使用酸处理的乳清蛋白提取物水溶液治疗过敏症的制作方法
【专利说明】使用酸处理的乳清蛋白提取物水溶液治疗过敏症
[0001]本申请是申请号为“201080055545.2”，申请日为“2010年10月14日”，发明名称为“使用酸处理的乳清蛋白提取物水溶液治疗过敏症”的申请的分案申请。
发明领域
[0002]本发明涉及乳清蛋白提取物的制造，涉及婴儿配方奶粉并且涉及减少或预防食物过敏。
[0003]发明背景
[0004]不用母乳喂养的婴儿必须依靠婴儿配方奶粉作为他们的营养素来源，并且用来确保正常生长和发育。
[0005]婴儿配方奶粉通常基于牛奶。然而大约2%至3%的婴儿对于牛奶中的蛋白质的具有过敏症。虽然存在着许多调节针对过敏原的免疫应答的因子，在婴儿中的Th I /Th2平衡在免疫发育中是重要的，然而婴儿配方奶粉在促进免疫调节机制并且驱动Thl和Th2分化的细胞因子方面是缺乏的。同样地，对于促进适当免疫应答和发育的膳食补充剂、食品或婴儿配方奶粉存在着需要。
[0006]发明概述
[0007]在一个实施方案中提供了一种用于从含乳清蛋白的组合物生产乳清蛋白提取物的方法，该方法包括:
[0008]使含乳清蛋白的组合物与一种水溶液接触，由此形成包括含可溶性蛋白的成分和不溶性成分的一种样品；
[0009]从该样品回收含可溶性蛋白的成分；
[0010]酸化该含可溶性蛋白的成分；
[0011]由此形成乳清蛋白提取物。
[0012]在某些实施方案中，该含乳清蛋白的组合物可包括甜乳清、酸乳清、低乳糖乳清、脱矿物乳清、乳清蛋白浓缩物(WPC)或乳清蛋白分离物(WPI)的一种或多种。优选地，在该含乳清蛋白的组合物中的蛋白质的量可以是基于干重计至少大约10 %至大约95 % w/w。
[0013]在某些实施方案中，该含乳清蛋白的组合物可包括碳水化合物和脂肪中的至少一种。优选地，在该含乳清蛋白的组合物中的碳水化合物的量可以是基于干重计至少大约1%至小于大约80%w/w。优选地，在该含乳清蛋白的组合物中的脂肪的量可以是基于干重计至少大约0.5%至小于大约10%w/w。
[0014]在某些实施方案中，该含乳清蛋白的组合物可包括基于干重计大约80%至82 % w/w的蛋白质、大约4%至8%w/w的乳糖以及大约4%至8%w/w的脂肪。
[0015]在某些实施方案中，该含乳清蛋白的组合物可以是一种WPC。优选地，该WPC可以是WPC 80。
[0016]在某些实施方案中，该含乳清蛋白的组合物可被提供为一种与水溶液接触的粉末形式。
[0017]在某些实施方案中，该水溶液可以是水。
[0018]在某些实施方案中，该含乳清蛋白的组合物可以以至少大约0.5%至10%w/w的含乳清蛋白的组合物的量被提供为与该水溶液接触。
[0019]在某些实施方案中，该含可溶性蛋白的成分可以是通过将该含可溶性蛋白的成分从不溶性固体中分离来回收的。优选地，可通过使该样品经受离心、色谱法、离子交换、电渗析、过滤或吸附的一项或多项将该含可溶性蛋白的成分从该不溶性固体中分离出来。
[0020]在某些实施方案中，该含可溶性蛋白的成分可以是通过对该含可溶性蛋白的成分提供至少大约2.5的pH来酸化的。
[0021]在某些实施方案中，该含可溶性蛋白的成分可以是在该含可溶性蛋白的成分已经被酸化之后从该样品中回收的。
[0022]在某些实施方案中，所述方法还可包括以下另外的步骤:将所酸化的含可溶性蛋白的成分中和。
[0023]在某些实施方案中，该含可溶性蛋白的成分可以是通过对该含可溶性蛋白的成分提供大约为7的pH来中和的。
[0024]在某些实施方案中，该含可溶性蛋白的成分可以是在该含可溶性蛋白的成分已经被中和之后从该样品中回收的。
[0025]在某些实施方案中，所述方法还可包括将该含可溶性蛋白的成分干燥以形成一种粉末的步骤。在另一实施方案中，提供了一种用于从含乳清蛋白的溶液生产乳清蛋白提取物的方法，包括:
[0026]将在含乳清蛋白的溶液中的可溶性乳清蛋白从不溶性乳清蛋白分离出来；
[0027]酸化该可溶性乳清蛋白；
[0028]由此形成乳清蛋白提取物。
[0029]在另一实施方案中，提供了包括酸处理的含可溶性乳清蛋白成分的水溶液的乳清蛋白提取物。在某些实施方案中，该提取物是根据以上说明的方法生产的。
[0030]在某些实施方案中，形成该酸处理的含可溶性乳清蛋白的成分的水溶液的蛋白质可以是基本上未水解的。
[0031]在其他实施方案中，提供了包括酸处理的含可溶性乳清蛋白成分的水溶液用于制造婴J L配方奶粉、膳食补充剂或食品的用途。
[0032]在相关实施方案中，提供了包括乳清蛋白提取物的婴儿配方奶粉、膳食补充剂或食品，该乳清蛋白提取物包括酸处理的含可溶性乳清蛋白成分的水溶液。
[0033]在另外的实施方案中，提供了包括酸处理的含可溶性乳清蛋白成分的水溶液的乳清蛋白提取物用于制造预防食物过敏或使其减轻至最低程度的药物的用途。
[0034]在另一个实施方案中，提供了一种预防食物过敏或使其减轻至最低程度的方法，包括以下步骤:向个体提供包括酸处理的含可溶性乳清蛋白成分的水溶液的乳清蛋白提取物。
[0035]在另外的实施方案中，提供了一种用于减少在易于食物过敏的个体中的TNF或IL-2释放的方法，包括向个体提供包括酸处理的含可溶性乳清蛋白成分的水溶液的乳清蛋白提取物的步骤。
[0036]仍然在另外的实施方案中，提供了一种用于增加在易于食物过敏的个体中的IL-18释放的方法，包括向个体提供包括酸处理的含可溶性乳清蛋白成分的水溶液的乳清蛋白提取物的步骤。
[0037]仍然在另外的实施方案中，提供了一种用于增强在易于食物过敏的个体中的肠上皮细胞屏障功能的方法，包括向个体提供包括酸处理的含可溶性乳清蛋白成分的水溶液的乳清蛋白提取物的步骤。
[0038]仍然在另外的实施方案中，提供了一种用于增强在易于食物过敏的个体中的Thl免疫应答的方法，包括向个体提供包括酸处理的含可溶性乳清蛋白成分的水溶液的乳清蛋白提取物的步骤。
[0039]在另一实施方案中，提供了一种用于使在易于食物过敏的个体中的Th2免疫应答降至最低程度的方法，包括向个体提供包括酸处理的含可溶性乳清蛋白成分的水溶液的乳清蛋白提取物的步骤。
[0040]附图简要说明
[0041 ]图1.在用提取物(123)治疗之后从RAW细胞的TNF-α释放的抑制。
[0042]图2.在用提取物(123)治疗之后从THP-1细胞的IL-18释放的增强。
[0043]图3.在用提取物(123)治疗之后从初级⑶4+T细胞的IL_2释放的抑制。
[0044]图4.提取物(123)对⑶4T细胞的IL_2释放的影响。
[0045]图5.在CD3和CD28刺激作用之后提取物(123)(酸化的或中性的)对CD4T细胞的IL-2释放的影响。
[0046]图6.在用中性的或酸化的提取物(123)或乳铁蛋白治疗之后T84细胞的跨上皮电阻。
[0047]图7.在用中性的(123-中性的)或酸活化的(123-酸化的)的提取物治疗之后T84细胞的跨上皮电阻。
[0048]图8.在用以1/8或1/12稀释到配方中或作为3次/天的快速推注给药的提取物(123)治疗之后的血清IgE。
[0049]图9.在用以1/8或1/12稀释到配方中或作为3次/天的快速推注给药的提取物(123)治疗之后的BLG特异性IgGl浓度(包括离群值，用x表示)。
[0050]图10.在用以1/8或1/12稀释到配方中或作为3次/天的快速推注给药的提取物(123)治疗之后的血清RMCPII浓度。
[0051 ]图11.在用以1/8或1/12稀释到配方中或作为3次/天的快速推注给药的提取物(123)治疗之后的肥大细胞计数/mm2固有层。
[0052]图12.在用以1/8或1/12稀释到配方中或作为3次/天的快速推注给药的提取物
(123)治疗之后的在肠中的IL-1O(A)、IFN-Y(B)和IL-4(C)。
[0053]图13.断奶研究:血清BLG特异性IgGl(A)、IgE(B)和RMCPII(C)。在第4天开始用提取物(123)并且在第14天开始口服BLG的强饲法。
[0054]实施方案的详细说明
[0055]将会理解的是，在本说明书中披露和限定的本发明涉及两个或更多个从正文或附图提到的或显而易见的个体特征的所有可替代组合。所有这些不同组合都构成本发明的不同替代方面。
[0056]现在将详细地参考本发明的某些实施方案。虽然将结合这些实施方案来说明本发明，将会理解的是并不旨在将本发明限制于那些实施方案。相反，本发明旨在覆盖所有替代方案、修改、和等效物，它们都可以包括在如通过权利要求书所限定的本发明的范围之内。
[0057]本领域的熟练技术人员将认识到类似或等价于在此说明的那些的许多方法和材料，这些都可以在实践本发明中使用。绝非将本发明局限于所说明的这些方法和材料。
[0058]将会理解的是，在本说明书中披露和限定的本发明涉及两个或更多个从正文或附图提到的或显而易见的个体特征的所有可替代组合。所有这些不同组合都构成本发明的不同替代方面。
[0059]如在此所使用的，除非在上下文另外要求的地方，术语“包括”(comprise)和该术语的变化，例如“包括” ("comprising")、“包括”(comprises)和“包括” ("comprised")并不旨在排除其他添加剂、成分、整体或步骤。
[0060]本发明人已经惊奇地发现，处于酸处理的含可溶性乳清蛋白成分的水溶液的形式的乳清蛋白提取物具有免疫调节特性。特别是，在此说明的体外研究显示，提取物(另外称为“123”)增加了是Thl应答的特征的生物标记，而使Th2应答的标记降至最低。具体地，这些体外研究显示，该提取物减少了 CD4+T细胞的IL-2分泌，并且增加了 I