专利名称：抗乙肝转移因子制备工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及生物化学制药技术领域，确切地说是公开了一种抗乙肝转移因子制备工艺。
以往的抗乙肝转移因子的制备工艺是采用透析法或超滤法，截留分子量为10,000dt，该工艺制备的抗乙肝转移因子杂质含量高、稳定性差、临床效果不理想。
本发明公开了一种抗乙肝转移因子制备工艺，目的旨在提高抗乙肝转移因子的纯度、增加制品的稳定性、改善临床疗效，使之更适用于临床应用。
针对本发明的目的，采用的具体解决方案如下取用乙肝疫苗免疫合格的动物脾脏用注射用水洗净，按1∶3～5的比例加入生理盐水制成匀浆，经-10℃～-30℃反复冻融，经3000rpm离心，取上清液，用5000dt超滤膜超滤，取滤液冻干，既得本发明产品，取冻干粉测定活性，活性应大于50％(活性指数)本发明的关键在于采用5000dt超滤膜将截留分子量由10,000dt降至5,000dt，其积极效果是提高了产品的纯度，去除了5,000dt～10,000dt间的杂质，增强了制品的活性和稳定性，改善了临床疗效。
下面结合实施例进一步说明本发明实施例1取用乙肝疫苗免疫合格的猪脾脏100克，用注射用水洗净，加300ml生理盐水通过匀浆机匀浆，在-10℃～-20℃反复冻融五次，在3000rpm低温离心机上离心30分钟，取上清液，经5000dt超滤膜超滤，冻干得本发明，经测定活性为84.8％活性指数。
实施例2取用乙肝疫苗免疫合格的羊脾脏180克，用注射用水洗净，加750ml生理盐水通过匀浆机匀浆，在-10℃～-30℃反复冻融七次，在3000rpm低温离心机上离心30分钟，取上清液，经5000dt超滤膜超滤，冻于得本发明，经测定活性为63.3％活性指数。
实施例3取用乙肝疫苗免疫合格的猪脾脏250克，用注射用水洗净，加1250ml生理盐水通过匀浆机匀浆，在-10℃～-25℃反复冻融六次，在3000rpm低温离心机上离心30分钟，取上清液，经5000dt超滤膜超滤，冻干得本发明，经测定活性为74.4％活性指数。
10,000dt膜与5,000dt膜超滤效果比较1、10,000dt抗乙肝转移因子与5,000dt抗乙肝转移因子治疗乙型肝炎临床疗效比较
2、10,000dt抗乙肝转移因子与5,000dt抗乙肝转移因子纯度的高效液相色谱(HPLC)比较，用10,000dt超滤膜获得的抗乙肝转移因子，HPLC分析有九个峰，即有九个成分。而5,000dt膜超滤后HPLC分析只有4个峰，即4种成分。而国际公认的抗乙肝转移因子的分子量小于5,000dt，故上述结果表明改为5,000dt膜超滤后较10,000dt膜超滤时纯度大为提高。
3、10,000dt抗乙肝转移因子与5,000dt抗乙肝转移因子活性比较<
4、10,000dt抗乙肝转移因子与5,000dt抗乙肝转移因子半衰期比较
半衰期为37℃，粘附抑制指数下降一半所需的时间
权利要求
1.一种抗乙肝转移因子制备工艺，包括将用乙肝疫苗免疫合格的动物脾脏用注射用水洗净，按1∶3～5的比例加入生理盐水制成匀浆，经-10℃～-30℃反复冻融，经3000rpm离心，取上清液，超滤膜超滤，取滤液冻干，其特征在于用5000dt超滤膜进行超滤。
全文摘要
本发明公开了一种抗乙肝转移因子制备工艺,采用超滤法从用乙肝疫苗免疫合格的动物脾脏中制备抗乙肝转移因子,本发明的关键在于采用5000dt超滤膜将乙肝转移因子截留分子量由10,000dt降至5,000dt,其积极效果是提高了产品的纯度,去除了5,000dt～10,000dt间的杂质,增强了制品的活性和稳定性,改善了临床疗效。
文档编号C12P21/00GK1229853SQ9911280
公开日1999年9月29日 申请日期1999年4月1日 优先权日1999年4月1日
发明者唐群雁, 孟庆文 申请人:长春高斯达生化药业集团股份有限公司