专利名称：治疗乙肝的阿德福韦酯组方药物的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域中治疗乙肝的阿德福韦酯组方药物，具体是由阿德福韦酯1份，大黄素、氧化苦参碱、黄芪提取物、叶下珠提取物、三七提取物、水飞蓟素及水飞蓟宾衍生物、川芎嗪及其衍生物和阿魏酸及其衍生物中的任意一种0.1-200份，配伍组方的药物。
背景技术：
乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(HBV)引起的一种严重危害人类健康的疾病。世界上大约有3.5亿慢性HBV携带者，每年大约有100万人死于乙肝病毒引起的疾病，在我国约有1.2亿人是乙肝病毒携带者，现患乙肝2800万，现患率为2770/10万，且三分之一的人会演变成慢性肝炎、肝硬化或肝癌。已确认的6种肝炎病毒中，乙型和丙型肝炎危害性最大，易转化为慢性肝炎，也是肝硬化和原发性肝癌的直接诱因。1998年全世界有200万人死于这两种肝炎病毒引起的肝癌，中国也有30万人死亡，世界卫生组织已把乙肝列为世界第九死因。一旦感染上肝炎，就必须长期不间断服药，我国每年对症治疗各种病毒性肝炎所需医疗费用约300～500亿元人民币。
目前乙型肝炎的治疗，主要采用抗病毒、免疫调节、改善肝功能和抗肝纤维化等综合治疗措施。
抗病毒治疗来清除HBV是根本的治疗措施。临床观察发现，乙型肝炎病人如仅有肝功能如ALT的好转或恢复正常，而HBV并未消除，此类病人极易复发，且不能阻止肝脏病变的发展。抗HBV药物有干扰素、核苷类似物和免疫调节剂，核苷类药物是近年来抗HBV药物研究的热点，进展很快，阿德福韦酯(adefovir dipivoxil)是FDA批准用于治疗乙肝的抗病毒核苷类似物药物。研究资料表明，阿德福韦酯抗病毒有效率同拉米夫定接近，可用于对拉米夫定耐药的病人，长期用药后(目前已用药两年以上)未发现任何与药物有关的病毒变异现象。但是目前阿德福韦酯仍然存在疗效不够满意，单一的抗病毒作用机理，复发率高和在停药后有25％的慢乙肝病人ALT升高超过正常上限值的10倍以上，潜在的耐药性，对肾脏有潜在的毒性和药价昂贵等问题。
大多数慢性肝病都伴有不同程度的肝纤维化的发生，肝纤维化机制十分复杂，抗肝纤维化治疗包括针对病因治疗和针对抗肝纤维化本身的治疗。自Rogking提出肝纤维化是一种可逆性病变以来，由于西医药抗肝纤维化疗效的局限，在肝病治疗中，抗肝纤维化的中药和天然药物应用受到广泛重视。
实验和临床研究证明，清热利湿，凉血解毒，活血化淤的中药可阻抑肝纤维化发展，甚至使已形成的肝硬化逆转，并且对HBsAg具有较强的抑制作用；甘寒药物配以酸味药物，既可以清除湿热病毒，抑制病毒复制，又可以改善肝功能和微循环，恢复肝细胞正常代谢；
近年研究显示，苦参、叶下珠等多种中药成份具有不同于核苷类似物的抗乙肝病毒的作用机理；研究表明，大黄素，黄芪提取物，三七提取物，水飞蓟素及水飞蓟宾衍生物，川芎嗪及其衍生物和阿魏酸及其衍生物具有保护肝脏肾脏，缓解药物如核苷类似物对肾脏损害的功能；阿德福韦酯结合中药有效成份的组方药物具有多途径、多层次、多靶点的综合药理学作用，达到协同提高药效的作用，并可降低阿德福韦酯对肾脏的潜在毒副作用，在肝脏疾病治疗中具有显著优势和应用前景。因此，利用核苷类似物阿德福韦酯的抗乙肝病毒作用，结合中药有效成份，开发具有抗病毒、免疫调节、保肝及提高肝功能和抗肝纤维化的中西医结合复方制剂具有积极意义。
阿德福韦(adefovir)属开环腺嘌呤磷酸核苷，化学结构为6-氨基嘌呤-9-己氧基甲基磷酸。由于阿德福韦口服后肠道通透性差，生物利用度很低，故将阿德福韦制成亲脂性口服前体药物阿德福韦酯(adefovir dipivoxil)，即阿德福韦的二特戊酰氧亚甲基酯，化学名9-[2-[双(特戊酰氧基甲氧基)磷酰甲氧基]乙基]腺嘌呤，分子式C20H32N5O8P，分子量501.48。该药由美国Gilead Sciences公司开发，于2002年9月20日被FDA批准用于治疗成人慢性乙肝，商品名为Hepsera。
1、抗病毒作用机制阿德福韦酯经细胞内激酶磷酸化形成有活性的二磷酸盐。该活性代谢产物可竞争抑制HBV DNA多聚酶，整合阿德福韦进入病毒DNA链，链合成随之终止，从而抑制病毒复制。其所需要的药物浓度仅为0.1mM，远低于抑制人类DNA多聚酶a(1.18mM)、g(0.97mM)的浓度。核苷类似物如拉米夫定或泛昔洛韦，在转化成有活性形式的三磷酸盐之前，需依赖于细胞型或细胞特异的核酸激酶，在细胞内先转化成单磷酸盐的形式。而阿德福韦酯本身含有单磷酸盐基团，较之更易转化，所以与其它核苷类似物比较，阿德福韦对更多的细胞种类有抗病毒的活性。
2、药理和毒理口服阿德福韦后，首要的毒性靶器官依次为肾、胃肠道、肝脏和淋巴增生组织(包括骨髓)。大鼠和猴服用阿德福韦酯后，肾毒性是主要的剂量限制相关毒性。剂量10mg/kg，在小鼠中没有发现与阿德福韦相关致癌性，阿德福韦在遗传毒性方面与其他核苷类似物相似。
3、动物药代动力学在动物模型中，阿德福韦可分布于大部分组织，其中肠、肝、肾浓度最高，在排除前，阿德福韦不会被代谢。阿德福韦通过肾小球滤过和肾小管分泌相结合的形式由肾脏以原形排泄。
4、临床试验目前已在全球进行的阿德福韦酯(10mg/天)治疗慢性HBV感染的III期临床试验公布的阶段性研究结果表明，治疗组和对照组相比，在肝组织学改善、ALT复常、病毒水平下降及HBeAg血清转换等方面均有显著差异，由于阿德福韦对HBV野毒株和拉米夫定或泛昔洛韦耐药株都有很强的抗病毒活性，更重要的是至今在HBV感染者中尚未发现对阿德福韦的耐药变异株，因此阿德福韦有希望成为新的治疗慢性HBV感染的选择。
大黄素(Emodin)为蒽醌类，化学结构式1.3.8-三羟基-6-甲基蒽醌，分子式C15H10O5，分子量270.23，橙色针状结晶(乙醇或12mm下减压升化)，熔点256～257℃，几乎不溶于乙醇及碱溶液。主要存在于蓼科，豆科，鼠李科，百合科等植物中，在常用的如大黄、虎帐和何首乌等药材中都作为主要有效成份之一。
研究表明大黄素对肝脏的作用(1)大黄素对肝纤维化形成具有治疗作用降低肝纤维化大鼠的血清透明质酸和层粘连蛋白，减少肝组织羟脯氨酸含量，降低肝纤维化分级评分，大黄素通过抑制肝星状细胞增殖从而阻止肝纤维化的形成。(2)大黄素具有保肝作用大黄素可清除自由基，减轻脂质过氧化反应，维持肝细胞结构正常，防止肝细胞损伤导致肝纤维化形成。
研究表明大黄素对肾脏的作用(1)大黄素可抑制人肾成纤维细胞。(2)大黄素可应用于治疗糖尿病肾病及延缓慢性肾衰的药，给药剂量为100～200mg/日。能防治糖尿病大鼠肾脏的肥大，纠正其血流动力学异常；能够减轻糖尿病肾病大鼠肾脏的损伤，保护肾功能；能够纠正糖尿病时血脂代谢异常；能够减少糖尿病时肾脏组织中细胞外基质的生长，减缓肾小球的硬化。
口服大黄素在肠内易于吸收，2-3小时后血中即达到最高浓度，以后逐渐下降，尿及胆汁在服药后4-8小时即达到高峰，由尿排出可持续2天，在体内的分布以肝肾为最多。
氧化苦参碱(oxymatrine)，即苦参素，是苦参碱的N-氧化物，分子式为C15H24N2O2，分子量为264.4。氧化苦参碱是从苦豆子或豆科植物苦参的干燥根中分离出的有效单体，天然提出物中氧化苦参碱占98％以上。
氧化苦参碱具有抗乙肝病毒和抗纤维化的双重作用，在治疗慢性肝炎的同时具有抑制胶原活动过度和抗肝纤维化作用。
1、氧化苦参碱具有直接抗乙型肝炎病毒作用可增强白细胞吞噬能力，抑制乙肝病毒复制，对肝细胞本身无毒性低于模型组，且大剂量治疗组低于小剂量治疗组。
(1)氧化苦参碱可抑制HePG2-2.2.15细胞分泌HBsAg和HBeAg，降低2.2.15细胞浆核心颗粒HBV-DNA水平；显著降低DHBV感染鸭血清DHBV-DNA水平；(2)氧化苦参碱可抑制乙肝病毒转基因小鼠抗原的表达。
2、氧化苦参碱能抑制胶原活动过度和防治肝纤维化可通过抑制成纤维细胞和肝星状细胞增殖及I型胶原的合成、III型原胶原mRNA的表达而起到抗肝纤维化作用。
3、氧化苦参碱保肝作用氧化苦参碱可阻断肝细胞异常凋亡，对四氯化碳和D-半乳糖胺所致的中毒性肝损伤具有保护作用，对实验性小鼠肝衰竭具有保护作用；氧化苦参碱抗脂质过氧化的作用，减少肝组织丙二醛的形成，提高肝组织中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的含量。
4、氧化苦参碱的抗炎与免疫调节作用氧化苦参碱可抑制炎性因子IL-1、IL-6、TNF-α的释放，降低CCl4模型中大鼠血清TNF-α、ALT水平，减少肝组织中炎性组织的浸润；氧化苦参碱对免疫功能的影响主要是双向调节，并同剂量有关。
黄芪提取物是指来源于豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪干燥根的提取物，有效成份主要是黄酮、皂甙、多糖、氨基酸、微量元素等。
黄芪多糖从内蒙黄芪中分离4种多糖，两种葡萄糖，两种杂多糖。
黄芪皂甙多是四环三萜类皂甙或五环三萜类皂甙。
黄芪黄酮类主要是黄酮类、异黄酮类、二氢黄酮类。
1、黄芪提取物对免疫系统具有双向调节作用。
(1)对体液免疫的作用许多报道对黄芪能够促进正常机体的抗体生成功能提供了支持，可使免疫后早期的抗原结合细胞，包括抗体分泌细胞及B、T淋巴细胞和NK细胞数明显升高；(2)对单核巨噬细胞系统的作用明显提高了巨噬细胞的吞噬率；(3)对NK细胞活性也具有增强作用，同剂量有关；(4)黄芪高剂量对免疫有抑制作用。
2、黄芪提取物具有抗肝纤维化和保肝的作用(1)黄芪提取物黄芪总皂甙对体外激活肝星状细胞的增殖和产生胶原有明显抑制作用，该作用可能是抗肝纤维化的机制之一。
(2)黄芪提取物具有保肝的作用黄芪提取物具有清除自由基，抗氧化的作用；对细胞凋亡有明显的抑制作用，能防止肝糖元减少，防止肝脏受抗肿瘤药物和肝炎病毒的损害。
(3)黄芪对蛋白质及核酸代谢的调节作用黄芪提取物可保护肝脏粗面内质网，并使粗面内质网增加，细胞内rRNA和mRNA含量增加，促进蛋白质合成。
3、黄芪提取物对肾脏的保护作用增加肾血流量，保护修复肾小球基底膜，对肾炎、肾病、肾衰模型均有保护作用。
叶下珠(Phyllanth Usurinaria L.)是大戟科叶下珠属植物，全草入药，性微苦，有平肝清热、利水解毒之功效。提取物内含有木脂素，萜类，黄酮，糅质，生物碱等。
叶下珠具有较强的抗乙肝病毒作用，1982年印度学者首次报道叶下珠提物对于人血清中的乙肝病毒表面抗原(HBsAg)有强力灭活作用，从叶下珠分离出的新化合物去氢柯子酸甲酯和已短叶苏木酚酸甲酯已初步证实有明显的抗病毒和抗乙肝表面抗原活性；叶下珠有保肝降酶作用和预防原发性肝癌作用。
研究显示苦味叶下珠有较强的抗肝炎病毒、抗肝细胞损伤及预防肝癌的作用(1)抗乙肝病毒作用苦味叶下珠在体外具有灭活HBsAg的能力，体内有抗HBV作用，具有抑制HBV、WHV(土拨鼠肝炎病毒)及DHBV(鸭乙肝病毒)等嗜肝病毒DNA聚合酶活性的能力。
(2)对肝细胞损伤有保护作用叶下珠素和叶下珠次素对CCl4和氨基半乳糖诱发的肝细胞损伤有明显保护作用，叶下珠提取物中的鞣花酸也能有效地对抗肝细胞损伤，起到明显的保肝降酶作用；(3)对原发性肝癌有预防作用抑制肝癌细胞生长及克隆形成，对肝癌细胞有抑制和杀伤作用，可预防动物嗜肝病毒相关性肝癌。
临床研究证实叶下珠能促进HBsAg转阴，改善症状，恢复肝功能。叶下珠与干扰素比较，在血清HBsAg、HBeAg和HBV DNA转阴效果方面没有显著差异，叶下珠与干扰素联合用药比单用干扰素效果更好；在血清HBsAg、HBeAg、HBV DNA转阴以及转氨酶复常方面，叶下珠优于非特异性治疗或其他草药治疗。
苦味叶下珠对乙肝病毒标志物阳性者有效，疗效与苦味叶下珠的亚种、产地关系较大；就剂型而言，以全草粉末疗效最佳；给药途径，迄今为止患者均为口服，动物则以灌胃或注射，而腹腔注射优于皮下注射及静脉注；在一定范围内，剂量、疗程与疗效成正比；制成复方制剂或与其它中、西药联用，有可能减少复发机会及避免耐药性生成。
三七是经典的止血活血良药。近年临床应用显示，三七用于肝脏疾病治疗具有保肝和抗肝纤维化作用。三七的主要活性成份三七总皂甙是缺血再灌注损伤的有效保护药物，三七可显著降低血清ALT、球蛋白，升高白蛋白，减轻肝细胞脂肪变性及炎细胞浸润。
实验研究表明，对动物实验性急性肝损伤有明显的防治作用；三七总皂甙能对抗CCl4诱发大鼠急性肝损伤，使升高的谷丙转氨酶(SGPT)和谷草转氨酶(SGOT)降低，明显提高肝组织及血清超氧化物歧化酶(SOD)含量，减少肝糖原消耗，改善肝脏微循环，减少内质网等细胞器损伤，从而达到保肝作用。三七能抑制肝脏胶原纤维合成与沉积，促进胶原蛋白分解。三七总皂甙能抑制肝纤维化大鼠胶原及TGF-β1的合成表达，减轻肝纤维化程度。研究发现，三七对CCl4诱发的小鼠肝纤维化和肝损伤，具有明显减轻肝细胞坏死、促进修复再生及减轻肝纤维化作用。
三七总皂甙对肾损害的保护作用三七总皂甙对甘油所致兔急性肾功能衰竭(ARF)早期有明显的保护作用；三七促进人肾成纤维细胞凋亡，导致细胞数量减少；三七皂甙对庆大霉素所致肾损害有保护作用；三七对甘油所致的兔急性肾小管坏死(ATN)模型有明显保护作用，其机制可能与三七有改善微循环、血液流变学、抑制脂质过氧化反应、保护肾脏抗氧化酶和ATP酶活性及减轻肾组织钙超载有关。
水飞蓟素(Silymarin)是从菊科水飞蓟属植物水飞蓟(Silybum marianum L.Gaertn.)果实提取的一类黄酮类，由水飞蓟宾、异水飞蓟宾、水飞蓟宁和水飞蓟丁构成的同分异构体混合物(比例约为3∶1∶1∶1)，其中水飞蓟宾含量最多，活性最高，目前可以化学合成。
水飞蓟素被认为是一种经典的保肝因子，其机制涉及抗自由基作用，抗脂质过氧化作用，抗脂氧酶作用，抗谷胱甘肽排空作用。
研究表明，肝星状细胞是肝脏病理情况下细胞外基质沉积的主要细胞来源，应用抗氧化剂，减少氧化性刺激，抑制星形细胞活化，在抗纤维化中具有重要意义。水飞蓟素作为一种抗氧化剂，具有直接和间接的抗肝纤维化作用。
研究发现水飞蓟素还具有抗肿瘤作用，降血脂作用，免疫调节作用。水飞蓟在欧洲做为保肝药物已有一百多年的历史，目前水飞蓟黄酮类化合物水飞蓟素、水飞蓟宾等已广泛用于急性、慢性肝炎、酒精性及中毒性肝损伤、脂肪肝和早期肝硬化的治疗，临床应用显示该药疗效确切，毒性极低。
水飞蓟素水溶性差，需口服给药。水飞蓟宾的衍生物飞蓟宾二钠水溶性好，可以静脉给药；水飞蓟宾葡甲胺盐为水飞蓟宾与葡甲胺(1-甲胺基-1-去氧山梨醇)结合的水溶性衍生物，较水飞蓟素易溶于水，故吸收速度及疗效的发挥均水飞蓟素为优，长期使用安全性好。
水飞蓟素或水飞蓟宾具有明显的清除自由基和抗氧化作用，它可抑制环孢素所致的肾组织脂质过氧化及肾毒性的发生；对顺铂所致大鼠肾毒性有预防作用，可明显预防顺铂引起的肾皮质丙二醛(MDA)生成量增高以及线粒体谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性降低。
川芎嗪(ligustrazin)即2，3，5，6-四甲基吡嗪，来源于伞形科植物川芎(Ligusticumwallichii Franch.)根茎，现已经人工合成。川芎嗪的衍生物包括盐酸川芎嗪与磷酸川芎嗪。
川芎嗪对肝脏主要是抗肝纤维化和保肝的作用，川芎嗪具有保护肝细胞、有一定程度抗自由基、抗脂质过氧化及防止或延缓实验性肝纤维化作用，降低血清一氧化氮水平作用。肝功能等项指标均有不同程度的改善，对四氯化碳肝损伤有显著的保护作用。
实验研究表明，川芎嗪在延缓肾功能衰竭方面不失为价廉物美的新药，主要表现在改善循环，改善血液流变性，抗纤维化，抗氧化及拮抗钙离子等方面。临床研究表明，川芎嗪在对慢性肾功能不全患者、肾病综合征、治疗阿昔洛韦肾损害、糖尿病肾病、防止肾间质纤维化、急性肾缺血、庆大霉素肾毒性保护作用和环孢素A肾毒性都有明确的疗效。
阿魏酸钠，化学名称为3-甲氧基-4-羟基桂皮酸钠盐二水合物。目前阿魏酸主要有两方面的来源，一方面是从天然产物中分离，如从酸枣仁、川芎中分离，或从谷维素水解产物中分离；另一方面是以香草醛和丙二酸为原料来合成制备。
近年研究发现阿魏酸钠对肝脏疾病有效。动物实验显示阿魏酸钠可明显减轻四氯化碳引起的肝纤维化程度，不仅对贮脂细胞(HSC)具有直接的抑制作用，而且可通过干扰细胞之间的影响间接抑制HSC增殖和合成胶原。对CCl4和D-GalN造成的小鼠实验性肝损伤具有保护作用，能降低实验性肝损伤小鼠血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性，可能通过抗脂质过氧化而提高肝细胞膜系统的稳定性，减轻肝细胞变性和坏死。
许多临床研究表明，阿魏酸哌嗪、阿魏酸钠能减少蛋白尿，延缓肾功能减退，对肾脏具有保护作用。阿魏酸哌嗪能减轻阿霉素肾病大鼠的肾脏损害，对原发性肾病综合症、肾性血尿有明显的作用；阿魏酸钠对庆大霉素肾毒性的保护作用，儿童肾病综合征中的抗自由基作用和早期糖尿病肾病有明显的疗效。
发明内容
阿德福韦酯是2002年FDA通过的治疗乙肝的核苷类似物新药，作用机理主要是抗乙肝病毒。目前乙型肝炎的治疗，主要采用抗病毒、免疫调节、保肝及改善肝功能和抗肝纤维化等综合治疗。天然药物的有效成份(大黄素，氧化苦参碱，黄芪提取物，叶下珠提取物，三七提取物，水飞蓟素及水飞蓟宾衍生物，川芎嗪及其衍生物和阿魏酸及其衍生物)在免疫调节、保肝及改善肝功能和抗肝纤维化方面都有明确的作用机理和临床效果。阿德福韦酯同上述天然药物有效成份组方的药物，呈现相辅相依的协同作用并具有提高药效的特点。因此提供治疗乙肝的阿德福韦酯组方药物，能够发挥抗病毒、免疫调节、保肝及改善肝功能和抗肝纤维化协同作用的阿德福韦酯组方药物是十分必要的。
1、本发明的目的是提供用于治疗乙肝的阿德福韦酯组方药物，具体是主要有效成份由阿德福韦酯组成，另一种有效成份是大黄素，氧化苦参碱，黄芪提取物，叶下珠提取物，三七提取物，水飞蓟素及水飞蓟宾衍生物，川芎嗪及其衍生物和阿魏酸及其衍生物中的任意一种，其余为药用辅料；所述药物为口服制剂，包括胶囊、缓释胶囊、片剂和颗粒剂。
2、本发明的理论基础是建立在治疗乙肝机理的相关研究上，目前乙型肝炎的治疗，主要采用抗病毒、免疫调节、保肝及改善肝功能和抗肝纤维化等综合治疗。阿德福韦酯和大黄素，氧化苦参碱，黄芪提取物，叶下珠提取物，三七提取物，水飞蓟素及水飞蓟宾衍生物，川芎嗪及其衍生物和阿魏酸及其衍生物分别具有不同的作用靶点、途径和机理，在抗病毒、免疫调节、保肝及改善肝功能和抗肝纤维化方面有相辅相成的协同作用，并可降低阿德福韦酯对肾脏的潜在毒副作用。
(1)在治疗乙肝的抗乙肝病毒方面。
阿德福韦酯具有较好的抗病毒功能。临床试验结果显示HBeAg阳性患者口服阿德福韦酯10mg/天，治疗72周后，46％患者的HBV DNA水平低于检测范围，丙氨酸转氨酶(ALT)复常率为75％，HBeAg转阴率为44％，HBeAg血清转换率为23％。值得注意的是，有25％的慢乙肝病人在停药后ALT升高超过正常上限值的10倍以上，大多在停药后12周内出现，病人在治疗期间无HBeAg阴转；HBeAg转阴率和HBeAg血清转换率偏低，只有44％和23％。
●氧化苦参碱具有直接抗乙型肝炎病毒作用可增强白细胞吞噬能力，抑制乙肝病毒复制，氧化苦参碱可抑制HePG2-2.2.15细胞分泌HBsAg和HBeAg，降低2.2.15细胞浆核心颗粒HBV-DNA水平，显著降低DHBV感染鸭血清DHBV-DNA水平；抑制乙肝病毒转基因小鼠抗原的表达；●苦味叶下珠提取物具有直接抗乙型肝炎病毒作用在体外具有灭活HBsAg的能力，体内有抗HBV作用，具有抑制HBV、WHV(土拨鼠肝炎病毒)及DHBV(鸭乙肝病毒)等嗜肝病毒DNA聚合酶活性的能力。叶下珠与干扰素比较，在血清HBsAg、HBeAg和HBV DNA转阴效果方面没有显著差异。
氧化苦参碱和苦味叶下珠提取物具有不同于阿德福韦酯的DNA链终止剂的抗乙肝病毒作用机理，阿德福韦酯同氧化苦参碱或苦味叶下珠提取物的组方药物，在抗乙肝病毒方面，具有互补和协同提高的作用，表现在HBeAg转阴率和HBeAg血清转换率方面明显提高。
(2)在治疗乙肝的免疫调节、保肝及改善肝功能和抗肝纤维化功能上，阿德福韦酯作用机理是通过抗乙肝病毒从而间接达到局限性地改善肝功能和防止肝纤维化的效果。本发明的组方药物，通过天然药物组分的直接作用，弥补了单纯使用阿德福韦酯的不足，表现在肝功能和防止肝纤维化指标明显提高。
●大黄素对肝纤维化形成具有治疗作用降低肝纤维化大鼠的血清透明质酸和层粘连蛋白，减少肝组织羟脯氨酸含量，降低肝纤维化分级评分；大黄素通过抑制肝星状细胞增殖从而阻止肝纤维化的形成；大黄素具有保肝作用大黄素可清除自由基，减轻脂质过氧化反应，维持肝细胞结构正常，防止肝细胞损伤导致肝纤维化形成。
●氧化苦参碱通过抑制成纤维细胞和肝星状细胞增殖及I型胶原的合成、III型原胶原mRNA的表达而起到抗肝纤维化作用；氧化苦参碱保肝作用氧化苦参碱可阻断肝细胞异常凋亡，对四氯化碳和D-半乳糖胺所致的中毒性肝损伤具有保护作用，对实验性小鼠肝衰竭具有保护作用，抗脂质过氧化的作用，减少肝组织丙二醛的形成，提高肝组织中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的含量；氧化苦参碱抗炎与免疫调节作用氧化苦参碱可抑制炎性因子IL-1、IL-6、TNF-α的释放，降低CCl4模型中大鼠血清TNF-a、ALT水平，减少肝组织中炎性组织的浸润，对免疫功能的影响主要是双向调节，并同剂量有关。同阿德福韦酯组方，弥补了阿德福韦酯在抗肝纤维化作用、保肝、抗炎与免疫调节方面的不足。
●黄芪提取物对免疫系统具有双向调节作用黄芪能够促进正常机体的抗体生成功能提供了支持，可使免疫后早期的抗原结合细胞，包括抗体分泌细胞及B、T淋巴细胞和NK细胞数明显升高；明显提高了巨噬细胞的吞噬率；对NK细胞活性也具有增强作用，同剂量有关；黄芪高剂量对免疫有抑制作用。黄芪提取物具有抗肝纤维化和保肝的作用黄芪提取物黄芪总皂甙对体外激活肝星状细胞的增殖和产生胶原有明显抑制作用；黄芪提取物具有清除自由基，抗氧化的作用；对细胞凋亡均有明显的抑制作用。能防止肝糖元减少，防止肝脏受抗肿瘤药物和肝炎病毒的损害。黄芪对蛋白质及核酸代谢的调节作用黄芪提取物可保护肝脏粗面内质网，并使粗面内质网增加，细胞内rRNA和mRNA含量增加，促进蛋白质合成。
●叶下珠对肝细胞损伤有保护作用叶下珠素和叶下珠次素对CCl4和氨基半乳糖诱发的肝细胞损伤有明显保护作用，叶下珠提取物中的鞣花酸也能有效地对抗肝细胞损伤，起到明显的保肝降酶作用；苦味叶下珠与阿德福韦酯联用制成复方制剂，有可能减少复发机会。
●三七总皂甙具有保肝和抗肝纤维化作用。三七总皂甙是缺血再灌注损伤的有效保护药物，对动物实验性急性肝损伤有明显的防治作用；三七总皂甙可显著降低血清ALT、球蛋白，升高白蛋白，减轻肝细胞脂肪变性及炎细胞浸润。实验研究表明，三七总皂甙能对抗CCl4诱发大鼠急性肝损伤，使升高的谷丙转氨酶(SGPT)和谷草转氨酶(SGOT)降低，明显提高肝组织及血清超氧化物歧化酶(SOD)含量，减少肝糖原消耗，改善肝脏微循环，减少内质网等细胞器损伤，从而达到保肝作用。三七总皂甙能抑制肝脏胶原纤维合成与沉积，促进胶原蛋白分解。三七总皂甙能抑制肝纤维化大鼠胶原及TGF-β1的合成表达，减轻肝纤维化程度。研究发现，三七总皂甙对CCl4诱发的小鼠肝纤维化和肝损伤，具有明显减轻肝细胞坏死、促进修复再生及减轻肝纤维化作用。
●水飞蓟素被认为是一种经典的保肝因子，其机制涉及抗自由基作用，抗脂质过氧化作用，抗脂氧酶作用，抗谷胱甘肽排空作用。水飞蓟素抑制星形细胞活化，在抗纤维化中具有重要意义。水飞蓟素作为一种抗氧化剂，具有直接和间接的抗肝纤维化作用。研究发现水飞蓟素还具免疫调节作用。目前水飞蓟黄酮类化合物水飞蓟素、水飞蓟宾等已广泛用于急性、慢性肝炎、酒精性及中毒性肝损伤、脂肪肝和早期肝硬化的治疗，临床应用显示该药疗效确切，毒性极低。
●川芎嗪对肝脏主要是抗肝纤维化和保肝的作用，川芎嗪具有保护肝细胞、有一定程度抗自由基、抗脂质过氧化及防止或延缓实验性肝纤维化作用，降低血清一氧化氮水平作用。肝功能等项指标均有不同程度的改善，对四氯化碳肝损伤有显著的保护作用。
阿德福韦酯对于肝功能不正常的患者，在完成了6到12个月的实验后，大部分都有了不同程度的改善，在6到9个月的疗程后，部分低蛋白患者的白蛋白水平都恢复了正常。这些临床研究表明阿德福韦酯通过抗乙肝病毒间接达到提高肝功能的治疗效果。值得注意的是，有25％的慢乙肝病人在阿德福韦酯停药后丙氨酸转氨酶(ALT)升高超过正常上限值的10倍以上，所以要求临床医师对停药后病人应密切观察，定期检测肝功能各项指标，及时发现异常，采取措施，缓解症状。
本发明的治疗乙肝的阿德福韦酯组方药物，弥补了阿德福韦酯在免疫调节、抗肝纤维化方面的不足，进一步提高保肝作用和肝功能指标，明显提高ALT下降幅度。
(3)阿德福韦酯(ADV)具有潜在的肾毒性口服阿德福韦后，首要的毒性靶器官依次为肾、胃肠道，肝脏和淋巴增生组织(包括骨髓)。大鼠和猴服用ADV后，肾毒性是主要的剂量限制相关毒性。在排除前，ADV不会被代谢。ADV通过肾小球滤过和肾小管分泌相结合的形式由肾脏以原形排泄。在阿德福韦酯60mg和120mg治疗HIV以及30mg治疗慢乙肝的临床研究中，发现对阿德福韦酯肾脏有潜在的毒性。阿德福韦酯10mg治疗慢乙肝也可能出现类似表现。主要是血清肌酐(Cr)升高，血磷(P)降低。用药期间应严密监测病人的肾功能指标，如Cr，尿素氮(BUN)，血磷及其它电介质等。但是阿德福韦10mg不会对那些经肝脏转化的药物以及在肾脏消除的药物不存在有临床意义的相互作用。对肾功能不全(肌酐清除率＜50ml/分)的病人需进行剂量调整，约有2％的病人因严重肾功能损害而停药。
●口服大黄素在肠内易于吸收，2-3小时后血中即达到最高浓度，以后漫漫下降，尿及胆汁在服药后4-8小时即达到高峰，由尿排出可持续2天，在体内的分布以肝肾为最多。
研究表明(1)大黄素可抑制人肾成纤维细胞。(2)大黄素可应用于治疗糖尿病肾病及延缓慢性肾衰的药，给药剂量为100～200mg/日。能防治糖尿病大鼠肾脏的肥大，纠正其血流动力学异常；能够减轻糖尿病肾病大鼠肾脏的损伤，保护肾功能；能够纠正糖尿病时血脂代谢异常；能够减少糖尿病时肾脏组织中细胞外基质的生长，减缓肾小球的硬化。
●黄芪提取物对肾脏的保护作用增加肾血流量，保护修复肾小球基底膜，对肾炎、肾病、肾衰模型均有保护作用。
●三七总皂甙对肾损害有保护作用三七总皂甙对甘油所致兔急性肾功能衰竭(ARF)早期有明显的保护作用；三七促进人肾成纤维细胞凋亡，导致细胞数量减少；三七皂甙对庆大霉素所致肾损害有保护作用；三七对甘油所致的兔急性肾小管坏死(ATN)模型有明显保护作用，其机制可能与三七有改善微循环、血液流变学、抑制脂质过氧化反应、保护肾脏抗氧化酶和ATP酶活性及减轻肾组织钙超载有关。
●水飞蓟素或水飞蓟宾具有明显的清除自由基和抗氧化作用，它可抑制环孢素所致的肾组织脂质过氧化及肾毒性的发生；对顺铂所致大鼠肾毒性有预防作用，可明显预防顺铂引起的肾皮质丙二醛(MDA)生成量增高以及线粒体谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性降低。
●川芎嗪有延缓肾功能衰竭作用，主要表现在改善循环，改善血液流变性，抗纤维化，抗氧化及拮抗钙离子等方面。临床研究表明，川芎嗪在对慢性肾功能不全患者、肾病综合征、治疗阿昔洛韦肾损害、糖尿病肾病、防止肾间质纤维化、急性肾缺血、庆大霉素肾毒性保护作用和环孢素A肾毒性都有明确的疗效。
●阿魏酸哌嗪、阿魏酸钠能减少蛋白尿，延缓肾功能减退，对肾脏具有保护作用。阿魏酸哌嗪能减轻阿霉素肾病大鼠的肾脏损害，对原发性肾病综合症、肾性血尿有明显的作用；阿魏酸钠对庆大霉素肾毒性的保护作用，儿童肾病综合征中的抗自由基作用和早期糖尿病肾病有明显的疗效。
在本发明的阿德福韦酯组方药物，根据作用机理的互补性，加入上述对肾脏具有保护作用的成份，弥补了阿德福韦酯在治疗乙肝中具有潜在的肾毒副作用，进一步提高肾功能的各项指标，保证组方药物的长期安全使用。
3、本发明的技术方案是提供一类用于治疗乙肝的阿德福韦酯组方药物，所述的药物组成(重量组份)灯盏花有效成份1份，X0.1-200份(X＝大黄素，氧化苦参碱，黄芪提取物，叶下珠提取物，三七提取物，水飞蓟素及水飞蓟宾衍生物，川芎嗪及其衍生物和阿魏酸及其衍生物中的任意一种)，配以适当药用辅料制成医药上可接受的制剂。
本发明所述的大黄素、氧化苦参碱和三七提取物分别是指来源于蓼科，豆科，鼠李科，百合科植物的蒽醌类提取物大黄素、来源于中药苦豆子或苦参根的氧化苦参碱(苦参素)和来源于三七的皂甙类提取物三七总皂甙，其中大黄素、氧化苦参碱和三七总皂甙含量分别大于50％。
本发明所述的黄芪提取物是指来源于豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪干燥根的提取物，内含有氨基酸，微量元素，黄酮，黄芪皂甙，多糖成份；或是指黄芪提取物进一步纯化所得含量大于50％的黄芪总皂甙和含量大于10％的黄芪多糖。
本发明所述的叶下珠提取物是指来源于大戟科叶下珠属植物，包括苦味叶下珠的提取物，内含有木脂素，萜类，黄酮，糅质，生物碱等。
本发明所述的川芎嗪及其衍生物、阿魏酸及其衍生物和水飞蓟素及水飞蓟宾衍生物分别是指川芎的吡嗪类提取物川芎嗪、天然植物如当归川芎的提取物阿魏酸和水飞蓟的提取物水飞蓟素或水飞蓟宾，其中川芎嗪、阿魏酸、水飞蓟素或水飞蓟宾含量分别大于50％；或分别是指提取的川芎嗪、阿魏酸和水飞蓟宾的进一步衍生物，或分别是指人工合成的川芎嗪、阿魏酸和水飞蓟宾及合成的川芎嗪、阿魏酸和水飞蓟宾的进一步衍生物。
本发明所述的川芎嗪衍生物、阿魏酸衍生物和水飞蓟宾衍生物包括川芎嗪的衍生物盐酸川芎嗪与磷酸川芎嗪、阿魏酸的盐类与阿魏酸哌嗪和水飞蓟宾的衍生物水飞蓟宾钠盐与水飞蓟宾葡甲胺盐。
本发明所述的药物组成成份中加入药学上可以接受的各种药用辅料，制成口服制剂，包括胶囊、缓释胶囊、片剂和颗粒剂。
本发明的药物可以采用现有制药领域中的常规生产方法，需要的时候可以添加各种药学上可接受的载体。所述载体包括要学领域常规的稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、吸收促进剂、吸收载体和润滑剂。
4、本发明的优点在于(1)本发明药物组方之间协同作用提高药效在治疗乙肝的抗病毒、提高肝功能和抗肝纤维化方面，本发明的组方药物分别优于阿德福韦酯和专利组方中的单方药物。其中阿德福韦酯和氧化苦参碱、阿德福韦酯和叶下珠提取物组方，在抗乙肝病毒方面，分别优于专利组方中的单方药物阿德福韦酯和氧化苦参碱、叶下珠提取物；而阿德福韦酯分别同大黄素、黄芪提取物、三七提取物，水飞蓟素及水飞蓟宾衍生物，川芎嗪及其衍生物和阿魏酸及其衍生物的组方药物，在提高肝功能和抗肝纤维化方面，分别优于阿德福韦酯和专利组方中的单方药物。预示本发明组方药物可明显提高临床治疗的有效率和进一步改善患者的生存质量。
(2)减轻单方药物引起的不良反应由于阿德福韦酯存在肾毒性，本发明所述的大黄素、黄芪提取物、三七提取物，水飞蓟素及水飞蓟宾衍生物，川芎嗪及其衍生物和阿魏酸及其衍生物，不同程度地具有抗肾功能损害、抗肾衰竭和肾保护功能，从而减轻或缓解单独使用阿德福韦酯药物引起的肾毒性不良反应。
具体实施例方式
实施例1阿德福韦酯和阿魏酸钠组方药物片剂制备。
取阿魏酸钠150g，阿德福韦酯10g，适量淀粉、糊精、微晶纤维素，加入5-10％聚维酮乙醇溶液，制软材，过12-16目筛制成湿颗粒，湿颗粒40-60℃烘干，加入低取代羟丙基纤维素136g和硬脂酸镁2g压片，即得治疗乙肝的组方药物片剂1000片，每片含有阿魏酸钠150mg，阿德福韦酯10mg。
实施例2阿德福韦酯和大黄素组方药物片剂制备。
取大黄素100g，阿德福韦酯10g，适量淀粉、糊精、微晶纤维素，加入5-10％聚维酮乙醇溶液，制软材，过12-16目筛制成湿颗粒，湿颗粒40-60℃烘干，加入低取代羟丙基纤维素100g和硬脂酸镁2g压片，即得治疗乙肝的组方药物片剂1000片，每片含有大黄素100mg，阿德福韦酯10mg。
实施例3阿德福韦酯和三七总皂甙组方药物片剂制备。
取三七总皂甙200g，阿德福韦酯10g，适量淀粉、糊精、微晶纤维素，加入5-10％聚维酮乙醇溶液，制软材，过12-16目筛制成湿颗粒，湿颗粒40-60℃烘干，加入低取代羟丙基纤维素136g和硬脂酸镁2g压片，即得治疗乙肝的组方药物片剂1000片，每片含有三七总皂甙200mg，阿德福韦酯10mg。
实施例4阿德福韦酯和水飞蓟素组方药物片剂制备。
取水飞蓟素200g，阿德福韦酯10g，适量淀粉、糊精、微晶纤维素，加入5-10％聚维酮乙醇溶液，制软材，过12-16目筛制成湿颗粒，湿颗粒40-60℃烘干，加入低取代羟丙基纤维素136g和硬脂酸镁2g压片，即得治疗乙肝的组方药物片剂1000片，每片含有水飞蓟素200mg，阿德福韦酯10mg。
实施例5阿德福韦酯和大黄素组方药物颗粒剂制备。
取大黄素100g，阿德福韦酯10g，适量淀粉、糊精、微晶纤维素，加入5-10％聚维酮乙醇溶液，制软材，过12-16目筛制成湿颗粒，湿颗粒40-60℃烘干，即得治疗乙肝的组方药物颗粒剂1000包。每包含有大黄素100mg，阿德福韦酯10mg。
实施例6阿德福韦酯和阿魏酸钠组方药物颗粒剂制备。
取阿魏酸钠150g，阿德福韦酯10g，适量淀粉、糊精、微晶纤维素，加入5-10％聚维酮乙醇溶液，制软材，过12-16目筛制成湿颗粒，湿颗粒40-60℃烘干，即得治疗乙肝的组方药物颗粒剂1000包。每包含有阿魏酸钠150mg，阿德福韦酯10mg。
实施例7阿德福韦酯和水飞蓟素组方药物颗粒剂制备。
取水飞蓟素200g，阿德福韦酯10g，适量淀粉、糊精、微晶纤维素，加入5-10％聚维酮乙醇溶液，制软材，过12-16目筛制成湿颗粒，湿颗粒40-60℃烘干，即得治疗乙肝的组方药物颗粒剂1000包。每包含有水飞蓟素200mg，阿德福韦酯10mg。
实施例8阿德福韦酯和三七总皂甙组方药物颗粒剂制备。
取三七总皂甙200g，阿德福韦酯10g，适量淀粉、糊精、微晶纤维素，加入5-10％聚维酮乙醇溶液，制软材，过12-16目筛制成湿颗粒，湿颗粒40-60℃烘干，即得治疗乙肝的组方药物颗粒剂1000包。每包含有三七总皂甙200mg，阿德福韦酯10mg。
实施例9阿德福韦酯和阿魏酸钠组方药物胶囊制备。
取阿魏酸钠150g，阿德福韦酯10g，加入适量淀粉，70％乙醇作为湿润剂，过20目筛制粒，在60℃烘干，再过20目筛整粒，然后装入2号胶囊壳中，制成1000粒胶囊，每粒含有阿魏酸钠150mg，阿德福韦酯10mg。
实施例10阿德福韦酯和水飞蓟素组方药物胶囊制备。
取水飞蓟素200g，阿德福韦酯10g，加入适量淀粉，70％乙醇作为湿润剂，过20目筛制粒，在60℃烘干，再过20目筛整粒，然后装入2号胶囊壳中，制成1000粒胶囊，每粒含有水飞蓟素200mg，阿德福韦酯10mg。
实施例11阿德福韦酯和大黄素组方药物胶囊制备。
取大黄素100g，阿德福韦酯10g，加入适量淀粉，70％乙醇作为湿润剂，过20目筛制粒，在60℃烘干，再过20目筛整粒，然后装入2号胶囊壳中，制成1000粒胶囊，每粒含有大黄素100mg，阿德福韦酯10mg。
实施例12阿德福韦酯和三七总皂甙组方药物胶囊制备。
取三七总皂甙200g，阿德福韦酯10g，加入适量淀粉，70％乙醇作为湿润剂，过20目筛制粒，在60℃烘干，再过20目筛整粒，然后装入2号胶囊壳中，制成1000粒胶囊，每粒含有三七总皂甙200mg，阿德福韦酯10mg。
权利要求
1.用于治疗乙肝的阿德福韦酯组方药物。本发明所述的药物由以下成份组成(重量比)阿德福韦酯1份，X0.1-200份(X＝大黄素，氧化苦参碱，黄芪提取物，叶下珠提取物，三七提取物，水飞蓟素及水飞蓟宾衍生物，川芎嗪及其衍生物和阿魏酸及其衍生物中的任意一种)，其余为药用辅料。
2.根据权利要求1所述用于治疗乙肝的阿德福韦酯组方药物，其特征在于，本发明所述的药物应用于治疗由于乙肝病毒侵染引起的人肝脏疾病。
3.根据权利要求1所述用于治疗乙肝的阿德福韦酯组方药物，其特征在于，本发明所述的大黄素、氧化苦参碱和三七提取物分别是指来源于蓼科，豆科，鼠李科，百合科植物的蒽醌类提取物大黄素、来源于中药苦豆子或苦参根的氧化苦参碱(苦参素)和来源于三七的皂甙类提取物三七总皂甙，其中大黄素、氧化苦参碱和三七总皂甙含量分别大于50％。
4.根据权利要求1所述用于治疗乙肝的阿德福韦酯组方药物，其特征在于，本发明所述的黄芪提取物是指来源于豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪干燥根的提取物，内含有氨基酸、微量元素、黄酮、黄芪皂甙和多糖成份；或是指黄芪提取物进一步纯化所得含量大于50％的黄芪总皂甙和含量大于10％的黄芪多糖。
5.根据权利要求1所述用于治疗乙肝的阿德福韦酯组方药物，其特征在于，本发明所述的叶下珠提取物是指来源于大戟科叶下珠属植物，包括苦味叶下珠的提取物，内含有木脂素、萜类、黄酮、糅质和生物碱成份。
6.根据权利要求1所述用于治疗乙肝的阿德福韦酯组方药物，其特征在于，本发明所述的川芎嗪及其衍生物、阿魏酸及其衍生物和水飞蓟素及水飞蓟宾衍生物分别是指川芎的吡嗪类提取物川芎嗪、天然植物如当归川芎的提取物阿魏酸和水飞蓟的提取物水飞蓟素或水飞蓟宾，其中川芎嗪、阿魏酸、水飞蓟素或水飞蓟宾含量分别大于50％；或分别是指提取的川芎嗪、阿魏酸和水飞蓟宾的进一步衍生物，或分别是指人工合成的川芎嗪、阿魏酸和水飞蓟宾及合成的川芎嗪、阿魏酸和水飞蓟宾的进一步衍生物。
7.根据权利要求1和6所述用于治疗乙肝的阿德福韦酯组方药物，其特征在于，本发明所述的川芎嗪衍生物、阿魏酸衍生物和水飞蓟宾衍生物包括川芎嗪的衍生物盐酸川芎嗪与磷酸川芎嗪、阿魏酸的盐类与阿魏酸哌嗪和水飞蓟宾的衍生物水飞蓟宾钠盐与水飞蓟宾葡甲胺盐。
8.根据权利要求1所述用于治疗乙肝的阿德福韦酯组方药物，其特征在于，本发明所述的药物组成成份中加入药学上可以接受的各种药用辅料，制成口服制剂，包括胶囊、缓释胶囊、片剂和颗粒剂。
全文摘要
本发明涉及治疗乙肝的阿德福韦酯组方药物。本发明所述的药物由以下成分组成(重量比)阿德福韦酯1份，X0.1－200份(X＝大黄素、氧化苦参碱、黄芪提取物、叶下珠提取物、三七提取物、水飞蓟素及水飞蓟宾衍生物、川芎嗪及其衍生物和阿魏酸及其衍生物中的任意一种)，其余为药用辅料；所述药物为口服制剂，包括胶囊、缓释胶囊、片剂和颗粒剂；本发明的组方药物，能够发挥组方药物的抗病毒、免疫调节、保肝及改善肝功能和抗肝纤维化协同作用，并可降低阿德福韦酯对肾脏的潜在毒副作用。
文档编号A61K31/675GK1618430SQ200310112198
公开日2005年5月25日 申请日期2003年11月19日 优先权日2003年11月19日
发明者王少华 申请人:深圳市清华源兴生物医药科技有限公司