专利名称：一种消炎止血的妇科药物及其应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗妇科病的药物。具体地说是涉及对“宫血宁胶囊”的改进，以及改进后的宫血宁胶囊在制药领域中的用途。
本发明还提供了所述药物的新用途，即在制药中的新应用。
技术方案本发明提供的消炎止血的妇科药物，可由下述方法制备获得该方法包括(1)将重楼药材粉碎成黄豆粒大小的粗粉；(2)加温水浸泡，放弃水液，滤干；(3)用乙醇热回流提取，合并提取液，滤过；(4)滤液减压回收乙醇、脱脂，其特征在于滤液经回收乙醇脱脂后，再选择下述两种方法之一，进行制备A.进一步减压回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.12～1.16，浓缩液喷雾干燥，过80目筛，得干浸膏粉，加辅料适量，混匀，制得胶囊1000粒，即得成品；B.采用大孔吸附树脂吸附，再分别用水、30％乙醇、乙醇洗脱，收集乙醇洗脱部分，回收乙醇，浓缩、干燥、粉碎、分装，即为成品。
所述的温水浸泡的温度为60℃以下；所述的用乙醇热回流提取的乙醇的重量百分浓度为90％，有益效果本发明由于滤液经减压回收乙醇后，进一步减压回收、浓缩、喷雾干燥，或者是进一步采用大孔吸附树脂吸附等措施，它保留了宫血宁胶囊中的有效成分，除去了大量无效成分，每粒胶囊的体积由原来的280毫克缩小为80毫克，含量仍相当于生药2克，质量高，疗效好，胶囊体积小服用也方便。特别是能有效消除部分患者原来服用后引起的肠胃不适，扩大适用范围。
通过对本发明药物系统深入的研究，所述的药物除了已知的止血作用外，本发明还进一步提供了该药物的新用途，即在制药中的新应用。
实际上本发明提供了所述药物作为制备治疗或预防由金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、大肠杆菌引起的炎症药中的应用。
提供了所述药物作为制备治疗或预防慢性盆腔炎的药中的应用。
下面将通过实施例1～4对本发明作详细具体的说明，但本发明的内容并不局限于此。
实施例1取重楼2000克，粉碎成粗粉，加入四倍量55℃的温水浸泡三次，每次4小时。弃去水液；浸泡后的重楼粗粉滤干，加入四倍量90％乙醇回流提取三次，每次3小时。合并提取液，滤过，在55℃下，滤液减压回收乙醇至含醇量为25％，相对密度为1.05，冷却静置12小时，除去浓缩液上层脂状物，进一步减压回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.15，浓缩液喷雾干燥，过80目筛，得干浸膏粉，加辅料适量，混匀，制成胶囊1000粒，即得成品。成品为胶囊剂，内容物为浅黄棕色至灰棕色粉末，味苦。
〖检查〗产品应符合胶囊剂项下有关的各项规定(中国药典2000版附录IL)。
〖含量测定〗照高效液相色谱法测定。(中国药典2000版附录VID)测定。
色谱条件与系统适用性试验用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈—水(45∶55)为流动相，检测波长为203nm。理论塔板数按重楼皂甙VI峰计算，应不低于5000。对照溶液的制备精密称取重楼皂甙VI对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，作为对照品溶液。供试品溶液的制备取本品装量差异项下内容物1克，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理{功率250W，频率25KHz}40rain，放冷，称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀。滤过，弃去初滤液，取续滤液作为供试品溶液。
实施例2除了滤液经回收乙醇脱脂后，采用大孔吸附树脂吸附，再分别用水、30％乙醇、乙醇洗脱，收集乙醇洗脱部分，回收乙醇，浓缩、干燥、粉碎、分装，即为成品外，其余过程与实施例1相同。
实施例3
由于原料重楼的主要成份为皂甙，多糖，粘液质，其中皂甙又分为薯芋皂甙和偏诺皂甙。药理实验证明，宫血宁的有效成份为偏诺皂甙，该种皂甙在水中溶出极微，薯芋皂甙部份可溶出，多糖，粘液质易溶于水，根据其性质，采用水除去部份水溶性物质后，以乙醇提取的制备方法。取重楼粗粉1200g，均分4份，每份300g，取其三份，分别用30℃、60℃、90℃热水浸泡，各浸泡三次，每次3小时，水浸液弃去，滤干。连同未用水浸泡的一份，各份再分别用90℃乙醇热回流3次，每次3小时，所得醇液合并，回收乙醇，浓缩呈稠膏，80℃真空干燥12小时，称重，计算收得率。取各份水浸液及醇提液，浓缩至1/10量，硅胶G板点样，氯仿∶甲醇∶水(8∶2∶0.1)展开，10％硫酸乙醇溶液显色，热风吹至斑点清晰，检查偏诺皂甙，以重楼皂甙VI、VII对照，见
图1.图2，试验结果见表1.
表1.水浸泡醇提试验结果
试验结果表明，重楼用温水浸洗除去部分水溶性杂质，当水温超过60℃时，通过薄层层析检查，即可检出有效成分偏诺皂甙VI、VII。因此，温水浸洗温度控制在60℃以下为佳。
实施例4采用正交试验法优选重楼乙醇提取工艺条件1.表头设计试验以大鼠子宫收缩试验，结合浸膏得率作为考察指标，选择了提取过程中的提取次数、提取时间、乙醇浓度、每次乙醇用量四个因素，每个因素设三个水平进行正交试验，试验选用L9(34)正交表。因素水平表设计如表2。
表2.正交试验因素水平表因素A B C D水平提取次数提取时间醇用量醇浓度1 3 1.5 6 70°2 2 2 5 80°3 2 3 4 90°2.大鼠子宫收缩试验供试品溶液的配制，取试验所得干燥浸膏0,6g，取24ml蒸馏水分次加入并研磨10分钟后，放置24小时备用。
标准品溶液的配制，同缩宫素(催产素)生物检定法(中国药典77年版二部附录)项下，临用时用生理盐水稀释成，1ml含0,01个单位。
子宫营养液的配制同缩宫素(催产素)生物检定法(中国药典二部附录)项下，必要时增加0.5-1倍氯化钙(无水)量。
供试用动物同缩宫素(催产素)生物检定法(中国药典二部附录)项下。
试验法实验条件同缩宫素(催产素)生物检定法(中国药典二部附录)项下。实验时将子宫肌置于盛有25ml蓄养液的子宫肌槽内，静置约15分钟，取标准品稀释液0.3ml加入溶槽内，启动记录仪同时记时，待子宫肌收缩至最高点并开始松驰时(如收缩缓慢或不收缩，只观察3分钟)，关上记录仪，将蓄养液放去，用新蓄养液洗涤三次，放去。再加25ml蓄养液，休息5-10分钟，再进行第二次药液加注。每次子宫肌休息时间应固定。调节标准品稀释液的给药量，使所致反应为最大收缩的一半左右且较稳定，即以此剂量为ds，供试品给药量dT同标准品，按ds、dT、dT、ds或dT、ds、ds、dT的顺序注入一组4个剂量，然后以第一与第三，第二与第四剂量所致反应，分别比较，若dT所致反应均大于ds所致反应，即认为供试品大鼠子宫收缩作用符合规定，如dT所致反应均小于ds所致反应，即认为供试品大鼠子宫收缩作用不符合规定，如dT所致反应并不是均大于ds所致反应，应另取子宫复试，复试时按上述次序用2组8个剂量按同法比较；如dT所致反应均大于ds所致反应，亦认为供试品的大鼠子宫收缩作用符合规定，否则为不符合规定。
3、试验方法及结果取重楼粗粉1800g，45±5℃温水浸洗3次，每次3小时，滤干水份，均分9份，每份200g，按L9(34)表进行提取试验，所得提取液经浓缩、干燥至恒重计算浸膏得率，并进行大鼠子宫收缩试验，结果见表3。
表3.正交试验表L9(34)
4、试验结论从试验结果可看出，影响大鼠子宫收缩试验和浸膏收率的因素依次为RD＞RB＞RA＞RC，醇浓度最为关键，醇提时间次之。既能满足大鼠子宫试验规定，浸膏收率又较高的提取条件为选择90％L醇提取，提取时间每次3小时，共3次，每次加醇为原料粗粉的4倍量，即A1B3C3D3。经按该工艺条件生产，结果所得浸膏均满足要求。
为了更好地理解本发明的实质，下面将通过应用实施例1～7所进行的药理试验及结果来说明其在制药领域中的新用途。
受试药物宫血宁胶囊[II]，由云南白药集团股份有限公司提供；溶剂为1％羧甲基纤维素钠溶液；配制方法称取宫血宁用上述溶剂配至所需浓度。
实验动物大鼠，SD种，由云南白药集团股份有限公司研究所动物室提供，普通级，合格证号滇实动证第9717号。小鼠ICR种，提供单位同上，普通级，合格证号滇实动证第9716号。
剂量设置受试药宫血宁设两个剂量组，高剂量组0.64g/kS(给药量/体重，以下同)，低剂量组0.32g/kg。阳性对照药均设一个剂量妇炎净3g/kg，云南白药2.5g/Kg。
给药方法所有试验小鼠按0.8mh/20g，大鼠按1ml/100g，体积灌胃给药。
试验对照空白对照，给同受试药等体积的含1％CMC-Na的蒸馏水。阳性对照，妇炎净胶囊，广西梧州中药厂生产，妇炎净为1988卫生部批准的三类新药。
应用实施例1——本发明的药物对二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀的影响实验方法取ICR小鼠40只，雄性，体重25-28g，随机分为空白对照组，试药高、低剂量组、阳性对照组每天给药一次，共3天，于末次给药1小时后，在每鼠右耳涂50μl二甲苯致炎，左耳作对照，30min后拉颈椎处死，剪下两耳，用同一打孔器打下圆耳片，分析天平稳重，以(右耳重—左耳重)/左耳重作为肿胀率。比较各给药组与空白对照组肿胀率的差异，试验结果见表4。实验结果本发明的药物高低剂量均能明显对抗二甲苯所致小鼠耳廓肿胀，有较强的抗炎作用。
表4.小鼠耳廓肿胀率(X±SD)
*与空白组比较P＜0.05，**与空白组比较P＜0.01。
应用实施2——本发明的药物对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀影响实验方法选用健康大鼠48只，体重150-190g，随机分为四组，空白对照组，宫血宁高、低剂量组，阳性对照组，致炎前灌胃给药，每天一次，连续三天，于末次给药30min后，在大鼠足跖部皮下注射1％角叉菜胶0.1ml致炎，用毛细管法测量，致炎前后大鼠足跖关节以下的体积变化，并比较致炎后1、2、3、6小时各组的平均肿胀率(致炎后体积—致炎前体积)/致炎前体积，结果见表5。
表5.大鼠足跖肿胀率经时变化 (X+SD)
*与空白组比较P＜0.05，**与空白组比较P＜0.01。
实验结果本发明的药物大小剂量在致炎后1、2小时有显著抑制大鼠足跖肿胀的作用。
应用实施例3——本发明的药物对大鼠棉球肉芽肿增生的影响实验方法取140-170g雄性大鼠经乙醚浅麻醉于无菌条件下作腹部切口，将2个20mg的灭菌棉球植入两侧，腹股沟皮下，术后随机分为4组，分别给予宫血宁高低剂量、妇炎净、蒸馏水，手术当天给药，一天一次，连续7天。第八天先称体重，将大鼠断头处死，剥离脂肪分出棉球肉芽肿组织，于烘箱内60℃干燥12小时称重，减去原棉球重，即为肉芽肿净重。同时取出大鼠的胸腺、脾脏称重，比较各组肉芽肿指数及脏器指数(肉芽肿重或脏器重mg/大鼠体重g)，试验结果见表6。
表5.大鼠肉芽肿指数 (X+SD)
*与空白组比较P＜0.05，**与空白组比较P＜0.01。
试验结果表明，本发明的药物高剂量能明显抑制慢性肉芽肿的增生。
应用实施例4——本发明的药物对大鼠子宫炎症的影响实验方法实验选用200-250g·雌性健康大鼠，无菌条件，在乙醚麻醉下，减去下腹部毛，碘酒及75％酒精消毒，于下腹正中切口2cm，暴露子宫，沿左侧子宫角上1cm处作一横切口，将一塑料管(管径2mm，长5mm，重2mg，酒精消毒)放置于子宫内，与子宫切口缝合固定，以防脱落。伤口滴入含2万μ的青霉素以防感染。术后随机分组。2小时开始给药，每天一次，连续7天，第8天处死动物，取出两侧子宫，分析天平称重，以(左侧子宫重—右侧子宫重)/右侧子宫重，为炎症肿胀率，比较各组肿胀率之间的差异，并进行统计，结果见表7。
表7.大鼠子宫肿胀率(X+SD)
*与空白组比较P＜0.05，**与空白组比较P＜0.01试验结果表明，对照组大鼠左侧放置塑料管子宫明显红肿，子宫壁厚度增加，较对侧子宫明显变粗，两侧子宫差异较大；给药组与之相比均有不同程度的减轻，经统计与对照组比较有显著性差异，表明宫血宁胶囊对动物子宫内放置塑料管所致炎症有明显的抑制作用。
应用实施例5——本发明药物的镇痛作用实验方法取ICR小鼠40只，雌雄各半，体重18～22g，随机分为空白对照组，阳性药组，试药高；低剂量。每天灌胃给药一次，连续3天，于末次药30min后，每鼠按腹腔注射0.6％冰醋酸0.1ml/log，记录注射致痛剂后20min内各鼠的扭体次数。比较各组间差异，并进行统计。结果见表8。
试验结果表明，试药高低剂量均能明显减少小鼠注射致痛剂后产生的扭体次数，有一定的镇痛作用。
表8.小鼠扭体次数 (X+SD)
*与空白组比较P＜0.05。
应用实施例6——本发明药物具有的抑菌作用实验方法将本发明的药物用培养基稀释为所需浓度梯度，分别置于试管中(1ml/管)，每管加入0.1ml稀释10-3倍的新鲜菌液，于37℃培养箱培养18h后，观察有无细菌生长，确定细菌不生长的最低抑菌浓度，结果见9。
表9.宫血宁最低抑菌浓度(液体试管法)
实验结果表明，宫血宁对金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、大肠杆菌均有一定的抑制作用，其最低抑菌浓度分别为0.0625g/ml，0.125g/ml、0.125g/ml。
应用实施例7——临床疗效观察试验用药用法用量试验组宫血宁胶囊，本发明的药物；每次2粒，每日3次；疗程28天。服药后第14天、28天复查。
对照组妇炎净胶囊，批号990204(广西梧州制药股份有限公司生产)至次2粒，每天3次；疗程28天。服药后第14天、28天复查。
疗效观察通过对患者治疗前诊查及治疗后2周、4周进行复诊和妇科检查，观察治疗后患者症状、体征的改善情况，发现宫血宁胶囊对于慢性盆腔炎治疗后2周症状和体征即有所改善，在治疗4周后改善尤为明显。经统学检验，治疗总有效率无明显性差异(P＞0.05 Ridit-检验)，但在显效及痊愈率方面与对照组比较有显著性差异(P＜0.05 Ridit-检验)，见表10。
表10.宫血宁对慢性盆腔炎的疗效
表10表明，本发明的药物治疗四周后与对照组相比，在显愈率方面与对照组比较有显著性差异P＜0.05Ridit—检验。
对白带常规的治疗结果见表11。
表11.两组白带常规化验指标治疗后分布表白带常规 治疗组 对照组I°18 12II° 83 38III° 00合计 101 50与治疗前比较，均有显著性差异P＜0.05(Ridit—检验)，与同期对照组比较P＞0.05(Ridit—检验)。说明本发明的药物对白带常规的改善有显著作用。
以上试验结果清楚地显示，采用改进工艺制备的本发明的药物，除去了无效成分，有效成分高度富集，服用量虽小，但却具有十分有效的缩宫作用是妇科止血的良药。以0.32、0.64g/kg不同剂量的本发明的药物灌胃大鼠，能显著研制角叉莱胶所致足跖肿胀，慢性棉球肉芽肿形成及塑料环引起的子宫炎症。以0.32、0.64g/kg、灌胃小鼠对二甲苯诱发的小鼠耳廓肿胀有明显抑制作用；对由注射醋酸引起的小鼠扭体次数有明显的减少作用。体外抑菌试验表明，本发明的药物在0.0625-0.125g/ml浓度下能抑制金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和大肠杆菌的生长。表明本发明的药物有明显的抗炎、镇痛、抑菌作用，为临床治疗提供了切实的药效学基础，提示了新的开发应用前景，本发明的药物可作为制备治疗或预防由金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、大肠杆菌引起的炎症药中的应用，临床资料表明本发明的药物可应用于制备治疗或预防慢性盆腔炎的有效药物。
权利要求
1.一种消炎止血的妇科药物，该药物由下述方法制备获得该方法包括(1)将重楼药材粉碎成黄豆粒大小的粗粉；(2)加温水浸泡，放弃水液，滤干；(3)用乙醇热回流提取，合并提取液，滤过；(4)滤液减压回收乙醇、脱脂，其特征在于滤液经回收乙醇脱脂后，再选择下述两种方法之一，进行制备A.进一步减压回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.12～1.16，浓缩液喷雾干燥，过80目筛，得干浸膏粉，加辅料适量，混匀，制得胶囊1000粒，即得成品；B.采用大孔吸附树脂吸附，再分别用水、30％乙醇、乙醇洗脱，收集乙醇洗脱部分，回收乙醇，浓缩、干燥、粉碎、分装，即为成品。
2.根据权利要求1所述的消炎止血的妇科药物，其中所述的温水浸泡的温度为60℃以下。
3.根据权利要求1所述的消炎止血的妇科药物，其中所述的用乙醇热回流提取，乙醇的重量百分浓度为90％。
4.权利要求1所述的药物作为制备妇科止血药物的应用。
5.权利要求1所述的药物作为制备治疗或预防由金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、大肠杆菌引起的炎症药中的应用。
6.权利要求1所述的药物作为制备镇痛药物中的应用。
7.权利要求1所述的药物作为制备治疗或预防慢性盆腔炎的药中的应用。
全文摘要
本发明提供了一种消炎止血的妇科药物及其应用。该药物由下述方法制备获得该方法包括(1)将重楼药材粉碎；(2)加温水浸泡，放弃水液，滤干；(3)用乙醇热回流提取，合并提取液，滤过；(4)滤液减压回收乙醇、脱脂，其特征在于滤液经回收乙醇脱脂后，再选择下述两种方法之一，进行制备A.进一步减压回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.12～1.16，浓缩液喷雾干燥，过80目筛，得干浸膏粉，加辅料适量，混匀，制得胶囊1000粒，即得成品；B.采用大孔吸附树脂吸附，再分别用水、30％乙醇、乙醇洗脱，收集乙醇洗脱部分，回收乙醇，浓缩、干燥、粉碎、分装，即为成品。所述的药物可用于制备妇科止血、消炎和镇痛的药物，尤其是用于制备治疗或预防慢性盆腔炎的药物。
文档编号A61P7/00GK1401372SQ0213338
公开日2003年3月12日 申请日期2002年6月26日 优先权日2002年6月26日
发明者高崇昆, 赵晓顶, 张志伟, 倪凤仪, 崔占和 申请人:云南白药集团天然药物研究院