杏鲍菇酵素及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及酵素技术领域，尤其涉及一种杏鲍菇酵素及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 酵素也被称为酶，是一种生物催化剂，由蛋白质构成。酵素参与正常的新陈代谢、 自体免疫、修复组织等人所有的生理活动。随着年龄增大，体内酵素相对减少，身体状况逐 渐走下坡路。因此，需要补充适量的酵素。
[0003] 研究发现，以一种或多种新鲜蔬菜、水果等为原料，经多种有益菌发酵可以产生酵 素，且含有丰富的维生素、矿物质和次生代谢产物等营养成分具有抗衰老、抗菌、消炎、净化 血液、增强机体免疫能力及解毒抗癌等多种保健功能。
【发明内容】
[0004] 本发明要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种口感倶佳、营养价值 极高的杏鲍菇酵素，还提供了一种杏鲍菇酵素的制备方法。
[0005] 为解决上述技术问题，提供了一种杏鲍菇酵素的制备方法，包括以下步骤：
[0006] (1)将杏鲍菇进行发酵得到杏鲍菇酵素原液；
[0007] (2)分别将苹果汁、葡萄汁、桃汁和西瓜汁进行发酵得到苹果酵素原液、葡萄酵素 原液、桃酵素原液和西瓜酵素原液；
[0008] (3)将所述步骤（1)中制备得到的杏鲍菇酵素原液和步骤(2)中苹果酵素原液、葡 萄酵素原液、桃酵素原液、西瓜酵素原液进行混合，发酵得到杏鲍菇酵素。
[0009] 上述的制备方法，优选的，所述步骤(1)中所述发酵具体为:将杏鲍菇打浆，加入红 糖和双蒸水得到杏鲍菇浆液，在杏鲍菇浆液中接种酵母菌发酵得到杏鲍菇酵素原液。
[0010]上述的制备方法，优选的，酵母菌的的接种量为5v/v%~8v/v%。
[0011]上述的制备方法，优选的，所述发酵的条件为:20~30°C下，避光发酵48h~72h。
[0012] 上述的制备方法，优选的，所述步骤(2)具体为:分别在苹果汁、葡萄汁、桃汁和西 瓜汁中加入红糖、双蒸水和蛋白胨;然后接种酵母菌进行发酵得到苹果酵素原液、葡萄酵素 原液、桃酵素原液和西瓜酵素原液。
[0013] 上述的制备方法，优选的，酵母菌的的接种量为5v/v%~8v/v%。
[0014]上述的制备方法，优选的，所述步骤(2)中所述发酵的条件为:20~30°C下，避光发 酵48h~72h。
[0015] 上述的制备方法，优选的，所述步骤(3)具体为:将所述步骤（1)中制备得到的杏鲍 菇酵素原液和步骤(2)中的苹果酵素原液、葡萄酵素原液、桃酵素原液和西瓜酵素原液按照 体积比为3:1:1:1:1混合得到混合液，进行发酵得到杏鲍菇酵素。
[0016] 上述的制备方法，优选的，所述步骤(3)中所述发酵具体为:在混合液中接种嗜酸 乳杆菌和保加利亚乳杆菌的混合菌种，联合发酵2~3天。进一步优选的，所述混合菌种的接 种量为8v/v%~10v/v%。
[0017] 上述的制备方法，优选的，所述混合菌种中，所述嗜酸乳酸杆菌:保加利亚乳杆菌 的体积比为1:1。
[0018] 作为一个总的技术构思，本发明还提供了一种上述制备方法制备得到的杏鲍菇酵 素。
[0019 ]上述的杏鲍菇酵素，优选的，所述杏鲍菇酵素包括蛋白酶、脂肪酶、SOD酶和胞外多 糖。
[0020] 与现有技术相比，本发明的优点在于：
[0021] (1)本发明提供了一种杏鲍菇酵素，在培养基中接入杏鲍菇，进行发酵培养，从而 制成杏鲍菇酵素原液，与水果酵素原液进行复配，不仅可以增强发酵程度，减少发酵时间； 还发挥了菇体降血脂、降胆固醇、增强机体免疫能力、防止心血管病等功效。制备得到的杏 鲍菇酵素具有平衡内分泌，净化血液、补充能量、促进肠道消化吸收、排毒清肠、美容养颜、 加速新陈代谢、排除多余热量、减脂控重等作用，广泛应用于农业、畜牧业、商业、
[0022] (2)本发明提供了一种杏鲍菇酵素的制备方法，将杏鲍菇、水果等浆液分别发酵， 然后混合进行二次发酵，有效积累了其功能活性成分，提高了酵素中脂肪酶、蛋白酶等的活 性和活菌的数量，有效提高酵素的各种保健功效和高附加值的效果。
[0023] (3)本发明提供了一种杏鲍菇酵素的制备方法，控制杏鲍菇酵素原液、苹果酵素原 液、葡萄酵素原液、桃酵素原液和西瓜酵素原液按照体积比为3:1:1:1:1混合进行发酵，使 杏鲍菇酵素成品的营养价值更高、口感更佳，酵素气味更好。
【附图说明】
[0024]为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例 中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整的描述。
[0025]图1为蛋白酶活力测定的标准曲线图。
[0026]图2为胞外多糖含量测定的标准曲线图。
【具体实施方式】
[0027]以下结合具体优选的实施例对本发明作进一步描述，但并不因此而限制本发明的 保护范围。
[0028] 实施例
[0029] 以下实施例中所采用的材料和仪器均为市售。本实施例采用的酵母菌为ATCC 204508;嗜酸乳酸杆菌为CICC6243;保加利亚乳杆菌为ACCC10638，均购于中国微生物菌种 保藏中心。
[0030] 实施例1
[0031] -种本发明的杏鲍菇酵素，其制备方法包括以下步骤：
[0032] (1)制备杏鲍菇酵素原液:将500g的杏鲍菇子实体进行微波消毒处理后，在洁净条 件下，打浆，加入30g红糖，加入双蒸水，混合均匀得到300mL的杏鲍菇浆液。调节杏鲍菇浆液 的pH为6.4，然后分装于锥形瓶中，以5v/v%的接种量接种酵母菌，在30°C下避光发酵48h (发酵条件还可以在20°C下发酵72h)得到杏鲍菇酵素原液。
[0033] (2)制备水果酵素原液:选取苹果，葡萄，西瓜，桃子4种水果，分别对四种水果剥 皮、打浆、过滤得到果浆。分别取IOOmL苹果果浆、葡萄果浆、西瓜果浆和桃子果浆，于每个果 浆中均加入20g红糖，加入双蒸水至体积为300mL。然后加入2 %的蛋白胨，经115 °C高压灭菌 20mi η，冷却至室温得到培养基A、B、C、D。调节培养基A、B、C、D的pH为6.4，分别在培养基A、B、 C、D中接种5v/v%的酵母菌，在室温下避光发酵在30°C下避光发酵48h(发酵条件还可以在 20°C下发酵72h)得到苹果酵素原液、葡萄酵素原液、西瓜酵素原液和桃子酵素原液。
[0034] (3)联合发酵:在洁净条件下，将步骤（1)中制得的杏鲍菇酵素原液，步骤(2)中制 得的苹果酵素原液、葡萄酵素原液、西瓜酵素原液和桃子酵素原液，按照体积比为3:1:1:1: 1混合得到混合液。调节混合液的pH为6.4。在混合液中接种ΙΟv/v %的嗜酸乳杆菌和保加利 亚乳杆菌的混合菌种(混合菌种中嗜酸乳酸杆菌:保加利亚乳杆菌体积比为1:1)，在30°C下 避光发酵48h(发酵条件还可以在20 °C下发酵72h)。待发酵完成后，灭活发酵菌，终止发酵过 滤，得到杏鲍菇酵素成品。
[0035] 实施例2
[0036] 杏鲍菇酵素原液，苹果酵素原液、葡萄酵素原液、西瓜酵素原液和桃子酵素原液的 体积比为1:1:1:1:1，其余步骤与实施例1 一致。
[0037] 实施例3
[0038] 杏鲍菇酵素原液，苹果酵素原液、葡萄酵素原液、西瓜酵素原液和桃子酵素原液的 体积比为3:2:1:1:2，其余步骤与实施例1 一致。
[0039] 对比例1
[0040] -种本发明的杏鲍菇酵素，其制备方法包括以下步骤：
[0041] (1)将500g的杏鲍菇子实体进行微波消毒处理后，在洁净条件下，打浆，加入30g红 糖，加入双蒸水，混合均匀得到300mL的杏鲍菇浆液。
[0042] (2)选取苹果，葡萄，西瓜，桃子4种水果，分别对四种水果剥皮、打浆、过滤得到果 浆。分别取IOOmL苹果果浆、葡萄果浆、西瓜果浆和桃子果浆，于每个果浆中加入20g红糖，加 入双蒸水至体积为300mL得到苹果混合液、葡萄混合液、西瓜混合液和桃子混合液。
[0043] (3)将步骤（1)中的杏鲍菇浆液、步骤(2)中的苹果混合液、葡萄混合液、西瓜混合 液和桃子混合液按照体积比为3:1:1:1:1混合得到混合液。调节混合液的pH为6.4。在混合 液中接种lOv/V%的酵母菌:嗜酸乳酸杆菌:保加利亚乳杆菌的体积比=1:1:1的混合菌种， 在30°C下避光发酵4天。待发酵完成后，灭活发酵菌，终止发酵过滤，得到杏鲍菇酵素成品。
[0044] 分别考察实施例1和对比例1中杏鲍菇酵素成品中蛋白酶、脂肪酶、SOD酶和胞外多 糖的含量。
[0045] 1、酵素中蛋白酶活力的测定采用以下方法:将实施例1中制备得到的杏鲍菇酵素 混合双蒸水配制浓度为2%的酵素待测溶液。规定ImL酵素，在40°C和pH为6.0时，酵素 Imin 水解燕麦蛋白生成Iyg氨基酸为一个酶活力单位，以yg(u/mL)表示。
[0046] 标准曲线的制作:取12支试管，分为两组，每组6支试管;于每只试管中分别加入0、 0.2、0.4、0.6、0.8、1.011^标准氨基酸溶液，相当于氨基酸含量分别