专利名称：一种粉剂止血药物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种药物及其制备方法，特别是涉及一种粉剂止血药物及其制备方法。
胶原是动物体内含量最丰富的蛋白质，是细胞外基质的主要成分。胶原具有抗原性低、与细胞亲合力大、与血小板产生血凝作用等特点，在医药领域应用广泛。目前已经发现20种遗传基因不同的胶原类型，其最大特征是三条胶原螺旋的结构。以存在量最多的I型胶原为例，胶原分子约95％为三条螺旋链领域，剩余的约5％为非胶原性的终端肽链结构领域。胶原的抗原性低，主要是由于胶原三条螺旋链领域缺乏酪氨酸残基，目前市场上胶原产品的抗原性，除杂质外主要来自胶原N和C终端的肽链。
以胶原为基础的医用产品的研究与开发，已经获得了很多成果，如将胶原做成溶液、凝胶、粉末、海绵、纤维、薄膜等不同剂型，或进行各种各样的改性，使其具有不同的医用或医疗功能。
一种粉剂止血药，它是用包括以下步骤的方法生产的1)将胶原纤维原料，置于气体发生器中，40～50℃下用醛类物质交联剂固定20～100分钟，其中，醛类物质优选甲醛、甲基乙二醛或戊二醛；2)用甘油水溶液清洗，甘油水溶液的配比为甘油∶水＝0.1～10∶90～99.9；3)将上述清洗过的胶原纤维置于密闭容器中，30～35℃下搅拌24～72小时，密闭容器中加有过量的干燥剂、醇和盐酸溶液；干燥剂优选Na2SO4或CaCl2；醇优选甲醇、乙醇或异丙醇；盐酸溶液的优选浓度为0.1～10％。
4)将经过上述处理的胶原纤维，用甘油水溶液清洗，甘油水溶液的配比为甘油∶水＝0.1～10∶90～99.9，真空干燥；5)用粉碎机研磨至粉剂即得粉剂止血药。
为了使生产出的粉剂止血药效果更好，所述胶原纤维原料是用以下方法获得的1)将富含胶原蛋白的动物组织机械去除表皮层、肌肉和脂肪等杂质，粉碎后清洗干净；2)用pH8.5～10.5的稀碱溶液和醇类物质水溶液洗涤脱脂，其中稀碱溶液优选氢氧化钠∶碳酸氢钠∶水＝0.1～1∶5～10∶89～94.9，醇类物质水溶液优选乙醇∶异丙醇∶水＝5～10∶2～5∶85～93；3)溶解在pH5.5～6.5的稀酸溶液中，其中优选甲酸、乙酸、丙酸或盐酸；4)向上述溶液中加入由胃酶、胰酶和木瓜酶三种蛋白酶组成的复合蛋白酶，复合蛋白酶的活性比为胃酶∶胰酶∶木瓜酶＝1∶1∶0.5，胶原蛋白与复合蛋白酶的重量比为100～1000∶1，30～35℃下搅拌培养10～15小时；5)在离心收集的上清中加入NaCl，使浓度达到2mol/L，0～10℃下搅拌10～20小时，收集得到的沉淀物；6)将沉淀物溶于0.1～0.5％乙酸溶液中，离心收集上清；7)上清中再加入NaCl，使浓度达到1mol/L，搅拌得到沉淀物；重复操作3～4次，得到目的产物。
本发明的另一个目的是提供一种生产能迅速有效地止血、换药简单的粉剂止血药物的方法。
为实现上述目的，本发明采用以下技术方案。
一种粉剂止血药的制备方法，包括以下步骤1)将胶原纤维原料，置于气体发生器中，40～50℃下用醛类物质交联剂固定20～100分钟；2)用甘油水溶液清洗；3)将上述清洗过的胶原纤维置于密闭容器中，30～35℃下搅拌24～72小时，密闭容器中加有过量的干燥剂、醇和盐酸溶液；4)将经过上述处理的胶原纤维，用甘油水溶液清洗，真空干燥；5)用粉碎机研磨至粉剂即得粉剂止血药。
在上述方法中，所述的胶原纤维原料可以为市售胶原初级产品，也可以是用以下方法获得的1)将富含胶原蛋白的动物组织机械去除表皮层、肌肉和脂肪等杂质，粉碎后清洗干净；2)用pH8.5～10.5的稀碱溶液和醇类物质水溶液洗涤脱脂，其中稀碱溶液优选氢氧化钠∶碳酸氢钠∶水＝0.1～1∶5～10∶89～94.9，醇类物质水溶液优选乙醇∶异丙醇∶水＝5～10∶2～5∶85～93；3)溶解在pH5.5～6.5的稀酸溶液中，其中优选甲酸、乙酸、丙酸或盐酸；4)向上述溶液中加入复合蛋白酶，胶原蛋白与复合蛋白酶的重量比为100～1000∶1，30～35℃下搅拌培养10～15小时；5)在离心收集的上清中加入NaCl，使浓度达到2mol/L，0～10℃下搅拌10～20小时，收集得到的沉淀物；6)将沉淀物溶于0.1～0.5％乙酸溶液中，离心收集上清；7)上清中再加入NaCl，使浓度达到1mol/L，搅拌得到沉淀物；重复操作3～4次，得到目的产物。
在该过程中，所述复合蛋白酶由活性比为胃酶∶胰酶∶木瓜酶＝1∶1∶0.5的三种蛋白酶组成。
所述醛类物质交联剂为甲醛、甲基乙二醛或戊二醛。
所述清洗用的甘油水溶液的配比均为甘油∶水＝0.1～10∶90-99.9。
所述密闭容器中加入的过量的干燥剂为Na2SO4或CaCl2；醇是甲醇、乙醇或异丙醇；盐酸溶液的浓度为0.1～10％。
得到的粉剂止血药经包装、60Co照射灭菌后为成品。
本发明的粉剂止血药，能迅速有效地止血，换药方法简单，无副作用，并可促进创面愈合和修复，还能被机体组织吸收。止血时间短，可使出血量减少，减轻病人的痛苦和损失。需要换药时，不必清除创面上原有的药物，直接在创面上第二次覆加药物即可。胶原基粉剂止血药由改性后的胶原组成，具有促进成纤维细胞活性和各种生长因子活性的特点，而且微观上的纤维结构，可作为细胞和组织生长的支架(scaffolds)，使止血后的创面良好地修复。
在气体发生器中对材料进行交联固定，可以避免交联剂溶液中的有害杂质(如戊二醛溶液中的环半化合物)进入材料中，使本发明粉剂止血药的生物学性能非常优异。通过胶原纤维的交联，使胶原聚集体变得化学稳定。
醇类物质的处理，提高止血药的等电点。通常认为，细胞的表面膜带有负电荷(如血小板)，根据异性相吸原理，高等电点的本发明产品具有很强的吸附血小板的能力，从而加快止血速率。
盐酸的化学改性，有利于提高止血药物与创面组织的粘附力。甘油的处理，提高了材料的柔软度，降低对创面的硬度刺激，以减少病人痛苦。下面结合具体实施例对本发明做进一步说明。
实施例2用市售胶原纤维生产本发明的止血药物，具体步骤如下1、将市售胶原纤维原料，置于气体发生器中，45℃下用戊二醛固定90分钟；2、用甘油∶水＝1∶99的甘油水溶液清洗；3、将上述清洗过的胶原纤维置于密闭容器中，34℃下搅拌30小时，密闭容器中加有过量的干燥剂CaCl2、异丙醇和3％的盐酸溶液；4、将经过上述处理的胶原纤维，用甘油∶水＝3∶97的甘油水溶液清洗，真空干燥；5、用粉碎机研磨至粉剂即得本发明的粉剂止血药；
6、得到的粉剂止血药经包装、60Co照射灭菌后为成品。
实施例3、本发明止血药的疗效实验将本发明止血药用于兔耳部及内脏止血和治疗效果观察。耳部出血创面尺寸为2×1cm，肝(脾)脏上切除1×1cm组织，实验组用本发明止血药，对照组所用止血药主要成分为明胶，止血时间为算术均值，止血效果如表1所示。体内脏器创面止血后，缝合腹腔，定期处死动物，进行体内吸收和组织切片观察。结果显示本发明止血药60天左右被机体完全吸收，创面局部组织无异常现象。尤其是耳部创面止血后，不仅创面愈合快，而且愈合后创面局部平整，与周围组织无显著颜色差异。
表1 兔耳静脉、肝脏、脾脏的止血效果组n 止血时间(s) 止血率别 耳部 肝脏 脾脏 ％实验组2020 3040 100对照组2060 6570 100
权利要求
1.一种粉剂止血药，它是用包括以下步骤的方法生产的1)将胶原纤维原料，置于气体发生器中，40～50℃下用醛类物质交联剂固定20-100分钟，其中，醛类物质优选甲醛、甲基乙二醛或戊二醛；2)用甘油水溶液清洗，甘油水溶液的配比为甘油∶水＝0.1～10∶90～99.9；3)将上述清洗过的胶原纤维置于密闭容器中，30～35℃下搅拌24～72小时，密闭容器中加有过量的干燥剂、醇和盐酸溶液；干燥剂优选Na2SO4或CaCl2；醇优选甲醇、乙醇或异丙醇；盐酸溶液的优选浓度为0.1～10％。4)将经过上述处理的胶原纤维，用甘油水溶液清洗，甘油水溶液的配比为甘油∶水＝0.1～10∶90～99.9，真空干燥；5)用粉碎机研磨至粉剂即得粉剂止血药。
2.根据权利要求1所述的一种粉剂止血药，其特征在于所述胶原纤维原料是用以下方法获得的1)将富含胶原蛋白的动物组织机械去除表皮层、肌肉和脂肪等杂质，粉碎后清洗干净；2)用pH8.5～10.5的稀碱溶液和醇类物质水溶液洗涤脱脂，其中稀碱溶液优选氢氧化钠∶碳酸氢钠∶水＝0.1～1∶5～10∶89～94.9，醇类物质水溶液优选乙醇∶异丙醇∶水＝5～10∶2～5∶85～93；3)溶解在pH5.5～6.5的稀酸溶液中，其中优选甲酸、乙酸、丙酸或盐酸；4)向上述溶液中加入由胃酶、胰酶和木瓜酶三种蛋白酶组成的复合蛋白酶，复合蛋白酶的活性比为胃酶∶胰酶∶木瓜酶＝1∶1∶0.5，胶原蛋白与复合蛋白酶的重量比为100～1000∶1，30～35℃下搅拌培养10～15小时；5)在离心收集的上清中加入NaCl，使浓度达到2mol/L，0～10℃下搅拌10～20小时，收集得到的沉淀物；6)将沉淀物溶于0.1～0.5％乙酸溶液中，离心收集上清；7)上清中再加入NaCl，使浓度达到1mol/L，搅拌得到沉淀物；重复操作3～4次，得到目的产物。
3.一种粉剂止血药的制备方法，包括以下步骤1)将胶原纤维原料，置于气体发生器中，40～50℃下用醛类物质交联剂固定20～100分钟；2)用甘油水溶液清洗；3)将上述清洗过的胶原纤维置于密闭容器中，30～35℃下搅拌24～72小时，密闭容器中加有过量的干燥剂、醇和盐酸溶液；4)将经过上述处理的胶原纤维，用甘油水溶液清洗，真空干燥；5)用粉碎机研磨至粉剂即得粉剂止血药。
4.根据权利要求3所述的一种粉剂止血药的制备方法，其特征在于所述胶原纤维原料为市售胶原初级产品。
5.根据权利要求3所述的一种粉剂止血药的制备方法，其特征在于所述胶原纤维原料用以下方法获得1)将富含胶原蛋白的动物组织机械去除表皮层、肌肉和脂肪等杂质，粉碎后清洗干净；2)用pH8.5～10.5的稀碱溶液和醇类物质水溶液洗涤脱脂，其中稀碱溶液优选氢氧化钠∶碳酸氢钠∶水＝0.1～1∶5～10∶89-94.9，醇类物质水溶液优选乙醇∶异丙醇∶水＝5～10∶2～5∶85～93；3)溶解在pH5.5～6.5的稀酸溶液中，其中优选甲酸、乙酸、丙酸或盐酸；4)向上述溶液中加入复合蛋白酶，胶原蛋白与复合蛋白酶的重量比为100～1000∶1，30～35℃下搅拌培养10～15小时；5)在离心收集的上清中加入NaCl，使浓度达到2mol/L，0～10℃下搅拌10～20小时，收集得到的沉淀物；6)将沉淀物溶于0.1～0.5％乙酸溶液中，离心收集上清；7)上清中再加入NaCl，使浓度达到1mol/L，搅拌得到沉淀物；重复操作3～4次，得到目的产物。
6.根据权利要求5所述的一种粉剂止血药的制备方法，其特征在于所述复合蛋白酶由活性比为胃酶∶胰酶∶木瓜酶＝1∶1∶0.5的三种蛋白酶组成。
7.根据权利要求3～6中任何一项所述的一种粉剂止血药的制备方法，其特征在于所述醛类物质交联剂为甲醛、甲基乙二醛或戊二醛。
8.根据权利要求3～6中任何一项所述的一种粉剂止血药的制备方法，其特征在于所述清洗用的甘油水溶液的配比均为甘油∶水＝0.1～10∶90～99.9。
9.根据权利要求3～6中任何一项所述的一种粉剂止血药的制备方法，其特征在于所述密闭容器中加入的过量的干燥剂为Na2SO4或CaCl2；醇是甲醇、乙醇或异丙醇；盐酸溶液的浓度为0.1～10％。
10.根据权利要求3～6中任何一项所述的一种粉剂止血药的制备方法，其特征在于得到的粉剂止血药经包装、60Co照射灭菌后为成品。
全文摘要
一种粉剂止血药物及其制备方法，涉及药物及其制备方法。本发明的目的是提供一种能迅速有效地止血、换药简单的粉剂止血药物及其制备方法。本发明一种粉剂止血药的制备方法，包括以下步骤1)将胶原纤维原料，置于气体发生器中，40～50℃下用醛类物质交联剂固定20～100分钟；2)用甘油水溶液清洗；3)将上述清洗过的胶原纤维置于密闭容器中，30～35℃下搅拌24～72小时，密闭容器中加有过量的干燥剂、醇和盐酸溶液；4)将经过上述处理的胶原纤维，用甘油水溶液清洗，真空干燥；5)用粉碎机研磨至粉剂即得粉剂止血药。本发明的粉剂止血药，能迅速有效地止血，换药方法简单，无副作用，并可促进创面愈合和修复，还能被机体组织吸收。
文档编号A61K38/39GK1406628SQ0114207
公开日2003年4月2日 申请日期2001年9月10日 优先权日2001年9月10日
发明者武继民 申请人:武继民