一种蛋鸡饲料添加剂的制作方法
【专利摘要】本发明属于生物技术领域，尤其是生物技术与禽养殖农业领域，具体为一种蛋鸡饲料添加剂。该蛋鸡饲料添加剂，包括以下组分及其重量百分数：多肽0.1?0.8%、海藻糖15?28%、重组无活性肠毒素B亚单位0.2?1.2%、甘油5?10%、奶粉14?34%、麦芽干粉2?6%和15?28%益生菌粉，将该添加剂各组分混匀，以0.2?0.5%的比例均匀混合与蛋鸡全价饲料再混匀，饲喂蛋鸡。本发明涉及的产蛋鸡饲料添加剂，可显著提高产蛋鸡的免疫能力，明显减少蛋鸡发病和死亡率；同时，本发明饲料添加剂可调节产蛋鸡内分泌与营养代谢，增加鸡蛋中免疫球蛋白水平，显著改善鸡蛋的品质。
【专利说明】
一种蛋鸡饲料添加剂
技术领域
[0001 ]本发明属于生物技术领域，尤其是生物技术与禽养殖农业领域，具体为一种蛋鸡 饲料添加剂。
【背景技术】
[0002] 随着集约化养殖业的发展，蛋鸡养殖规模越来越大，几乎所有的蛋鸡饲养企业都 使用配合饲料。由于长期使用同质化的原料，改变蛋鸡取食多样性，所产鸡蛋的风味下降， 口感粗糙，营养价值降低。高密度集约化养殖使得养殖环境生态系统结构单一，蛋鸡抵抗力 弱，极易出现交叉感染并大规模蔓延，给养殖户带来巨大经济损失。为了应对各种病害，养 殖户不得不大量使用化学药品和抗生素，然而这些药物不但改变了蛋鸡肠道菌群的正常组 成，肠道内微生态环境失调，还使药物在生物体内残留，妨碍了无公害蛋鸡养殖业的健康发 展。另外，随着人们生活水平的提高和健康意识的加强，人们对禽畜产品的健康价值也有了 新的需求。开发和生产消费者需求的新型畜产品，用高科技来提高产品的附加价值，对提高 人口素质和养殖效益均具有重要意义。值得注意的是，鸡蛋中免疫球蛋白的价值逐渐被人 们研究和重视。鸡蛋中免疫球蛋白有较高的热稳定性和特异性，如同人乳汁中的免疫球蛋 白一样，鸡蛋中免疫球蛋白可有效抑杀有害病菌，保护鸡胚的发育；当我们摄入鸡蛋中免疫 球蛋白时，其亦可抑杀胃肠中有害菌群，从而对人体胃肠起到有效保护作用。
[0003] 多肽的营养和调节功能，近年来已经得到了广泛关注和应用。已经出现了的有抗 生素类含多肽的药物，如多粘菌素类、杆菌肽及万古霉素，其结构如下所示：
[0004]
硫酸粘菌素的分子结构
[0006；
[0007] 枯草杆菌杆菌肽
[0008] 但是以上抗生素类多肽常为复杂多链结构，且通常含有糖基或其它基团，具有抗 生素活性。
【发明内容】
[0009] 本发明正是针对现有技术中存在的不足和缺陷，提供一种蛋鸡饲料添加剂。该添 加剂中多肽的结构简单，仅为常规蛋白质单一多肽链，不含糖基等其它结构或基团，未检出 具有抗菌活性，不具备抗生素的特性，本申请将功能多肽与益生菌粉作为饲料添加剂，能显 著调节蛋鸡肠道微生物生态平衡，提高产蛋鸡的免疫能力和减少腹泻，同时作为营养提高 蛋品品质和减少腥味，具有明显的创新性，且安全可靠，并可大规模应用于实际生产。
[0010]本发明的具体技术方案如下：
[0011] -种蛋鸡饲料添加剂，包括以下百分含量的物料:活性多肽0.1-0.8%、海藻糖10-28%、重组无活性肠毒素 B亚单位0.2-1.2% (Sigma,货号S4881)、甘油5-10%、奶粉14-34%、麦芽干粉2-6%、15-28%益生菌粉，总质量百分含量为100%。
[0012] 所述的活性多肽为3种多肽中的任意一种或三种多肽的混合，三种多肽混合以质 量比为1:1:1。所述3中多肽的氨基酸序列组成如下(左:多肽N-端;右:多肽-C端）：
[0013] NO. 1，LRPDPKRTIQKKSE，包含 14 个氨基酸残基；
[0014] N0 · 2，GAYSNQSIKASIG，包含13 个氨基酸残基；
[0015] N0 · 3，LGFFGKGNSSNE，包含 12 个氨基酸残基。
[0016]上述3种多肽的合成采用现有技术进行合成，脱盐，纯度要求达到95%以上。
[0017]所述益生菌的组分及质量百分数为：10-30 %双歧杆菌粉、30-50 %枯草芽孢杆菌 粉和40-60%地衣芽孢杆菌粉，总质量百分含量为100%。
[0018] 将活性双歧杆菌干粉与相应培养基混合，形成双歧杆菌粉，以质量百分含量计，所 述双歧杆菌粉中含90-95 %的活性双歧杆菌，余量为其相关培养基。
[0019] 将枯草芽孢杆菌干粉与相应培养基混合，形成枯草芽孢杆菌粉，以质量百分含量 计，所述枯草芽孢杆菌中含12-20 %的枯草芽孢杆菌活菌，余量为其相关培养基。
[0020] 将地衣芽孢杆菌干粉与相应培养基混合，形成地衣芽孢杆菌菌粉，以质量百分含 量计，所述地衣芽孢杆菌粉中含30 %的地衣芽孢杆菌活菌，余量为其相关培养基。
[0021] 制备以上所述蛋鸡饲料添加剂的方法，包括以下步骤:按比例称取多肽、海藻糖、 重组无活性肠毒素 B亚单位、甘油、奶粉、麦芽干粉和的益生菌组分，然后将其进行混合均 匀，即为蛋鸡饲料的添加剂。饲料添加剂，可在4°C的干燥环境中储存2年时间。
[0022] 以质量百分含量即，将蛋鸡饲料添加剂按照0.2-0.5%与蛋鸡饲料进行混合，然后 直接饲喂产蛋鸡即可。所述蛋鸡可以为海兰灰。
[0023] 本申请中所采用的重组无活性肠毒素 B亚单位为市售产品，例如可以采用产家为 Sigma,货号为S4881的市售产品。
[0024]本发明的积极效果体现在：
[0025] ( -）、本发明为新的增强产蛋鸡免疫和提高蛋品品质的饲料添加剂。
[0026] (二）、作为食品、营养添加剂以及免疫调节剂，多肽的功能作用已经得到广泛的关 注。目前的多肽产品多是通过分解动植物蛋白质而得到，而本发明涉及的多肽是从人工合 成的多肽库中，通过筛选最终确定的3条多肽，完全不同于已有开发的多肽产品。
[0027](三）、我们前期研究显示该多肽任一或两两组合与益生菌按百分质量配比作为蛋 鸡添加剂，均可显著提高蛋鸡的免疫力和蛋品的口味。该发明是一种新的安全、成本可接受 的提尚广蛋鸡免疫和蛋品品质的伺料添加剂。
[0028](四）、该蛋鸡饲料添加剂可显著提高产蛋鸡的免疫能力，明显减少蛋鸡发病和死 亡率;同时，本发明饲料添加剂可调节产蛋鸡内分泌与营养代谢，增加鸡蛋中免疫球蛋白水 平，显著改善鸡蛋的品质。
【具体实施方式】：
[0029]为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，下面结合【具体实施方式】对 本发明作进一步的详细描述，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于下述实施 例。以下实施例中的原料均为市售产品。
[0030] 实施例1:
[0031] 1.合成从).1多肽
[0032]按照NO. 1多肽的氨基酸序列，交由上海荣熙生物工程有限公司合成NO. 1多肽，需 脱盐处理和纯化，要求纯度达到95%以上。NO. 1多肽的氨基酸序列如下：
[0033] SEQ ID N0.1:LRPDPKRTIQKKSE，包含 14个氨基酸残基；
[0034] 2.益生菌粉的制备
[0035]以质量百分含量计，将90%的活性双歧杆菌干粉与10%的培养基混合，形成双歧 杆菌菌粉。其中培养基配方（干固体物料以1 〇〇wt %计）：蛋白胨13.74 %，酵母浸出粉 10.9%，牛肉膏7.0%，西红柿汁25.6%，乳糖1.5%，葡萄糖22.7%，无水乙酸钠8.9%，七水 合硫酸镁1.2 %，一水合硫酸锰0.26 %，柠檬酸氢二铵2.5 %，磷酸二氢钾2.5%，吐温2.5 %， L-半胱氨酸盐酸盐0.7%，培养基配方总质量百分含量为100%。
[0036]以质量百分含量计，将20 %枯草芽孢杆菌干粉与80 %培养基混合，形成枯草芽孢 杆菌菌粉。其中培养基配方(干固体物料）：葡萄糖64.4 %、蛋白胨15.4 %、酵母膏9.2 %、磷 酸二氢钾6.4%和碳酸钙4.6%，培养基配方总质量百分含量为100%。
[0037]以质量百分含量计，将30 %的地衣芽孢杆菌干粉与70 %培养基混合，形成地衣芽 孢杆菌菌粉。其中培养基配方(干固体物料）：红糖0.7 %、米糠42 %、麸皮57.3 %，培养基配 方总质量百分含量为100%。
[0038]进一步地，将上述3种菌的菌粉进行充分混合，形成益生菌组分，以质量百分含量 计，其混合比例为:30 %双歧杆菌菌粉、30 %枯草芽孢杆菌菌粉和40 %地衣芽孢杆菌菌粉。 [0039] 3.蛋鸡饲料添加剂的制备
[0040]按照质量百分比，将多肽0.4%、海藻糖28%、重组肠毒素 B亚单位0.2%、甘油6%、 奶粉34%、麦芽干粉6%和25.4%的益生菌组分，进行混合，即为蛋鸡饲料的添加剂。饲料添 加剂，可在4°C的干燥环境中储存2年时间。
[0041]将蛋鸡饲料添加剂按照0.3%质量百分比与市售蛋鸡全价饲料进行混合，然后直 接饲喂产蛋鸡即可。
[0042] 实施例2:
[0043] 1.合成N0.2多肽
[0044]按照N0.2多肽的氨基酸序列，交由上海荣熙生物工程有限公司合成N0.2多肽，需 脱盐处理和纯化，要求纯度达到95%以上。N0.2多肽的氨基酸序列如下：
[0045] SEQ ID N0.2:SEQ ID N0.2:GAYSNQSIKASIG，包含 13个氨基酸残基；
[0046] 2.益生菌粉的制备
[0047]以质量百分含量计，将90%的活性双歧杆菌干粉与10%的培养基进行混合，形成 双歧杆菌菌粉。其中培养基配方以总质量百分含量为100 %计（干固体物料）：蛋白胨 13.74%，酵母浸出粉10.9%，牛肉膏7.0%，西红柿汁25.6%，乳糖1.5%，葡萄糖22.7%，无 水乙酸钠8.9%，七水合硫酸镁1.2%，一水合硫酸锰0.26%，柠檬酸氢二铵2.5%，磷酸二氢 钾2.5 %，吐温2.5 %，L-半胱氨酸盐酸盐0.7 %。
[0048]以质量百分含量计，将20%的枯草芽孢杆菌干粉与80%的培养基进行混合，形成 枯草芽孢杆菌菌粉。其中培养基配方以总质量百分含量为100%计(干固体物料）：葡萄糖 64.4%、蛋白胨15.4%、酵母膏9.2%、磷酸二氢钾6.4%和碳酸钙4.6%。
[0049]以质量百分含量计，将30%的地衣芽孢杆菌干粉与70%的培养基进行混合，形成 地衣芽孢杆菌菌粉。其中培养基配方以总质量百分含量为100%计（干固体物料）：红糖 0.7%、米糠 42%、麸皮 57.3%。
[0050]进一步地，将上述3种菌的菌粉按比例进行充分混合，形成益生菌组分，其质量比 为:20 %双歧杆菌菌粉、30 %枯草芽孢杆菌菌粉和50 %地衣芽孢杆菌菌粉。
[0051 ] 3.蛋鸡饲料添加剂的制备
[0052]按照质量百分比，将多肽0.4%、海藻糖28%、重组肠毒素 B亚单位0.2%、甘油6%、 奶粉34%、麦芽干粉6%和25.4%的益生菌组分，进行混合，即为蛋鸡饲料的添加剂。饲料添 加剂，可在4°C的干燥环境中储存2年时间。
[0053]将蛋鸡饲料添加剂按照0.3%的质量百分比与蛋鸡全价饲料进行混合，然后直接 饲喂产蛋鸡即可。
[0054] 实施例3:
[0055] 1.合成N0.3多肽
[0056]按照N0.3多肽的氨基酸序列，交由上海荣熙生物工程有限公司合成N0.3多肽，需 脱盐处理和纯化，要求纯度达到95%以上。N0.3多肽的氨基酸序列如下：
[0057] SEQ ID N0.3:APVSNGGTKTET，包含 12个氨基酸残基；
[0058] 2.益生菌粉的制备
[0059]以质量百分含量计，将90%的活性双歧杆菌干粉与10%的培养基进行混合，形成 双歧杆菌菌粉。其中培养基配方以总质量百分含量为100%计（干固体物料）：蛋白胨 13.74%，酵母浸出粉10.9%，牛肉膏7.0%，西红柿汁25.6%，乳糖1.5%，葡萄糖22.7%，无 水乙酸钠8.9%，七水合硫酸镁1.2%，一水合硫酸锰0.26%，柠檬酸氢二铵2.5%，磷酸二氢 钾2.5 %，吐温2.5 %，L-半胱氨酸盐酸盐0.7 %。
[0060] 以质量百分含量计，将20%的枯草芽孢杆菌干粉与80%的培养基进行混合，形成 枯草芽孢杆菌菌粉。其中培养基配方以总质量百分含量为100%计(干固体物料）：葡萄糖 64.4%、蛋白胨15.4%、酵母膏9.2%、磷酸二氢钾6.4%和碳酸钙4.6%。
[0061] 以质量百分含量计，将30%的地衣芽孢杆菌干粉与70%的培养基进行混合，形成 地衣芽孢杆菌菌粉。其中培养基配方以总质量百分含量为100%计（干固体物料）：红糖 0.7%、米糠 42%、麸皮 57.3%。
[0062] 进一步地，将上述3种菌的菌粉按比例进行充分混合，形成益生菌组分，其质量比 为:20 %双歧杆菌菌粉、30 %枯草芽孢杆菌菌粉和50 %地衣芽孢杆菌菌粉。
[0063] 3.蛋鸡饲料添加剂的制备
[0064]按照质量百分比，将多肽0.4%、海藻糖28%、重组肠毒素 B亚单位0.2%、甘油6%、 奶粉34%、麦芽干粉6%和25.4%的益生菌组分，进行混合，即为蛋鸡饲料的添加剂。饲料添 加剂，可在4°C的干燥环境中储存2年时间。
[0065]将蛋鸡饲料添加剂按照0.4%质量百分比与蛋鸡全价饲料进行混合，然后直接饲 喂产蛋鸡即可。
[0066] 实施例4:
[0067] 1.合成多肽
[0068] 分别按照3种多肽的氨基酸序列，交由上海荣熙生物工程有限公司合成多肽，需脱 盐处理和纯化，要求纯度达到95%以上。N0.3多肽的氨基酸序列如下：
[0069] SEQ ID N0.1:LRPDPKRTIQKKSE，包含 14个氨基酸残基；
[0070] SEQ ID N0.2:GAYSNQSIKASIG，包含 13个氨基酸残基；
[0071] SEQ ID N0.3:APVSNGGTKTET，包含 12个氨基酸残基；
[0072] 最后，将3种多肽按照质量比1:1:1比例混合，形成多肽组合粉。
[0073] 2.益生菌粉的制备
[0074]以质量百分含量计，将90%的活性双歧杆菌干粉与10%的培养基进行混合，形成 双歧杆菌菌粉。其中培养基配方以总质量百分含量为100 %计（干固体物料）：蛋白胨 13.74%，酵母浸出粉10.9%，牛肉膏7.0%，西红柿汁25.6%，乳糖1.5%，葡萄糖22.7%，无 水乙酸钠8.9%，七水合硫酸镁1.2%，一水合硫酸锰0.26%，柠檬酸氢二铵2.5%，磷酸二氢 钾2.5 %，吐温2.5 %，L-半胱氨酸盐酸盐0.7 %。
[0075]以质量百分含量计，将20%的枯草芽孢杆菌干粉与80%的培养基进行混合，形成 枯草芽孢杆菌菌粉。其中培养基配方以总质量百分含量为100%计(干固体物料）：葡萄糖 64.4%、蛋白胨15.4%、酵母膏9.2%、磷酸二氢钾6.4%和碳酸钙4.6%。
[0076]以质量百分含量计，将30%的地衣芽孢杆菌干粉与70%的培养基进行混合，形成 地衣芽孢杆菌菌粉。其中培养基配方以总质量百分含量为100%计（干固体物料）：红糖 0.7%、米糠 42%、麸皮 57.3%
[0077]进一步地，将上述3种菌的菌粉按比例进行充分混合，形成益生菌组分，其质量比 为:20 %双歧杆菌菌粉、30 %枯草芽孢杆菌菌粉和50 %地衣芽孢杆菌菌粉。
[0078] 3.蛋鸡饲料添加剂的制备
[0079]按照质量百分比，将多肽0.4%、海藻糖28%、重组肠毒素 B亚单位0.2%、甘油6%、 奶粉34%、麦芽干粉6%和25.4%的益生菌组分，进行混合，即为蛋鸡饲料的添加剂。饲料添 加剂，可在4°C的干燥环境中储存2年时间。
[0080] 实验例子
[0081] 1、动物试验设计
[0082] 试验选择30周龄海兰灰蛋鸡600只，随机分为6个试验组，每组100只，分别为A、B、 C、D、E、F组，实验观察共100天。试验鸡均在同一鸡舍饲养，免疫和饲养管理按鸡场常规方式 进行。日喂2次，料足，自由饮水，纵向风扇通风，每天光照16小时，照度每立方米3~4瓦。每 天刮粪1次。
[0083] 2、试验饲料
[0084] 将上述实施案例1-4的蛋鸡饲料添加剂按照0.5%质量百分比与蛋鸡全价饲料(市 售蛋鸡基础饲料)进行混合，然后直接饲喂产蛋鸡即可。具体分组如下：
[0085] A组:常规蛋鸡全价饲料，用于褐壳蛋鸡的常规基础饲料。
[0086] B组:蛋鸡全价饲料+0.5 %不含多肽的蛋鸡饲料添加剂。
[0087] C组:蛋鸡全价饲料+0.5%的实施例1所述的蛋鸡饲料添加剂。
[0088] D组:蛋鸡全价饲料+0.5%的实施例2所述的蛋鸡饲料添加剂。
[0089] E组:蛋鸡全价饲料+0.5%的实施例3所述的蛋鸡饲料添加剂。
[0090] F组:蛋鸡全价饲料+0.5%的实施例4所述的蛋鸡饲料添加剂。
[0091] 3、指标测定
[0092] 记录产蛋鸡拉稀状况、鸡蛋外观、产蛋数、产蛋率、饲料消耗和破损、软蛋数等。具 体试验结果见下表1:
[0093] 表1蛋鸡饲料添加剂对褐壳蛋鸡生长及产蛋性能的影响
[0094]
[0095] 备注:蛋鸡肠道腹泻率，是指在观察期间蛋鸡肠道出现功能紊乱，表现出腹泻或拉 稀及粪便为糖鸡屎状。
【主权项】
1. 一种蛋鸡饲料添加剂，其特征在于包括以下百分含量的物料:活性多肽Ο . 1-0.8%、海 藻糖10-28%、重组无活性肠毒素 B亚单位0.2-1.2%、甘油5-10%、奶粉14-34%、麦芽干粉2-6%、 15-28%益生菌粉，总质量百分含量为100%。2. 根据权利要求1所述的一种蛋鸡饲料添加剂，其特征在于:所述的活性多肽为3种多 肽中的任意一种或三种多肽的混合，三种多肽混合以质量比为1:1:1，氨基酸序列组成如 下： N0.1，LRPDPKRTIQKKSE; N0.2，GAYSNQSIKASIG; N0.3，LGFFGKGNSSNE〇3. 根据权利要求1所述的一种蛋鸡饲料添加剂，其特征在于所述益生菌的组分及质量 百分数为：10-30%双歧杆菌粉、30-50%枯草芽孢杆菌粉和40-60%地衣芽孢杆菌粉，总质量百 分含量为100%。4. 根据权利要求3所述的一种蛋鸡饲料添加剂，其特征在于：以质量百分含量计，所述 双歧杆菌粉中含90-95%的活性双歧杆菌，余量为其相关培养基。5. 根据权利要求3所述的一种蛋鸡饲料添加剂，其特征在于：以质量百分含量计，所述 枯草芽孢杆菌中含12-20%的枯草芽孢杆菌活菌，余量为其相关培养基。6. 根据权利要求3所述的一种蛋鸡饲料添加剂，其特征在于：以质量百分含量计，所述 地衣芽孢杆菌粉中含30%的地衣芽孢杆菌活菌，余量为其相关培养基。
【文档编号】A23K50/75GK106036185SQ201610608568
【公开日】2016年10月26日
【申请日】2016年7月28日
【发明人】李昕阳, 张智
【申请人】四川昕泰科技有限公司