一种玉米豆粕日粮用复合酶及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于酶制剂领域，具体涉及一种玉米豆柏日粮用复合酶及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 开发玉米豆柏类饲料用的复合酶制剂有利于提高玉米豆柏型饲料的消化吸收效 率，提尚养殖效益，有良好的市场如景。
[0003] 名称为一种玉米豆柏型饲料复合酶添加剂及其应用发明专利，【申请号】 201110041719. 6发明提供了一种玉米豆柏型复合酶添加剂及其应用，复合酶添加剂由以 下组分组成：木聚糖酶10% -15% ;纤维素酶8% -15% ; 0 -甘露聚糖酶3% -8% ; a -半 乳糖苷酶5% -15% ;酸性蛋白酶5% -10% ;中温淀粉酶10% -20% ;糖化酶5% -10% ;载 体7%-54%。-该发明所述复合酶添加剂可以分解玉米豆柏中的营养物质和畜禽难以消化 的粗纤维等大量抗营养因子等，从而充分发掘玉米豆柏中的能量，帮助畜禽提高对玉米豆 柏型饲料的消化能力，降低料肉比；提高营养物质消化率和表观代谢能，减少回肠微生物 数量；与类似添加剂相比具有高效性、专一性和添加量少等优点；使用所述复合酶添加剂 可促进动物生长、提高饲料转化效率。
[0004] 杜仲，富含苯丙素类化合物、环烯醚萜类等活性成分，具有清除体内垃圾，加强细 胞物质代谢，分解体内胆固醇，降低体内脂肪，广谱抗菌，提高白血球数量，增强免疫力等显 著功效。杜仲纯粉在动物实验上的结果表明：可促进胆固醇和脂质代谢；添加杜仲纯粉饲 养的鳗鱼，具有天然鳗鱼的味道；将杜仲纯粉添加到饲料中可提高肉鸡的品质，使之具有 诱人的香味和品质。
[0005] 茯苓具有利水渗湿，健脾化痰，宁心安神，败毒抗癌的作用，可松弛消化道平滑肌， 抑制胃酸分泌，防止肝细胞坏死，抗菌等功效；所含茯苓酸具有增强免疫力、抗肿瘤以及镇 静、降血糖等的作用；茯苓多糖能降低点带石斑鱼血清A/G值，提高血清补体C3含量，提高 血液白细胞数和白细胞吞噬率，提高其非特异性免疫力。
[0006] 玉米豆柏日粮用复合酶的应用有着其广阔的市场空间和巨大的经济价值，但玉米 豆柏日粮用复合酶的热稳定性、安全性、复配全面性及作用效果的充分发挥仍是酶制剂生 产厂家和广大养殖户共同关注的一个重要问题，制备更安全，更全面，酶作用效果更好的玉 米豆柏日粮用复合酶是本行业技术人员的共同责任和追求。
【发明内容】
[0007] 本发明所解决的技术问题提供一种玉米豆柏日粮用复合酶及其制备方法；
[0008] 所述玉米豆柏日粮用复合酶，由以下重量份数的原料组成：0 _葡聚糖酶5-10,木 聚糖酶8-10,纤维素酶8-15,中温a -淀粉酶3-5,半乳糖苷酶1-2,酸性蛋白酶1-2,甘露聚 糖酶0. 5-1，植物乳杆菌胶囊1-2,植物制剂2-4份，生姜提取物1-2份，甘草1-2份。
[0009] 所述木聚糖酶、e -葡聚糖酶、纤维素酶、中温a -淀粉酶等均为食品级酶制剂；
[0010] 所述植物制剂的制备方法如下：
[0011] 称取决明子10-18份；杜仲5-15份；茯苓10-15份；分别将上述中草药粉碎至粒 径为2毫米以下，然后于容器中均匀混合并添加3-6倍重量的水，添加上述混合物料组分质 量1-2%的酸性纤维素酶，控制温度45-55°C，pH :3. 5-4,保持1-2h，随后添加混合物料2-3 倍重量乙醇和丙醇的混合物，控制温度至60°C -78°C保持3-4h，过滤；滤液真空浓缩后冷冻 干燥获得植物制剂。
[0012] 所述乙醇和丙醇的质量比例为1 :1-1. 5 ;乙醇浓度为95% ;丙醇浓度为100% ;
[0013] 所述生姜提取物的制备方法如下：
[0014] 将粉碎至粒径为2毫米以下生姜置于容器中，添加生姜3-6倍重量的水，控制温度 50°C _60°C保持2-3h，添加生姜2-3倍重量乙醇和甲醇的混合物，控制温度至30°C _40°C保 持3-8h，过滤；滤液真空浓缩后冷冻干燥获得生姜提取物。
[0015] 所述乙醇和甲醇的质量比例为1 :2,乙醇浓度85-95% ;甲醇浓度100%。
[0016] 所述植物乳杆菌胶囊的制备方法如下：
[0017] 植物乳杆菌胶囊产品由壁材、植物乳杆菌、冻干保护剂、水苏糖和羊肚菌酶解粉组 成。
[0018] 所述的壁材由酶解大豆分离蛋白、壳聚糖、黄原胶、卡拉胶、甘油和海藻糖组成；上 述各物质配成混合溶液时的浓度分别为：酶解大豆分离蛋白7-10%、壳聚糖1-2%、黄原胶 1-3%、卡拉胶 0. 1-0. 5%、甘油 0. 3-1%、海藻糖 0. 5-2%。
[0019] 酶解大豆分离蛋白的制备方法为：配制浓度为10-13%大豆分离蛋白溶液加热到 30-45°C，调整pH到3-5,加入大豆分离蛋白重量0. 1-1 %的酸性蛋白酶保温酶解0. 5-1. 5 小时，酶解后溶液喷雾干燥获得酶解大豆分离蛋白。
[0020] 羊肚菌酶解粉制备方法如下：
[0021] (1)羊肚菌子实体干燥粉碎；
[0022] (2)水溶均质：将粉碎的羊肚菌子实体加入不锈钢筒中，加入子实体3-6倍重量的 水，浸泡3-5小时，然后将此羊肚菌子实体液通过胶体磨，胶体磨操作条件为：调整胶体磨 定子与转子的间隙为〇. 5-1微米，胶体磨流量为0. 4-1吨/小时；
[0023] (3)升温酶解：将经过胶体磨处理的羊肚菌子实体液混合液转移到不锈钢酶解罐 中加热到50-60°C，调整pH到4. 5-6. 0,加入羊肚菌子实体重量0. 05-0. 1 %的纤维素酶、 0. 01-0. 1%的0-葡聚糖酶、0.01-0. 1%的蛋白酶，保温酶解0.5-1. 5小时，酶解过程中不 断搅拌。
[0024] (4)干燥：酶解后的醪液过滤后干燥获得羊肚菌酶解粉。
[0025] 所述干燥可以采用常规喷雾干燥、冷冻干燥等干燥形式。
[0026] 所述冻干保护剂由脱脂奶粉、海藻糖和麦芽糊精组成。
[0027] 本发明胶囊产品包含的植物乳杆菌优选CGMCC NO. 9405。
[0028] 上述植物乳杆菌胶囊产品制备方法如下：
[0029] 1)制备芯材：向经发酵罐发酵培养的植物乳杆菌发酵液中添加发酵液质量3-5% 的水苏糖和5-8%的羊肚菌酶解粉，然后与冻干保护剂溶液混合，-50°C下预冻0. 5h，然后 在真空冷冻干燥机中冻干l〇_18h，冻干后研磨粉碎制成芯材；
[0030] 所述发酵液与冻干保护剂溶液的比例为1:1. 4-0.8 ;所述冻干保护剂溶液由脱脂 奶粉、海藻糖和麦芽糊精溶液组成；三种溶液的体积比为脱脂奶粉：海藻糖：麦芽糊精= 3:1:0? 5 ;
[0031] 所述脱脂奶粉、海藻糖和麦芽糊精溶液的浓度分别为：脱脂奶粉5%，海藻糖1%， 麦芽糊精2%。
[0032] 2)包被：将芯材悬浮在流化床中，壁材喷雾包被，从一个喷头中喷入壳聚糖、甘油 和海藻糖的混合液，从另一个喷头中喷入黄原胶、卡拉胶和酶解大豆分离蛋白的混合液，喷 雾速度控制相同，包被过程中流化床内温度在25-38 °C之间，30分钟后即形成胶囊。此干燥 方法采用专利201120503311. 1中设备处理。
[0033]所述中温a-淀粉酶具有以下特性：
[0034] (1)该酶温度适应范围较宽，温度在55_75°C之间活性较高，最适作用温度为 65。。；
[0035] 热稳定性：该酶在65°C条件下保存24h仍具有80-83%酶活，70°C条件下保存12h 仍具有50-60%以上酶活。
[0036] (2)该酶最适反应pH值为5. 0 ;在pH值4. 0-6. 0之间均有较高酶活力；
[0037] 酸稳定性：在pH4_6下保存18h后仍有80%以上的酶活。
[0038] (3)酶活性：菌株304通过发酵制备的酸性中温a-淀粉酶酶活力为7000-9600U/ ml，特别适合液化工艺与糖化工艺并存的工业化需求。
[0039] 所述淀粉酶为中温a -淀粉酶，采用液体发酵法培养获得。
[0040] 本发明提供的产中温a-淀粉酶的菌株具体为枯草芽孢杆菌304(Bacillus SUbtilis)304。该菌株已于2013年11月24日保藏于中国典型培养物保藏中心（简称 CCTCC，地址为：中国.武汉.武汉大学），保藏号为CCTCC NO:M 2013600。
[0041] 所述枯草芽孢杆菌304由一株分离自酸性土壤的产中温a-淀粉酶的枯草芽孢杆 菌出发菌株经紫外线-氯化锂-硫酸二乙酯复合诱变筛选获得，菌株特点如下