本发明属于乳制品制造技术领域，涉及一种调制乳及其制备方法，具体涉及一种添加矿物质元素的调制乳及其制备方法。
背景技术：
调制乳，以不低于 80%的生羊乳或复原乳为主要原料，添加其他原料或食品添加剂或营养强化剂，采用适当的杀菌或灭菌等工艺制成的液体产品。现阶段的调制乳，具体还存在以下主要问题：
（1）现有添加矿物质元素的调制乳，对改善肠道内的菌落数无明显作用；
（2）现有添加矿物质元素的调制乳，不能抑制癌细胞的增殖。
技术实现要素：
本发明针对以上不足，提供一种添加矿物质元素的调制乳及其制备方法，实现以下发明目的：
（1）本发明的添加矿物质元素的调制乳，具有增加肠道内双歧杆菌和乳杆菌的菌落数，降低大肠杆菌和肠球菌的菌落数的作用；
（2）本发明制备的添加矿物质元素的调制乳，能够杀死B16（小鼠黑色素瘤细胞）癌细胞，具有抑制癌细胞增殖的作用；
（3）本发明制备的添加矿物质元素的调制乳，能够杀死THP-1（前骨髓性白血病细胞）；
（4）本发明制备的添加矿物质元素的调制乳，能够杀死Hacat（人角化细胞的肿瘤样细胞）癌细胞，具有抑制癌细胞增殖的作用；
（5）本发明制备的添加矿物质元素的调制乳，能够杀死A549（人肺腺癌细胞），具有抑制癌细胞增殖的作用。
为解决上述技术问题，采用以下技术方案：
一种添加矿物质元素的调制乳，其特征在于，包括以下原料：生羊乳、复合维生素、矿物质元素、低聚木糖、大豆低聚肽、乳化剂、木糖醇、微晶纤维素、法国蜗牛提取液、白萝卜汁、马齿苋汁、稳定剂、甜菊糖和食用香精。
所述的一种添加矿物质元素的调制乳，包括以下重量份的原料：生羊乳800-950份、复合维生素15-30份、矿物质元素10-16份、低聚木糖1-8份、大豆低聚肽1-7份、乳化剂1-3份、木糖醇2-8份、微晶纤维素0.02-0.2份、法国蜗牛提取液0.1-0.8份、白萝卜汁0.1-0.8份、马齿苋汁0.15-0.5份、稳定剂1-3份、甜菊糖0.01-0.3份和食用香精0.5-1.2份。
所述的一种添加矿物质元素的调制乳，包括以下重量份的原料：生羊乳900份、复合维生素25份、矿物质元素12份、低聚木糖2份、大豆低聚肽2份、乳化剂1.2份、木糖醇4份、微晶纤维素0.1份、法国蜗牛提取液0.5份、白萝卜汁0.4份、马齿苋汁0.35份、稳定剂2.5份、甜菊糖0.1份和食用香精0.6份。
所述法国蜗牛提取液，胶原蛋白含量11-15%，葡萄糖醛酸0.4-7.2%，乙醇酸≥0.5%。
所述白萝卜汁用新鲜的白萝卜，经打浆破碎、加热至80-90℃，再进行压榨，制得白萝卜汁；所述马齿苋汁是由马齿苋清洗干净，干蒸5-7min，置榨汁机内榨汁制得。
所述乳化剂为磷脂、卡拉胶、刺槐豆胶、硬脂酰乳酸钠、硬脂酰乳酸钙、双乙酰酒石酸单甘油酯、蔗糖脂肪酯或蒸馏单甘酯中的一种或任几种的组合。
一种添加矿物质元素的调制乳的制备方法，包括以下步骤：均质和超高温杀菌步骤。
所述均质步骤，第一阶段的均质压力为180-200bar，第二阶段的均质压力为20-40bar。
所述超高温杀菌步骤，采用的均质温度为45-60℃。
所述超高温杀菌步骤，在直管式杀菌成套设备中进行超高温杀菌，杀菌温度控制在136-140℃，杀菌时间设置为1-5S。
本发明与现有技术相比，具有以下有益效果：
（1）本发明的添加矿物质元素的调制乳，具有防病保健作用，具有增加肠道内双歧杆菌和乳杆菌的菌落数，降低大肠杆菌和肠球菌的菌落数的作用；
（2）本发明制备的添加矿物质元素的调制乳，能够杀死B16（小鼠黑色素瘤细胞）癌细胞，具有抑制癌细胞增殖的作用，用添加矿物质元素的调制乳处理癌细胞株培养液4周，B16的死细胞比例为17.2-21.3%，对照组为0.24%；
（3）本发明制备的添加矿物质元素的调制乳，能够杀死THP-1（前骨髓性白血病细胞），具有抑制癌细胞增殖的作用，用添加矿物质元素的调制乳处理癌细胞株培养液4周，THP-1死细胞比例为20.1-26.1%，对照组为0.30%；
（4）本发明制备的添加矿物质元素的调制乳，能够杀死Hacat（人角化细胞的肿瘤样细胞）癌细胞，具有抑制癌细胞增殖的作用，用添加矿物质元素的调制乳处理癌细胞株培养液4周，Hacat死细胞比例为16.6-18.8%，对照组为0.07%；
（5）本发明制备的添加矿物质元素的调制乳，能够杀死A549（人肺腺癌细胞），具有抑制癌细胞增殖的作用，用添加矿物质元素的调制乳处理癌细胞株培养液4周，A549死细胞比例为27.9-32.1%，对照组为0.16%。
（6）本发明的制备的添加矿物质元素的调制乳，成分多样、功能全面，口感极佳，营养丰富、全面，酸甜可口，经常饮用能够延年益寿。
具体实施方式
实施例1一种添加矿物质元素的调制乳
按重量份，包括以下组份：
生羊乳800份、复合维生素15份、矿物质元素10份、低聚木糖1份、大豆低聚肽1份、乳化剂1份、木糖醇2份、微晶纤维素0.02份、法国蜗牛提取液0.1份、白萝卜汁0.1份、马齿苋汁0.15份、稳定剂1份、甜菊糖0.01份和食用香精0.5份；
所述法国蜗牛提取液，胶原蛋白含量11-15%，葡萄糖醛酸0.4-7.2%，乙醇酸≥0.5%；
所述矿物质元素，为钙、铁、锌、镁、碘；所述钙、铁、锌、镁、碘的比例为钙：铁：锌：镁：碘为 350-950：4-15：2-8：35-90：0.01-0.5；其中所述钙可以由乳钙、柠檬酸钙、磷酸钙、氯化钙、碳酸钙、乳酸钙的一种或几种钙制剂组合制成；所述铁可以由焦磷酸铁、葡萄酸亚铁、硫酸亚铁、乳酸亚铁、柠檬酸铁的一种或几种铁制剂组合制成；所述锌可以由柠檬酸锌、硫酸锌、葡萄糖酸锌、乳酸锌、氯化锌的一种或几种锌制剂组合制成；所述镁可以由硫酸镁、氯化镁、柠檬酸镁中的一种或几种制剂组合制成；碘可以由碘化钾提供；
所述乳化剂为磷脂、卡拉胶、刺槐豆胶、硬脂酰乳酸钠、硬脂酰乳酸钙、双乙酰酒石酸单甘油酯、蔗糖脂肪酯或蒸馏单甘酯中的一种或任几种的组合。
实施例2一种添加矿物质元素的调制乳
按重量份，包括以下组份：
生羊乳900份、复合维生素25份、矿物质元素12份、低聚木糖2份、大豆低聚肽2份、乳化剂1.2份、木糖醇4份、微晶纤维素0.1份、法国蜗牛提取液0.5份、白萝卜汁0.4份、马齿苋汁0.35份、稳定剂2.5份、甜菊糖0.1份和食用香精0.6份；
所述法国蜗牛提取液，胶原蛋白含量11-15%，葡萄糖醛酸0.4-7.2%，乙醇酸≥0.5%；
所述矿物质元素，为钙、铁、锌、镁、碘；所述钙、铁、锌、镁、碘的比例为钙：铁：锌：镁：碘为 350-950：4-15：2-8：35-90：0.01-0.5；其中所述钙可以由乳钙、柠檬酸钙、磷酸钙、氯化钙、碳酸钙、乳酸钙的一种或几种钙制剂组合制成；所述铁可以由焦磷酸铁、葡萄酸亚铁、硫酸亚铁、乳酸亚铁、柠檬酸铁的一种或几种铁制剂组合制成；所述锌可以由柠檬酸锌、硫酸锌、葡萄糖酸锌、乳酸锌、氯化锌的一种或几种锌制剂组合制成；所述镁可以由硫酸镁、氯化镁、柠檬酸镁中的一种或几种制剂组合制成；碘可以由碘化钾提供；
所述乳化剂为磷脂、卡拉胶、刺槐豆胶、硬脂酰乳酸钠、硬脂酰乳酸钙、双乙酰酒石酸单甘油酯、蔗糖脂肪酯或蒸馏单甘酯中的一种或任几种的组合。
实施例3一种添加矿物质元素的调制乳
按重量份，包括以下组份：
生羊乳950份、复合维生素30份、矿物质元素16份、低聚木糖8份、大豆低聚肽7份、乳化剂3份、木糖醇8份、微晶纤维素0.2份、法国蜗牛提取液0.8份、白萝卜汁0.8份、马齿苋汁0.5份、稳定剂3份、甜菊糖0.3份和食用香精1.2份；
所述法国蜗牛提取液，胶原蛋白含量11-15%，葡萄糖醛酸0.4-7.2%，乙醇酸≥0.5%；
所述矿物质元素，为钙、铁、锌、镁、碘；所述钙、铁、锌、镁、碘的比例为钙：铁：锌：镁：碘为 350-950：4-15：2-8：35-90：0.01-0.5；其中所述钙可以由乳钙、柠檬酸钙、磷酸钙、氯化钙、碳酸钙、乳酸钙的一种或几种钙制剂组合制成；所述铁可以由焦磷酸铁、葡萄酸亚铁、硫酸亚铁、乳酸亚铁、柠檬酸铁的一种或几种铁制剂组合制成；所述锌可以由柠檬酸锌、硫酸锌、葡萄糖酸锌、乳酸锌、氯化锌的一种或几种锌制剂组合制成；所述镁可以由硫酸镁、氯化镁、柠檬酸镁中的一种或几种制剂组合制成；碘可以由碘化钾提供；
所述乳化剂为磷脂、卡拉胶、刺槐豆胶、硬脂酰乳酸钠、硬脂酰乳酸钙、双乙酰酒石酸单甘油酯、蔗糖脂肪酯或蒸馏单甘酯中的一种或任几种的组合。
对实施例1-3的添加矿物质元素的调制乳对肠道菌群影响试验，具体材料、方法、结果如下。
1、材料
本发明添加矿物质元素的调制乳、KM小鼠、大肠杆菌培养基（EMB培养基）、肠球菌培养基（EC培养基）、双歧杆菌（BBL培养基）、乳酸杆菌培养基（MRS培养基）等。
2、方法
KM小鼠适应饲养5d后，开始正式试验。选用健康小鼠40只（体重15-20g），随机分为4组（每组10只），分别为：空白对照组、实施例1、实施例2和实施例3。各试验组分别灌胃100mg/kgbw本发明添加矿物质元素的调制乳，对照组灌胃00mg/kgbw等量生理盐水。
分别于灌胃前和灌胃第12天，无菌收集新鲜粪样0.15-0.35g，称重后放入干燥灭菌瓶中，以1:100比例，加无菌水，制成均匀悬液，再依次10倍递增稀释成一系列不同稀释度的含菌液至10-9，在3.5h内完成样品稀释处理。根据预试验的结果，选择3个合适菌液稀释度，分别取lml，于各选择性培养基上，每个稀释度设两个重复。待菌落长出后，对4种肠道菌群进行分析，结果以每克粪便中的菌落的对数表示（log10nCFU/g）。4种菌均在37.2℃下培养48h后计数。其中，双歧杆菌和乳杆菌厌氧培养，各种菌的鉴定技术方法:乳杆菌为镜检G+、形态规则的菌落；双歧杆菌为镜检G+，形态不规则的菌落；肠球菌为镜检G+形态不规则的菌落；大肠杆菌为紫黑色有或无绿色金属光泽，镜检为G-的菌落。
3、试验结果及分析
表1本发明添加矿物质元素的调制乳对肠道菌群的影响
结果表明，小鼠经连续灌胃本发明添加矿物质元素的调制乳12d后，肠道内的双歧杆菌、乳杆菌、大肠杆菌和肠球菌数量均不同程度地发生了有利变化。即双歧杆菌、乳杆菌有明显的增加趋势，而大肠杆菌、肠球菌有明显的减少趋势。未灌服受试物的空白对照组各菌群灌胃前后都无显著变化。
实施例4一种添加矿物质元素的调制乳制备方法
包括以下步骤：
（1）生羊乳预处理
将原料乳依次进行验收、净乳、冷藏、标准化处理、预热处理；
其中，所述冷藏温度为0-4℃；
所述预热温度为55-65℃；
所述标准化，使用高剪切乳化罐、调配罐、脱气机标准化设备，根据产品工艺进行调配，化料温度65-75℃，化料时间为25-35分钟。
（2）白萝卜汁和马齿苋汁制备
所述白萝卜汁用新鲜的白萝卜，经打浆破碎、加热至80-90℃，再进行压榨，制得白萝卜汁；
所述马齿苋汁是由马齿苋清洗干净，干蒸5-7min，置榨汁机内榨汁制得。
（3）初步混合
按实施例2所述配方比例称取复合维生素、低聚木糖、大豆低聚肽、乳化剂、木糖醇、微晶纤维素、法国蜗牛提取液、白萝卜汁、马齿苋汁、稳定剂、甜菊糖和食用香精，在10-20℃将上述物质依次添加到预处理后的生羊乳中，搅拌，静止10-14小时，得混合液。
（4）添加矿物质元素
按实施例所述配方比例称取矿物质元素，添加到上述混合液中，转速为20-50rad/min，搅拌10-15min。
（5）均质
第一阶段的均质压力为180-200bar，第二阶段的均质压力为20-40bar，采用的均质温度为45-60℃。
（6）超高温杀菌
在直管式杀菌成套设备中进行超高温杀菌，杀菌温度控制在136-140℃，杀菌时间设置为1-5S。
（7）无菌灌装
冷却，然后进行无菌灌装，灌装间空气洁净度达到10万级，空气中菌落总数＜30CFU/皿，并保持正压，包装得到成品。
实施例5一种添加矿物质元素的调制乳的制备方法
本实施例是在实施例4的基础上，仅改变均质、杀菌步骤中的参数，具体改变为：
实施例11本发明添加矿物质元素的调制乳抑制癌细胞的试验
按常规方法培养附着性癌细胞株，分成5组，对照组和实施例4、6-9。实施例4、6-9在培养液中添加本发明实施例4、6-9所述添加矿物质元素的调制乳，添加量为0.7mg/ml，对照组不作处理。培养4周后，用常规方法测定活细胞数，并与对照组比较，计算培养4周后的死细胞比例，实验处理数据如表2所示。
表2抑制癌细胞试验的死细胞比例
从表2的实验结果可以看出，本发明实施例4、6-9的添加矿物质元素的调制乳对癌细胞均有抑制作用，其中实施例7、8是较优的实施例。
本发明所述的维生素复合物按质量份计包含以下组分：维生素C 0.2份、维生素A 10份、维生素D3 6份、维生素E 30份、生物素0.8份、维生素K3 1.5份、维生素B1 5份、维生素B2 5.5份、维生素B6 4份、维生素B12 0.5份、叶酸3份、烟酸6份、泛酸0.5份、蛋氨酸0.5份、赖氨酸0.2份。
另外，本发明的制备的添加矿物质元素的调制乳，成分多样、功能全面，口感极佳，营养丰富、全面，酸甜可口，经常饮用能够延年益寿。
除非另有说明，本发明中所采用的百分数均为重量百分数，本发明所述的比例，均为质量比例。
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。