一种中草药微生物发酵制剂、制备方法及其使用方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于饲料添加剂配方设计和生物发酵领域，具体涉及一种中草药微生物发 酵制剂及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 饲用抗生素在给动物生产带来巨大促进作用的同时，其弊端也日益显著，如引起 内源感染和二重感染、耐药菌的产生、机体免疫力下降以及药物的残留等；另外，抗生素残 留在畜禽产品中，可破坏人类胃肠道微生态平衡，引起疾病的发生，损害人类的健康，此外， 抗菌药物残留于动物性食品中，还会造成人与药物的长期接触，导致人体内耐药菌的增加。 因此，研宄和开发新型的抗生素替代品是非常必要的。目前，中草药在动物生产方面的应用 与开发已成为一大研宄热点。
[0003] 我国的中草药资源非常丰富，其含有丰富的蛋白质、糖类、脂类、维生素、微量元素 等物质，活性成分主要包括多糖类、生物碱类、有机酸类、黄酮类、多酚类、苷类、萜类、挥发 油类等。中草药在畜禽保健上发挥着重要功效，不仅可以促进动物生长、改善畜禽产品质 量、增强动物机体免疫力，并且具有低毒、低残留的特点，而且其自身也是营养物质，可作为 饲料中营养成分的有益补充，满足动物机体对均衡营养的需求。
[0004] 奠肠球菌/aeca/is)是革兰氏阳性菌，1994年出版的《伯杰氏细 菌鉴定手册》将该菌列为肠球菌属。粪肠球菌存在于人和大多数动物的肠道内，是人体肠道 内的重要菌群，能耐受胃酸和胆汁酸，粪肠球菌作为微生物制剂，可以对宿主胃肠道进行微 生态调节，增强动物免疫力。
[0005] 利用生物发酵技术将中草药中的有效活性成分在温和的反应条件下大量快速的 释放出来，同时产生新的活性成分、降低中草药的毒副作用。这发挥了益生菌和中草药在动 物生产上促进动物生长和增强动物机体免疫力的双重效果。
【发明内容】
[0006] 本发明要解决的技术问题是抗生素作为药物或饲料添加剂，具有药物残留、出现 耐药菌株、破坏动物肠道正常菌群等缺点。为解决上述问题，本发明利用微生物发酵技术， 对中草药进行发酵，提供一种中草药微生物发酵制剂、制备方法及其使用方法，该制剂绿色 健康，无毒副作用且安全有效。
[0007] 本发明的目的是以下述方式实现的： 一种畜禽用中草药微生物发酵制剂，其特征在于：由以下四种原料制备而成： 一：中药原料，以重量份数计为：黄芪5. 0~15份、当归I. 0~10. 0份； 二：培养基，以重量份数计为：葡萄糖2. 5~10. 5份、蛋白胨2. 5~10. 5份、酵母粉 0. 35~1. 35份、磷酸氢二钾0. 15~0. 75份、硫酸镁0. 015~0. 075份、硫酸锰0. 0035~ 0. 0135份、碳酸钙0. 8~3. 3份、氯化钠0. 45~1. 65份； 三：菌液，以体积份数计为：粪肠球菌菌液3. 0~10份； 四：辅料，麸皮5. O~20份。
[0008]上述畜禽用中草药微生物发酵制剂，由以下四种原料制备而成：中药原料以重量 份数计为：黄芪8. 3份、当归1. 7份；培养基以重量份数计为：葡萄糖3. 0份、蛋白胨3. 0份、 酵母粉〇. 4份、磷酸氢二钾0. 2份、硫酸镁0. 02份、硫酸锰0. 004份、碳酸钙I. 0份、氯化钠 0. 5份；菌液以体积份数计为：粪肠球菌菌液5. 0份；辅料以重量份数计为：麸皮15份。
[0009]上述畜禽用中草药微生物发酵制剂，所述粪肠球菌菌液是通过以下步骤制得的： 粪肠球菌先接种于斜面培养基，32~42°C条件下培养20~28h进行活化，然后将斜面培养 基上产生的悬浮液加入到种子培养基中扩大培养，32~42°C条件下静置培养18~20 h，至 对数生长期菌液浓度为〇. 7 X IO8~2. OX 10 8cfu/ml时，制备得到一级种子菌液，即粪肠 球菌菌液。
[0010] 上述畜禽用中草药微生物发酵制剂，所述粪肠球菌菌液是通过以下步骤制得的： 粪肠球菌先接种于斜面培养基，37°C条件下培养24h进行活化，然后将斜面培养基上产生 的悬浮液加入到种子培养基中扩大培养，37°C条件下静置培养18~20 h，至对数生长期菌 液浓度为〇. 7 X IO8~2. OX 10 8cfu/ml时，制备得到一级种子菌液，即粪肠球菌菌液。
[0011] 上述中草药微生物发酵制剂的制备方法，具体步骤如下： (1) 称取中药原料，将中药原料粉碎后，混合均匀，加入100~500份水，煮沸1~3 h， 得中药料液；然后加入葡萄糖、蛋白胨、酵母粉、磷酸氢二钾、硫酸镁、硫酸锰、碳酸钙、氯化 钠并混合均勾；于ll〇°C~120°C条件下高压蒸汽灭菌15~20 min后，降温至25~35°C， 得发酵培养基； (2) 粪肠球菌先接种于斜面培养基，32~42°C条件下培养20~28h进行活化，然后 将斜面培养基上产生的悬浮液加入到种子培养基中扩大培养，32~42°C条件下静置培养 18~20 h，至对数生长期菌液浓度为0. 7 X IO8~2. OX 10 8cfu/ml时，制备得到一级种子 菌液，即粪肠球菌菌液； (3) 将上述步骤（1)灭菌降温后的发酵培养基和（2)粪肠球菌菌液3.0~10体积份 混合均匀，发酵2~5天，控制温度在35~40°C ;发酵结束后，通过离心，将发酵液和沉淀 分开； (4) 将（3)中的发酵液浓缩后低温喷雾干燥得到干燥粉末，水分含量不高于10% ;将（3) 中的沉淀与麸皮混合，得到含有粪肠球菌菌粉及发酵液滤渣的干燥产物，产物水分含量不 尚于10% ; (5) 将（4)中的干燥粉末和干燥产物混合均匀，封装，其活菌数在2. OX IO9 cfu/g以上。
[0012] 上述中草药微生物发酵制剂的制备方法，所述步骤（1)混合均匀后于115 °C条件 下高压蒸汽灭菌15~20 min后，降温至25~35°C，得发酵培养基；所述（2)粪肠球菌先 接种于斜面培养基，37°C条件下培养24 h进行活化，然后将斜面培养基上产生的悬浮液 加入到种子培养基中扩大培养，37°C条件下静置培养18-20 h，至对数生长期菌液浓度为 0. 7 X IO8~2. 0 X 10 8cfu/ml时，制备得到一级种子菌液，即粪肠球菌菌液。
[0013]上述中草药微生物发酵制剂的制备方法，所述中草药和麸皮经粉碎过60~80目 筛。
[0014]上述中草药微生物发酵制剂的使用方法，由基础日粮和包含权利要求1-3中任一 项所述的中草药微生物发酵制剂组成，所述基础日粮和中草药微生物发酵制剂的重量配比 为 1:0. 4 ~1.0 o
[0015]本发明中，重量份单位是kg时，对应的体积份单位为1，重量份单位为g时，对应的 体积份单位是ml。
[0016] 在本发明中，黄芪，味甘性温，含黄芪苷、黄芪多糖、毛蕊异黄酮等有效成分，能够 益气壮阳，养血滋阴，对痢疾杆菌、溶血性链球菌、肺炎双球菌金黄色葡萄球菌等有抑制作 用，可以增强动物抗病力和免疫力；当归，味甘性温，含有当归多糖、阿魏酸、藁本内酯等有 效成分，有补血、和血、润肠通便之功效，能显著促进机体造血功能，升高红细胞、白细胞和 血红蛋白含量，同时对痢疾杆菌、伤寒杆菌、大肠杆菌、溶血性链球菌及肺炎双球菌等有抑 制作用。葡萄糖、蛋白胨、酵母粉、磷酸氢二钾、硫酸镁、硫酸锰、碳酸钙、氯化钠，主要为有益 菌生长提供必要的营养物质。
[0017]本发明所使用的粪肠球菌分离自健康猪肠道内，具有优良益生特性和发酵特性， 功能明确，功效明显，稳定性好，属于农业部《饲料添加剂品种目录》所列菌种，可安全用于 畜禽、水产动物。
[0018]相对于现有技术，本发明所使用的原料天然可靠、安全环保，通过对复方中草药进 行发酵，加速释放了中草药中的有效活性成分，改善了中草药口味，降低了中草药的毒性， 更易于被吸收和利用，同时发挥了益生菌的促生长作用，调整胃肠道生态平衡，刺激动物食 欲，促进畜禽生长，提高饲料转化率，增强动物机体免疫抗菌能力。
【具体实施方式】
[0019] 以下的是本发明的制备方法： 在本发明中重量份单位是kg时，对应的体积份单位为1，重量份单位为g时，对应的体 积份单位是ml。
[0020] -种畜禽用中草药微生物发酵制剂的制备方法，具体步骤如下： (1) 发酵培养基的制备：称取中药原料，以重量份数计为：黄芪5. 0~15份、当归I. 0~ 10份；将中药原料粉碎后，混合均匀，加入1〇〇~500份水，煮沸1~3 h，得中药料液；然 后加入葡萄糖2. 5~17. 5份、蛋白胨2. 5~17. 5份、酵母粉0. 35~2. 25份、磷酸氢二钾 0? 15~