细菌淀粉酶在家禽饲料中的用图
【专利摘要】本发明涉及在家禽饲料中的至少一种细菌淀粉酶用以改进该饲料的营养价值的方法和用途。本发明还涉及家禽饲料和改进该饲料的营养价值的家禽饲料添加剂，这些家禽饲料添加剂包括至少一种细菌淀粉酶和至少一种维生素和/或矿物质。
【专利说明】细菌淀粉酶在家禽饲料中的用途
[0001] 对序列表的引用
[0002] 本申请包含计算机可读形式的序列表，将该序列表通过引用结合在此。
[0003] 发明背景 发明领域
[0004] 本发明设及在家禽饲料中的至少一种细菌淀粉酶用W改进该饲料的营养价值的 方法和用途。本发明还设及家禽饲料和改进该饲料的营养价值的家禽饲料添加剂，运些家 禽饲料添加剂包括至少一种细菌淀粉酶和至少一种维生素和/或矿物质。
[0005] 相关技术说明
[0006] W0 03/068256 A1描述了用于改进反当动物营养的淀粉酶饲料补充剂。使用的淀 粉酶是由米曲霉(Aspergillus 0巧zae)产生的真菌淀粉酶。特里卡里科(Tricarico)等人， 在动物科学(Animal Science)中，2005,81:365-374描述了包含α-淀粉酶活性的米曲霉提 取物对荷斯坦化olstein)产奶母牛的瘤胃发酵(ruminal fermentation)和牛奶产生的影 响。
[0007] 美国专利号3,250,622披露了特定添加剂的用途，所述添加剂包含蛋白水解酶和 淀粉水解酶W及胶酶(gumase)，其与磨碎的麦芽载体密切相关，用于刺激奶牛中牛奶的产 生。没有指定酶的来源。
[000引罗霍（Rojo)等人，（动物饲料科学与技术（Animal Feed Science and Technology) ,123-124(2005) ,655-665)研究 了来自地衣芽抱杆菌（Bacillus licheniformis)和黑曲霉(Aspergillus niger)的外源淀粉酶对瘤胃淀粉消化和羊黑性能 的影响。
[0009] W0 01/41795 A1设及蛋白酶和季胺簇酸内盐的组合在球虫病(coccidiosis)和细 菌感染的治疗和/或预防中的用途。α-淀粉酶是可添加的任选的酶。
[0010] 格雷西亚（Gracia)等人，（动物饲料科学与技术(4]1；[1]1日1化6(15。;[了6油），150:3- 4,（2009) ,303-315)显示出具有木聚糖酶、蛋白酶和α-淀粉酶活性的多酶复合物改进了年 龄1 -4天的肉仔鸡的体重增加和FCR。
[0011]本发明的目的是提供可替代的、优选改进的淀粉酶，运些淀粉酶改进家禽的饲料 利用率和/或增重。
[0012] 发明概述
[0013] 本发明设及在家禽饲料中的至少一种细菌淀粉酶用W改进该饲料的营养价值的 用途，其中该细菌淀粉酶是与SEQ ID NO:2的氨基酸1-481具有至少80% -致性的多肤。
[0014] 本发明还设及用于改进家禽饲料的营养价值的方法，该方法包括向该饲料添加至 少一种细菌淀粉酶的步骤，其中该细菌淀粉酶是与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少 80 % -致性的多肤。
[0015] 本发明进一步设及一种家禽饲料添加剂，该家禽饲料添加剂包括至少一种细菌淀 粉酶，连同（i)至少一种维生素、（ii)至少一种矿物质、或（iii)至少一种维生素和至少一种 矿物质，其中该细菌淀粉酶是与SEQ ID N0:2的氨基酸1-481具有至少80% -致性的多肤， 另外设及包括该禽饲料添加剂和1 Ow % -40w %大豆粉的家禽饲料。
[0016] 定义
[0017] 淀粉酶:在本上下文中，淀粉酶是催化淀粉和其他直链和支链寡糖和多糖的内-水 解的酶。在具体的实施例中，用于根据本发明的用途的淀粉酶具有α-淀粉酶活性，即，催化 寡糖和多糖中1，4-α-糖巧键的内水解。α-淀粉酶W随机方式作用于，例如淀粉、糖原和相关 的多糖和寡糖，释放α-构型中的还原基团。
[001引淀粉酶属于6〔3.2.1.-基团，如6〔3.2.1.1(日-淀粉酶、1，4-日-0-葡聚糖葡聚糖水 解酶）、EC 3.2.1.2(β-淀粉酶）、EC 3.2.1.3(葡聚糖1，4-α-葡糖巧酶、淀粉葡糖巧酶、或葡 糖淀粉酶）、EC 3.2.1.20(0-葡糖巧酶）、6〔3.2.1.60(葡聚糖1，4-0-麦芽四糖淀粉酶）、6〔 3.2.1.68(异淀粉酶）、6〔3.2.1.98(葡聚糖1，4-0-麦芽己糖酶）、或6〔3.2.1.133(葡聚糖1， 4-α-麦芽糖水解酶）。本发明的淀粉酶是一种属于基团EC 3.2.1.1的α-淀粉酶。EC编号参考 加利福尼亚州（Cal if ornia)的圣迭戈（San Diego)的NC-IUBMB学术出版社（Academic Press)的1992年酶命名法，分别包括出版于欧洲生物化学期刊化ur.J.Biochem.)1994， 223，1-5;欧洲生物化学期刊1995，232，1-6;欧洲生物化学期刊1996，237，1-5;欧洲生物化 学期刊1997,250,1-6; W及欧洲生物化学期刊1999,264,610-650的增刊1-5。命名会定期得 U 增补芽口更讀f;参见，例女日,http: //WWW. chem. qmw. ac. uk/ iubmb/enzyme/index. html 0
[0019] 可W通过任何适当的方法确定淀粉酶活性。通常，测定-pH和测定-溫度可W适于 所研究的酶。pH值测定的实例是pH 2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、或12。测定-溫度的实例是30 °(：、35°(：、37°(：、40°(：、45°(：、50°(：、55°(：、60°(：、65°(：、70°(：、80°(：、90°(：或95°(：。优选的抑值和 溫度在生理范围内，如3、4、5、6、7或8的pH值，和30°C、35°C、37°C或40°C的溫度。优选的测定 是本文实例4的还原糖测定。可替代地，可W使用W下淀粉酶测定:底物:Phadebas片(法玛 西亚诊断公司（Pharmacia Diagnostic);交联、不溶、蓝色的淀粉聚合物，将其与家禽血清 白蛋白和缓冲物质混合，并制成片剂）。测定溫度：37°C。测定pH:4.3(或7.0,如果希望的 话）。反应时间：20min。在水中悬浮后，淀粉被α-淀粉酶水解，给出可溶性蓝色片段。在620皿 处测量的所得蓝色溶液的吸光度是α-淀粉酶活性的函数。一个真菌α-淀粉酶单位(1个FAU) 是在标准的测定条件下每小时分解5.26g淀粉的酶量。优选的淀粉是默克(Merck),可溶性 淀粉Erg.B.6,批次9947275。更详细的测定说明书，APTSMYQI-3207,可从诺维信公司 (Novozymes A/S)(克罗格休约尔36化rogshoejvej 36)，DK-2880己格斯维尔德（DK- 2880Bagsvaerd)，丹麦)得到。
[0020] 浓缩物:术语"浓缩物"意指具有高蛋白和能量浓度的饲料，例如鱼粉、糖蜜、低聚 糖、高梁、种子和谷物(例如来自玉米、燕麦、黑麦、大麦、小麦的整体或由破碎、娠磨等制备 的）、油巧滤饼(例如从棉巧、红花、向日葵、大豆、油菜巧/卡诺拉、花生或落花生）、栋桐仁 饼、酵母衍生材料和酒糟(例如湿酒糟(WDS)和具有可溶物的干酒糟(DDGS))。
[0021 ]饲料转化率:术语"饲料转化率"（FCR)说明如何有效地利用饲料。FCR越低，饲料利 用得越好。FCR可W在动物试验的基础上确定，该动物试验包括第一治疗，其中用于根据本 发明的用途的淀粉酶可W按所希望的浓度(例如，100至400mg酶蛋白/kg饲料)添加至动物 饲料，W及在没有向动物饲料添加淀粉酶的情况下的第二治疗(对照）。在具体实施例中，与 对照相比，该FCR改进了（即，减少了）至少1.0%，优选至少1.5%、1.6%、1.7%、1.8%、 1.9%、2.0%、2.1%、2.2%、2.3%、2.4%、或至少2.5%。在进一步的具体实施例中，与对照 相比，该FCR改进了（即，减少了）至少2.6%、2.7%、2.8%、2.9%、或至少3.0%。在再进一步 具体的实施例中，与对照相比，该FCR改进了（即，减少了）至少3.1 %、3.2 %、3.3 %、3.4 %、 3.5%、3.6%、3.7%、或至少3.8%。
[0022] 家禽:术语"家禽"意指针对它们所生产的蛋和/或它们的肉和/或它们的羽毛，由 人类饲养的驯养禽类。家禽包括肉仔鸡和蛋鸡。家禽包括鸡雁小纲总目（禽)的成员，尤其是 鸡形目（其包括鸡、珍珠鸡、鹤譜和火鸡)和雁鸭科，在雁鸭目中，通常称为"水禽"并且包括 家鸭和家碟。家禽还包括为了它们的肉而被杀的其他禽类，如乳错。家禽的实例包括鸡(包 括蛋鸡、肉仔鸡和维鸡）、鸭、碟、错子(包括但不限于维错）、珍珠鸡、火鸡和鹤譜。
[0023] 家禽饲料:术语"家禽饲料"意指向家禽给予的饲料，如鸡(包括蛋鸡、肉仔鸡和维 鸡）、鸭、碟、错子(包括但不限于维错）、珍珠鸡、火鸡和鹤譜。家禽饲料通常包括添加至例如 浓缩物的并且然后喂养家禽的预混物。
[0024] 家禽饲料添加剂:术语"家禽饲料添加剂"意指包括例如维生素和/或矿物质的预 混物。预混物是本领域中公认的针对某些饲料添加剂的术语。它们可W是固体或液体的。例 如，痕量矿物质预混物是一种组合物，该组合物旨在添加至动物饲料，并且该组合物包括所 希望种类和量的痕量矿物质。维生素预混物是一种组合物，该组合物旨在添加至动物饲料， 并且该组合物包括所期望种类和量的维生素。一些预混物包括维生素和痕量矿物质和可任 选的调配剂、防腐剂、抗生素、其他饲料成分或其任何组合，在给予至家禽之前，将运些预混 物与高蛋白和/或能量的饲料(例如浓缩物)混合。
[0025] 序列一致性:两个氨基酸序列之间的关联度通过参数"序列一致性"来描述。
[0026] 出于本发明的目的，使用如在EMBOSS包化MB0SS:欧洲分子生物学开放软件套件， 赖斯(Rice)等人，2000，遗传学趋势(Trends Genet.) 16:276-277)(优选3.0.0版或更新版 本)的尼德尔(Needle)程序中所实施的尼德尔曼-翁施(Needleman-Wunsch)算法(尼德尔曼 (化edleman)和翁施(Wunsch)，1970,分子生物学杂志（J.Mol.Biol. )48:443-453)来确定两 个氨基酸序列之间的序列一致性程度。使用版本6.1.0。所使用的任选参数是空位开放罚分 10、空位延伸罚分0.5,及邸L0SUM62(BL0SUM62的EMBOSS版本)取代矩阵。尼德尔标注的"最 长的一致性"的输出(使用-非简化选项获得)被用作百分比一致性，并且如下计算：
[0027] (一致的残基X 100)/(比对长度-比对中的空位总数）
[0028] 增重:术语"增重"意指在某段时期内动物增加多少重量。改进的增重意指相对于 未加淀粉酶的对照，改进的每日、每周、每两周或每月的增重（用g或kg/相对时期表示）。运 优选在如上面FCR段落中所述的试验中确定。
[0029] 发明详细说明
[0030] 令人惊讶地发现，添加淀粉酶至家禽饲料改进了饲料的营养价值。如果该家禽饲 料的表观可代谢能量(ΑΜΕ)减少了 lOOkcal/kg，那么与标准的饮食的家禽相比，家禽的体重 增加和FCR变得更糟。然而，诸位发明人令人惊讶地发现，在运种降低的ΑΜΕ的饮食中包括本 发明的淀粉酶改进了家禽的体重增加和FCR。
[0031] 因此，在第一方面，本发明设及用于改进家禽饲料的营养价值的方法，该方法包括 向该饲料添加至少一种细菌淀粉酶的步骤，其中该细菌淀粉酶是与SEQ ID Ν0:2的氨基酸 1-481具有至少80%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID Ν0:2的氨 基酸1-481具有至少85%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID NO: 2 的氨基酸1-481具有至少90%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID N0:2的氨基酸1-481具有至少91 %-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少92%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与 SEQ ID N0:2的氨基酸1-481具有至少93%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶 是与SEQ ID N0:2的氨基酸1-481具有至少94%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀 粉酶是与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少95%-致性的多肤。在一个实施例中，该细 菌淀粉酶是与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少96%-致性的多肤。在一个实施例中， 该细菌淀粉酶是与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少97%-致性的多肤。在一个实施例 中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少98%-致性的多肤。在一个实 施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID N0:2的氨基酸1-481具有至少99%-致性的多肤。在一 个实施例中，该多肤包括SEQ ID NO:2的氨基酸1-481，或由其组成。
[0032] 在本发明的第一方面的一个另外的方面，本发明设及一种用于改进家禽饲料的营 养价值的方法，该方法包括向该饲料添加至少一种细菌淀粉酶的步骤，其中该细菌淀粉酶 是与SEQ ID N0:2的氨基酸1-481具有至少80%-致性的多肤，并且其中该细菌淀粉酶改进 了家禽的增重和/或饲料转化率。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID N0:2的氨基 酸1-481具有至少85%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID N0:2的 氨基酸1-481具有至少90%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少91%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID N0:2的氨基酸1-481具有至少92%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少93%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与 SEQ ID N0:2的氨基酸1-481具有至少94%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶 是与SEQ ID N0:2的氨基酸1-481具有至少95%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀 粉酶是与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少96%-致性的多肤。在一个实施例中，该细 菌淀粉酶是与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少97%-致性的多肤。在一个实施例中， 该细菌淀粉酶是与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少98%-致性的多肤。在一个实施例 中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少99%-致性的多肤。在一个实 施例中，该多肤包括SEQ ID NO:2的氨基酸1-481，或由其组成。
[0033] 在第一方面的一个实施例中，该细菌淀粉酶改进了饲料转化率。在一个实施例中， 该细菌淀粉酶改进了体重增加。在一个另外的实施例中，该细菌淀粉酶改进了饲料转化率 并且改进了体重增加。在一个优选的实施例中，在饮食中，该细菌淀粉酶改进了家禽的饲料 转化率，其中与标准家禽饲料相比，该家禽饲料具有降低的表观可代谢能量。在一个优选的 实施例中，在饮食中，该细菌淀粉酶改进了家禽的体重增加，其中与标准家禽饲料相比，该 家禽饲料具有降低的表观可代谢能量。在一个优选的实施例中，在饮食中，该细菌淀粉酶改 进了家禽的饲料转化率和体重增加，其中与标准家禽饲料相比，该家禽饲料具有降低的表 观可代谢能量。
[0034] 在本发明的第一方面的另外的实施例中，与标准家禽饲料相比，该家禽饲料具有 降低的表观可代谢能量。在一个实施例中，该表观可代谢能量是在标准家禽饲料的85%和 99.9 %之间，如在标准家禽饲料的90 %和99.5 %之间、91 %和99 %之间、92 %和99 %之间、 93 %和98.5 %之间、或94 %和98 %之间，其中标准家禽饲料的能量针对第1-21天是 3050kcal/kg 并且针对第 22-40天是 3170kcal/kg。
[0035] 在本发明的第一方面的另外的实施例中，W在0.01和200mg酶蛋白/kg饮食之间的 剂量向家禽饲料添加细菌淀粉酶，所述剂量如0.05-100、0.1-50、0.2-35、0.4-20、0.5-25、 0.6-15、0.8-8、1-10或1-6.111邑酶蛋白/1^。在本发明的第一方面的另外的实施例中，从在1和 5000KNU/kg饲料之间的剂量向家禽饲料添加细菌淀粉酶，所述剂量如5-2500、10-1000、15- 600、20-400、25-300、30-200、40-160KNU/kg 饲料。
[0036] 在第二方面，本发明设及一种用于改进家禽饲料的营养价值的方法，该方法包括 向该饲料添加至少一种细菌淀粉酶的步骤，其中该细菌淀粉酶是与SEQ ID N0:2的氨基酸 1-481具有至少80%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID N0:2的氨 基酸1-481具有至少85%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID NO: 2 的氨基酸1-481具有至少90%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID N0:2的氨基酸1-481具有至少91 %-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少92%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与 SEQ ID N0:2的氨基酸1-481具有至少93%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶 是与SEQ ID N0:2的氨基酸1-481具有至少94%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀 粉酶是与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少95%-致性的多肤。在一个实施例中，该细 菌淀粉酶是与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少96%-致性的多肤。在一个实施例中， 该细菌淀粉酶是与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少97%-致性的多肤。在一个实施例 中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少98%-致性的多肤。在一个实 施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID N0:2的氨基酸1-481具有至少99%-致性的多肤。在一 个实施例中，该多肤包括SEQ ID NO:2的氨基酸1-481，或由其组成。
[0037] 在本发明的第二方面的一个另外的方面，本发明设及一种用于改进家禽饲料的营 养价值的方法，该方法包括向该饲料添加至少一种细菌淀粉酶的步骤，其中该细菌淀粉酶 是一种与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少80%-致性的多肤，并且其中该细菌淀粉酶 改进了家禽的增重和/或饲料转化率。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID N0:2的 氨基酸1-481具有至少85%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少90%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID N0:2的氨基酸1-481具有至少91 %-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少92%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与 SEQ ID N0:2的氨基酸1-481具有至少93%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶 是与SEQ ID N0:2的氨基酸1-481具有至少94%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀 粉酶是与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少95%-致性的多肤。在一个实施例中，该细 菌淀粉酶是与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少96%-致性的多肤。在一个实施例中， 该细菌淀粉酶是与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少97%-致性的多肤。在一个实施例 中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少98%-致性的多肤。在一个实 施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID N0:2的氨基酸1-481具有至少99%-致性的多肤。在一 个实施例中，该多肤包括SEQ ID NO:2的氨基酸1-481，或由其组成。
[0038] 在第二方面的一个实施例中，该细菌淀粉酶改进了饲料转化率。在一个实施例中， 该细菌淀粉酶改进了体重增加。在一个另外的实施例中，该细菌淀粉酶改进了饲料转化率 并且改进了体重增加。在一个优选的实施例中，在饮食中，该细菌淀粉酶改进了家禽的饲料 转化率，其中与标准家禽饲料相比，该家禽饲料具有降低的表观可代谢能量。在一个优选的 实施例中，在饮食中，该细菌淀粉酶改进了家禽的体重增加，其中与标准家禽饲料相比，该 家禽饲料具有降低的表观可代谢能量。在一个优选的实施例中，在饮食中，该细菌淀粉酶改 进了家禽的饲料转化率和体重增加，其中与标准家禽饲料相比，该家禽饲料具有降低的表 观可代谢能量。
[0039] 在本发明的第二方面的另外的实施例中，与标准家禽饲料相比，该家禽饲料具有 降低的表观可代谢能量。在一个实施例中，该表观可代谢能量是在标准家禽饲料的85%和 99.9 %之间，如在标准家禽饲料的90 %和99.5 %之间、91 %和99 %之间、92 %和99 %之间、 93 %和98.5 %之间、或94 %和98 %之间，其中标准家禽饲料的能量针对第1-21天是 3050kcal/kg 并且针对第 22-40天是 3170kcal/kg。
[0040] 在本发明的第二方面的另外的实施例中，W在0.01和200mg酶蛋白/kg饮食之间的 剂量向家禽饲料添加细菌淀粉酶，所述剂量如0.05-100、0.1-50、0.2-35、0.4-20、0.5-25、 0.6-15、0.8-8、1-10或1-6.111邑酶蛋白/1^。在本发明的第一方面的另外的实施例中，从在1和 5000KNU/kg饲料之间的剂量向家禽饲料添加细菌淀粉酶，所述剂量如5-2500、10-1000、15- 600、20-400、25-300、30-200、40-160KNU/kg 饲料。
[0041] 在第二方面，本发明设及一种家禽饲料添加剂，该家禽饲料添加剂包括至少一种 细菌淀粉酶，连同（i)至少一种维生素、（ii)至少一种矿物质、或(iii)至少一种维生素和至 少一种矿物质，其中该细菌淀粉酶是与SEQ ID NO:2的氨基酸1-481具有至少80% -致性的 多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少85%-致 性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID N0:2的氨基酸1-481具有至少90% 一致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID N0:2的氨基酸1-481具有至少 91%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID N0:2的氨基酸1-481具有 至少92%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID N0:2的氨基酸1-481 具有至少93%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID N0:2的氨基酸1- 481具有至少94%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID N0:2的氨基 酸1-481具有至少95%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID N0:2的 氨基酸1-481具有至少96%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少97%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID N0:2的氨基酸1-481具有至少98%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少99%-致性的多肤。在一个实施例中，该多肤包括SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481，或由其组成。在一个优选的实施例中，该家禽饲料添加剂改进了家禽 饲料的营养价值。
[0042] 在本发明的第Ξ方面的一个实施例中，本发明设及一种家禽饲料添加剂，该家禽 饲料添加剂包括至少一种细菌淀粉酶，连同（i)至少一种维生素、（ii)至少一种矿物质、或 (iii)至少一种维生素和至少一种矿物质，其中该细菌淀粉酶是与SEQ ID N0:2的氨基酸1- 481具有至少80%-致性的多肤，并且其中家禽饲料添加剂改进了家禽的增重或饲料转化 率。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少85%-致性 的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少90% - 致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少 91%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID N0:2的氨基酸1-481具有 至少92%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID N0:2的氨基酸1-481 具有至少93%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID N0:2的氨基酸1- 481具有至少94%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID N0:2的氨基 酸1-481具有至少95%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID N0:2的 氨基酸1-481具有至少96%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少97%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID N0:2的氨基酸1-481具有至少98%-致性的多肤。在一个实施例中，该细菌淀粉酶是与SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481具有至少99%-致性的多肤。在一个实施例中，该多肤包括SEQ ID NO: 2的氨基酸1-481，或由其组成。在一个优选的实施例中，该家禽饲料添加剂改进了家禽 饲料的营养价值。
[0043] 在第四方面，本发明设及一种家禽饲料，该家禽饲料包括第Ξ方面的家禽饲料添 加剂和10w%-40w%的大豆粉。在一个优选的实施例中，包括第Ξ方面的家禽饲料添加剂和 1 Ow%-40w%的大豆粉的家禽饲料改进了家禽的饲料转化率。在一个优选的实施例中，包括 第Ξ方面的家禽饲料添加剂和10w%-40w%的大豆粉的家禽饲料改进了家禽的增重。在一 个优选的实施例中，包括第Ξ方面的家禽饲料添加剂和10w%-40w%的大豆粉的家禽饲料 改进了家禽的增重和/或饲料转化率。
[0044] 在第四方面的一个实施例中，该细菌淀粉酶改进了饲料转化率。在一个实施例中， 该细菌淀粉酶改进了体重增加。在一个另外的实施例中，该细菌淀粉酶改进了饲料转化率 并且改进了体重增加。在一个优选的实施例中，在饮食中，该细菌淀粉酶改进了家禽的饲料 转化率，其中与标准家禽饲料相比，该家禽饲料具有降低的表观可代谢能量。在一个优选的 实施例中，在饮食中，该细菌淀粉酶改进了家禽的体重增加，其中与标准家禽饲料相比，该 家禽饲料具有降低的表观可代谢能量。在一个优选的实施例中，在饮食中，该细菌淀粉酶改 进了家禽的饲料转化率和体重增加，其中与标准家禽饲料相比，该家禽饲料具有降低的表 观可代谢能量。
[0045] 在本发明的第四方面的另外的实施例中，与标准家禽饲料相比，该家禽饲料具有 降低的表观可代谢能量。在一个实施例中，该表观可代谢能量是在标准家禽饲料的85%和 99.9 %之间，如在标准家禽饲料的90 %和99.5 %之间、91 %和99 %之间、92 %和99 %之间、 93 %和98.5 %之间、或94 %和98 %之间，其中标准家禽饲料的能量针对第1-21天是 3050kcal/kg 并且针对第 22-40天是 3170kcal/kg。
[0046] 在本发明的第四方面的另外的实施例中，W在0.01和200mg酶蛋白/kg饮食之间的 剂量向家禽饲料添加细菌淀粉酶，所述剂量如0.05-100、0.1-50、0.2-35、0.4-20、0.5-25、 0.6-15、0.8-8、1-10或1-6.111邑酶蛋白/1^。在本发明的第一方面的另外的实施例中，从在1和 5000KNU/kg饲料之间的剂量向家禽饲料添加细菌淀粉酶，所述剂量如5-2500、10-1000、15- 600、20-400、25-300、30-200、40-160KNU/kg 饲料。
[0047] 在一个具体实施例中，明确限定了处于添加至饲料中的形式的或当包含在饲料添 加剂中时的淀粉酶。明确定义指，淀粉酶制品为蛋白质基础上至少50%纯的。在其他具体实 施例中，该淀粉酶制品是至少60 %、70 %、80 %、85 %、88%、90%、92%、94%、或至少95 %纯 的。可W通过本领域已知的任何方法，例如通过SDS-PAGE，或者通过尺寸排阻色谱(参见WO 01/58275的实例12)来确定纯度。
[004引明确限定的淀粉酶制品是有利的。例如，要剂量正确地(do S e C 0rr e C11 y)将淀粉 酶加入饲料就容易得多，所述淀粉酶基本不含干扰或者污染的其他酶。术语正确配量具体 指得到一致和恒定的结果的目标，和基于所希望的效果优化剂量的能力。
[0049] 具体地说，使用重组生产方法即可获得纯度为上述数量级的淀粉酶制剂，然而，当 通过传统的发酵方法生产时，要想获得运些淀粉酶制剂却并非易事，而且，批次与批次之间 会有较高的差异。
[0050] 用于根据本发明的用途的细菌淀粉酶W有效量包括于家禽饮食或家禽饲料添加 剂中。现在期望的是，有效量低于400mg酶蛋白/kg饮食干物质，优选低于350、300、250、200、 150、100或低于50111旨酶蛋白/4旨饮食干物质（991]1)。另一方面，有效量可^高于0.011]1旨酶蛋 白 Ag 饮食干物质，优选高于 0.5、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.75 或高于Img酶蛋白/kg饮食干物质（ppm)。因此，优选剂量范围的非限制性实例是：0.01 - 200mg酶蛋白/kg，优选地0.05-100、0.1-50、0.5-25或1-10111邑酶蛋白/1^。优选剂量范围的附 加实例，全部Wmg酶蛋白/kg计，是:0.2-35、0.4-20、0.6-15、0.8-8、和1 -6。在其他非限制性 实例中，本发明的细菌淀粉酶的优选剂量范围是在1和5000KNU/kg饲料，如5-2500、ιο? ? 000 、 15-600 、 20-400 、 25-300 、 30-200 、 40-160KNU/kg 饲料。
[0051] 为了确定每kg饲料的淀粉酶蛋白mg数，从饲料组合物纯化淀粉酶，使用期望的淀 粉酶测定来确定纯化后的淀粉酶的比活性。也可W使用相同的测定同样地确定饲料组合物 的淀粉酶活性，并且根据运两个确定结果，计算Wmg淀粉酶蛋白/kg饲料表示的剂量。
[0052] 将同样的规则应用于确定饲料添加剂中的淀粉酶蛋白mg数。当然，如果样品使用 了用于制备饲料添加剂或饲料的淀粉酶，可W由此样品确定比活性(不需要从饲料组合物 或添加剂中纯化淀粉酶）。
[0053] 为了对细菌进行分类学上的分类和鉴定，参照伯杰氏系统细菌学手册(Bergey's Manual of Systematic Bacte;riology)(1986)，第2卷，ISBN0-683-0783。可供选择地，可W 使用熟知的16SrRNA序列分析（参见例如约翰森（JohanSen)等人，国际系统细菌学杂志 (Int. J.Syst.Bacteriol)，1999,49,1231-1240,特别是 1233页第二栏的方法部分）；或者可 W咨询分类学专家，例如，来自DSMZ或其他公认的保藏机构的分类学专家。
[0054] 如在本文中使用的，术语细菌的指示了淀粉酶源自细菌。术语"源自"包括可W获 得自或者获得自野生型细菌菌株、W及其变体的酶。变体可W具有至少一个氨基酸残基的 至少一个取代、插入和/或缺失。术语变体还包括重排体(shufflant)、杂合体化ybrid)、嵌 合酶和共有酶(consensus enzyme)。可W用本领域已知的任何方法产生变体，所述方法如 定点突变、随机突变、共有衍生方法山〇113日]13113 derivation processKEP 897985)和基因 重排(WO 95/22625，W0 96/00343)等。就本目的而言，当使用至少一种细菌淀粉酶进行变体 的设计、衍生或制备时，淀粉酶变体可W称为细菌的。术语细菌的指的不是可能的重组产生 宿主，而只是指淀粉酶编码基因的宿主起源。
[0055] 用于根据本发明的用途的淀粉酶优选源自芽抱杆菌属(Bacillus)的菌抹，如解淀 粉芽抱杆菌（Bacillus am}doliquefaciens)、环状芽抱杆菌（Bacillus circulans)、盐敏 芽抱杆菌(Bacillus halmapalus)、地衣芽抱杆菌(Bacillus licheniformis)、巨大芽抱杆 菌(Bacillus megaterium)、芽抱杆菌属菌种（Bacillus sp .)、嗜热脂肪芽抱杆菌、和枯草 芽抱杆菌的菌株;优选地来自解淀粉芽抱杆菌、盐敏芽抱杆菌、地衣芽抱杆菌、芽抱杆菌属 菌种、枯草芽抱杆菌、和嗜热脂肪芽抱杆菌的菌株。
[0化6] 野生型淀粉酶的实例是源自地衣芽抱杆菌的那些，如Swissprot条目名称AMY_ BA化I，主登录号P06278(SEQ ID N0:8)，和由诺维信公司W商品名DURAM化出售的商业淀粉 酶;源自解淀粉芽抱杆菌的那些，如Swissprot条目名称AMY_BACAM，主登录号P00692(SEQ ID N0:7)，和由诺维信公司W商品名BAN出售的商业淀粉酶;源自巨大芽抱杆菌的那些，如 Swissprot条目名称AMY_BACME，主登录号P20845;源自环状芽抱杆菌的那些，如Swissprot 条目名称AMY_BACCI，主登录号P08137;源自嗜热脂肪芽抱杆菌的那些，如Swissprot条目名 称AMY_BACST，主登录号P06279(SEQ ID N0:9)，和由诺维信公司W商品名TERMAMYL SC出售 的商业淀粉酶。另一个实例源自枯草芽抱杆菌，如Swissprot条目名称AMY_BACSU，主登录号 P00691。
[0057] 包含于商品中的淀粉酶的实例是：BAN、Stainz;yme、Te;rmamylSC、Natalase、和 Duramyl(所有都来自诺维信公司），W及在Validase BAA和Validase HT产品（来自化11巧 Research)中。用于根据本发明的用途的淀粉酶的进一步具体实例是在W下商品中包含的 淀粉酶：Clarase、DexLo、GC262SP、G-ZymeG990、G-ZymeG995、G-ZymeG997、G-ZymeG998、 HTAA、Optimax 7525、Purastar OxAm、Purastar ST、Spezyme AA、Spezyme口、Spezyme BBA、 SpezymeSAA、Spezyme DBA、Spezyme Ethyl,Spezyme Fred(GC521)、Spezyme HPA、和 叫化日地1〇￥(所有都来自杰能科公司（66116]1。〇1'));￥日11(1日36肌3401^、￥日11巧了11；[]1 3401 (所有都来自 Vail巧 Research) ;Aviz;yme l500、Dex1:;ro 300 L、Kleistase、Maltaz;yme、 Maxamyl、Thermozyme、Thermatex、Starzyme HT 120 L、Starzyme Super Cone、和 Ultraphlo。
[0058]淀粉酶的另外的非限制性实例是：
[0059] 具有、包括或其组成为沈Q ID N0:2的氨基酸1-481、1-484、1-486、或1-513的淀粉 酶(其中"Γ是指成熟肤的起始氨基酸，Ala,参考序列表）；
[0060]具有、包括或其组成为SEQ ID N0:4的氨基酸1-483的淀粉酶；
[0061 ]具有、包括或其组成为SEQ ID N0:5的氨基酸1-483的淀粉酶；
[0062] 具有、包括或其组成为SEQ ID N0:6的氨基酸1-481的淀粉酶(其中"Γ是指成熟肤 的起始氨基酸，化1，参考序列表）；
[0063] 具有、包括或其组成为SEQ ID N0:7的氨基酸1-483的淀粉酶(其中"Γ是指成熟肤 的起始氨基酸，化1，参考序列表）；
[0064] 具有、包括或其组成为SEQ ID N0:8的氨基酸1-483的淀粉酶(其中"Γ是指成熟肤 的起始氨基酸，Ala,参考序列表）；和
[0065] 具有、包括或其组成为SEQ ID N0:9的氨基酸1-515的淀粉酶(其中"Γ是指成熟肤 的起始氨基酸，Ala,参考序列表）；
[0066] 连同任何保留淀粉酶活性的W上指定的淀粉酶的片段或变体。
[0067] 片段是在氨基和/或簇基末端缺失了一个或多个氨基酸的多肤。优选地，片段包含 至少450个氨基酸残基，更优选地至少460个氨基酸残基，甚至更优选地至少470个氨基酸残 基，和最优选地至少480个氨基酸残基。另外优选的片段包含至少481、483、484、或至少513 个氨基酸残基。SEQ ID NO: 2的淀粉酶的酶活性片段的实例是具有其氨基酸1-481、1-484、 和1-486的序列。
[0068] 在具体实施例中，用于根据本发明的用途的淀粉酶是造粒稳定的、和/或热稳定 的。酶的溶解溫度(Tm)是其热稳定性的量度。本发明的淀粉酶可W具有至少75°C、76°C、77 °C、78°C、79°C、8(TC、8rC、82°C、83°C、84°C、85°C、86°C、87°C、88°C、89°C、9(rC、9rC、92 °C、93°C、94°C或至少95°C的Tm，如通过差示扫描热量法(DSC)所确定的。DSC是在lOmM憐酸 钢、50mM氯化钢缓冲液(pH 7.0)中进行。扫描速率是恒定的，例如1.5 °C/min。扫描间隔可W 是从20°(：至100°(：。可^选择另一种缓冲液用于扫描，例如抑5.0、5.5、6.0或抑6.5的缓冲 液。在一个另外的替代实施例中，可W采用更高或更低的扫描速率，例如更慢的扫描速率 1.4°(：/111111、1.3°(：/111111、1.2°(：/111111、1.1°(：/111111、1.0°(：/111111、或0.9°(：/111111。
[0069] 在另一个优选的实施例中，相对于最适pH和37°C下的活性，用于根据本发明的用 途的淀粉酶具有在pH 7.0和37 °C下的至少35 %的活性。更优选地，pH 7.0和37 °C的活性是 最适抑和37 °C下活性的至少40 %、45 %、50 %、55 %、60 %、65 %、70 %、或至少75 % (参考实 例2的表1)。
[0070] 在另一个优选的实施例中，相对于在最适pH和37°C下、在不存在胆盐的情况下的 活性，在抑7.0和37°C下、W及在存在5mM胆盐的情况下本发明的淀粉酶具有至少25%的活 性。更优选地，在抑7.0和37°C下W及在存在5mM胆盐的情况下的活性为在最适pH和37°C下 W及在不存在胆盐的情况下的活性的至少30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、或至少 65% (参考实例2的表2)。
[0071] 在再进一步更优选的实施例中，相对于在抑5.0和37°C下的TERMAMYL SC的淀粉 酶比活性，在pH 7.0和37°C下，本发明的淀粉酶的比活性为至少10%，更优选地至少15%、 20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、或至少70% (参考实例2的表3)。
[0072] 在另一个优选的实施例中，相对于在抑5.0和37°C下W及在存在5mM胆盐的情况 下TERMAMYL SC的淀粉酶的比活性，在pH 7.0和37°C下W及在存在5mM胆盐的情况下本发明 的淀粉酶的比活性为至少10%，更优选地至少15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、 50%、55%、60%、65%、70%、或至少75% (参考实例2的表4)。
[0073] 在W上优选实施例中提及的活性可W适当使用还原糖测定法来测定，例如，如在 实例2中所描述的，优选地使用蜡质玉米作为底物。详细过程描述于实例2中。
[0074] 在另一个具体的实施例中，用于根据本发明的用途的淀粉酶在存在蛋白酶的情况 下是稳定的。蛋白酶的实例是消化蛋白酶、和饲料蛋白酶，如描述于例如W0 01/58275、W0 01/58276、W0 2004/111220 2004/11122UW02004/072221、和WO 2005/035747中的蛋白酶。 消化蛋白酶的实例为膜酶和胃蛋白酶。可W在存在蛋白酶(例如，胃蛋白酶，70mg/l)的情况 下，在缓冲液中，W所希望的抑(例如，pH 2、3、4、或5)，通过解育0.5mg纯化的淀粉酶蛋白/ ml持续所希望的时间（例如，30、45、60、90、或120分钟），并且然后提高抑至所希望的抑(例 如，pH 4、5、6、或7)并且使用例如本文实例2的还原糖测定测量残余活性来确定蛋白酶稳定 性。相对于对照（非蛋白酶处理的样品），残余淀粉酶活性优选地是至少20%，优选地至少 30%、40%、50%、60%、70%、80%、或至少90%。
[0075] 家禽饲料和家禽饲料添加剂
[0076] 本发明还设及包括本发明淀粉酶的家禽饲料和家禽饲料添加剂。优选地，该家禽 饲料或家禽饲料添加剂富含本发明的淀粉酶。术语"富含"指示，该组合物的淀粉酶活性已 经增加，例如，富集因子为至少1.1，如至少1.2、至少1.3、至少1.4、至少1.5、至少2.0、至少 3.0、至少4.0、至少5.0、至少10。
[0077] 在一个实施例中，该家禽饲料或家禽饲料添加剂包括本发明的多肤和一种或多种 调配剂。在一个实施例中，该家禽饲料或家禽饲料添加剂包括本发明的多肤，连同（i)至少 一种维生素、（ii)至少一种矿物质、或（iii)至少一种维生素和至少一种矿物质。在一个实 施例中，该家禽饲料或家禽饲料添加剂包括本发明的多肤，连同一种或多种调配剂和（i)至 少一种维生素、（ii)至少一种矿物质、或（iii)至少一种维生素和至少一种矿物质。在一个 实施例中，该家禽饲料或家禽饲料添加剂进一步包括一种或多种氨基酸。在一个实施例中， 该家禽饲料或家禽饲料添加剂进一步包括一种或多种其他饲料成分。在一个实施例中，该 家禽饲料或家禽饲料添加剂进一步包括一种或多种氨基酸和一种或多种其他饲料成分。
[0078] 在一个实施例中，该家禽饲料添加剂由本发明的多肤和来自下组的一种或多种组 分组成，该组由W下各项组成:维生素、矿物质、调配剂和其他饲料成分。在一个实施例中， 该家禽饲料添加剂由本发明的多肤、一种或多种维生素和一种或多种调配剂组成。在一个 实施例中，该家禽饲料添加剂由本发明的多肤、一种或多种矿物质和一种或多种调配剂组 成。在一个实施例中，该家禽饲料添加剂由本发明的多肤、一种或多种矿物质、一种或多种 维生素和一种或多种调配剂组成。在一个实施例中，该家禽饲料添加剂由本发明的多肤、一 种或多种矿物质、一种或多种维生素、一种或多种其他饲料成分和一种或多种调配剂组成。
[0079] 在一个实施例中，该家禽饲料由本发明的多肤、一种或多种浓缩物和一种或多种 组分组成，该一种或多种组分来自下组，该组由W下各项组成:维生素、矿物质、调配剂和其 他饲料成分。在一个实施例中，该家禽饲料由本发明的多肤、一种或多种浓缩物、一种或多 种维生素和一种或多种调配剂组成。在一个实施例中，该家禽饲料由本发明的多肤、一种或 多种浓缩物、一种或多种矿物质和一种或多种调配剂组成。在一个实施例中，该家禽饲料由 本发明的多肤、一种或多种浓缩物、一种或多种矿物质、一种或多种维生素和一种或多种调 配剂组成。在一个实施例中，该家禽饲料由本发明的多肤、一种或多种浓缩物、一种或多种 矿物质、一种或多种维生素、一种或多种其他饲料成分和一种或多种调配剂组成。
[0080] 家禽饲料具有50-800g/kg的粗蛋白含量，并且此外包括如在此要求保护的至少一 种淀粉酶。
[0081] 除如上文描述的用于根据本发明的用途的淀粉酶W外，根据本发明的最终家禽饲 料组合物包括如上所述的至少大豆粉和痕量矿物质和/或维生素预混物。例如，该饲料组合 物包含10w%-40w%大豆粉和0.5w%-2w%的痕量矿物质和维生素。
[0082] 完整的动物饮食中巧、有效憐和氨基酸的饮食含量是在饲料表（如饲料表 (Veevoede;rtabel)1997,化学成分数据（gegevens over chemische samenstelling)，饲料 的消化率和营养价值（verteerbaarheid en voederwaarde van voedermiddelen)，中央饲 料局（Central Veevoederbureau)，Runderweg6,8219地莱利斯塔德，ISBN 90-72839-13-7) 的基础上计算。
[0083] 在优选的实例中，对于每kg饲料，该家禽饲料组合物包含：维生素 A，7，000-9， 000UI;维生素 D3，2，000-2，500UI;维生素 E，15-20mg;维生素 K3，1.5-2.5mg;硫胺素，l-2mg; 核黄素，6-7mg;化唉醇，2-3mg;泛酸，10-12mg;叶酸，ο. 5-1.5mg;生物素，ο. 1-lmg;铁，100- 150mg;锋，100-150mg;儘，100-150mg;钻，1 -2mg;铜，10-20mg。
[0084]粗蛋白W氮(N)乘W系数6.25计算，即粗蛋白（邑/1^)=則邑/1^巧6.25。通过凯氏定 氮法化jeldahl method)测定氮含量(A.O.A.C. ,1984,官方分析方法（Official Methods of Analysis)第14版，官方分析化学家集（Association of Official Anal}ftical Qiemists)，华盛顿特区）。
[00化]可W在欧洲家禽饲养材料能量值表化uropean Table of Energy Values for Poul化y Feed-stuffs)，斯克得霍特（Spelderholt)家禽研究与推广中屯、，7361DA贝克贝 亨，荷兰，Grafisch bedrijf 化nsen&looijen公司，瓦赫宁恩.ISBN90-71463-12-5的基础 上计算可代谢能量。
[0086] 本发明的家禽饲料还可W包含动物蛋白，如肉和骨粉、羽毛粉、和/或鱼粉，通常量 为0-25%。本发明的家禽饲料还可W包含具有可溶物的干酒糟(DDGS)，通常量为0-30%。
[0087] 在再进一步具体的实施例中，本发明的家禽饲料包含0-80%玉蜀泰;和/或0-80% 高梁;和/或0-70 %小麦;和/或0-70 %大麦;和/或0-30 %燕麦;和/或10 % -40 %大豆粉;和/ 或0-25 %鱼粉;和/或0-25 %肉和骨粉;和/或0-20 %乳清。
[0088] 该动物饲料可W包括植物蛋白。在具体实施例中，运些植物性蛋白的蛋白含量是 至少为10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、或90%(巧/巧）。植物性蛋白可^衍生 自植物性蛋白来源，如豆类和谷类，例如得自蝶形花科巧科），十字花科，襲科和早熟禾科 植物的材料，如大豆粉饼，羽扇豆粉饼，油菜巧粉饼，及其组合。
[0089] 在一个具体实施例中，植物性蛋白来源是来自豆科(Fabaceae)的一种或多种植物 的材料，如大豆、羽扇豆、魏豆、或豆(bean)。在另一个具体实施例中，植物性蛋白来源是得 自襲科的一种或多种植物，如甜菜、糖甜菜、渡菜或奎奴亚襲(quinoa)的材料。植物性蛋白 来源的其他实例是油菜和卷屯、菜。在另一个具体实施例中，大豆是一种优选的植物性蛋白 来源。植物性蛋白来源的其他实例是谷物，例如大麦、小麦、黑麦、燕麦、玉蜀泰巧米）、水 稚、和局梁。
[0090] 调配剂
[0091] 本发明的家禽饲料添加剂可W配制为液体或固体。针对液体配制品，该调配剂可 W包括多元醇（如，例如，甘油、乙二醇或丙二醇）、盐（如，例如，氯化钢、苯甲酸钢、山梨酸 钟)或糖或糖衍生物(如，例如，糊精、葡萄糖、薦糖、和山梨醇）。因此，在一个实施例中，该家 禽饲料添加剂是一种液体组合物，该液体组合物包括本发明的多肤和一种或多种选自W下 列表的调配剂，该列表由W下各项组成:甘油、乙二醇、1,2-丙二醇、1,3-丙二醇、氯化钢、苯 甲酸钢、山梨酸钟、糊精、葡萄糖、薦糖、和山梨醇。
[0092] 针对固体配制品，该配制品可W是例如作为颗粒、喷雾干粉或聚结物。调配剂可W 包括盐(有机的或无机的锋、钢、钟或巧盐，例如，如乙酸巧、苯甲酸巧、碳酸巧、氯化巧、巧樣 酸巧、山梨酸巧、硫酸巧、乙酸钟、苯甲酸钟、碳酸钟、氯化钟、巧樣酸钟、山梨酸钟、硫酸钟、 乙酸钢、苯甲酸钢、碳酸钢、氯化钢、巧樣酸钢、硫酸钢、乙酸锋、苯甲酸锋、碳酸锋、氯化锋、 巧樣酸锋、山梨酸锋、硫酸锋）、淀粉或糖或糖衍生物(像例如，薦糖、糊精、葡萄糖、乳糖、山 梨醇）。
[0093] 在一个实施例中，该固体家禽饲料添加剂是W颗粒形式。该颗粒可W具有基体结 构(matrix s化ucture)，其中组分是均匀混合的。然而，该颗粒典型地包括核屯、颗粒和一种 或多种包衣，该包衣典型地是盐的和/或蜡质的包衣。该核屯、颗粒可W是本发明的淀粉酶与 可任选的一种或多种盐或惰性颗粒(具有施加到其上的本发明的淀粉酶)一起的均匀混合 物。
[0094]在一个实施例中，核屯、颗粒的材料选自下组，该组由W下各项组成:无机盐(如乙 酸巧、苯甲酸巧、碳酸巧、氯化巧、巧樣酸巧、山梨酸巧、硫酸巧、乙酸钟、苯甲酸钟、碳酸钟、 氯化钟、巧樣酸钟、山梨酸钟、硫酸钟、乙酸钢、苯甲酸钢、碳酸钢、氯化钢、巧樣酸钢、硫酸 钢、乙酸锋、苯甲酸锋、碳酸锋、氯化锋、巧樣酸锋、山梨酸锋、硫酸锋）、淀粉或糖或糖衍生物 (像例如，薦糖、糊精、葡萄糖、乳糖、山梨醇）、糖或糖衍生物(像例如，薦糖、糊精、葡萄糖、乳 糖、山梨醇）、有机小分子、淀粉、面粉、纤维素和矿物质。
[00M]盐包衣典型地至少是Ιμπι厚并且可W是一种具体的盐或多种盐的混合物，例如 Na2S〇4、K2S〇4、MgS〇4和/或巧樣酸钢。其他实例是在例如W02008/017659、W0 2006/034710、W0 1997/05245、W0 1998/54980、W01998/55599、W0 2000/70034中描述的那些，或是例如在WO 2001/00042中描述的聚合物包衣。
[0096] 在另一个实施例中，该家禽饲料添加剂是一种固体组合物，该固体组合物包括本 发明的淀粉酶和一种或多种选自W下列表的一种或多种调配剂，该列表由W下各项组成： 氯化钢、苯甲酸钢、山梨酸钟、硫酸钢、硫酸钟、硫酸儀、硫代硫酸钢、碳酸巧、巧樣酸钢、糊 精、葡萄糖、薦糖、山梨醇、乳糖、淀粉和纤维素。在一个优选的实施例中，该调配剂选自W下 化合物中的一种或多种:硫酸钢、糊精、纤维素、硫代硫酸钢和碳酸巧。在一个优选的实施例 中，该固体组合物是处于颗粒形式。在一个实施例中，该固体组合物是处于颗粒形式，并且 包括核屯、颗粒、包含本发明淀粉酶的酶层和盐包衣。
[0097] 在另外的实施例中，该调配剂选自W下化合物中的一种或多种:甘油、乙二醇、1， 2-丙二醇或1,3-丙二醇、氯化钢、苯甲酸钢、山梨酸钟、硫酸钢、硫酸钟、硫酸儀、硫代硫酸 钢、碳酸巧、巧樣酸钢、糊精、葡萄糖、薦糖、山梨醇、乳糖、淀粉和纤维素。在一个优选的实施 例中，该调配剂选自W下化合物中的一种或多种：1,2-丙二醇、1,3-丙二醇、硫酸钢、糊精、 纤维素、硫代硫酸钢和碳酸巧。
[00側维生素和矿物质
[0099] 在另一个实施例中，该家禽饲料或家禽饲料添加剂可W包括一种或多种维生素， 如一种或多种脂溶性维生素和/或一种或多种水溶性维生素。在另一个实施例中，该家禽饲 料或家禽饲料添加剂可任选地包括一种或多种矿物质，如一种或多种痕量矿物质和/或一 种或多种大量矿物质。
[0100] 通常脂溶性和水溶性维生素 W及痕量矿物质形成了用于添加到饲料中的所谓的 预混物的一部分，而大量矿物质通常是单独地添加到饲料中。
[0101] 脂溶性维生素的非限制性实例包括维生素 A、维生素 D3、维生素 E、w及维生素 K，例 如维生素 K3。
[0102] 水溶性维生素的非限制性实例包括维生素 B12、生物素和胆碱、维生素 B1、维生素 B2、维生素 B6、烟酸、叶酸和泛酸盐(panthothenate)，例如Ca-D-泛酸盐。
[0103] 痕量矿物质的非限制性实例包括棚、钻、氯化物、铭、铜、氣化物、舰、铁、儘、钢、砸 和锋。
[0104] 大量矿物质的非限制性实例包括巧、儀、钟和钢。
[0105] 在W0 01/58275的表A中，列出了运些组分的营养需求m家禽和仔猪/猪为例）。营 养需求指的是应在饮食中提供指定浓度的运些组分。
[0106] 在可替代的实施例中，本发明的动物饲料添加剂包含W0 01/58275的表A中指定的 单独组分中的至少一种。至少一种指的是一种或两种或Ξ种或四种等直至所有十Ξ种、或 直至所有十五种单独组分中的任一种，一种或多种。更具体地，该至少一种单独组分W提供 在表A的第四栏或第五栏或第六栏说明的范围内的饲料中浓度（in-feed-concentration) 的量包括在本发明的添加剂内。
[0107] 氨基酸
[0108] 本发明的组合物还可包括一种或多种氨基酸。用于动物饲料的氨基酸的实例是赖 氨酸、丙氨酸、0-丙氨酸、苏氨酸、甲硫氨酸和色氨酸。
[0…9]其他饲料成分
[0110] 包括本发明淀粉酶的家禽饲料或家禽饲料添加剂可W进一步包括着色剂、稳定 剂、生长改进添加剂和香料化合物/调味料、多不饱和脂肪酸(PUFA);活性氧产生物质、抗微 生物肤和抗真菌多肤。
[0111] 着色剂的实例是类葫萝l·素，例如0-胡萝l·素、邮青素、和叶黄素。
[0112] 香料化合物/调味料的实例是甲氧甲酪，茵香酸，十、十一和/或十二内醋、紫罗酬、 尊尾酬、姜辣素、赃晚、亚丙基苯献（propylidenephatalide)、亚下基苯献（butylidene pha化lide)、辣椒素和较质。
[0113] 抗微生物肤(AMP)的实例是CAP18、林可霉素化eucocin)A、S色肤(Tri化pticin)、 P;roteg;rin-l、死亡素（Thanatin)、防卫素(Defensin)、乳铁蛋白、乳铁蛋白肤、和奥维司匹 林(Ovispirin)如诺维司匹林(Novispirin)(罗伯特莱勒(Robert Lehrer) ,2000)、菌丝霉 素(Plectasins)W及他汀类，包含在WO 03/044049和WO 03/048148中所披露的化合物和多 肤，W及W上的保留了抗微生物活性的变体或片段。
[0114]抗真菌多肤(AFP)的实例是巨大曲霉(Aspergillus giganteus)和黑曲霉的肤，连 同其保留了抗真菌活性的变体和片段，如在W0 94/01459和W002/090384中披露的。
[0115] 多不饱和脂肪酸的实例为C18、C20和C22多不饱和脂肪酸，如花生四締酸、二十二 碳六締酸、二十碳五締酸和丫-亚油酸。
[0116] 活性氧生成种类的实例为化学品，如过棚酸盐、过硫酸盐或过碳酸盐;和酶，如氧 化酶、氧合酶或合成酶。
[0117] 进一步通过W下实例来描述本发明，所述实例不应理解为限制了本发明的范围。 [011引实例
[0119] 实例1:α-淀粉酶活性
[0120] 使用可商购于罗氏诊断（Roche Diagnostics)的目录号为11876473的ΑΜΥΚ-试剂 盒测定α-淀粉酶活性。底物是4,6-亚乙基他)-对-硝基苯基(Gi)-a，D-麦芽庚糖巧(亚乙基- 〇7ΡΝΡ)"α-淀粉酶分裂(split off)亚乙基-Gn，并且然后由酶α-葡糖巧酶(试剂盒的部分)在 形成葡萄糖和黄色对-硝基苯酪的情况下，切割得到的Gn-对-硝基苯基。
[01別]在405nm下，例如用Konelab 30分析仪（可商购于热电公司（Thermo Electron Corporation))，例如使用2min的测定时间观察形成对-硝基苯酪的速率(其为反应速率的 量度，从而也是α-淀粉酶活性的量度）。
[0122] 该反应条件是:溫度37°C，pH: 7.0，反应时间：5min。优选使用具有化i j 0.0025% (西格玛B 4184)的氯化巧0.03M作为稳定剂。可W相对于标准给出α-淀粉酶活性，例如W KNU( S)的单位表示，其按照相对于公知KNU( S)活性的α-淀粉酶标准物确定。
[0123] 更详细的测定描述化B-SM-0221.02) W及KNU(S)TERMAMYL SC标准物可从诺维信 公司（克罗格休约尔36，DK-2880己格斯维尔德)应要求获得。
[0124] 实例2:在有和没有胆盐的情况下，淀粉酶pH曲线
[0125] 运个实验用于确定Ξ种α-淀粉酶在加入和未加入胆盐时的抑曲线，所述淀粉酶为 两种本发明的细菌淀粉酶和现有技术的真菌米曲霉淀粉酶。
[0126] 使用的淀粉酶是纯化的嗜热脂肪芽抱杆菌淀粉酶变体(来自TERMAMYL SC)，纯化 的芽抱杆菌属菌种淀粉酶变体(来自STAINZYME)，和用于比较的纯化的米曲霉淀粉酶(来自 FUNGAMYL)。运些酶制品全部在商业上可由诺维信公司（克罗格休约尔36，DK-2880己格斯维 尔德，丹麦)获得。
[0127] 还原糖测定
[0128] 酶缓冲液:50mM乙酸盐、50mM咪挫、50mM丙二酸、ImM CaCl2、0.01 % 曲通X-100。用 肥 1/NaOH调节至抑 2.0、3.0、4.0、5.0、6.0或7.0。
[0129] 底物缓冲液：1.5mg/ml支链淀粉(蜡质玉米，例如来自Cerestar的蜡质玉米04201， 批号WM5671)，50mM乙酸盐，50mM咪挫，50mM丙二酸，lmM CaCl2。用肥1/化細调至所希望的抑 (如上）。在l〇〇°C下解育5min。用或不用5mM胆盐（即，可商购于例如LGC promochem的牛横胆 酸钢，500g/mol)来制备底物缓冲液。
[0130] 用还原糖测定检测淀粉酶活性。简而言之，在PCR-MTP(The;rm〇-Fast96，ABgene，目 录号AB-0600)中将50μ1酶(在酶缓冲液中稀释，使其落入测定的线性范围内）与10化1底物 缓冲液混合。将ΜΤΡ在37 °C下解育15min，此后添加75μ1终止溶液（lOOmM对-径基苯甲酸酷 阱、180mM K-Na-酒石酸、2%Na0H)，并且将运些板在95°C下解育lOmin。然后从每个孔中转 移15化1至96孔MTP，并且在410nm下，监测吸光度作为淀粉酶活性的量度。
[0131] 结果(两次测定的平均值)示于下表1-4中。表1示出在没有胆盐的情况下，在所指 示pH下的每种酶的活性。对于每种酶，最大活性设为100%。表2所示的与表1相同，但存在 5mM的胆盐。表3示出在没有胆盐的情况下，在所指示的pH下，相对于本实验中测定的最大酶 活性，对于每mg酶蛋白而言每种酶的活性，该最大酶活性为TERMAMYL SC酶在抑5.0下的活 性（100 % )。因此，相对于该活性，已经将每种酶的活性归一化。在比活性基础上，确定每种 酶的酶蛋白的量。表4所示的与表3相同，但存在5mM的胆盐。在运里，在存在5mM胆盐情况下， TERMAMYL SC酶在抑5.0下的活性是参考值(100%)。
[0。。表1:无胆盐时的相对活性
[0133]
[0134] 表2:有胆盐时的相对活性
[0135] _______
[0136] *因为明显错误所丢弃的一个测量值
' ' ' '
[0。7] 表3:无胆盐的情况下，相对于TERMAMYL SC的归一化的绝对活性
[013 引
[0139] ~表4:有胆盐的情况下，相对于TERMAMYL SC的归一化的绝对磊在
[0140]
[0141] ~运些结果示出，尽管胆盐看起来略微降低了淀粉酶活性，但是在存在5mM胆盐的情 况下，该活性仍是令人满意的。运些结果还示出，胆盐并没有导致最适抑的改变。
[0142] 此外，运些结果示出，在抑7下，本发明的各芽抱杆菌淀粉酶都具有多于50%的相 对活性，对于对比真菌淀粉酶并不是运种情况。
[0143] 最后，表3和4证实了，至少在运些条件下，来自TERMAMYL SC的淀粉酶比其他两种 测试的淀粉酶具有显著更高的活性/mg酶。
[0144] 实例3:肉仔鸡饲料（"前期（s^der)")
[0145] 可W在室溫下，使用常规混合设备，通过将W下成分混合在一起来制备包含根据 本发明的化合物的混合物的肉仔鸡饲料Γ前期"）。
[0146]
[0147] 实例4:肉仔鸡饲料（"生长期(grower)")
[0148] 可W在室溫下，使用常规混合设备，通过将W下成分混合在一起来制备包含根据 本发明的化合物的混合物的肉仔鸡饲料Γ生长期"）。
[0149]
[0150] 实例5:饮食的表观可代谢能量
[0151] 针对肉仔鸡的生命表现进行体内试验，运些肉仔鸡已经喂食如实例3和4中指定的 基础饮食，运些基础饮食是基于大豆粉并且补充WTERMAMYL SC。
[0152] 用基础饮食和用玉米/大豆饮食进行该研究，该玉米/大豆饮食包含替代40%大豆 的玉米。在试验中，W40KNU/kg饲料、80KNU/kg饲料、120KNU/kg饲料和160KNU/kg饲料的分 级内含物使用TERMMYL SC。
[。巧引表5:实验性处理概述（W 9个重复处理7只禽类/笼)
[0154]
[0155] ~
[0156] 交付作为日龄Co化500雄性鸡的总数为630只的禽类。针对试验，使用包括10次处 理(每次处理(每次7只禽类)重复9次）的完全随机设计，将处理组分配到金属笼。
[0157] 皇
[0158] 实验在UFPR实验装置处进行。处理号显示在笼或围栏处，重复次数和治疗组必须 在各围栏处是可见的。每个围栏的禽类最大数和每只禽的空间的最大数是依照现行立法。 供给饲料和水用于随意采食。将运些禽关在配备有饮水槽和投饲机的金属笼中。溫度和光 照方案依据肉仔鸡养殖地的建议。在每天的基础上，针对病禽类和死禽类检查所有的围栏。 在围栏记录表单上记录每只死禽的身份号码、围栏、年龄和体重。记录死禽的一般健康状 况、重量、死亡率和死因和填充级连同形态学改变/症状。
[0159] 1?
[0160] 动物直到14天龄消耗相同饮食，并且此后通过添加酸不溶性灰分(AIA)作为标志 物来配制实验饮食，使用二者都基于罗斯塔诺等人(2011)。在实验饮食适应期间后，通过部 分收集法保持排泄物取样四天(21至24天）。每天有两次收集，一次在上午并且另一次在傍 晚，分别在约上午9:00和17 : 30，用塑料刮片，避免收集临近笼、水槽和饮水槽附近的排泄 物。然后将运些样品置于冷冻机中，并且就在取样之后，清理冷冻机剩余排泄物，W防止下 次取样的污染。随后，将粪便标本在65°C的强制通风烘箱中干燥，直到恒重。
[0161] 将运些鸡空腹两小时，并且吃一个半小时至填满消化道，用于回肠消化率测量。通 过颈椎脱位屠宰运些禽类，并且回肠内容物被带到美克尔憩室之下4cm并且在回盲部之上 4cm中。将内容物样品在液氮中迅速冷冻并且然后在冷冻机中储存。随后，进行内容物冻干。
[0162] 针对干物质（DM)、粗蛋白（CP)、总能(GE)、脂肪(F)和酸不溶性灰分(AIA)分析饮 食、排泄物和回肠内容物。在计算代谢和消化率前，收集干物质数据(DM 105°C)，然后通过 部分收集法，使用酸不溶性灰分(AIA)作为标志物计算可代谢的W及可消化和可代谢能量。 根据W下等式计算消化率：消化率=1〇〇-(1〇〇*(饮食标志物％/标记粪便％)*(%粪便养 分/饮食养分％))。
[0163] 在计算消化率和代谢率的饮食系数后，我们根据马特森等人（1965)，通过下式计 算玉米的消化率:CD成分=CD参照+((CD包含物40-CD参照％ )/(玉米MS*的包含物％ ))。
[0164] 统计学分析
[0165] 由研究调查者分析数据，并且在数据分析中考虑死亡率。根据适用于数据集的研 究设计和特征并且包括异常值检查的标准最小二乘法程序进行表观可代谢能量和消化率 参数的统计分析。
[0166] 缉里
[0167] 评估最适用于生物学解释的数据。当运些结果不满足线性回归，那么针对最好的 酶反应通过线性回归柏拉图(Plato)的方法分析数据。结果总结于表6中。
[01側表6:饮食、具有玉米的饮食和具有不同水平TERMAMYL SC的玉米的表观可代谢能 量(ΑΜΕ)。
[0169]
[0170] *l = 3860r = 158**l = 402化=183;1 =最大ΑΜΕ r =最适水平
[0171] 运些结果示出向家禽饲料中添加本发明的α-淀粉酶改进了饮食的、并且尤其是 40%大豆粉被玉米代替的饮食的表观可代谢能量。
[0172] 实例6:在鸡中的动物试验
[0173] 针对已经被喂养如W下指定的基础饮食的肉仔鸡的生命表现，进行第二体内试 验。
[0174] 该研究是使用具有玉米/大豆饮食的模型调研Termamyl SC(细菌α-淀粉酶，IUB号 3.2.1.1.)对肉仔鸡表现的补充作用。
[01巧]每周并且从1至7天、1至14天、1至21天、1至28天、1至35天、1至40天和22至40天记 录表现参数。
[017W 表7:实验处理概述
[0177]
[0178] *通过将饮食Τ1和巧混合获得处理Τ2、Τ3和Τ4。
[0179] 淀粉酶:Termamyl SC(沈Q ID N0:2)，80KNU/kg饲料
[0180] 表8:成分组成
[0181]
[0183] 1使用NIR所确定的。
[0184] 表9:基础饮食的估计的组成
[0185]
[0187]
[018 引 1 组成/kg 饲料：￥^.4,9,000111;￥^.03,2,5001]1;￥11.6,20111邑；￥^.1(3,2.5111邑；硫 胺素，2mg;核黄素，6mg;R比唉醇，3mg;氯钻胺素，0.015mg，泛酸，12mg;烟酸，35mg;叶酸， 1.5mg;生物素，0 . Img;铁，lOOmg ;锋，130mg ;儘，130mg;钻，2mg;铜，20mg;舰，2mg;砸， 0.25mg〇
[0189] 2表观可代谢能量。
[0190] 禽类和窝
[0191] 使用总数1，800只一天龄的雄性Co化X Co化500慢羽化小鸡。使用包括W9个重 复的8次治疗W及25只禽类/重复的完全随机安排，将治疗组分配到地面围栏中。
[0192] 供给饲料和水用于随意采食。使用红外线加热灯控制环境溫度，W维持禽类舒适 度。在第一天，将环境溫度调节至32°C，每两天减少rC直到到达舒适的溫度。将禽类放置在 稻壳垫料上。
[OIW] 实验饮食
[0194]所有的饮食都在400kg容量混合器中生产。混合器在每批进料之间都进行清洁和 真空处理。将饮食提供为糊状物。在研究开始之前，分析玉米和大豆粉的化学组成。
[01巧]实验设计
[0196] W8次处理和每次25只禽类的9次重复使得设计是完全随机的。
[0197] 测量的响应
[0198] 在7天、14天、21天、28天、35天和40天龄评估体重、体重增加和饲料转化。饲料转化 率计算为对死的禽类重量的校正。在各箱处，将响应记录在单独可用的表格上。
[0199] 统计学分析
[0200] 研究调查者分析数据。遵循适当的程序(SAS研究所，2009)进行统计分析。
[0201] 缉里
[020。表10:喂食具有酶的饮食的肉仔鸡的从1至40天龄的体重增加，g
[0203]
[0204] a-d具有不同上标字母的平均值显著不同（p〈〇. 05)-图基检验。
[02化]表η:喂食具有酶的饮食的肉仔鸡的从1至40天龄的饲料转化率，g: g
[0206]
[0207]
[0208] a-d具有不同上标字母的平均值显著不同（p〈〇.05)-图基检验。
[0209] 表12:从1至40天龄的累积的体重增加 ，g
[0210]
[0211] a-e具有不同上标字母的平均值显著不同（p〈〇. 05)-图基检验。
[0212] 表13:从1至40天龄的累积的饲料转化率，g:g
[0213]
[0215] a-e具有不同上标字母的平均值显著不同（p〈〇.05)-图基检验。
[0216] 表14:相对于从1至40天向肉仔鸡喂食的饮食的能量水平，评估的测量值的回归方 星
[0217]
[021 引 1从 1 至21 天的能量水平(2,950; 3，000; 3,050; 3，100和 3，150kcal/kg)和从22至 40 天(3，070; 3，120; 3，170; 3，220和3，270kcal/kg)的能量水平的回归方程。使用所有数据获 得决定系数(r2)。
[0219] 2 线性效应(p〈〇. 10)。
[0220] 3对各参数，基于平均值对能量分级添加的响应所确定的。使用在能量水平(〇、5〇、 100、150和200kcal/kg)之间的差异来获得该相对生物等效量。
[0221] 总之，运些试验在添加本发明的淀粉酶的情况下表现良好，尤其是关于在生长期 和后期期间改进的增重和FCR方面。
【主权项】
1. 在家禽饲料中的至少一种细菌淀粉酶用以改进该饲料的营养价值的用途，其中该细 菌淀粉酶是与SEQ ID NO:2的氨基酸1-481具有至少80% -致性的多肽。2. 如权利要求1所述的用途，其中与标准家禽饲料相比，该家禽饲料具有降低的表观可 代谢能量。3. 如权利要求1至2中任一项所述的用途，其中将该细菌淀粉酶以在0.01和200mg酶蛋 白/kg饮食之间的剂量添加至该家禽饲料。4. 如权利要求1至3中任一项所述的用途，用于改进家禽的增重和/或饲料转化率。5. -种用于改进家禽饲料的营养价值的方法，该方法包括向该饲料添加至少一种细菌 淀粉酶的步骤，其中该细菌淀粉酶是与SEQ ID NO:2的氨基酸1-481具有至少80% -致性的 多肽。6. 如权利要求5所述的方法，其中与标准家禽饲料相比，该家禽饲料具有降低的表观可 代谢能量。7. 如权利要求5至6中任一项所述的方法，其中该细菌淀粉酶以在0.01和200mg酶蛋白/ kg饮食之间的剂量添加至该家禽饲料。8. 如权利要求5至7中任一项所述的方法，用于改进家禽的增重和/或饲料转化率。9. 一种家禽饲料添加剂，该家禽饲料添加剂包括至少一种细菌淀粉酶，连同（i)至少一 种维生素、（ii)至少一种矿物质、或（iii)至少一种维生素和至少一种矿物质，其中该细菌 淀粉酶是与SEQ ID NO:2的氨基酸1-481具有至少80% -致性的多肽。10. 如权利要求9所述的家禽饲料添加剂，其中该家禽饲料添加剂改进了家禽饲料的营 养价值。11. 如权利要求9至10中任一项所述的家禽饲料添加剂，其中家禽饲料添加剂改进了家 禽的增重或饲料转化率。12. -种家禽饲料，包括如权利要求9至11中任一项所述的家禽饲料添加剂和10w%-40w%大豆粉。13. 如权利要求12所述的家禽饲料，其中与标准家禽饲料相比，该家禽饲料具有降低的 表观可代谢能量。14. 如权利要求12至13中任一项所述的家禽饲料，其中将该细菌淀粉酶以在0.01和 200mg酶蛋白/kg饮食之间的剂量添加至该家禽饲料。15. 如权利要求12至14中任一项所述的家禽饲料，其中该家禽饲料改进了家禽的增重 和/或饲料转化率。
【文档编号】A23K50/75GK106028832SQ201480064636
【公开日】2016年10月12日
【申请日】2014年12月1日
【发明人】I·克纳普, J-O·B·索尔巴拉, R·G·埃梅斯
【申请人】帝斯曼知识产权资产管理有限公司, 诺维信公司