一种茶叶挥发性精油在制备防癌保健品或抗癌药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于茶叶精深加工技术领域，特别设及一种茶叶挥发性精油在制备防癌保 健品或抗癌药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 中国饮茶历史悠久，茶树资源丰富，运为饮茶者提供了得天独厚的条件。茶是最受 人们欢迎的健康饮料之一，茶叶中含有茶蛋白、茶多酪、茶多糖、咖啡碱、茶叶皂巧等多种功 效成分，具有抗肿瘤、降血糖、降血脂、降血压、抗氧化和增强机体免疫力等生理功能，作为 保健食品和药品具有广阔的开发前景。
[0003] 茶叶香气物质种类丰富，含量却极微，一般占茶叶干物质含量的0.01~0.05%，绿 茶约为0.005~0.02%，红茶约为0.0 l~0.03%，乌龙茶约为0.05 %。茶叶香气物质按有机 化学分类法可分为碳氨化合物、醇类、醒类、酬类、酸类、醋类、内醋类、酪类、氧杂类化合物、 含硫类化合物、含氮类化合物等，其中W醇类、酬类、醋类、醒类和碳氨化合物为主。香气含 量最高的乌龙茶，其香气因产地环境、茶树品种、鲜叶原料、制作工艺、品质等级、胆存方法 等不同而表现出各自特有的香气特征，尤W制作工艺影响较大:发酵程度轻者，其香气成分 中澄花叔醇、莱莉内醋、吗I噪等含量较高;发酵程度重者，芳精醇及其氧化产物、香叶醇、苯 甲醇等成分含量较高。茶叶深加工方面，茶叶水提取制备速溶茶、浓缩茶汁用于茶饮料加工 得到广泛应用，茶叶中分离的茶多酪包括其中的儿茶素广泛用于食品添加剂或生产保健食 品，部分甚至用于医药领域如消炎药及做抗癌研究，但茶叶的挥发性精油即香气物质，其保 健功能应用很少在加工中得W重视。有专利采用控类及其衍生物(源自油脂衍生)对6大茶 类茶叶的挥发性精油进行了选择性的萃取，有专利利用相关分解酶处理茶叶后制备高香气 的茶叶提取物，还有专利利用微波结合离子液体进行茶叶香气的提取并用于分析。
【发明内容】
[0004] 为了解决现有技术的缺点和不足之处，本发明的目的在于提供一种茶叶挥发性精 油在制备防癌保健品或抗癌药物中的应用。该方法简单，快速。
[0005] 本发明的目的通过W下技术方案实现：
[0006] -种茶叶挥发性精油在制备防癌保健品或抗癌药物中的应用。
[0007] 所述防癌保健品或抗癌药物是指防治或者治疗具有酿还原酶(QR)诱导效应的癌 症的保健品或药品。
[000引所述茶叶挥发性精油是W茶叶为原料，优选通过同时蒸馈萃取法提取得到的。也 可W采用其他方法制备得到。
[0009]所述同时蒸馈萃取法具体按照W下步骤:将茶叶原料研磨粉碎，按照每克茶叶原 料添加5~20ml水的比例添加水，得到茶水混合物；W二氯甲烧作为萃取剂，利用同时蒸馈 萃取装置等方法进行提取，提取时间为60min~ISOmin;将所制得的溶液转入样品瓶中氮吹 干燥，得到茶叶精油。
[0010] 所述利用同时蒸馈萃取装置进行提取具体按照W下步骤:茶水混合物置于圆底烧 瓶中，连接于蒸馈萃取装置的一端，并用电热套加热，保持微沸;蒸馈萃取装置的另一端连 接装有二氯甲烧的圆底烧瓶，用水浴锅加热，溫度保持在55°c。
[0011] 当茶叶用量<50克时，所述二氯甲烧的用量是50mL当茶叶用量>50克时，所述二 氯甲烧的用量是茶叶克数对应数量的毫升数。
[0012] 所述茶叶为红茶、绿茶、青茶、黄茶、白茶和黑茶。
[0013] 本发明W茶叶挥发性精油对W小鼠肝癌细胞化palclc7为代表诱导其酿还原酶 (QR)活性提高为抗癌活性评价，茶叶挥发性精油对化palck7癌细胞株具有较好的抑制作 用，是一种潜在的防癌抗癌活性物质。
[0014] 本发明与现有技术相比具有如下的优点及有益效果：
[0015] (1)本发明提取得到的茶叶挥发性精油具有较强的防癌保健和抗癌效果，且本发 明所设及的同时蒸馈萃取法及相关法操作简单易行，成本低，精油的回收率高；因此，具有 较高的实际应用和推广价值。
[0016] (2)本发明得到的茶叶精油能够应用于芳香疗法中，不仅能够舒缓情绪，消除焦 虑，并且还具有抑制癌细胞生长的保健功效，具有良好的应用前景，可W应用于医药、保健 品和日化行业。
【具体实施方式】
[0017] 下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
[0018] 实施例1茶叶挥发性精油的制备方法
[0019] (1)称取25g磨碎茶样于IL圆底烧瓶中，按照每克茶叶原料添加5~20ml水的比例 添加一级水，连接于同时蒸馈萃取装置的一端，并用电热套加热，保持微沸；另一端连接装 有50mL二氯甲烧的圆底烧瓶，用水浴锅加热，溫度保持在55°C ;提取时间为60~1 SOmin。
[0020] (2)提取结束后收集馈出液转入样品瓶中，氮吹挥干二氯甲烧，得到茶叶挥发性精 油样品。
[0021] 实施例2茶叶挥发性精油抗肿瘤细胞体外功效研究，包括W下步骤：
[0022] (1)制备化pal Cl八小鼠肝癌细胞悬液，取对数生长期、状态良好的细胞，用0.25% 膜蛋白酶(质量百分数)消化，用培养基配制成5X IO3个细胞/mL的细胞悬液，接种于96孔培 养板中，每孔20化L，接种两块板。37°C ,5% (体积百分数)C〇2培养箱中培养细胞24h。
[0023] (2)按照一定剂量将茶叶挥发性精油用含10 %胎牛血清的a-MEM培养液(体积百分 数)配置成含样品的一定浓度溶液，每孔加入15化L溶液，将不加入小鼠肝癌细胞组作为空 白对照组，对照组加等量新鲜培养液。37 °C，5 % C〇2培养箱(体积百分数）中继续培养细胞。
[0024] (3)培养24h后，两块板分为A板和B板。
[002引细胞存活率的测定
[0026] A板加入0.2% (质量百分数)的结晶紫，每孔100化，室溫(20-25°C)放置10-15min， 在水中漂洗后用纸吸干水分。加入0.5 % SDS (质量百分数)溶液，在摇床上10化pm，37 °C振荡 化后，用酶标仪于610nm处测吸光度值(OD值）。
[0027] 酿还原酶(QR)的测定
[002引 B板加入50化0.08%的洋地黄皂巧（质量百分数），在10化pm摇床上，37°C振荡〉 0.5h。然后将反应体系：酶液、MTT、甲糞酿混合后倒入加样槽中，迅速加入20化L/well酶反 应液。使用酶标仪利用动力学法在490nm，Imin测定一次。
[0029] (4)计算方法
[0032] 样品的相对QR活性用CD值表示，其定义为相对QR活性达到倍增时对应的样品浓 度，当细胞活力大于0.5，且相对QR活性大于2时，认为样品具有诱导酿还原酶的活性即具有 抗癌活性。
[0033] 实施例3茶叶精油的抗癌活性评价(一）
[0034] 将红茶、绿茶、黑茶、白茶、青茶、黄茶共6大茶类代表采用实施例1的方法得到茶叶 挥发性精油，使用实施例2所述的方法，通过线性拟合曲线得到诱导酿还原酶产生倍增的具 体浓度。
[0035] 表1. 6大茶类茶叶精油诱导酿还原酶产生倍增的浓度(iig/ml)
[0037] W上结果是=次平行实验的平均值
[0038] 根据表1结果表明：不同茶类的茶挥发油浓度在3~30yg/mL的范围内能诱导酿还 原酶倍增即起到抗癌作用。说明茶叶挥发性精油是一种潜在的防癌抗癌活性物质。
[0039] 实施例4茶叶精油的抗癌活性评价(二）
[0040] 将不同香型不同季节乌龙茶(青茶)采用实施例1的方法得到茶叶挥发性精油，使 用实施例2所述的方法，通过线性拟合曲线得到诱导酿还原酶产生倍增的具体浓度。
[0041] 表2.不同香型不同季节凤凰单从茶(青茶)等诱导QR产生倍增的浓度(iig/mU
[0044] W上结果是=次平行实验的平均值
[0045] 根据表2结果表明：不同香型不同季节的凤凰单从乌龙茶挥发油浓度在3~30yg/ mL的范围内同样能诱导酿还原酶倍增即起到抗癌作用。说明茶叶挥发性精油是一种潜在的 防癌抗癌活性物质。
[0046] 上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的 限制，其它的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化， 均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1. 一种茶叶挥发性精油在制备防癌保健品或抗癌药物中的应用。2. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于:所述防癌保健品或抗癌药物是指防治或者 治疗具有醌还原酶诱导效应的癌症的保健品或药品。3. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于:所述茶叶挥发性精油是以茶叶为原料，通 过同时蒸馏萃取法提取得到的。4. 根据权利要求3所述的应用，其特征在于:所述同时蒸馏萃取法具体按照以下步骤： 将茶叶原料研磨粉碎，按照每克茶叶原料添加5~20ml水的比例添加水，得到茶水混合物； 以二氯甲烷作为萃取剂，利用同时蒸馏萃取装置等方法进行提取，提取时间为60min~ 180min;将所制得的溶液转入样品瓶中氮吹干燥，得到茶叶精油。5. 根据权利要求4所述的应用，其特征在于:所述利用同时蒸馏萃取装置进行提取具体 按照以下步骤:茶水混合物置于圆底烧瓶中，连接于蒸馏萃取装置的一端，并用电热套加 热，保持微沸；蒸馏萃取装置的另一端连接装有二氯甲烷的圆底烧瓶，用水浴锅加热，温度 保持在55°C。6. 根据权利要求4所述的应用，其特征在于：当茶叶用量<50克时，所述二氯甲烷的用 量是50mL;当茶叶用量>50克时，所述二氯甲烷的用量是茶叶克数对应数量的毫升数。7. 根据权利要求3或4所述的应用，其特征在于:所述茶叶为红茶、绿茶、青茶、黄茶、白 茶和黑茶。
【专利摘要】本发明属于茶叶加工领域，公开了一种茶叶挥发性精油在制备防癌保健品或抗癌药物中的应用。所述防癌保健品或抗癌药物是指防治或者治疗具有醌还原酶诱导效应的癌症的保健品或药品。茶叶挥发性精油是以茶叶为原料，通过同时蒸馏萃取法提取得到的。获得的茶叶挥发性精油不仅具有令人愉悦的气味，能舒缓焦虑情绪，而且还具有一定的抗癌效果，6大茶类包括红茶、绿茶、青茶、黄茶、白茶和黑茶提取的挥发性精油浓度在3～30μg/ml的范围内能诱导醌还原酶倍增即起到抗癌作用。研究结果表明茶叶挥发性精油通过诱导醌还原酶起到抗癌作用，是一种潜在的抗癌活性物质，可以制备防癌保健品和抗癌药物。
【IPC分类】A61K36/82, A61P35/00, A23L33/00
【公开号】CN105559074
【申请号】CN201610077038
【发明人】陈忠正, 李斌, 张媛媛, 林晓蓉, 燕妮, 高雄, 李晓飞, 李晓玲
【申请人】华南农业大学
【公开日】2016年5月11日
【申请日】2016年2月3日