本发明涉及一种功能性饲用甜味剂的制备方法，属于饲料添加剂技术领域。
背景技术：
动物的采食量在实际生产中起着重要的作用，在养猪生产中，其与仔猪的增重潜力具有很强的线性相关性。因此，提高断奶仔猪的采食量是保证其生长性能的重要措施。因为猪的味觉敏感，所以常在仔猪饲粮中添加各种风味剂以提高其采食量。研究表明，在断奶仔猪饲粮中添加甜味剂不仅能够防止仔猪断奶后的采食抑制，还能够提高断奶仔猪的生长性能。现以甜味剂在仔猪饲粮中运用较多，饲料甜味剂是由多种甜味原料复合加工而成的一种饲料用调味剂，可以利用自身的甜味特征通过掩盖饲料原料的不良味道并赋予饲料舒适的口感，从而刺激动物食欲帮助提高采食量。
目前饲料甜味剂的主要的甜源是采用糖精及其盐，同时辅以其他的成分对糖精及其盐的口感进行修饰，常用的有甜蜜素、阿斯巴甜、三氯蔗糖、葡萄糖等，但糖精及其盐本身具有金属苦味，会影响饲粮的适口性，因此，对于饲料甜味剂的改善，使其具有以下特点:1、无毒性和致癌作用，无不良余味，不会对动物的生长发育产生损害作用，不能在动物体内积累，从而间接危害人类健康；2、产生甜味快，有与蔗糖一样的甜味特征，有足够的甜度；3、稳定性好。在生产、储存与使用中甜味剂本身不挥发损失，不影响饲料中其他营养成分；4、无生理活性，是水溶性的，被动物采食后，能溶于口腔的唾液中被味蕾感知；5、成本低廉，性价比优越。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题：针对目前饲料甜味剂的主要的甜源是采用糖精及其盐，同时辅以其他的成分对糖精及其盐的口感进行修饰，但糖精及其盐本身具有金属苦味，会影响饲粮的适口性的问题，本发明提供了一种功能性饲用甜味剂的制备方法。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：
一种功能性饲用甜味剂的制备方法，其特征在于，具体制备步骤为：
（1）将罗汉果与新鲜甜菊叶水洗打浆后混合加入质量分数为70%乙醇溶液中，在70～75℃恒温水浴下，用60w超声波超声辅助提取50～60min，离心分离后收集上清液，并将沉淀重复浸提1～2次，合并上清液，并在60～65℃下，减压蒸发至干后装入研钵中研磨，得植物基甜味料；
（2）取葡萄糖、豆粕粉、硫酸镁、氯化钠加入去离子水中混合均匀，用氢氧化钠溶液调节ph至中性，再转入灭菌锅中，在110～120℃下灭菌12～20min，得液体培养基；
（3）将产胞外多糖酵母菌、植物乳杆菌、乳酸菌lb1，接种至液体培养基中进行菌种培养，在35～37℃下，以150～200r/min振荡培养30～36h，过滤得复合益生菌液；
（4）取复合益生菌液与去离子水混合，再加入米糠、鱼糜、玉米粉、蔗糖、豆粕粉、植物基甜味料，搅拌均匀后装入发酵罐中，发酵2～3天，得甜味培养料；
（5）用甜味培养料喂养家蝇幼虫1～2月后筛选12～15目幼虫，将筛选出的幼虫置于洁净的饲养盒中饥饿处理15～20h，再用清水淋洗15～20min后用质量分数2%氯化钠溶液浸泡1～2h，取出后用去离子水洗涤冷冻干燥，得功能性饲用甜味剂。
所述罗汉果浆液、甜菊叶浆液与乙醇溶液的用量为500～600重量份罗汉果浆液，200～300重量份甜菊叶浆液加入2000～3000重量份乙醇溶液。
所述葡萄糖、豆粕粉、硫酸镁、氯化钠的用量为15～20重量份葡萄糖，12～15重量份豆粕粉，0.20～0.25重量份硫酸镁，5～6重量份氯化钠。
所述产胞外多糖酵母菌、植物乳杆菌、乳酸菌lb1的接种量为3～5%。
所述复合益生菌液、米糠、鱼糜、玉米粉、蔗糖、豆粕粉、植物基甜味料的重量为0.010～0.02份复合益生菌液，70～75份米糠，3～4份鱼糜，13～15份玉米粉，3～4份蔗糖，5～8份豆粕粉，0.010～0.015份植物基甜味料。
本发明的有益技术效果是：
本发明通过产胞外多糖酵母菌、植物乳杆菌、乳酸菌lb1，培育复合菌种培养液，并将其与米糠，鱼糜，玉米粉，蔗糖，豆粕粉，植物基甜味料发酵制得甜味培养料，并喂养蝇蛆，最后筛选灭活制得功能性饲用甜味剂。本发明用产胞外多糖酵母菌发酵培养料，提高培养料糖含量，并与植物乳杆菌、乳酸菌lb1通过培养料进入虫体，改善内外肠道营养吸收率，提高免疫力，并且在虫体死亡后，将臭味物质发酵产生酯类、辛酸、十六醛以及甜味等物质改善风味，增加甜度的同时增加鲜味和营养成分，可有效刺激味觉，促进食欲，以达到增加饲料采食的效果，且可提高消化吸收能力，显著增加食欲，从而保证仔猪的健康生长，食用后仔猪皮红毛亮，提高免疫力。
具体实施方式
取罗汉果用水洗净表皮后剖开去核，再加入匀浆机中破碎打浆10～15min，得罗汉果浆液，取新鲜甜菊叶用水洗净后加入匀浆机中破碎打浆10～12min，得甜菊叶浆液，取500～600g罗汉果浆液，200～300g甜菊叶浆液加入2～3l质量分数为70%乙醇溶液中，在70～75℃恒温水浴下，并用60w超声波超声辅助提取50～60min，再装入离心机中，以4000～6000/min离心分离10～15min，收集上清液，并将沉淀重复浸提1～2次，合并上清液，将合并后的上清液装入旋转蒸发仪中，在60～65℃下，减压蒸发至干后装入研钵中研磨，得植物基甜味料，取15～20g葡萄糖，12～15g豆粕粉，0.20～0.25g硫酸镁，5～6g氯化钠，加入0.8～1.0l去离子水中，以300～400r/min搅拌混合10～15min后，用质量分数为5%氢氧化钠溶液调节ph至中性，随后转入灭菌锅中，在110～120℃下灭菌12～20min，得液体培养基，按接种量3～5%，将产胞外多糖酵母菌、植物乳杆菌、乳酸菌lb1，接种至液体培养基中进行菌种培养，在35～37℃下厌氧培养15～20h，过滤得复合益生菌液，取10～20g益生菌液与10～15l去离子水混合，再加入70～75kg米糠，3～4kg鱼糜，13～15kg玉米粉，3～4kg蔗糖，5～8kg豆粕粉，10～15g植物基甜味料，搅拌均匀后装入发酵罐中，发酵2～3天，得甜味培养料，用甜味培养料喂养家蝇幼虫1～2月，收集10～15目幼虫，将筛选出的幼虫置于洁净的饲养盒中饥饿处理15～20h，并用清水淋洗15～20min，再用质量分数2%氯化钠溶液浸泡1～2h，取出后用去离子水洗涤1～3次，转入冷冻干燥箱中，在﹣50～﹣35℃下干燥3～6h，得功能性饲用甜味剂。
实例1
取罗汉果用水洗净表皮后剖开去核，再加入匀浆机中破碎打浆10min，得罗汉果浆液，取新鲜甜菊叶用水洗净后加入匀浆机中破碎打浆10min，得甜菊叶浆液，取500g罗汉果浆液，200～300g甜菊叶浆液加入2l质量分数为70%乙醇溶液中，在70℃恒温水浴下，并用60w超声波超声辅助提取50min，再装入离心机中，以4000/min离心分离10min，收集上清液，并将沉淀重复浸提1次，合并上清液，将合并后的上清液装入旋转蒸发仪中，在60℃下，减压蒸发至干后装入研钵中研磨，得植物基甜味料，取15g葡萄糖，12g豆粕粉，0.20g硫酸镁，5g氯化钠，加入0.8l去离子水中，以300r/min搅拌混合10min后，用质量分数为5%氢氧化钠溶液调节ph至中性，随后转入灭菌锅中，在110℃下灭菌12min，得液体培养基，按接种量3%，将产胞外多糖酵母菌、植物乳杆菌、乳酸菌lb1，接种至液体培养基中进行菌种培养，在35℃下厌氧培养15h，过滤得复合益生菌液，取10g益生菌液与10l去离子水混合，再加入70kg米糠，3kg鱼糜，13kg玉米粉，3kg蔗糖，5kg豆粕粉，10g植物基甜味料，搅拌均匀后装入发酵罐中，发酵2天，得甜味培养料，用甜味培养料喂养家蝇幼虫1月，收集10目幼虫，将筛选出的幼虫置于洁净的饲养盒中饥饿处理15h，并用清水淋洗15min，再用质量分数2%氯化钠溶液浸泡1h，取出后用去离子水洗涤1次，转入冷冻干燥箱中，在﹣35℃下干燥3h，得功能性饲用甜味剂。
实例2
取罗汉果用水洗净表皮后剖开去核，再加入匀浆机中破碎打浆12min，得罗汉果浆液，取新鲜甜菊叶用水洗净后加入匀浆机中破碎打浆11min，得甜菊叶浆液，取550g罗汉果浆液，250g甜菊叶浆液加入2l质量分数为70%乙醇溶液中，在72℃恒温水浴下，并用60w超声波超声辅助提取55min，再装入离心机中，以5000/min离心分离12min，收集上清液，并将沉淀重复浸提1次，合并上清液，将合并后的上清液装入旋转蒸发仪中，在62℃下，减压蒸发至干后装入研钵中研磨，得植物基甜味料，取18g葡萄糖，13g豆粕粉，0.24g硫酸镁，5g氯化钠，加入0.9l去离子水中，以350r/min搅拌混合12min后，用质量分数为5%氢氧化钠溶液调节ph至中性，随后转入灭菌锅中，在115℃下灭菌15min，得液体培养基，按接种量4%，将产胞外多糖酵母菌、植物乳杆菌、乳酸菌lb1，接种至液体培养基中进行菌种培养，在36℃下厌氧培养18h，过滤得复合益生菌液，取15g益生菌液与12l去离子水混合，再加入72kg米糠，3kg鱼糜，14kg玉米粉，3kg蔗糖，6kg豆粕粉，12g植物基甜味料，搅拌均匀后装入发酵罐中，发酵2天，得甜味培养料，用甜味培养料喂养家蝇幼虫1月，收集12目幼虫，将筛选出的幼虫置于洁净的饲养盒中饥饿处理18h，并用清水淋洗18min，再用质量分数2%氯化钠溶液浸泡1h，取出后用去离子水洗涤2次，转入冷冻干燥箱中，在﹣40℃下干燥4h，得功能性饲用甜味剂。
实例3
取罗汉果用水洗净表皮后剖开去核，再加入匀浆机中破碎打浆15min，得罗汉果浆液，取新鲜甜菊叶用水洗净后加入匀浆机中破碎打浆12min，得甜菊叶浆液，取600g罗汉果浆液，300g甜菊叶浆液加入3l质量分数为70%乙醇溶液中，在75℃恒温水浴下，并用60w超声波超声辅助提取60min，再装入离心机中，以6000/min离心分离15min，收集上清液，并将沉淀重复浸提2次，合并上清液，将合并后的上清液装入旋转蒸发仪中，在65℃下，减压蒸发至干后装入研钵中研磨，得植物基甜味料，取20g葡萄糖，15g豆粕粉，0.25g硫酸镁，6g氯化钠，加入1.0l去离子水中，以400r/min搅拌混合15min后，用质量分数为5%氢氧化钠溶液调节ph至中性，随后转入灭菌锅中，在120℃下灭菌20min，得液体培养基，按接种量5%，将产胞外多糖酵母菌、植物乳杆菌、乳酸菌lb1，接种至液体培养基中进行菌种培养，在37℃下厌氧培养20h，过滤得复合益生菌液，取20g益生菌液与15l去离子水混合，再加入75kg米糠，4kg鱼糜，15kg玉米粉，4kg蔗糖，8kg豆粕粉，15g植物基甜味料，搅拌均匀后装入发酵罐中，发酵3天，得甜味培养料，用甜味培养料喂养家蝇幼虫2月，收集15目幼虫，将筛选出的幼虫置于洁净的饲养盒中饥饿处理20h，并用清水淋洗20min，再用质量分数2%氯化钠溶液浸泡2h，取出后用去离子水洗涤3次，转入冷冻干燥箱中，在﹣50℃下干燥6h，得功能性饲用甜味剂。
对比例：玉米－豆粕型基础饲粮。
用添加本发明制备的功能性饲用甜味剂的玉米－豆粕型基础饲粮与对比例进行断奶仔猪饲养，猪舍温度控制在(25±3)℃，并保持良好的通风。试验管理按照常规管理规程及正常免疫程序进行饲养。试验期间断奶仔猪自由饮水、自由采食。
将混合饲料每天分2～4次进行投喂，并且要保证每天都有1h的空槽时间即可。
饲养结果如表1所示：
表1
由上表可知，本发明制备的功能性饲用甜味剂，可有效刺激味觉，促进食欲，以达到增加饲料采食的效果，且可促进消化吸收，提高日增重量。