用于缓解视觉疲劳的药食同源药王茶复方冲剂及其制备方法和质量控制方法

本发明属于功能性食品
技术领域：
，具体涉及一种用于缓解视觉疲劳的药食同源药王茶复方冲剂及其制备方法和质量控制方法。
背景技术：
：视觉疲劳又称视疲劳，是指在长时间从事近距离注视的工作或学习时因过度用眼而产生的眼部疲劳综合症。视觉疲劳主要以视物模糊、重影、畏光、不耐久视，眼部干涩、痛痒、酸胀、流泪，头痛眩晕等为临床表现。视觉疲劳患者不仅容易出现眼部疲劳、疼痛等症状，还可能因视力问题引发焦虑、烦躁、抑郁等负面情绪(参见姚杨华等研究的视疲劳的相关研究概述[j].中国中医眼科杂志，2016)，严重影响工作、学习和生活质量。引发视觉疲劳的因素很多，既包括眼部不良因素(如用眼过度)及其他身体不良因素(如营养问题)，又包括环境不良因素(如屏幕闪烁)(参见马乐等研究的北京市海淀区高校学生视疲劳流行现况及其相关因素[j].北京大学学报，2011)。近期的研究证实，视觉疲劳与氧化应激密切相关，自由基可引起眼部组织炎症，产生脂质过氧化物等有害物质，诱发视觉疲劳(参见刘垚杰等研究的复配粗提物对氧化应激型视力损伤的保护[j].食品安全质量检测学报，2020)。近年来，视觉疲劳问题日益普遍，业已成为影响青少年学生、白领工作者特别是长期过度使用智能手机、电脑或多媒体屏幕人群的生活质量的重要因素。然而，目前缓解视觉疲劳的市售药品、大健康产品特别是功能性食品很少。以药食同源植物为主要原料，研究、开发能够缓解视觉疲劳的功能性食品，对于新时代大众健康特别是青少年学生、白领工作者等人群的身心健康具有至关重要的积极意义。药食同源是我国独特的营养保健理论。我国第一部医药典籍《黄帝内经》首先提出药食同源思想：“五谷为养，五果为助，五畜为养，五菜为充，气味合而服之，以补精益气。此五者，有辛酸甘苦咸，各有所利，或散或收，或缓或急，或坚或耎，四时五藏，病随五味所宜也。”隋朝的杨上善在《黄帝内经太素》中进一步阐明了药食同源的涵义：“五谷五畜，五果五菜，用之充饥，则谓之食，以期疗病，则谓之药。”此后，经过历代医药学家、食品专家的完善，逐步形成了“药食同功”、“药食同理”、“食疗”、“食治”的药食同源理论。国家食品安全法明确指出，食品是指“各种供人食用或者饮用的成品和原料以及按照传统既是食品又是药品的物品，但是不包括以治疗为目的的物品”，其中，“按照传统既是食品又是药品的物品”的条文规定，确立了药食同源物品的法律地位，明确了药食同源物品的基本涵义，同时也明晰了食品与药品的界限。药食同源理论不仅重视药食同功、同理，又强调药食存在界限，不可违规将非药食同源中药材用于食品制造中，否则可能严重危害人体健康。按照药食同源理论研发的复方冲剂，符合国家法律规定，安全性高，并且具有显著的营养保健效果。现有技术中，中国专利cn1225273a公开了一种中药保健品及其制备方法，将药食同源原料(可用于制造食品)栀子、决明子、菊花、枸杞子、薏米、熟大黄、茯苓、石决明、石斛以及药用原料(不可用于制造食品)羚羊角、蝉蜕、地龙、石决明(鲍科动物贝壳)、黄连、柴胡等混合、煎煮、过滤后制成液体产品。中国专利cn1287845a公开了一种菊花保健茶及制备方法，将决明子、菊花粉碎成细末后与绿茶混合制成保健茶。中国专利cn105076609a公开了一种枸杞菊花茶饮料的制备方法，先将枸杞子和菊花分别制成水提液，混合后加入冰糖和稳定剂(羧甲基纤维素钠)，然后均质、杀菌后制得液体饮料。论文《缓解视觉疲劳枸杞子饮料的毒理学试验及安全性评价》报道了一种用枸杞鲜果(非干制的枸杞子)制成的液体果汁饮料，试验表明该产品安全无毒。总体上看，现有技术各具特色，其特点和不足之处如下：(1)多数现有技术只是将决明子、菊花等原药材混合在一起，或者将原药材简单地清洗、切割或粉碎后混合在一起，没有对原材料中的活性成分进行提取，难以保证产品的有效性，也不方便饮用。(2)多数现有技术在组方时，并未考虑使用药食同源原料药王茶。(3)有的现有技术在组方时，未考虑微量元素和维生素对视觉疲劳的缓解作用。事实上，视觉疲劳、眼睛健康与微量元素(如硒)、维生素(如维生素a)的关系十分密切。(4)有的现有技术使用了冰糖、蔗糖、蜂蜜等营养性甜味剂或多种不利于人体健康的加工辅料、助剂。糖类物质摄入过多不仅可能诱发或加剧近视，还可能加重糖尿病视网膜病变，影响视力。(5)有的现有技术使用了非药食同源的中药材，不符合国家保健食品原料规定和食品安全要求。如果用此类中药材制作普通食品或功能性食品，可能威胁消费者健康。(6)多数现有技术在选择药食同源原料时，没有考虑原料成本，未能统筹兼顾活性功能与经济效益，影响了产品的可行性和实用性。(7)很多现有技术缺乏原料和成品质量控制方法和标准，难以保障缓解视觉疲劳产品的品质和效果。(8)很多现有技术没有缓解视觉疲劳的功能性实验依据，亦未对产品进行必要的安全性检测(如重金属检测)，缺乏科学性和实用性。技术实现要素：本发明基于药食同源理论，提供一种用于缓解视觉疲劳的药食同源药王茶复方冲剂及其制备方法和质量控制方法，该复方冲剂具有缓解视觉疲劳作用明显、配方独特、安全可靠、经济可行、品质优良、质量可控等特点和优势。为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案予以实现：本发明公开了一种用于缓解视觉疲劳的药食同源药王茶复方冲剂，以质量份数计由以下组分制成：8000～12000份的药食同源原料复合提取物，7000～9000份的甜菊糖苷，500～1500份的葡萄糖酸锌，3～5份的硒化卡拉胶，21000～25000份的抗坏血酸以及6～10份的维生素a；其中，药食同源原料复合提取物是由药王茶、决明子、菊花和枸杞子4种药食同源的原料按照2:4:3:3的质量比混合后提取得到。优选地，该用于缓解视觉疲劳的药食同源药王茶复方冲剂，以质量份数计由以下组分制成：10000份的药食同源原料复合提取物，9000份的甜菊糖苷，1500份的葡萄糖酸锌，4份的硒化卡拉胶，23000份的抗坏血酸以及8份的维生素a；其中，药食同源原料复合提取物是由药王茶、决明子、菊花和枸杞子4种药食同源的原料按照2:4:3:3的质量比混合后提取得到。优选地，所述的药食同源原料复合提取物的提取方法如下：将决明子、枸杞子清洗后烘干，将药王茶和菊花茶烘干，将4种药材按所述质量比混合后粉碎，得到粒度为40～60目的混合粉末；将混合粉末按照固液比为60g/l的比例，浸入50±3℃热水中，处理8±3min，然后将热水煮沸，在沸腾状态下提取0.5h，提取结束后在5000rpm条件下离心8±3min，弃沉淀，收集上清液，得到提取液；将提取液浓缩至原体积的的1/3～1/4，制得浓缩液，将浓缩液在温度-50±3℃、真空度20±3pa条件下冻干，得到药王茶、决明子、枸杞子和菊花的水提物，即药食同源原料复合提取物。本发明还公开了一种用于缓解视觉疲劳的药食同源药王茶复方冲剂的制备方法，包括：以质量份数计，分别称取8000～12000份的药食同源原料复合提取物，7000～9000份的甜菊糖苷，500～1500份的葡萄糖酸锌，3～5份的硒化卡拉胶，21000～25000份的抗坏血酸以及6～10份的维生素a，混合均匀，制得用于缓解视觉疲劳的药食同源复方冲剂；其中，药食同源原料复合提取物是由药王茶、决明子、菊花和枸杞子4种药食同源的原料按照2:4:3:3的质量比混合后提取得到。优选地，所述的药食同源原料复合提取物的提取方法如下：将原料决明子、枸杞子清洗后烘干，将原料药王茶和菊花茶烘干，将4种药材按所述质量比混合后粉碎，得到粒度为40～60目的混合粉末；将混合粉末按照固液比为60g/l的比例，浸入50±3℃热水中，处理8±3min，然后将热水煮沸，在沸腾状态下提取0.5h，提取结束后在5000rpm条件下离心8±3min，弃沉淀，收集上清液，得到提取液；将提取液浓缩至原体积的的1/3～1/4，制得浓缩液，将浓缩液在温度-50±3℃、真空度20±3pa条件下冻干，得到药王茶、决明子、枸杞子和菊花的水提物，即药食同源原料复合提取物。优选地，所述原料药王茶的质量控制方法如下：1)首先采用肉眼观测方法考察药王茶的外观性状，要求其叶片表面呈绿色至暗绿色，若呈其他颜色则认定为不符合要求；要求叶片无霉变，如果有霉斑则认定为不符合要求；2)然后采用高效液相色谱法测定药王茶中槲皮苷、没食子酸、槲皮素的含量，要求槲皮苷含量不低于0.210％、没食子酸含量不低于0.205％且槲皮素含量不低于0.120％，否则认定为不符合要求。本发明还公开了上述的用于缓解视觉疲劳的药食同源药王茶复方冲剂的其中一种质量控制方法，采用分光光度法测定药食同源药王茶复方冲剂中总黄酮的含量，要求总黄酮含量不低于25％，否则认定为不符合要求。本发明还公开了上述的用于缓解视觉疲劳的药食同源药王茶复方冲剂的另一种质量控制方法，采用高效液相色谱法测定药食同源药王茶复方冲剂中槲皮苷、没食子酸、槲皮素、大黄酚、甜菜碱和木犀草苷的含量，要求：槲皮苷含量不低于1.86mg/g、没食子酸含量不低于1.75mg/g、槲皮素含量不低于1.08mg/g、大黄酚含量不低于4.50μg/g、甜菜碱含量不低于6.50mg/g且木犀草苷含量不低于0.30mg/g，否则认定为不符合要求。与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：(1)配方独特，作用明显。本发明以药王茶、决明子、枸杞子、菊花4种药食同源中药材为植物原料制成药食同源原料复合提取物，以微量元素(硒、锌)和维生素(维生素a、抗坏血酸)为功能性食品添加剂或营养强化剂，以甜菊糖苷为甜味剂，以抗坏血酸为酸味剂，运用现代营养学、食品工艺学、食品毒理学等原理和技术，结合我国传统的药食同源理论，在大量试验研究的基础上研发了能够缓解视觉疲劳的药食同源药王茶复方冲剂。配方独特之处在于迄今未见将药王茶应用于缓解视觉疲劳的相关研究报道，药王茶是陕西秦岭山区特有的药食同源植物，能够清暑热、益脑清心，主治暑热眩晕、两目不清等，气味清香，滋味鲜爽，具有良好的开发应用价值。本发明通过试验研究证明，药王茶提取物具有较强的抗氧化活性，在缓解视疲劳复方冲剂中具有重要作用。本发明为陕西秦岭地区特色药食同源植物药王茶资源的科学开发和深度利用提供了参考。按照国家食品药品监督管理总局(现国家市场监督管理总局)《关于印发抗氧化功能评价方法等9个保健功能评价方法的通知》进行的功能性实验表明，本发明所述复方冲剂能够清除dpph(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)、abts(2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐)和·oh(羟基)自由基，降低视觉疲劳症状积分，提升症状改善有效率和明视持久度，对视觉疲劳具有良好的缓解效果。(2)安全可靠，经济可行。本发明所用4种植物原料(药王茶、决明子、枸杞子、菊花)全部为国家卫生健康委员会(原卫生部)批准的可用于食品的中药材或者传统上既能食用又能药用的中药材，属于合法的药食同源原料，没有使用非药食同源中药材(如黄连)，安全性高。本发明以水为提取剂制备药食同源中药材提取物，未使用乙醇、甲醇等有机溶剂或有害提取剂。在选择药食同源原料时，本发明既考虑了提取物的活性，又考虑了原料成本，最终将药王茶、决明子、菊花、枸杞子的配比定为2:4:3:3，保证了原料在成本经济上的可行性。本发明选择甜菊糖苷作为甜味剂，选择抗坏血酸作为酸味剂和营养补充剂，没有使用冰糖、蔗糖、蜂蜜等营养性甜味剂。甜菊糖苷对糖尿病具有辅助治疗作用，抗坏血酸具有抗氧化应激作用，有助于糖尿病人康复，不会影响糖尿病眼病患者的视力健康。本发明所用甜菊糖苷、葡萄糖酸锌、维生素a、硒化卡拉胶等原辅材料皆为国家《食品营养强化剂使用标准》(gb14880-2012)等许可的食品添加剂或营养强化剂，具有较高的食用安全性。本发明亦未使用麦芽糊精、羧甲基纤维素钠等过多的加工辅料或助剂。此外，本发明还对该复方冲剂的重金属进行了检测，证明其符合国家食品安全标准要求。(3)品质优良，质量可控。在感官特性方面，本发明以色泽、滋(气)味、组成状态和口感为感官指标，运用单因素实验和正交试验方法优选了药食同源药王茶复方冲剂的配方；在营养素和活性物质组成方面，使用电感耦合等离子体原子发射光谱仪、高效液相色谱仪等测定了该复方冲剂的蛋白质、微量元素、维生素、槲皮素、没食子酸等的含量；在产品性质方面，采用浸润下沉性试验等分析了该复方冲剂的冲调性能；在功能活性方面，采用自由基清除实验、明视持久度实验等鉴定了该复方冲剂的缓解视觉疲劳作用。最终制得了营养丰富、功能确切、品质较好的缓解视觉疲劳复方冲剂，该复方冲剂气味清香，滋味鲜爽，具有药王茶的独特风味。本发明还提供了药王茶原料和复方冲剂产品的质量控制方法和标准，有助于确保缓解视觉疲劳药食同源药王茶复方冲剂的质量和效果。附图说明图1为dpph自由基清除活性；图2为abts自由基清除活性；图3为·oh自由基清除活性。图中，a、b、c、d、e和f分别代表药王茶、决明子、菊花、枸杞子、药食同源原料复合提取物(药王茶:决明子:菊花:枸杞子＝2:4:3:3)和药食同源药王茶复方冲剂。具体实施方式为了使本
技术领域：
的人员更好地理解本发明方案，下面结合具体实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分的实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本发明保护的范围。实施例1一种用于缓解视觉疲劳的药食同源药王茶复方冲剂，由以下质量份的组分制成：药食同源原料复合提取物10000份，甜菊糖苷9000份，葡萄糖酸锌1500份，硒化卡拉胶4份，抗坏血酸23000份以及维生素a8份。其中，药食同源原料复合提取物是将药王茶、决明子、菊花、枸杞子4种药食同源原料按照2:4:3:3的质量比混合提取得到。所述用于缓解视觉疲劳的药食同源复方冲剂的制备方法包括如下步骤：步骤1，药食同源原料准备：准备药王茶、菊花、枸杞子和决明子4种药食同源中药材。步骤2，药王茶原料质量控制：使用2种方法检验药王茶原料质量。1)采用肉眼观测方法考察药王茶的外观性状，要求其叶片表面呈绿色至暗绿色，如果呈其他颜色则认定为不符合要求；要求叶片无霉变，如果有霉斑认定为不符合要求；2)采用高效液相色谱法测定药王茶中槲皮苷、没食子酸、槲皮素的含量，要求槲皮苷含量不低于0.210％、没食子酸含量不低于0.205％且槲皮素含量不低于0.120％，否则认定为不符合要求。步骤3，粉碎与过筛：将挑选后的决明子和枸杞子用清水淘洗2次，在40±3℃下烘干，将挑选后的药王茶和菊花直接在40±3℃烘干。然后将4种中药材按照上述质量比混合，粉碎得到粒度为40～60目的药王茶、决明子、枸杞子、菊花混合粉末，备用。步骤4，提取：称取上述药王茶、决明子、枸杞子、菊花混合粉末，用4层纱布包裹后再用绳子束紧，放入50±3℃热水中(固液比为60g/l)浸泡8±3min，然后将热水煮沸，在沸腾状态下提取0.5h，提取结束后在5000rpm条件下离心8±3min，弃沉淀，收集上清液，得到药王茶、决明子、枸杞子、菊花提取液。步骤5，浓缩：将药王茶、决明子、枸杞子、菊花提取液真空旋转蒸发浓缩至原体积的1/3～1/4，制得浓缩液。步骤6，冷冻干燥：将浓缩液在温度-50±3℃、真空度20±3pa条件下冻干，得到药王茶、决明子、枸杞子、菊花水提物，即药食同源原料复合提取物。步骤7，混料：按上述质量份数配比关系，分别称取药食同源原料复合提取物、甜菊糖苷、葡萄糖酸锌、硒化卡拉胶、抗坏血酸及维生素a，混匀后制得药食同源药王茶复方冲剂。用于缓解视觉疲劳的药食同源药王茶复方冲剂的质量控制方法如下：使用2种方法检验复方冲剂质量：1)采用分光光度法测定药食同源药王茶复方冲剂中总黄酮的含量，要求总黄酮含量不低于25％，否则认定为不符合要求；2)采用高效液相色谱法测定药食同源药王茶复方冲剂中槲皮苷、没食子酸、槲皮素、大黄酚、甜菜碱和木犀草苷的含量，要求槲皮苷含量不低于1.86mg/g、没食子酸含量不低于1.75mg/g、槲皮素含量不低于1.08mg/g、大黄酚含量不低于4.50μg/g、甜菜碱含量不低于6.50mg/g且木犀草苷含量不低于0.30mg/g，否则认定为不符合要求。本实施例中药食同源原料的功能与作用分析如下。药王茶是陕西秦岭山区的特色药食同源中药材，主要产于太白山海拔3000米左右的高山草甸区域。相传因“药王”、“中华养生鼻祖”孙思邈在秦岭太白山地区潜修期间发现并终生饮用而得名。据文献记载，药王茶能够“清暑热，益脑清心，调经，健胃”，主治“暑热眩晕，两目不清，胃气不和，滞食，月经不调”。2014年，国家卫生计生委(现国家卫健委)办公厅在给陕西省卫生计生委(现陕西省卫健委)的函件(国卫办食品函〔2014〕1075号)中指出，根据《食品安全法》和《新食品原料安全性审查管理办法》的规定，药王茶可按照有传统食用习惯的普通食品进行管理。从此，药王茶正式成为国家许可的药食同源植物。本发明研究发现，药王茶具有较强的抗氧化能力，含有槲皮苷、没食子酸和槲皮素等活性物质，总黄酮含量较高。黄酮类化合物通常具有较强的抗氧化活性，可有效清除体内的自由基，阻止细胞退化、衰老。部分黄酮类化合物对糖尿病引起的视网膜病变具有较好的作用。由于视觉疲劳与氧化应激以及眼部疾患等存在较密切的关系，因此将药王茶应用于缓解视觉疲劳领域具有开发前景。决明子、枸杞子、菊花也是我国传统的中药材。2002年，国家卫生部(现国家卫健委)在《关于进一步规范保健食品原料管理的通知》(卫法监发〔2002〕51号)中将其划归为可作为食品的物品，至此，决明子、枸杞子、菊花正式成为国家许可的药食同源植物。决明子味苦、甘、咸，性微寒，入肝、肾、大肠经。据《神农本草经》记载，决明子能“治青盲，目淫肤，赤白膜，眼赤痛泪出。”《日华本草》记载决明子能“治头风明目，胜于黑豆。”《本草备要》记载决明子能“治一切目疾，故有决明之名。”《本草崇原》记载决明子能“主治青盲、目淫、肤赤。”《本草求真》指出决明子“除风散热。凡人目泪不收，眼痛不止，多属风热内淫，以致血不上行，治当即为驱逐；按此苦能泄热，咸能软坚，甘能补血，力薄气浮，又能升散风邪，故为治目收泪止痛要药。并可作枕以治头风，但此服之太过，搜风至甚，反招风害，故必合以甘菊、枸杞相为补助，则功更胜。谓之决明，即是此意。”《得配本草》指出决明子“配杞子，蜜丸，治阴虚目疾。”现代科学研究发现决明子中含有较多的大黄酚，具有一定的抗菌作用，对急性结膜炎、急性角膜炎等眼部感染有较好的防治效果。据《雷公炮制药性解》记载，枸杞子“味苦甘，性微寒无毒，入肝肾二经。主五内邪热，烦躁消渴，周痹风湿，下胸胁气，除头痛，明眼目，补劳伤，坚筋骨，益精髓，壮心气，强阴益智，去皮肤骨节间风，散疮肿热毒。久服延年，恶奶酪，解面毒。”《太平圣惠方》记载枸杞子能够治疗“眼赤痛，昼夜不开”。《本草纲目》记载枸杞子具有治疗“目涩有翳”等功效。枸杞子含有丰富的多糖、甜菜碱。甜菜碱具有抗氧化、保肝等多种药理作用。中医认为，肝脏功能与眼睛健康存在密切关系。菊花性寒，入肝经。据《神农本草经》记载，菊花可治“诸风头眩肿痛，目欲脱，泪出，皮肤死肌，恶风湿痹。”《本草纲目》记载菊花可治“风热，目疼欲脱，泪出，养目去盲，作枕明目。”《得配本草》记载菊花可治“肌肤湿痹，头目眩晕。”菊花中含有较多的木犀草苷与绿原酸。木犀草苷具有保护心血管系统与中枢神经系统等作用，绿原酸可以抗菌、清除自由基、抗衰老。根据中医药理论，将决明子、枸杞子、菊花、药王茶四者配伍对人体有益。本发明通过大量试验研究证实，药王茶、决明子、枸杞子、菊花按照最优配比(2:4:3:3)混合后制得的药食同源原料复合提取物具有较好的抗氧化活性，其对dpph自由基的清除能力强于单独的决明子、菊花和枸杞子，对abts自由基的清除能力强于单独的枸杞子和决明子，对·oh自由基的清除能力强于单独的决明子(参见下文)。枸杞子、决明子、药王茶、菊花4种原料都是药食同源中药材，食用安全性高，符合《植物饮料》(gb/t31326-2014)等国家标准要求。本实施例中食品添加剂、营养强化剂的功能和作用分析如下。硒化卡拉胶是重要的补硒剂，安全性高，可以补充微量元素硒。硒有助于消除对眼睛有害的自由基，对提高视力有一定的效果。硒化卡拉胶还具有保护肝脏的作用。甜菊糖苷是非营养性甜味剂，安全性高，适用于糖尿病、肥胖病、动脉硬化患者食用，不会危害糖尿病眼病患者的视力健康。葡萄糖酸锌是重要的补锌剂，安全性高，生物利用度好，可以补充微量元素锌。锌具有改善眼部营养、保护视力的作用。维生素a是维护眼睛正常功能的必需物质。抗坏血酸具有抗氧化、调节免疫、参与氨基酸和蛋白质代谢等多种生物功能。抗坏血酸是重要的维生素(维生素c)。抗坏血酸在眼球晶状体、角膜中分布较多，能够减除光诱导的眼球氧化损伤。抗坏血酸还能作为酸味剂调整药食同源药王茶复方冲剂的口感。可以看出，本实施例所用食品添加剂、营养强化剂安全可靠，有助于维持眼球健康、缓解视觉疲劳。实施例2一种用于缓解视觉疲劳的药食同源药王茶复方冲剂，由以下质量份的组分制成：药食同源原料复合提取物10000份，甜菊糖苷7000份，葡萄糖酸锌1000份，硒化卡拉胶4份，抗坏血酸23000份以及维生素a8份。其中，药食同源原料复合提取物是将药王茶、决明子、菊花、枸杞子4种药食同源原料按照2:4:3:3的质量比混合提取得到。本实施例的药食同源药王茶复方冲剂的制备和质量控制方法与实施例1相同。实施例3一种用于缓解视觉疲劳的药食同源药王茶复方冲剂，由以下质量份的组分制成：药食同源原料复合提取物10000份，甜菊糖苷7000份，葡萄糖酸锌1500份，硒化卡拉胶4份，抗坏血酸25000份以及维生素a8份。其中，药食同源原料复合提取物是将药王茶、决明子、菊花、枸杞子4种药食同源原料按照2:4:3:3的质量比混合提取得到。本实施例的药食同源药王茶复方冲剂的制备和质量控制方法与实施例1相同。实施例4一种用于缓解视觉疲劳的药食同源药王茶复方冲剂，由以下质量份的组分制成：药食同源原料复合提取物10000份，甜菊糖苷8000份，葡萄糖酸锌500份，硒化卡拉胶4份，抗坏血酸24000份以及维生素a8份。其中，药食同源原料复合提取物是将药王茶、决明子、菊花、枸杞子4种药食同源原料按照2:4:3:3的质量比混合提取得到。本实施例的药食同源药王茶复方冲剂的制备和质量控制方法与实施例1相同。实施例5一种用于缓解视觉疲劳的药食同源药王茶复方冲剂，由以下质量份的组分制成：药食同源原料复合提取物10000份，甜菊糖苷8000份，葡萄糖酸锌1000份，硒化卡拉胶4份，抗坏血酸25000份以及维生素a8份。其中，药食同源原料复合提取物是将药王茶、决明子、菊花、枸杞子4种药食同源原料按照2:4:3:3的质量比混合提取得到。本实施例的药食同源药王茶复方冲剂的制备和质量控制方法与实施例1相同。实施例6一种用于缓解视觉疲劳的药食同源药王茶复方冲剂，由以下质量份的组分制成：药食同源原料复合提取物9000份，甜菊糖苷9000份，葡萄糖酸锌1000份，硒化卡拉胶4份，抗坏血酸24000份以及维生素a8份。其中，药食同源原料复合提取物是将药王茶、决明子、菊花、枸杞子4种药食同源原料按照2:4:3:3的质量比混合提取得到。本实施例的药食同源药王茶复方冲剂的制备和质量控制方法与实施例1相同。为了确定本发明所涉及药食同源药王茶复方冲剂的最优配方，评价其营养价值、品质特征以及缓解视觉疲劳效果，本发明进行了大量的试验研究，各种分析情况如下：一、药食同源药王茶复方冲剂配方优选1.1实验材料与仪器设备实验材料主要包括市售药食同源中药材决明子、枸杞子、菊花、药王茶，以及甜菊糖苷(食品级)、抗坏血酸(食品级)、葡萄糖酸锌(食品级)、硒化卡拉胶(食品级)、维生素a(食品级)、abts(分析纯)、dpph(分析纯)、牛血清白蛋白(纯度≧98％)、抗坏血酸(维生素c，vc，纯度≧99％)、无水乙醇(分析纯)、pbs缓冲液(磷酸盐缓冲液，ph＝6.6)、硫酸亚铁(feso4·7h2o，分析纯)、铁氰化钾(k3fe(cn)6，分析纯)、三氯化铁(fecl3，分析纯)、硝酸铝(al(no)3·9h2o，分析纯)、醋酸钾(ch3cook，分析纯)、过氧化氢(h2o2)水溶液(30％，分析纯)、芦丁(分析纯)、水杨酸(c7h6o3，分析纯)、过硫酸钾(k2s2o8，分析纯)、甲醇(色谱级)、乙腈(色谱级)、大黄酚(色谱级)、甜菜碱(色谱级)、木犀草苷(色谱级)、槲皮苷(色谱级)、没食子酸(色谱级)、槲皮素(色谱级)、醋酸(色谱级)、磷酸(色谱级)。仪器设备主要包括全波长酶标仪、真空冷冻干燥机、旋转蒸发仪、恒温加热设备、离心机。1.2药食同源药王茶复方冲剂的制备方法1.2.1决明子购买与检验在陕西省西安市药店购买干制决明子。1)采用肉眼观测的方式考察决明子的颜色和外观性状，要求略呈菱方形或短圆柱形，两端平行倾斜，长3～7mm，宽2～4mm，如果呈其他形状则认定不符合要求。表面绿棕色或暗棕色，平滑有光泽，如果呈其他颜色(如黑色)则认定为不符合要求。虫蛀和变形率不得超过2％，无霉变。如果有霉斑或虫蛀率超过2％认定为不符合要求。2)采用高效液相色谱测定决明子中大黄酚的含量，若决明子中大黄酚含量不低于0.21％，则认为决明子符合要求，否则认定为不符合要求。同时通过肉眼观测方法和高效液相色谱法检测的决明子原料方可用于药食同源药王茶复方冲剂制备。1.2.2枸杞子购买与检验在陕西省西安市药店购买干制枸杞子。枸杞子的检验：1)采用肉眼观测的方式考察枸杞子的颜色和外观性状，要求呈类纺锤形或椭圆形，长6～20mm，直径3～10mm，如果呈其他形状则认定不符合要求。表面红色或暗红色，如果呈其他颜色(如黄色至褐色)则认定为不符合要求。虫蛀和变形率不得超过2％，无霉变。如果有霉斑或虫蛀率超过2％认定为不符合要求。2)采用高效液相色谱法测定枸杞子中甜菜碱含量，若枸杞子甜菜碱含量不低于0.51％，则认为枸杞子符合要求，否则认定为不符合要求。同时通过肉眼观测方法和高效液相色谱法检测的枸杞子原料方可用于药食同源药王茶复方冲剂制备。1.2.3药王茶购买与检验在陕西省太白县医药公司购买干制药王茶。药王茶的购买与检验：1)采用肉眼观测方法考察药王茶的外观性状，要求其叶片表面呈绿色至暗绿色，如果呈其他颜色(如黄色至褐色)则认定为不符合要求；要求无霉变，如果有霉斑认定为不符合要求。2)采用高效液相色谱法测定药王茶中槲皮苷、没食子酸、槲皮素的含量，要求槲皮苷含量不低于0.210％、没食子酸含量不低于0.205％且槲皮素含量不低于0.120％，否则认定为不符合要求。同时通过肉眼观测方法和高效液相色谱法检测的药王茶原料方可用于药食同源药王茶复方冲剂制备。1.2.4菊花购买与检验在陕西省西安市药店购买干制菊花。1)采用肉眼观测的方式考察菊花的颜色和外观性状，要求呈扁球形或不规则球形，直径1.5～2.5cm，如果呈其他形状则认定不符合要求。舌状花类白色或黄色，如果呈其他颜色(如黑色)则认定为不符合要求。虫蛀和变形率不得超过2％，无霉变。如果有霉斑或虫蛀率超过2％认定为不符合要求。2)采用高效液相色谱测定菊花中木犀草苷含量，若测得菊花中木犀草苷不少于0.081％，则认为菊花符合要求，否则认定为不符合要求。同时通过肉眼观测方法和高效液相色谱法检测的菊花原料方可用于药食同源药王茶复方冲剂制备。经检验，本研究所用决明子、枸杞子、菊花、药王茶4种药食同源原料均符合要求。1.2.5粉碎与过筛将挑选后的决明子和枸杞子用清水淘洗2次，在40±3℃下烘干，将挑选后的药王茶和菊花直接在40±3℃烘干。然后将4种中药材按照一定的质量比混合，粉碎得到粒度为40～60目的药王茶、决明子、枸杞子、菊花混合粉末，备用。1.2.6提取称取60g上述药王茶、决明子、枸杞子、菊花混合粉末，用4层纱布包裹后再用绳子束紧，放入1l热水(50±3℃)中浸泡8±3min，然后将热水煮沸，在沸腾状态下提取0.5h，提取结束后在5000rpm条件下离心8±3min，弃沉淀，收集上清液，得到药王茶、决明子、枸杞子、菊花提取液。1.2.7浓缩将药王茶、决明子、枸杞子、菊花提取液真空旋转蒸发浓缩至原体积的1/3～1/4，即得浓缩液。1.2.8冷冻干燥将浓缩液在温度-50±3℃、真空度20±3pa条件下冻干，得到药王茶、决明子、枸杞子、菊花水提物(药食同源原料复合提取物)。1.2.9混料按实验设计配比分别称取药食同源原料复合提取物、甜菊糖苷、葡萄糖酸锌、硒化卡拉胶、抗坏血酸及维生素a，混匀后制得药食同源药王茶复方冲剂。1.2.10药食同源药王茶复方冲剂质量检验采用分光光度法测定药食同源药王茶复方冲剂中的总黄酮含量，采用高效液相色谱法测定药食同源药王茶复方冲剂中大黄酚、甜菜碱、木犀草苷、槲皮苷、槲皮素和没食子酸的含量，要求药食同源药王茶复方冲剂中的总黄酮含量不低于25％、槲皮苷含量不低于1.86mg/g、没食子酸含量不低于1.75mg/g、槲皮素含量不低于1.08mg/g、大黄酚含量不低于4.50μg/g、甜菜碱含量不低于6.50mg/g且木犀草苷含量不低于0.30mg/g，否则认为制备的药食同源药王茶复方冲剂不符合要求。1.3抗氧化实验方法1.3.1dpph自由基清除率的测定用无水乙醇配制0.04mg/ml的dpph溶液，准确吸取样品待测溶液1ml和dpph无水乙醇混合溶液2ml，混匀后室温下避光放置30min，立即于波长517nm处测定吸光度，每个样品平行测定3次。以维生素c为阳性对照。计算各待测样品对dpph自由基的清除率(％)。1.3.2abts自由基清除率的测定先将0.89ml浓度为140mmol/l的过硫酸钾溶液加入到50ml7mmol/l的abts自由基溶液中，过夜，4℃下保存，制成abts储备液。临用前将abts储备液进行稀释，在734nm下使其吸光值为(0.70±0.02)，制成abts工作液。将0.1ml试样加入到1.9ml的abts工作液中，充分混匀，避光反应6min后在734nm下测定吸光值。以维生素c为阳性对照。计算各待测样品对abts自由基的清除率(％)。1.3.3羟基自由基清除率的测定在10.0ml离心管中分别加入9.0mmol/lfeso4溶液1.0ml、1.0ml样品溶液、9.0mmol/lh2o21.0ml，摇匀后静置10min，加入9.0mmol/l水杨酸-乙醇溶液1.0ml，摇匀，37℃保温30min后，冷却，3500r/min离心10min，取上清液于510nm测吸光值。以等体积蒸馏水代替水杨酸为样品对照组，以等体积蒸馏水代替样品为空白对照组，以维生素c为阳性对照，测算羟基自由基清除率(％)。1.4感官评定方法按照感官评价通用原理，结合《植物饮料》(gb/t31326-2014)、《固体饮料》(gb/t29602-2013)等国家标准，制定缓解视觉疲劳药食同源药王茶复方冲剂的感官评定标准，见表1。感官评定小组由20名不同性别、年龄的成员组成，符合相关规定。为了消除评定小组成员主观因素对感官评定结果的影响，评定过程中不对产品做任何可能影响评定结果的标记。表1感官评定标准1.5配方优化方法1.5.1配方优选策略以功能(抗氧化活性)、价格成本和感官特征[色泽、滋(气)味、组织状态、口感]为考察指标，通过多指标综合评价方法优选得出药食同源药王茶复方冲剂的最佳配方。1.5.2药食同源原料配比优选方法综合考量药王茶、决明子、枸杞子、菊花4种药食同源原料及其特定配比混合物的抗氧化活性和价格成本，确定原料最优配比。1.5.3药食同源药王茶复方冲剂配方正交试验方法首先通过预实验(单因素实验)筛选对药食同源药王茶复方冲剂感官特征影响较大的因素，然后通过正交试验进一步确定因素水平。具体地讲，采用单因素实验方法考察了药食同源原料复合提取物添加量、甜菊糖苷添加量、葡萄糖酸锌添加量、维生素a添加量、硒化卡拉胶添加量和抗坏血酸添加量6个因素对药食同源药王茶复方冲剂感官特征的效应，结果发现，药食同源原料复合提取物添加量、硒化卡拉胶添加量、维生素a添加量对风味口感影响较小，因此参考《食品营养强化剂使用标准》(gb14880—2012)《食品添加剂使用标准》(gb2760-2014)等国家标准，将其添加量分别固定为10000份、4份、8份。在此基础上，选择对风味口感影响较大的甜菊糖苷添加量(a)、葡萄糖酸锌添加量(b)和抗坏血酸添加量(c)作为正交试验因素，设计三因素三水平正交试验[l9(33)]优选药食同源药王茶复方冲剂的配方。1.6实验结果与分析1.6.1药食同源原料配比的优选(药食同源原料协同配比的确定)为了确保药食同源药王茶复方冲剂的生物活性(功能)以及生产可行性，通过综合考量药王茶、决明子、枸杞子、菊花4种药食同源原料及其特定配比混合物的抗氧化活性和价格成本，确定了4种原料的最优配比(表2)。大量研究表明，视觉疲劳与氧化应激密切相关，改善机体氧化应激状态有助于缓解视觉疲劳(参见下文)。表2药食同源原料功能(活性)与经济效益分析a药王茶:决明子:菊花:枸杞子＝2:4:3:3。由表2和图1～3可知，药王茶、决明子、枸杞子、菊花4种药食同源原料对abts、dpph、·oh自由基清除活性的ec25和ec50存在较大差异(详见下文)，说明4种药食同源原料的抗氧化能力不同。由表2还可看出，药王茶、决明子、枸杞子、菊花的价格成本也存在较大差异。将药王茶、决明子、菊花、枸杞子按照2:4:3:3的质量比配伍时，抗氧化活性较高，价格成本较低(表2)。按照最优配比(药王茶:决明子:菊花:枸杞子＝2:4:3:3)制备的药食同源原料复合提取物对dpph自由基的清除能力高于单独的决明子、菊花和枸杞子，对abts自由基的清除能力高于单独的枸杞子和决明子，对·oh自由基的清除能力高于单独的决明子(表2)。综上决定，将决明子、菊花、枸杞子与药王茶4种药食同源原料按照最优质量比(药王茶:决明子:菊花:枸杞子＝2:4:3:3)配伍后制备药食同源药王茶复方冲剂。按照该原料配比制得的药食同源原料复合提取物显示出较强的抗氧化活性，并且价格成本较低，具有较好的市场开发前景。1.6.2药食同源药王茶复方冲剂配方的优选根据预实验结果，将药食同源原料复合提取物添加量、硒化卡拉胶添加量、维生素a添加量分别固定为10000份、4份、8份，通过正交试验优选甜菊糖苷添加量(a)、葡萄糖酸锌添加量(b)和抗坏血酸添加量(c)的水平(表3)。由表3可知，甜菊糖苷添加量(a)、葡萄糖酸锌添加量(b)和抗坏血酸添加量(c)的最优理论组合为a3b3c2，即甜菊糖苷、葡萄糖酸锌和抗坏血酸的添加量分别为9000份、1500份和23000份。该理论组合(a3b3c2)中各因素的水平恰好与正交试验的第9个实验相同，而第9个实验的感官评分(84.60)在正交试验的9个实验中最高，这从侧面反映出该理论组合是合理的。由表3、表4和表5的分析结果可以看出，甜菊糖苷添加量(a)对感官品质的影响最大，葡萄糖酸锌添加量(b)次之，抗坏血酸添加量(c)的影响最小。综上所述，药食同源药王茶复方冲剂的最优配方如下：甜菊糖苷添加量9000份，葡萄糖酸锌添加量1500份，抗坏血酸添加量23000份，药食同源原料复合提取物添加量10000份，硒化卡拉胶添加量4份，维生素a添加量8份。按照最优配方制作的药食同源药王茶复方冲剂具有药王茶的特殊香味，滋味鲜爽，酸甜适宜，具备较优越的感官品质。表3正交试验设计与结果表4药食同源药王茶复方冲剂的感官评定结果频数分布表a实验编号与表3中的实验编号相同，数据为评定小组中赞成相应评价等级的人数。表5不同感官指标所占权重打分色泽口感滋(气)味组织状态0.205250.36750.25250.17475二、药食同源药王茶复方冲剂质量控制方法建立2.1实验材料与仪器设备实验材料同前文，仪器设备除了前文所列以外还需要高效液相色谱仪(配c18色谱柱)。2.2实验方法2.2.1药王茶活性成分测定方法的建立2.2.1.1槲皮苷含量的测定参考《中国药典》等的方法采用高效液相色谱法测定槲皮苷含量，色谱条件为：使用c18色谱柱分离，以乙腈和0.5％磷酸溶液为流动相。梯度洗脱，梯度程序为：0～34min，乙腈:0.5％磷酸溶液＝14:86→15:85；34～44min，乙腈:0.5％磷酸溶液＝15:85→24:76；44～65min，乙腈:0.5％磷酸溶液＝24:76→31:69。流速1.0ml/min，检测波长为369nm，柱温25℃，进样量10μl。2.2.1.2槲皮素含量的测定参考《中国药典》等的方法采用高效液相色谱法测定槲皮素含量，色谱条件为：使用c18色谱柱分离，以乙腈和0.5％磷酸溶液为流动相。梯度洗脱，梯度程序为：0～34min，乙腈:0.5％磷酸溶液＝14:86→15:85；34～44min，乙腈:0.5％磷酸溶液＝15:85→24:76；44～65min，乙腈:0.5％磷酸溶液＝24:76→31:69。流速1.0ml/min，检测波长为369nm，柱温25℃，进样量10μl。2.2.1.3没食子酸含量的测定参考《中国药典》的方法采用高效液相色谱法测定没食子酸含量，色谱条件为：使用c18色谱柱分离，以甲醇和0.05％磷酸溶液为流动相，等度洗脱，其中流动相比例为甲醇:0.05％磷酸溶液＝7:93，时间30min。流速1.0ml/min，检测波长为271nm，柱温30℃，进样量10μl。2.2.2药食同源药王茶复方冲剂的质量控制方法的建立2.2.2.1总黄酮测定方法的建立参考《蜂胶中总黄酮含量的测定方法分光光度比色法》(gb/t20574-2006)国家标准测定药食同源药王茶复方冲剂中总黄酮的含量。2.2.2.2大黄酚含量的测定采用高效液相色谱法测定大黄酚含量，色谱条件为：使用c18色谱柱分离，以乙腈和0.1％磷酸溶液为流动相，梯度洗脱，梯度程序为：0～15min，乙腈:0.1％磷酸溶液＝40:60；15～30min，乙腈:0.1％磷酸溶液＝40:60→90:10；30～40min，乙腈:0.1％磷酸溶液＝90:10。流速1.0ml/min，检测波长为284nm，柱温30℃，进样量10μl。2.2.2.3木犀草苷含量的测定采用高效液相色谱法测定木犀草苷含量，色谱条件为：使用c18色谱柱分离，以甲醇和0.5％乙酸溶液为流动相。梯度洗脱，其梯度程序为：0～5min，甲醇:0.5％乙酸溶液＝15:85→30:70；5～8min，甲醇:0.5％乙酸溶液＝30:70→50:50；8-16min，甲醇:0.5％乙酸溶液＝50:50→52:48；16～20min，甲醇:0.5％乙酸溶液＝52:48→54:46。流速1.0ml/min，检测波长为254nm，柱温30℃，进样量10μl。2.2.2.4甜菜碱含量的测定采用高效液相色谱法测定甜菜碱含量，色谱条件为：使用c18色谱柱分离，以50mmol/l的kh2po4为流动相，流速0.4ml/min，检测波长为200nm，柱温30℃，进样量20μl。其余实验方法同前文。2.3实验结果与分析2.3.1药王茶原料质量控制方法对药王茶原料的质量控制方法包括：1)采用肉眼观测方法考察药王茶的外观性状，要求其叶片表面呈绿色至暗绿色，如果呈其他颜色(如黄色至褐色)则认定为不符合要求；要求无霉变，如果有霉斑认定为不符合要求。2)采用高效液相色谱法测定药王茶中槲皮苷、没食子酸、槲皮素的含量，要求槲皮苷含量不低于0.210％、没食子酸含量不低于0.205％且槲皮素含量不低于0.120％，否则认定为不符合要求。同时通过肉眼观测方法和高效液相色谱法检测的药王茶原料方可用于药食同源药王茶复方冲剂制备。2.3.2药食同源药王茶复方冲剂质量控制方法对药食同源药王茶复方冲剂的质量控制方法为：1)采用分光光度法测定药食同源药王茶复方冲剂中总黄酮的含量，要求总黄酮含量不低于25％，否则认定为不符合要求。2)采用高效液相色谱法测定药食同源药王茶复方冲剂中槲皮苷、没食子酸、槲皮素、大黄酚、甜菜碱和木犀草苷的含量，要求槲皮苷含量不低于1.86mg/g、没食子酸含量不低于1.75mg/g、槲皮素含量不低于1.08mg/g、大黄酚含量不低于4.50μg/g、甜菜碱含量不低于6.50mg/g且木犀草苷含量不低于0.30mg/g，否则就认定为不符合要求。同时通过分光光度法和高效液相色谱法检测的药食同源药王茶复方冲剂方为合格产品。槲皮苷、没食子酸、槲皮素是药王茶的重要活性成分，大黄酚是决明子的标志性化合物，甜菜碱是枸杞子的主要活性物质，木犀草苷是菊花的主要活性物质。以大黄酚、甜菜碱、木犀草苷、槲皮苷、没食子酸、槲皮素为药食同源药王茶复方冲剂的质量控制指标，可以精确控制复方冲剂的质量，确保复方冲剂的生物活性(缓解视觉疲劳功能)。三、药食同源药王茶复方冲剂营养组成和品质特征分析3.1实验材料与仪器设备按照前述配比和方法制备药食同源药王茶复方冲剂。主要试剂包括2,6-二氯靛酚(分析纯)、硝酸铝(al(no3)3,分析纯)、偏磷酸(hpo3,分析纯)、考马斯亮蓝g-250染液。仪器设备主要包括电感耦合等离子体原子发射光谱仪、高效液相色谱仪(配c18色谱柱)、分光光度计。其余实验材料与仪器设备同前文。3.2实验方法3.2.1抗坏血酸定量分析方法参照《食品中抗坏血酸的测定》(gb5009.86-2016)国家标准中的2,6-二氯靛酚滴定法测定抗坏血酸含量。3.2.2重金属与微量元素定量分析方法3.2.2.1锌参照《食品中锌的测定》(gb5009.14-2017)国家标准，使用电感耦合等离子体原子发射光谱仪测定法测定锌含量。3.2.2.2铅参照《食品中铅的测定》(gb5009.12-2017)国家标准，使用电感耦合等离子体原子发射光谱仪测定法测定铅含量。3.2.2.3硒参照《食品中硒的测定》(gb5009.93-2017)国家标准，使用电感耦合等离子体原子发射光谱仪测定法测定硒含量。3.2.3蛋白质使用经典的考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量。3.2.4植物次级代谢产物定量分析方法3.2.4.1大黄酚测定方法见上文。3.2.4.2木犀草苷测定方法见上文。3.2.4.3甜菜碱测定方法见上文。3.2.4.4总黄酮测定方法见上文。3.2.4.5槲皮苷测定方法见上文。3.2.4.6槲皮素测定方法见上文。3.2.5冲调性能分析方法3.2.5.1浸润下沉性参考《固体饮料》(gb/t29602-2013)等标准规范，将蒸馏水倒入烧杯中，称取一定量药食同源药王茶复方冲剂，快速地散布在水面上，记录药食同源药王茶复方冲剂在静止状态和搅拌情况下全部浸润下沉所需时间。3.2.5.2速溶性称取一定量药食同源药王茶复方冲剂，倾入烧杯中，用蒸馏水冲调，搅拌均匀后观察其溶解效果。3.3实验结果与分析3.3.1微量元素测定发现，药食同源药王茶复方冲剂中锌的含量为4.80mg/g，硒含量为0.16μg/g。锌是人体必需的微量元素，具有改善眼部营养、保护视力的作用。动物实验发现，锌与眼球维生素a的含量密切相关。人体实验发现，体内锌水平与近视发生率之间存在一定的相关性。补充锌等微量元素有助于促进儿童的视力发育[19]。硒对视觉器官的功能也是极为重要的。硒有助于消除对眼睛有害的自由基。如果人眼长期处于缺硒状态，可能导致视力下降甚至出现眼部疾病(如白内障、视网膜病变)。临床试验表明，硒对提高视力有一定的作用。药食同源药王茶复方冲剂中含有一定量的锌、硒元素，有助于保护视力。3.3.2维生素测定发现，药食同源药王茶复方冲剂中含有抗坏血酸和维生素a。抗坏血酸具有抗氧化、调节免疫、参与氨基酸和蛋白质代谢等多种生物功能。抗坏血酸在眼球晶状体、角膜中分布较多，能够减除光诱导的眼球氧化损伤。适量补充抗坏血酸有助于防治早期角膜水肿、白内障以及某些化学性、物理性眼部损伤。维生素a是维护眼睛正常功能的必需物质。药食同源药王茶复方冲剂中含有维生素a和抗坏血酸，有利于维持眼球健康。此外，抗坏血酸还能作为酸味剂调整药食同源药王茶复方冲剂的口感，使之酸甜适宜。3.3.3蛋白质测定发现，药食同源药王茶复方冲剂中蛋白质含量为53.45mg/g。蛋白质是人体必需的营养物质。药食同源药王茶复方冲剂中含有较丰富的蛋白质，有助于补充蛋白质和氨基酸，维护眼球组织健康。3.3.4总黄酮测定发现，药食同源药王茶复方冲剂中总黄酮含量为28.43％。视觉疲劳与氧化应激存在较大的相关性。研究发现，药王茶、决明子、枸杞子、菊花中的黄酮类化合物具有较好的抗氧化作用，适量摄入有利于减除自由基氧化损伤。3.3.5大黄酚测定发现，药食同源药王茶复方冲剂中大黄酚含量为5.3μg/g。大黄酚是决明子的主要活性成分，具有一定的抗菌作用，对急性结膜炎、急性角膜炎等眼部感染有较好的疗效[41-43]。3.3.6甜菜碱测定发现，药食同源药王茶复方冲剂中甜菜碱含量为6.67mg/g。甜菜碱是枸杞子的主要活性成分，具有抗氧化、保肝等多种药理作用。中医认为，肝脏功能与眼睛健康存在密切关系。3.3.7木犀草苷测定发现，药食同源药王茶复方冲剂中木犀草苷含量为0.32mg/g。木犀草苷是菊花的主要活性成分，具有保护心血管系统与中枢神经系统等作用。3.3.8槲皮苷测定发现，药食同源药王茶复方冲剂中槲皮苷含量为2.05mg/g。槲皮苷具有一定的抗氧化和消炎作用。3.3.9槲皮素测定发现，药食同源药王茶复方冲剂中槲皮素含量为1.56mg/g。槲皮素具有多重生物活性，如抗氧化、抗病毒、抗炎作用，对肝脏疾病、神经系统疾病等具有一定的积极作用。3.3.10没食子酸测定发现，药食同源药王茶复方冲剂中没食子酸含量为1.98mg/g。没食子酸具有抗炎、抗突变、抗氧化等多种生物学活性；此外，没食子酸对肝脏具有一定的保护作用，可以抵抗四氯化碳诱导的肝脏损伤。3.3.11重金属测定发现，药食同源药王茶复方冲剂中铅含量为6.1μg/kg，未检出其他重金属。国家标准中铅限量为1.0mg/kg。可以看出，药食同源药王茶复方冲剂的重金属含量达到了国家标准要求，即其在重金属方面的安全性较好。3.3.12冲调性能分析浸润下沉性试验分析发现，药食同源药王茶复方冲剂在静止条件下全部浸润下沉的时间为117.00s，在搅拌条件下为18.17s。速溶性试验分析发现，药食同源药王茶复方冲剂冲调后未出现团块或颗粒，杯底无明显沉淀。浸润下沉性、速溶性实验结果表明药食同源药王茶复方冲剂冲调性能较好。综上可知，药食同源药王茶复方冲剂中含有微量元素锌和硒、抗坏血酸、蛋白质、黄酮类化合物、大黄酚、木犀草苷、甜菜碱等多种营养素和活性物质，很多成分在维护眼球组织健康、缓解视觉疲劳方面具有重要作用。药食同源药王茶复方冲剂中重金属含量符合国家标准要求，说明其安全性较好。浸润下沉性、速溶性试验表明药食同源药王茶复方冲剂冲调性能较好。药食同源药王茶复方冲剂比液体饮料更加易于储存和携带。四、药食同源药王茶复方冲剂缓解视觉疲劳功能评价4.1实验材料与仪器设备实验仪器为视力表、“品”字形立体方块图。其余实验材料与仪器设备同前文。4.2实验方法4.2.1抗氧化活性实验方法abts、dpph、·oh实验方法见上文。4.2.2缓解视觉疲劳功能评价方法参照国家食品药品监督管理总局(现国家市场监督管理总局)《关于印发抗氧化功能评价方法等9个保健功能评价方法的通知》所列方法对药食同源药王茶复方冲剂的缓解视觉疲劳作用进行测评。实验分成2个大组：药食同源药王茶复方冲剂试食组(简称试食组)和对照组(不服用药食同源药王茶复方冲剂组)。每个大组按照实验设计分成若干个小组。采用问卷调查与眼科检验相结合的方法测试药食同源药王茶复方冲剂的缓解视觉疲劳功效。4.3实验结果与分析4.3.1抗氧化活性由图1～3可见，随着药王茶、决明子、枸杞子、菊花提取物浓度的增加，它们对abts、dpph、·oh自由基的清除率也逐渐升高，提示这4种药食同源原料均具有一定的抗氧化活性。将药王茶、决明子、枸杞子、菊花按照前文优选的最优配比(药王茶:决明子:菊花:枸杞子＝2:4:3:3)混合后制得的药食同源原料复合提取物具有较好的抗氧化活性(表6)。药食同源原料复合提取物对dpph自由基清除率的ec25和ec50低于单独的决明子，也低于单独的菊花和枸杞子；对abts自由基清除率的ec25和ec50低于单独的枸杞子和决明子；对·oh自由基清除率的ec25和ec50低于单独的决明子(表2和表6)，提示将4种药食同源原料按照一定质量比(药王茶:决明子:菊花:枸杞子＝2:4:3:3)混合制成复合提取物后，其抗氧化活性明显提升，显示出一定的协同增效作用(表6)。由表6可知，药食同源药王茶复方冲剂对abts、dpph、·oh自由基清除率的ec25和ec50均低于药食同源原料复合提取物，说明药食同源原料复合提取物与抗坏血酸、硒化卡拉胶等按照一定质量比制成复方冲剂后，其抗氧化活性进一步提升。由表6还可看出，药食同源药王茶复方冲剂对dpph自由基清除率的ec25和ec50低于单独的药王茶、菊花、枸杞子和决明子，对abts自由基清除率的ec25和ec50低于单独的菊花、枸杞子和决明子，对·oh自由基清除率的ec25和ec50也低于单独的菊花、枸杞子和决明子，说明以药王茶、菊花、枸杞子和决明子为原料制备的复方冲剂具有较强的抗氧化活性。表6抗氧化活性分析结果a拟合方程中，x与y分别代表质量浓度与自由基清除率。药食同源药王茶复方冲剂的抗氧化活性可能与其中较丰富的黄酮类化合物(参见前文)、抗坏血酸等有关。视觉疲劳的发生、发展机制非常复杂，许多研究表明视觉疲劳与氧化应激之间存在极其密切的关联性。长期从事注视性学习或工作容易使眼部组织代谢量加大，生成较多的自由基等代谢废物，造成较严重的氧化应激状态，从而伤害眼部组织，引发或加剧视觉疲劳。药食同源药王茶复方冲剂具有较好的自由基清除活性，对于缓解视觉疲劳具有积极效应。4.2.2症状改善有效率测试发现，试食组的视觉疲劳改善有效率为100％，而对照组的改善有效率为0，提示药食同源药王茶复方冲剂对视觉疲劳症状有一定的改善效果。4.2.3症状平均积分由表7可知，试食组的小组成员服用药食同源药王茶复方冲剂后视觉疲劳症状积分明显降低；而对照组多数小组成员的症状积分没有明显降低，个别反而有所升高。将试食组自身进行比较可知，调查前、后的症状积分存在显著差异(p<0.05)；将对照组自身进行比较可知，调查前、后的症状积分差异不显著(p>0.05)。表7视觉疲劳症状平均积分分析4.2.4明视持久度由表8可知，药食同源药王茶复方冲剂试食前的明视持久度平均值为42.42％，试食后为72.39％，明视持久度的增幅超过了10％。统计分析发现，试食前、后的明视持久度存在显著差异(p<0.05)。表8明视持久度分析分组试食前明视持久度(％)试食后明视持久度(％)159.4880.56252.5682.78353.7875.56448.0778.89544.1180.00642.5265.00738.1166.11831.8966.67927.0463.891026.6764.44平均值42.4272.39综上可知，药食同源药王茶复方冲剂具有较强的抗氧化活性，能够降低视觉疲劳症状平均积分，提高症状改善有效率和明视持久度，说明其具有较好的缓解视觉疲劳功能。当前第1页12