本发明涉及饲料脱霉剂领域，尤其涉及一种含有壳寡糖的复合脱霉剂及其制备方法。
背景技术：
：霉菌毒素是动物致病的一类常见毒素，动物发生霉菌毒素中毒时，一方面会导致肝、肾功能减弱，使其对病毒、细菌崩解碎片以及其产生的代谢产物的处理速率降低，造成病毒、细菌等停留在体液中的时间延长并不断积聚，使动物出现烦躁不安、食欲减退、渴欲增强、腹泻、等中毒症状。另一方面，动物霉菌毒素中毒后，肝脏会发生大、变性、坏死，影响机体内核酸复制，使机体免疫系统减弱，无法发挥正常的生理机能，霉菌毒素也能使淋巴细胞发生溶解，抑制细胞、体液免疫调节机能，免疫系统减弱、失去调节后会导致动物出现继发性感染，尽管动物场采取固定的免疫程序，但由于整个动物群抗体水平降低，会使其经常发生动物瘟、蓝耳病、附红细胞体病、伪狂犬病等疾病。在饲料中添加脱霉剂是用于避免发生动物霉菌毒素中毒的一种最常用方法，然而现有脱霉剂，只能吸附毒素，却忽视了动物在已经受到霉菌毒素侵害后的消炎和机体各种功能的修复问题，不能快速有效的解决动物霉菌毒素中毒的各种病症和恢复机体健康。技术实现要素：为了克服现有技术中的不足，本发明提供一种含有壳寡糖的复合脱霉剂及其制备方法。本发明采用的技术方案如下：一种含有壳寡糖的复合脱霉剂，包括以下质量分数的各组分：蒙脱石50～80％、壳寡糖5～30％、钾盐10～20％。本发明所述的一种含有壳寡糖的复合脱霉剂可进一步确定各组分质量分数为：蒙脱石80％、壳寡糖8％、钾盐12％。本发明所述的一种含有壳寡糖的复合脱霉剂可进一步确定各组分质量分数为：蒙脱石80％、壳寡糖5％、钾盐15％。本发明所述的一种含有壳寡糖的复合脱霉剂可进一步确定各组分质量分数为：蒙脱石70％、壳寡糖15％、钾盐15％。进一步的，壳寡糖的脱乙酰度≥90％、均分子量为200～1000da、纯度≥90％。进一步的，钾盐为饲料级氯化钾。进一步的，蒙脱石为300～500目、纯度≥95％。进一步的，本发明还包括所述一种含有壳寡糖的复合脱霉剂的制备方法：步骤为：(1)将蒙脱石原料在70～90℃条件下烘干，粉碎得到蒙脱石原料粉；(2)将壳寡糖粉末溶于去离子水中配制成质量浓度为5～10％的溶液；(3)将步骤(1)中的蒙脱石原料粉加入到步骤(2)中的壳寡糖溶液中，在混合设备中混合2～3h，搅拌速度为20～50rpm，然后减压干燥得到处理粉；(4)将钾盐加入到步骤(3)得到的处理粉中，搅拌混匀后得到脱霉剂。进一步的，本发明的一种含有壳寡糖的复合脱霉剂的制备方法中步骤(1)中的蒙脱石原料纯度≥95％，烘干粉碎至300～500目。进一步的，本发明还包括一种含有壳寡糖的复合脱霉剂的使用方法：饲料预防发霉：脱霉剂与饲料质量比为0.5～1‰；饲料已发霉：脱霉剂与饲料质量比为1～3‰。本发明的理论依据为：蒙脱石：可以有效清除饲料中的多种有害霉菌毒素，对黄曲霉素、赭曲霉素、玉米赤霉烯酮毒素、呕吐毒素等霉菌毒素有极强的吸附、固定、抑制作用，蒙脱石本身不被消化，携带各种毒物排出动物体外，保证动物的健康。壳寡糖：是n-乙酰氨基葡萄糖(glcnac)和氨基葡萄糖(glcn)以β-1，4糖苷键连接而成的同聚物或异聚物。壳寡糖自身氨基带正电荷，是目前已知的唯一碱性寡糖。壳寡糖一般以几丁质或壳聚糖为原料，经酶转化和化学方法脱乙酰基后制而得，它无毒，有较好的生物相容性和生物可降解性。壳寡糖的生物活性依赖于分子质量、聚合度、脱乙酰度。壳寡糖可抑制肿瘤生长，抑制炎症反应，有抗细菌、抗疟疾、抗真菌、抗氧化和增强免疫力等作用。在抑制炎症反应方面，壳寡糖能够抑制各类炎症介质的产生，还能抑制炎症区域细胞白介素、肿瘤坏死因子产生，减轻炎症损伤；另外壳寡糖在炎症过激部位抑制核转录因子，阻断炎症关键起始步骤及次级炎症反应。在抗氧化方面，壳寡糖结构所带氨基具有还原性，可直接清除部分活性氧，同时壳寡糖增强体内抗氧化系统，不仅提高超氧化物歧化酶、过氧化氢酶等抗氧化酶的活性，还可以诱导金属含硫蛋白的表达合成、保护巯基，提高机体总抗氧化能力。在增强免疫力方面，壳寡糖激活伤口周围更多的成纤细胞，增加成纤维细胞中胶原酶的释放，促进细胞有丝分裂，有利于伤口的愈合。钾盐：是体内一个重要的电解质，参与细胞的酸碱平衡、离子平衡、水平衡和渗透压的保持，在维持这些重要功能中起着举足轻重的作用。同时钾在几个酶控生化反应中起着激活和辅酶的作用，这些反应包括能量的转换和利用、蛋白质合成及碳水化合物代谢。本发明的复合脱霉剂壳寡糖能被吸附进蒙脱石的晶体结构中，成为一个特殊的稳定体系，在进入动物体后，壳寡糖与蒙脱石协同，对消化道内的致病菌，以及它们所产生的毒素、气体等有极强的吸附、固定、抑制作用，使其失去致病性；同时，壳寡糖在胃部低ph环境下溶解后，壳寡糖上的氨基会质子化(-nh4+)，质子化的壳寡糖很容易被钾离子置换出来，壳寡糖游离出来后，壳寡糖继续在动物肠道内发挥作用，促进损伤的消化道黏膜上皮再生，恢复肠蠕动的正常节律，维护肠道的输送和吸收，提高消化道的免疫功能；壳寡糖进入动物机体血液后，可消除霉菌毒素导致的各种炎症反应，进而提高机体免疫力。本发明复合脱霉剂既能消除霉菌毒素，又能最大程度的对动物机体产生修复作用，并能提高机体免疫力。极大的解决了普通脱霉剂质量不稳定或产品功能单一的缺点，另外本发明添加剂成分均为天然产物、具有安全、营养等特点，符合畜牧业发展的需要。具体实施方式下面结合具体实施例与效果试验对本发明做进一步阐述。(一)实施例实施例1本发明一种含有壳寡糖的复合脱霉剂，由以下质量分数的各组分组成：蒙脱石80％、壳寡糖8％、钾盐12％。其中蒙脱石纯度≥95％；壳寡糖的脱乙酰度≥90％、均分子量为200～1000da、纯度≥90％；钾盐为饲料级氯化钾。制备步骤为：(1)将蒙脱石原料在90℃条件下烘干，粉碎至300～500目得到蒙脱石原料粉；(2)将壳寡糖粉末溶于去离子水中配制成质量浓度为5％的溶液；(3)将步骤(1)中的蒙脱石原料粉加入到步骤(2)中的壳寡糖溶液中，在混合设备中混合3h，搅拌速度为50rpm，然后减压干燥得到处理粉；(4)将钾盐加入到步骤(3)得到的处理粉中，搅拌混匀后得到脱霉剂样品1。实施例2本发明一种含有壳寡糖的复合脱霉剂，由以下质量分数的各组分组成：蒙脱石80％、壳寡糖5％、钾盐15％。其中蒙脱石纯度≥95％；壳寡糖的脱乙酰度≥90％、均分子量为200～1000da、纯度≥90％；钾盐为饲料级氯化钾。制备方法同实施例1，最后得到的脱霉剂样品2。实施例3本发明一种含有壳寡糖的复合脱霉剂，由以下质量分数的各组分组成：蒙脱石50％、壳寡糖30％、钾盐20％。其中蒙脱石纯度≥95％；壳寡糖的脱乙酰度≥90％、均分子量为200～1000da、纯度≥90％；钾盐为饲料级氯化钾。制备方法同实施例1，最后得到的脱霉剂样品3。实施例4本发明一种含有壳寡糖的复合脱霉剂，由以下质量分数的各组分组成：蒙脱石70％、壳寡糖15％、钾盐15％。其中蒙脱石纯度≥95％；壳寡糖的脱乙酰度≥90％、均分子量为200～1000da、纯度≥90％；钾盐为饲料级氯化钾。制备方法同实施例1，最后得到的脱霉剂样品4。(二)脱霉剂对霉菌毒素的体外吸附效果试验选用普通蒙脱石和酵母细胞壁提取物分别作为对比样品a和对比样品b，与实施例样品进行体外脱霉效果评估。实验步骤如下：(1)将各实施例样品及对比样品a、对比样品b各取0.01g，分别加入到装有10ml霉菌毒素标准缓冲液的试管中；(2)将各试管在37℃水浴恒温振荡器中振荡1.5h；(3)将振荡后的各试管混合物在离心机2000rpm条件下离心10min，各取上清液200μl；(4)将各上清液中加入流动相(乙腈、去离子水组成，质量比为52：48)5ml，将上清液和流动相混合均匀；(5)各取步骤(4)中的混合物样品100μl，通过高压液相色谱法进行分析；(6)重复步骤(5)三次，取每种混合物样品分析结果平均值作结果分析。霉菌毒素标准缓冲液分为两种情况，分别模拟动物胃部和肠部的内部环境：(1)胃部环境：标准缓冲液组成为ph3.0柠檬酸缓冲液加霉菌毒素；(2)肠部环境：标准缓冲液组成为ph6.5磷酸氢钠缓冲液加霉菌毒素。霉菌毒素与标准缓冲液组成如表1所示：表1霉菌毒素组成项目含量单位黄曲霉毒素b1200μg/kg玉米赤霉烯酮2mg/kg呕吐毒素50mg/kg赭曲霉毒素200μg/kg烟曲霉毒素b12mg/kg试验结果如下：表2脱霉剂样品对霉菌毒素的吸附效果(ph＝3.0)表3脱霉剂样品对霉菌毒素的吸附效果(ph＝6.5)由如表2和表3可以看出，本发明含有壳寡糖的脱霉剂对霉菌毒素的吸收率均在80％以上，均远高于对比样品a、对比样品b的吸收率，其中实施例1的样品1对各种霉菌毒素的吸附率最高，均达到90％以上，效果都明显高于单纯蒙脱石、酵母细胞壁脱霉剂。(三)脱霉剂对动物免疫功能的影响试验实验步骤为：选择体重约50kg的生长猪40头，随机分为4组，每组10头，分别喂养不同的饲料。第1组为对照组，喂霉变饲料；第2组喂霉变饲料加1‰对比样品a；第3组喂霉变饲料加1‰对比样品b；第4组喂霉变饲料加1‰样品1，分别喂养30天进行血清检测。检测结果如下：表4脱霉剂对生长猪血清生化指标的影响指标对照组样品a样品b样品1tp(g/l)52.47±1.8453.20±4.6954.75±1.6550.97±3.57alb(g/l)29.37±3.0228.60±3.1634.45±2.3533.70±1.94glb(g/l)23.10±1.1924.60±7.7520.30±0.7017.27±1.64bun(mmol/l)3.13±0.623.47±0.205.55±2.053.37±0.09tg(nmol/l)0.53±0.120.60±0.180.46±0.070.79±0.37tc(nmol/l)2.06±0.181.90±0.042.19±0.111.83±0.21hdl-c(mmol/l)1.04±0.090.86±0.021.09±0.130.89±0.03ldl-c(mmol/l)0.85±0.080.83±0.040.91±0.130.78±0.13got(u/l)83.67±11.46a45.67±0.67b65.50±1.50ab62.00±4.00abgpt(u/l)72.33±7.9767.00±9.2957.00±5.0060.00±0.58alp(u/l)247.00±22.72198.33±39.47186.50±99.50247.67±20.58表5脱霉剂对生长猪血清抗氧化指标的影响表6脱霉剂对生长猪血清球蛋白和激素水平的影响指标对照组样品a样品b样品1igg(μg/ml)7.53±0.397.99±0.976.77±1.487.48±1.06gh(μg/ml)1.08±0.251.15±0.080.96±0.141.43±0.21t3(μg/ml)1.06±0.05ab0.67±0.05bc1.06±0.03ab1.36±0.09aat4(μg/ml)46.72±6.3632.27±5.4138.96±1.7248.13±5.18由表4至表6可以看出，样品1的got(谷丙转氨酶)、mda(丙二醛)较低，alp(碱性磷酸酶)、t-aoc(总抗氧化能力)、cat(氧化氢酶)、gh(生长激素)较高，表明本发明含有壳寡糖的脱霉剂能有效降低霉菌毒素对动物免疫系统的损伤，提高动物的抗氧化能力及免疫功能，进而增强动物对食用含霉菌毒素饲料的免疫力。以上所述，仅是本发明的最佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，任何熟悉本领域的技术人员，在不脱离本发明技术方案范围情况下，利用上述揭示的方法内容对本发明技术方案做出许多可能的变动和修饰，均属于权利要求书保护的范围。当前第1页12