒温水浴振荡器中以150r/min振荡吸附2h。而后，以3000r/min离心l0min，收集上清液，测定上清液中各霉菌毒素的含量并计算各霉菌毒素的吸附率Y(％)，Y＝100×(C0-C1)/C0；
然后在离心后的沉淀中加入l0ml pH 7.0的PBS缓冲溶液，于37℃，150r/min的恒温振荡水浴锅中振荡解吸30min，3000r/min离心l0min，收集上清液，同上法测定上清液中各霉菌毒素的含量并计算解吸率R(％)，R＝C2/(C0-C1)×100％；
其中，C0为吸附前各霉菌毒素的浓度(ng/ml)；C1为吸附后各霉菌毒素的浓度(ng/ml)；C2为解吸后各霉菌毒素的浓度(ng/ml)。
2、实验结果
不同添加剂对霉菌毒素的脱除效果见表1。
表1不同添加剂对霉菌毒素的脱除效果
结果表明，本发明将鼠李糖乳杆菌、煅烧贝壳和玉米秸秆炭制备的猪用抗霉菌毒素饲料添加剂对霉菌毒素的有一定的脱除效果，对玉米赤霉烯酮、AFB1、伏马毒素B1、呕吐毒素和T-2毒素的吸附率分别为64.31％、70.62％、65.33％、69.65％和70.24％；而进一步添加栀子和牡丹皮制备的添加剂4，对霉菌毒素的脱除率显著提高，对玉米赤霉烯酮、AFB1、伏马毒素B1、呕吐毒素和T-2毒素的吸附率分别达到94.85％、98.13％、96.30％、95.74％和96.68％，不同霉菌毒素的脱除率比添加其他原料的添加剂组提高了19个百分点以上，而且与毒素结合更紧密，解吸率显著降低，脱毒更为彻底。
以上结果证明，鼠李糖乳杆菌、煅烧贝壳、玉米秸秆炭与栀子、牡丹皮之间具有明显的协同增效作用。
试验例2猪用抗霉菌毒素饲料添加剂对仔猪生长性能的影响
选择健康、体重相近的杜×长×大杂交猪120头(平均体重25kg)，均随机分成3组(空白对照组、实验1组和实验2组)，空白对照组饲喂基础日粮，不添加任何添加剂；实验1组在基础日粮中添加AFB1(0.1mg/kg饲料)；实验2组在基础日粮中添加AFB1(0.1mg/kg饲料)，再添加本发明实施例6制备的猪用抗霉菌毒素饲料添加剂，添加量为0.2％(质量比)；各组的其他饲养条件均相同，连续饲喂60天，对试验猪进行日常观察和检测。实验结果见表2。
表2猪用抗霉菌毒素饲料添加剂对猪生长性能的影响
注：同列数据肩标不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)。
结果表明，实验1组仔猪食欲不振，背毛粗糙，腹泻率高达47.5％，而且仔猪的平均日增重、平均日采食量均显著低于空白对照组，料重比显著高于空白对照组，说明AFB1对仔猪生长性能有明显危害。而实验2组添加本发明猪用抗霉菌毒素饲料添加剂，仔猪腹泻率仅2.5％，仔猪的平均日增重、平均日采食量和料重比与空白对照组差异不显著，另外实验2组仔猪的料重比略低于空白对照组，证明本发明猪用抗霉菌毒素饲料添加剂不仅能够有效脱除饲料中的AFB1，降低其对仔猪生长性能的危害，而且还能够提高仔猪的生长性能。