本发明涉及制备烟用提取物的技术领域，具体地指一种烟用晚香玉花提取物的制备方法。
背景技术：
在烟草制品中，为了保证吸烟安全，常常通过降低烟气中的焦油和烟碱含量，同时添加烟用香原料来保证烟草制品的香气和吸味。传统的烟用添加香料方法，即以天然提取物单体和合成单体混合调配，这种方法存在香气单调，不丰满，与烟草搭配不协调，改善卷烟评吸品质不明显等缺点。
晚香玉花(polianthestuberosa)又名夜来香、月下香，石蒜科晚香玉属植物，分布于墨西哥、南美等地区。晚香玉花中含有α-松油醇、邻氨基苯甲酸苯甲酯、异丁香酚甲醚、金合欢醇、苯甲酸苄酯等香气物质，这些香气物质具有特殊的花香香韵，而花类的芳香物质大多以糖苷键合态形式存在，难以释放出来。传统的回流提取法效率较低，受热易破坏花类芳香物质的有效成分，且溶剂消耗量较大，操作繁琐。目前通过传统香料制备方法不能生产出所需要的烟用晚香玉花提取物。而且，以晚玉香花为原料生产特色烟用香料的方法未见报道。
β-葡萄糖苷酶(β-d-glucosidase)，又称β-d-葡萄糖苷葡萄糖水解酶，别名龙胆二糖酶、纤维二糖酶(cellobias)和苦杏仁苷酶。它属于纤维素酶类，是纤维素分解酶系中的重要组成成分，能够水解糖苷类，同时释放出β-d-葡萄糖和香气成分。
固定化酶(immobilizedenzyme)是20世纪60年代发展起来的一种新技术，是用物理或化学方法处理水溶性的酶使之变成不溶于水或固定于固相载体的但仍具有酶活性的酶衍生物。与游离酶相比，固定化酶可以较长时间内反复分批反应和装柱连续反应，从而提高了酶的使用效率，增加产物的收率，降低了成本；在反应完成后固定化酶极易与产物分开，简化提纯工艺，提高了产物的质量。因此，广泛应用于污水治理、医药工程、化工合成等领域，但在烟用晚香玉花提取物制备中却未见报道。
技术实现要素：
本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种烟用晚香玉花提取物的制备方法。该方法制备的烟用晚香玉花提取物具有清新的晚香玉花香气，并带有宜人的花香香韵。
一种烟用晚香玉花提取物的制备方法，包括如下步骤：
(1)取干晚香玉花，加入其5～8倍重量的水，微波提取1～2次，每次1～2h，将提取液静置冷却后过滤，收集滤液得到晚香玉花提取液；
(2)将0.1～0.3g固体β-葡萄糖苷酶溶于1ml柠檬酸缓冲液(0.1mol/l，ph4.5)中，加入15～20ml质量浓度为2％的海藻酸钠溶液，搅拌均匀，再加入20～30ml质量浓度为2％的氯化钙溶液，4℃包埋1～3h后，用缓冲溶液洗涤，得固定化β-葡萄糖苷酶，其承载量为10～20u/g；
(3)取固定化β-葡萄糖苷酶处理晚香玉花提取液，固定化β-葡萄糖苷酶固体用量15g/l～35g/l，酶处理的ph值5～8，酶处理温度35℃～40℃，酶处理时间2h～4h，处理完成后在1℃～5℃沉降处理24h～48h；
(4)将酶处理后的提取液过滤，得澄清的晚香玉花提取液，将过滤后的晚香玉花提取液减压浓缩，浓缩至相对密度为1.30～1.35，收集浓缩液得到烟用晚香玉花提取物a；
(5)取步骤(4)的晚香玉提取物a，加入丙二醇，在压力6～20pa，进料温度为60℃～75℃，进料速度为5～30ml/min，刮板转速为60～130rpm的条件下进行分子蒸馏，取轻组分为晚香玉花提取物；其中丙二醇的加入量占分子蒸馏物总质量的百分比为10％～30％。
进一步的，所述步骤(1)中微波提取的微波功率为500～900w，温度为55～70℃。
进一步的，所述步骤(4)中酶处理后的提取液过滤时，用滤纸过滤去大颗粒的杂质，得澄清的晚香玉花提取液。
进一步的，所述步骤(4)减压浓缩时，浓缩温度为50～65℃，浓缩压力为0.01～0.1个大气压。
本发明的有益效果：
(1)本发明采用微波提取法与酶解法相结合的方法对晚香玉花进行提取，大大增加晚香玉花中的芳香物质的提取得率，得到香气更丰富、品质更好的特色烟用香原料。
(2)本发明制备的烟用晚香玉花提取物具有清新的晚香玉花香气，并带有宜人的花香香韵，将晚香玉花提取物添加到卷烟中，具有丰富烟香、增加甜香香韵的作用。
(3)本发明改善了晚香玉花提取物的品质，实现了晚香玉花提取物在卷烟中的应用，且该方法操作简单、提取时间短、生产成本低。
利用固定化β-葡萄糖苷酶处理晚香玉提取物，释放晚香玉提取物中α-松油醇、邻氨基苯甲酸苯甲酯、异丁香酚甲醚、金合欢醇、苯甲酸苄酯等芳香物质，制备特色的烟用晚香玉提取物，该方法工艺简单，成本低，提取得率高，香料品质好。与游离β-葡萄糖苷酶处理晚香玉提取物相比，固定化处理后，不需要通过膜分离去除游离酶，简化了生产工艺，便于工业化生产转化；晚香玉提取物中主要香气物质α-松油醇、邻氨基苯甲酸苯甲酯、异丁香酚甲醚、金合欢醇、苯甲酸苄酯总的相对含量提高了30％～60％，添加到卷烟中，卷烟香气更加丰富，甜香韵更加明显。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的有关技术问题作进一步详细的描述。实施例1
(1)取干晚香玉花，加入其6倍重量的水，微波提取2次，每次1.5h，微波功率为600w，温度为60℃，将提取液静置冷却后过滤，收集滤液得到晚香玉花提取液；
(2)将0.15g固体β-葡萄糖苷酶溶于1ml柠檬酸缓冲液(0.1mol/l，ph4.5)中，加入16ml质量浓度为2％的海藻酸钠溶液，搅拌均匀，再加入22ml质量浓度为2％的氯化钙溶液，4℃包埋2h后，用缓冲溶液洗涤，得固定化β-葡萄糖苷酶，其承载量为15u/g；
(3)取固定化β-葡萄糖苷酶处理晚香玉花提取液，固定化β-葡萄糖苷酶固体用量15g/l，酶处理的ph值5，酶处理温度37℃，酶处理时间2.5h，处理完成后在2℃沉降处理27h；
(4)将酶处理后的提取液用滤纸过滤去大颗粒的杂质，得澄清的晚香玉花提取液，将过滤后的晚香玉花提取液减压浓缩，浓缩温度为50℃，浓缩压力为0.03个大气压，浓缩至相对密度为1.33，收集浓缩液得到烟用晚香玉花提取物a；
(5)取步骤(4)的晚香玉提取物a，加入丙二醇，在压力8pa，进料温度为63℃，进料速度为8ml/min，刮板转速为75rpm的条件下进行分子蒸馏，取轻组分为晚香玉花提取物；其中丙二醇的加入量占分子蒸馏物总质量的百分比为12％。
实施例2
(1)取干晚香玉花，加入其5倍重量的水，微波提取1次，每次2h，微波功率为900w，温度为65℃，将提取液静置冷却后过滤，收集滤液得到晚香玉花提取液；
(2)将0.27g固体β-葡萄糖苷酶溶于1ml柠檬酸缓冲液(0.1mol/l，ph4.5)中，加入18ml质量浓度为2％的海藻酸钠溶液，搅拌均匀，再加入26ml质量浓度为2％的氯化钙溶液，4℃包埋2.7h后，用缓冲溶液洗涤，得固定化β-葡萄糖苷酶，其承载量为18u/g；
(3)取固定化β-葡萄糖苷酶处理晚香玉花提取液，固定化β-葡萄糖苷酶固体用量32g/l，酶处理的ph值7，酶处理温度35℃，酶处理时间3.5h，处理完成后在1℃沉降处理36h；
(4)将酶处理后的提取液用滤纸过滤去大颗粒的杂质，得澄清的晚香玉花提取液，将过滤后的晚香玉花提取液减压浓缩，浓缩温度为60℃，浓缩压力为0.06个大气压，浓缩至相对密度为1.30，收集浓缩液得到烟用晚香玉花提取物a；
(5)取步骤(4)的晚香玉提取物a，加入丙二醇，在压力12pa，进料温度为67℃，进料速度为16ml/min，刮板转速为90rpm的条件下进行分子蒸馏，取轻组分为晚香玉花提取物；其中丙二醇的加入量占分子蒸馏物总质量的百分比为18％。
实施例3
(1)取干晚香玉花，加入其7倍重量的水，微波提取2次，每次1.2h，微波功率为800w，温度为70℃，将提取液静置冷却后过滤，收集滤液得到晚香玉花提取液；
(2)将0.2g固体β-葡萄糖苷酶溶于1ml柠檬酸缓冲液(0.1mol/l，ph4.5)中，加入15ml质量浓度为2％的海藻酸钠溶液，搅拌均匀，再加入25ml质量浓度为2％的氯化钙溶液，4℃包埋3h后，用缓冲溶液洗涤，得固定化β-葡萄糖苷酶，其承载量为20u/g；
(3)取固定化β-葡萄糖苷酶处理晚香玉花提取液，固定化β-葡萄糖苷酶固体用量20g/l，酶处理的ph值8，酶处理温度40℃，酶处理时间3h，处理完成后在5℃沉降处理40h；
(4)将酶处理后的提取液用滤纸过滤去大颗粒的杂质，得澄清的晚香玉花提取液，将过滤后的晚香玉花提取液减压浓缩，浓缩温度为54℃，浓缩压力为0.08个大气压，浓缩至相对密度为1.35，收集浓缩液得到烟用晚香玉花提取物a；
(5)取步骤(4)的晚香玉提取物a，加入丙二醇，在压力18pa，进料温度为72℃，进料速度为28ml/min，刮板转速为126rpm的条件下进行分子蒸馏，取轻组分为晚香玉花提取物；其中丙二醇的加入量占分子蒸馏物总质量的百分比为28％。
本发明采用固定化β-葡萄糖苷酶处理晚香玉花提取液，将其与其他步骤与本发明相同，而采用游离β-葡萄糖苷酶处理晚香玉花提取液的处理方式比较，如表1所示，为不同处理方式晚香玉花提取物中香气物质相对含量比较，如表2所示，将不同处理方式下的晚香玉花提取物，添加到卷烟中的卷烟评吸结果。
表1香气物质相对含量比较
表2不同处理方式的晚香玉花提取在卷烟中的感官评价效果
本发明的制备方法使晚香玉花提取物中主要香气物质α-松油醇、邻氨基苯甲酸苯甲酯、异丁香酚甲醚、金合欢醇、苯甲酸苄酯总的相对含量提高了30％～60％，将其添加到卷烟中，卷烟香气更加丰富，甜香韵更加明显。充分说明了采用本发明的提取方法制备出了产量更高、品质更好的晚香玉花提取物。
以上所述仅为本发明的具体实施方案的详细描述，并不以此限制本发明，凡在本发明的设计思路上所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。