专利名称：基本上不含水的生物粘附性液体组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及有机组合物。更具体地，本发明涉及一种能够在使用时增稠和/或粘附到表面上的液体组合物；该表面尤其是表皮或黏膜表面，但也不排除其他表面。
背景技术：
在医药中，藻酸盐组合物用来例如减轻回流性食管炎的后果。但是，这些组合物尽管有利，但是它们不能粘附在食管的黏膜表面上。
US-B-6391294公开了一种药用的聚合物质，在水存在下，经阴离子聚合物和阳离子聚合物的反应，在体表就地形成这种聚合物质。所述聚合物可以作为独立的多个组合物或在非水性载体中的单一组合物施用，然后一起就地反应。
国际药学杂志(International Journal of Pharmaceutics)，238卷，2002年，第123-132页描述了藻酸盐水溶液在食管内作为生物黏合剂的应用。
如果提供一种能在目标体表区域内增稠和/或能粘附在所述区域上的组合物，这将是有利的。
发明内容
本发明的第一个方面提供一种用于粘附到表面上的液体组合物，该组合物包含悬浮在水溶性液体稀释剂中的水溶胀性聚合物颗粒，其中，所述液体稀释剂基本上不含水，或包含不足以完全溶胀所述聚合物颗粒的量的水，其中，所述聚合物颗粒不同时包括阴离子聚合物颗粒和阳离子聚合物颗粒。
尽管所述组合物可以用在家庭中，但是优选所述组合物用于与体表粘附。所述水溶性液体稀释剂优选为药用的稀释剂。在优选方案中，所述组合物为治疗组合物。
下面的说明是用于治疗用途的本发明的组合物。随后将描述非治疗性的用途。下文中提及的该组合物的性质，例如颗粒性质、可使用的稀释剂类型、可使用的合适的阴离子聚合物等等，也适用于非治疗性用途。
因此，本发明的组合物是颗粒悬浮液的形式。在使用前这些颗粒在组合物中仍然是颗粒，优选基本上没有溶胀。它们的尺寸差距很大，从肉眼可见的尺寸到显微镜下才可看见的尺寸。该悬浮液可以是均相分散液的形式。例如在即将施用前，该组合物可以与水在体外混合(例如在玻璃杯中)。另外，它也可以与水在体内混合，例如在口腔(唾液提供水)内混合。不论以何种方式输送，水将使聚合物颗粒溶胀，使它们凝结，从而增加该组合物的黏度，并使它们的至少一部分粘附在体表上。所述颗粒不须具有任何水溶性，但是在优选实施方案中，它们可部分或完全溶解在水中。但是，在所有实施方案中，水将使事先保存在无水或少水环境中的颗粒溶胀。
优选地，这种粘附层可防止或减轻发炎或损伤。通过在受损的体表外部提供屏障，使其避免进一步发炎或损伤，从而使体表愈合。
备选地或另外地，粘附层可促进活性药剂经体表吸收。活性药剂可以和该组合物配制在一起或单独施用。使用时，活性药剂可以作为涂层的一部分存在，也可以单独存在但是通过该粘附层而被吸收。
体表可以是表皮的表面。表皮的表面可以是任何外部的表面皮肤。受损的皮肤可以是起泡、被火烧伤、发炎、化脓、晒伤或被叮咬的皮肤。
体表可以是黏膜表面。黏膜表面可以是任何内部的体表。其例子包括口(包括舌)、鼻、眼、喉、食管、胃、阴道和直肠。
体表可以是被撕裂或切割表面，例如暴露在外的受到损伤或其他外伤的肌肉表面。
本发明的组合物可以当作加湿或软化皮肤的组合物，或作为护发素或脱毛组合物。
本发明的组合物可以是牙科组合物，例如假牙固定剂。
当本发明的组合物和唾液中的水混合时，该组合物优选粘附在胃肠道的表面，优选食管，最优选下部食管。但是，它可以粘附在不同的表面上，例如口腔或喉咙的表面，用来减轻例如口腔溃疡或咽喉炎。
优选地，从与水混合到达到有利的溶胀程度之间的间隔在1～60秒钟的范围内，最优选2～30秒钟。
合适的聚合物优选为水溶胀性、无毒和在稀释剂中不溶胀的聚合物。
合适地，所述聚合物可以为阴离子、阳离子和非离子聚合物。可以使用这些聚合物的混合物，但例外的是，阴离子和阳离子聚合物的复合配方是不利的，因为它们之间会发生相互作用。因此下列物质可以合适地用作任何所给配方中的聚合物●仅为阴离子聚合物。这是特别优选的配方。在此定义下，可以使用混合的阴离子聚合物，但是优选仅使用一种阴离子聚合物。
●仅为非离子聚合物。这是优选配方。在此定义下，可以使用混合的非离子聚合物，但是优选仅使用一种非离子聚合物。
●仅为阳离子聚合物。这是优选配方。在此定义下，可以使用混合的阳离子聚合物，但是优选仅使用一种阳离子聚合物。
●阴离子聚合物和非离子聚合物。在此定义下，可以使用混合的阴离子聚合物和/或混合的非离子聚合物，但是优选仅使用一种阴离子聚合物和一种非离子聚合物。
●阳离子聚合物和非离子聚合物。在此定义下，可以使用混合的阳离子聚合物和/或混合的非离子聚合物，但是优选仅使用一种阳离子聚合物和一种非离子聚合物。
合适的阴离子聚合物的例子在例如US-B-6391294中给出。优选的阴离子聚合物包括透明质酸的水溶性盐、藻酸盐(例如碱金属和碱土金属的藻酸盐，例如藻酸钠、藻酸钾、藻酸钙和藻酸镁)、黄原胶、阿拉伯胶、果胶；衍生为酸性的聚糖类，优选含糖醛酸的物质，例如透明质酸或苹婆酸；角叉菜胶盐和聚乳酸和水溶性纤维素衍生物(例如羧甲基纤维素钠)。
本发明使用的更优选的阴离子聚合物是水溶胀性的藻酸的盐(即藻酸盐)和水溶胀性的纤维素衍生物的盐，优选水溶性的藻酸的盐和水溶性的纤维素衍生物的盐。
合适的阳离子聚合物的例子在例如US-B-6391294中给出。合适的阳离子聚合物包括壳聚糖盐(例如氯化壳聚糖、乙酸壳聚糖)、二乙基氨基乙基葡聚糖、软骨素盐、聚赖氨酸、肤质素(dermatan)和角蛋白。
合适的非离子聚合物的例子包括纤维素衍生物(例如甲基纤维素、羟乙基丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素)和淀粉以及淀粉衍生物。
所述聚合物颗粒在未溶胀状态优选具有30～500微米的平均粒径，特别是50～200微米，尤其是90～125微米。在制备本发明的组合物之前，为了测定平均粒径，它们可经筛分分级。
基于组合物的总重量，该组合物优选包含2～90重量％的所述聚合物颗粒，更优选5～70重量％，再优选20～60重量％，最优选30～50重量％的所述聚合物颗粒。
此处的“水”包括含水液体，例如唾液。
当然，非水性液体本身应当为药用的。优选的非水性液体包含一元醇、多元醇、糖醇和糖多元醇，或由上述物质组成。
合适的一元醇包括乙醇和异丙醇。
合适的多元醇包括丙三醇、二元醇、聚亚烷基二醇或它们的混合物。合适的二元醇例如为丙二醇。合适的聚亚烷基二醇为聚乙二醇(PEG)，优选分子量至少100，优选至少200的聚乙二醇。优选其分子量最高为1000，更优选最高为700，最优选最高为400。
合适的糖多元醇是氢化的葡萄糖浆(LYCASIN(注册商标))。
药用的液体稀释剂优选基本上不含水，基于组合物的总重量，例如含水量低于1重量％，或优选低于0.5重量％。最优选它是无水的。
备选地，药用的液体稀释剂包含一些水。为了控制阴离子聚合物颗粒的溶胀性，使其在需要的位置达到最优效果，这是有利的。例如，在组合物中掺入一些水将使颗粒溶胀到一定程度，但是基本上不凝结。当包括部分预溶胀颗粒的组合物被咽下并与唾液混合时，与没有部分预溶胀时的颗粒相比，该颗粒将更快地凝结和形成屏障膜。比喻来说，它们可认为是“预处理的(primed)”。
在这些实施方案中，所述组合物应含有足以“预处理”该颗粒的一部分水，但不能比这更多；在施用之前，希望该组合物没有显著增稠。水的最佳比例依赖于组合物的其它组分，特别是液体稀释剂。一般地，基于稀释剂的重量，所述液体稀释剂可含有10～70重量％的水。
当液体稀释剂是丙三醇时，基于稀释剂(即丙三醇)的重量，它可含有最高20重量％的水，优选10～20重量％的水。
当液体稀释剂是简单的二元醇，优选丙二醇时，基于稀释剂(即二元醇)的重量，它可含有最高50重量％的水，优选10～50重量％的水，最优选25～50重量％的水。
当液体稀释剂是聚亚烷基二醇，例如聚乙二醇时，基于稀释剂(即聚亚烷基二醇)的重量，它可含有最高60重量％的水，优选10～60重量％的水，最优选30～60重量％的水。但是，当稀释剂是聚乙二醇400时，其上限优选为稀释剂重量的60重量％，当它是聚乙二醇200时，其上限优选是40重量％。
稀释剂(包括有水存在的情况)的希尔德布兰德(Hildebrand)溶解度参数优选为至少15(Jcm-3)1/2，优选至少20(Jcm-3)1/2。
稀释剂(包括有水存在的情况)的希尔德布兰德溶解度参数优选不大于35(Jcm-3)1/2，优选不大于31(Jcm-3)1/2。
特别当某种活性剂对发炎或受损的体表有效，例如对胃回流引起的食管发炎有效时，或当需要使某种活性剂通过粘附的组合物穿过皮肤被吸收到血液中时，所述组合物也可以包含这种活性剂。合适的活性剂包括止痛剂、消炎剂和解热剂(例如对乙酰氨基酚、布洛芬、萘普生、二氯芬酸、酮洛芬、水杨酸胆碱、苄达明、丁丙诺啡、氢化可的松、倍他米松)、减充血剂(例如伪麻黄碱、苯福林、羟甲唑啉、丁苄唑啉)、矿物盐(例如葡萄糖酸锌、乙酸锌)、止咳剂(例如右美沙芬、可待因、pholocodine)、祛痰剂(例如愈创甘油醚、N-乙酰半胱氨酸、溴苄环己铵)、防腐剂(例如三氯生、氯二甲苯酚、氯化十六烷基吡啶鎓、氯化苯甲烷铵、戊间甲酚、hexylresourcinol、二氯苯甲醇、苯甲醇、地喹氯铵、磺胺嘧啶银)、心血管药(例如三硝基甘油)、局部麻醉剂(例如利多卡因、苯佐卡因)、细胞保护剂(例如生胃酮、硫糖铝、碱式水杨酸铋)、抗溃疡剂(例如碳酸钙、碳酸氢钠、三硅酸镁、氢氧化镁铝、西咪替丁、雷尼替丁、尼扎替丁、法莫替丁、奥美拉唑、泮托拉唑)、抗组胺剂(例如氯雷他定、特非那定、苯海拉明、氯苯那敏、曲普利啶、阿伐斯汀)、止吐剂(例如丙氯拉嗪、舒马曲坦)、肠道调节剂(例如地芬诺酯、洛哌丁胺、番泻甙)、抗真菌剂(例如克霉唑)、抗生素(例如镰孢真菌素、短杆菌素)和制牛皮癣剂(例如地蒽酚、钙泊三醇)。可以包括一种或一种以上的试剂。
可以简单地将本发明的组合物粘附在体表上来治疗体表的疾病。但是，用于食管表面的情况下，它另外起治疗胃肠痉挛的作用，例如回流食管炎、胃炎、消化不良或消化性溃疡。因此，在本发明的这方面，该组合物还可以包含碳酸氢盐和选择性包括藻酸盐交联剂，使到达胃的组合物形成回流抑制“筏”。对于这种用途的特别优选的实施方案可以包括本发明的组合物以及碳酸钙和碳酸氢钠，并将其配制成可饮用的制剂。
本发明的第二个方面提供一种治疗患者的方法，该方法使用上述的本发明的组合物，并将其粘附到患者的体表。可以采用这种方法来例如防止或缓解体表的病状。备选地或另外地，可以采用这种方法来为患者透皮给药。
本发明还提供了聚合物颗粒在制备本文所述组合物中的应用，所述组合物用于治疗需要进行预防性或恢复性处理的体表，或用于活性药剂的透皮给药。
通过将各组分混合在一起直到得到均匀混合物，特别是得到均匀的分散体，由此来制备本发明的组合物。
本发明的非治疗性用途是得益于以下事实的用途组合物具有低的初始黏度，用水稀释时变成较高黏度的液体，优选该液体具有粘附在目标表面上的倾向。本发明的组合物可用于家庭清洁组合物。例如，将该组合物装入一个装置中，周期性地将第一个发明组合物以未稀释和非黏性的形式释放到抽水马桶中。该组合物可沿抽水马桶自由地向下流到水中，在水中该组合物增稠，并粘附在水线以下的卫生洁具上，在此发挥清洁作用。当聚合物是藻酸盐时，因为藻酸盐的强螯合作用，它可防止或除去水垢。
在另一个非治疗方案中，本发明的组合物是用于物品清洗机的封装组合物的一部分。封装材料可以是透水性的，当吸入水时，囊内的聚合物溶胀使囊破裂，从而将内容物释放到物品清洗机中。然后释放出聚合物，并可粘附在物品清洗机内的硬表面上。因此它对物品清洗机的表面具有清洗或预防结垢的作用。
现在参照下列实施例进一步描述本发明。
图1表示单个藻酸盐颗粒在甘油内的溶胀。
图2显示了溶胀行为随用人工唾液进行稀释时的变化。
图3表示溶胀速率和稀释剂稀释之间的关系对每个稀释剂是不同的。
图4希尔德布兰德溶解度参数与80重量％的载体稀释时的模拟溶胀速率的关系。
图5希尔德布兰德溶解度参数与表现出颗粒溶胀所必需的稀释程度的关系。
图6显示了悬浮在稀释剂中的藻酸盐颗粒被置于食管黏膜上时，其溶胀面积的变化。
图7显示稀释剂的选择对施用到食管黏膜上的藻酸盐总量的影响。
图8显示藻酸钠在食管黏膜上的保留随冲洗时间增加的变化。
图9为“蠕动试管”生物粘附测试系统设备。
图10显示在冲洗前进行5次初始蠕动波动之后，从食管流出的施用到食管黏膜上的藻酸盐总量的百分比。
图11显示在冲洗后仍然保留在黏膜表面上藻酸盐占给药到食管的藻酸盐总量的百分比。
图12显示稀释剂的选择对藻酸盐在食管的上、中和下部3个区域内的保留的影响。
具体实施例方式
实施例1在这些实施例中，目的是评估下列影响
●人工唾液稀释剂稀释对藻酸盐颗粒溶胀速率的影响。
●稀释剂组合物的选择对藻酸盐颗粒溶胀速率的影响。
原料
仪器尼康Labophot光学显微镜，该显微镜与COHU High Performance CCD照相机相连，该照相机通过接口连接到图像分析软件Image Proplus 4.1版(美国马里兰州的Media Cybernetics，经销商为英国伯克郡finchampstead的Datacell Ltd.)。
涡旋混合器VM20，英国Bucks的Chiltem Scientific。
Thoma血细胞计数器计数盒，深度0.1mm，0.0025mm2，英格兰Hawksley。
方法人工唾液的制备按照以下配方制备人工唾液在水中加入5mM的碳酸氢钠、7.36mM的氯化钠、20mM的氯化钾、6.6mM的一水合磷酸二氢钠、1.5mM的二水合氯化钙。
目测单个颗粒的溶胀将单个藻酸盐颗粒(90～125μm)放在血细胞计数器计数盒的中心，使用盖玻片盖上，用Blu-Tack(英国莱斯特，Bostick公司)使盖玻片两侧负重。在该室的前面靠近盖玻片处注射15μL的水化液体(人工唾液稀释剂DMMB)。在室表面和盖玻片之间的毛细作用力吸取界面之间的流体，从而浸渍该单个颗粒。随着藻酸盐颗粒的水化，由于DMMB和溶解性藻酸盐络合时颜色从蓝色变化到紫色，所以可划出凝胶层。由于颜色的变化，这意味着可以用光学显微镜(尼康Labophot)沿二维方向观察颗粒的径向溶胀。图像分析软件(Image Proplus 4.1版，美国MediaCybernetics)在预定时间后捕获图像，用溶胀区域的软件测定法计算颗粒的径向溶胀程度。
使用血细胞计数器计数盒的基本原理是保证溶胀的固定体积。盖玻片和室表面之间的距离是设计为精确到100μm，因此可以捕获90～125μm的筛分的藻酸盐颗粒，同时限制轴向溶胀。因此，溶胀将沿径向发生，可以使用图像分析法根据二维图像计算溶胀程度。
制备水化流体使用水化流体水化血细胞计数器计数盒内的藻酸盐颗粒。为了测定稀释剂的选择和有人工唾液的稀释剂的稀释对颗粒溶胀的影响，制备多个稀释剂人工唾液溶液(0～100重量％)。测定下列稀释剂●甘油●70∶30(重量)甘油∶丙二醇●40∶60(重量)甘油∶丙二醇●丙二醇●聚乙二醇200●聚乙二醇400将1，9-二甲基亚甲蓝(DMMB)加到水化流体(稀释剂人工唾液混合物)中。DMMB是与溶剂化的藻酸钠络合的阳离子染料，所产生的从蓝色到紫色的颜色变化描绘出溶胀颗粒的凝胶层。水化流体内的稀释剂浓度决定了DMMB的加入量(350～1490μM)。DMMB的加入量是观测所需要的最小浓度。
结果和讨论图1表示单个藻酸盐颗粒在甘油内的溶胀，图2显示了溶胀行为随着用人工唾液进行稀释时的变化。在100％的稀释剂(即0重量％的稀释剂稀释)中，藻酸盐颗粒不溶胀，颗粒面积没有随时间变化。但是，随着使用有人工唾液的甘油的稀释增加而使该藻酸盐颗粒水化，从标准化的面积对时间的梯度计算得到的溶胀速率增加(图1和2)。
从图1和2所示的结果明显地看到，藻酸盐颗粒溶胀速率和有人工唾液的甘油的递增稀释之间的关系可以认为具有两个主要特点。首先，该关系可以用初始阶段来描述其特征。初始阶段表示在进行一系列稀释剂稀释时，悬浮的藻酸盐颗粒保持未溶胀的状态。第二，在稀释的临界水平超出了初始阶段，随其后的稀释(激活阶段)溶胀速率增加。
图3表示溶胀速率和稀释剂稀释之间的关系对每个稀释剂是不同的。
不同的稀释剂显示出以下方面的差异在超过初始阶段所需要的稀释水平的差异，即颗粒开始溶胀所必需的稀释剂稀释水平的差异；以及进入激活阶段时溶胀速率对进一步稀释的敏感性的差异。可以清楚地看到，藻酸盐颗粒在约25重量％的甘油人工唾液中开始溶胀。但是，在聚乙二醇400中，需要使用人工唾液将该稀释剂稀释至60重量％来引发溶胀。
这六种稀释剂给出了稀释时溶胀速率的范围，并且提供了引发溶胀所需要的稀释剂稀释程度的控制方法。
蒸发焓是将纯液体转化为气体所需要的能量。在将液体转化为气体时，必需彻底解离液体的单个分子，因此蒸发焓是将液体分子结合在一起的范德华力大小的直接量度。
在溶剂和溶质混合时，溶质必须以类似蒸发的方法断开溶剂分子之间的范德华相互作用。因此，溶剂的蒸发焓作为溶剂分子间范德华相互作用力量度，可以提供溶解行为的指标。特定溶剂的溶解行为可用希尔德布兰德溶解度参数(δ)表示，该参数由内聚能密度的平方根计算。
希尔德布兰德溶解度参数(δ)＝(ΔE/V)0.5(ΔE/V)＝内聚能密度因此，溶剂的希尔德布兰德溶解度参数给出了溶剂分子间范德华力的量度，可被用来衡量多种溶剂的溶解行为。
在这项工作内容中，用来溶胀藻酸盐颗粒的溶剂是下列6种稀释剂●甘油●丙二醇●70∶30(重量)甘油∶丙二醇的混合物●40∶60(重量)甘油∶丙二醇的混合物●聚乙二醇200●聚乙二醇400据认为，稀释剂的希尔德布兰德溶解度参数对于本发明很关键。这可以用基团贡献方法计算(参见Sperling，L.H.，物理聚合物科学简介(Introduction to physical polymer science)，2001年第3版，Wiley；CowieJ.M.G，聚合物化学家和现代材料的物理(polymer chemists and physics ofmodem materials)，1991年第2版，格拉斯哥Blackie)。
计算下表所示的每种稀释剂的希尔德布兰德溶解度参数。
每种稀释剂的希尔德布兰德溶解度参数提供了单个稀释剂分子之间内聚力的量度，并且看起来似乎可以用希尔德布兰德溶解度参数来理解颗粒溶胀速率和载体稀释程度之间的关系。
图4和图5反映了希尔德布兰德溶解度参数与80重量％的载体稀释时的模拟溶胀速率的关系，以及与表现出颗粒溶胀所必需的稀释程度的关系。
实施例2这些实施例研究稀释剂的选择对施用到食管黏膜上的悬浮藻酸盐颗粒的影响。
实施例1的结果表明，当组合物进入上部胃肠道时，稀释剂被黏膜表面上的唾液稀释，悬浮的藻酸盐将开始溶胀。溶胀的藻酸盐和黏膜表面之间的接触将导致形成覆盖组织表面的溶胀的生物粘附性膜。悬浮的颗粒在黏膜和组合物之间的界面的溶胀是形成生物粘附层的关键。
为了理解稀释剂的选择对藻酸盐颗粒在组合物和黏膜界面上的溶胀行为的影响，需要能显示生物粘附性膜在黏膜表面上形成时的微观结构。
仪器“放大镜”—指Cool Snap专业数码相机，附带到尼康AF微型尼卡60mm f/2.8D镜头，经Cool Snap专业PCI界面卡连接到奔腾PIII 1GHz PC上。使用Image ProPlus 4.1版(美国马里兰州的Media Cybemetics，经销商为英国伯克郡finchampstead的Datacell Ltd.)进行图像分析。
Thoma血细胞计数器计数盒，深度0.1mm，0.0025mm2，英格兰Hawksley。
方法组织黏膜的制备将猪宰杀后立即将新鲜的食管收集在磷酸盐缓冲盐水中，加冰运输。在宰杀1小时内解剖除去肌肉组织，剩下清洁的上皮组织管道。用氰基丙烯酸酯黏合剂(Super GlueLoctite(爱尔兰)公司)将25mm×50mm的组织片粘附在显微镜载玻片上，在40ml的0.9％重量/体积的NaCl中水化1分钟，在人工唾液中冲洗，然后置于显微镜下。
制剂的制备制备下列每个含有浓度为1.9mM的DMMB的稀释剂。
●甘油●丙二醇●聚乙二醇200●聚乙二醇400●70∶30(重量/重量)甘油∶丙二醇的混合物●40∶60(重量/重量)甘油∶丙二醇的混合物然后使用每种溶液制备40重量％的藻酸钠的悬浮液。该溶液的制备方法是，称出合适量的稀释剂和藻酸盐，然后在玻璃瓶中用刮铲混合这两种原料。
将制剂施用到组织黏膜通过将藻酸盐悬浮液填充至血细胞计数器载玻片的开口计数盒内，然后将其倒置在组织表面上，从而将所述制剂施用至组织表面。血细胞计数器载玻片可保证均匀的单层悬浮液铺展在组织表面上。
图像捕获和分析使用所述放大镜观测悬浮的藻酸盐颗粒的溶胀。显微镜可被描述为连接到数码相机上的放大镜头，界面到能捕获数码图像的PC上，从而显示生物粘附性膜的微结构。当藻酸盐颗粒在黏膜表面上水化并和DMMB络合时，从蓝色到紫色的颜色变化划出溶胀区域。在预定时间后图像分析软件捕获图像，将一系列图像转换成描述颗粒溶胀的程度随时间的动画。然后将数码栅格放在整个图像上，对根据其具体的栅格参数选择的一些颗粒进行图像分析。颗粒径向溶胀程度的测定可以发现在生物粘附性膜内溶胀藻酸盐区域的形成特性。
放大镜显示，当将组合物置于黏膜表面时，悬浮的藻酸盐颗粒开始水化和溶胀。稀释剂中DMMB的存在意味着在颗粒开始溶胀时，由于藻酸盐和DMMB的络合导致从蓝色到紫色的颜色变化。使用图像分析软件，可以测定悬浮的藻酸盐颗粒的溶胀面积随时间的变化。
图6显示了悬浮在稀释剂中的藻酸盐颗粒被置于食管黏膜上时，其溶胀面积的变化。
图6的结果表明，置于食管黏膜上的藻酸盐颗粒的溶胀速率可以通过稀释剂的选择来调整。如下表所示，稀释剂的选择影响0～360秒之间的溶胀速率并影响溶胀程度。
悬浮在食管黏膜上的稀释剂中的藻酸盐的溶胀速率和程度配方—40重量％的藻酸盐(Protanal LF120L 90～125μm)稀释剂在90～360秒之间计算溶胀速率。
图6表示，悬浮在含甘油的稀释剂中的颗粒溶胀最快，不同的稀释剂在平衡溶胀区域和平衡前的溶胀速率上表现出不同。例如，悬浮在聚乙二醇400中的颗粒在0.28的标准化溶胀面积时开始平稳，但是悬浮在甘油中的颗粒在类似的溶胀面积仍然快速溶胀。很明显，稀释剂的选择对颗粒溶胀产生影响。
实施例3为了研究生物粘附性和溶胀之间的关系而进行这些实施例。
仪器安捷伦紫外-可见光系统8453(英格兰斯托克波特，安捷伦科技英国公司(Agilent Technologies UK Td))Erweka ZT44 USP/BP崩解测试仪(英格兰诺丁汉，CopleyInstruments)
方法概述按如下方法测定所述制剂的粘附性将一段猪食管外翻套在塑料管上，连接到USP崩解测试仪上，所述USP崩解测试仪进行垂直浸渍移动，将黏膜浸渍到40重量％的稀释剂Protanal LF120L(120～125μm)悬浮液中。组织和粘附的制剂经测试仪的垂直移动到冲洗容器中并在人工唾液(如上述)中冲洗。相对于总粘附程度在预定时间后替换容器，以便用含有可分析量的藻酸盐(0.7gL-1)采集约5个样品。当制剂看起来全部分离(目测)之后，从崩解测试仪上取下组织，在人工唾液中搅拌2小时，以便除去残余的粘附物质。搅拌后，为了保证分离掉所有粘附的藻酸盐，刮划黏膜并分析残余物的藻酸盐浓度。
制备黏膜表面将猪宰杀后立即将新鲜的食管收集在磷酸盐缓冲盐水中，加冰运输。在宰杀1小时内解剖除去肌肉组织，剩下清洁的上皮组织管道。然后将组织管道切成8cm的段，将这些段外翻套在崩解测试仪的棒上。
然后轻轻地清洗套在棒上的组织，在0.9％的氯化钠中平衡1分钟。
粘附试验该组织置于崩解测试仪上，下降到16g的制剂(40重量％的藻酸盐/稀释剂悬浮液)中，停留5秒钟。然后开动崩解测试仪，该组织和粘附的藻酸盐以USP预定的速率和距离在18ml的人工唾液(37℃)中进出浸渍。浸渍动作冲涤配方与组织的界面，使制剂经崩解和溶解而分离。
样品采集在预定的时间后，停止崩解测试仪，改变人工唾液冲洗容器。由预试验来精确测量预定时间，该预试验提供分离制剂所需的大约冲洗时间。然后将该预定时间分成多个时间范围，在这些时间范围内，可分析量的组合物(0.7g/L藻酸盐)应当已被冲洗到18ml的人工唾液中。用视觉观察测定终点，即全部分离的点。达到终点后，从崩解测试仪上取下组织，放在16ml的人工唾液中，搅拌2小时。这是为了保证剩余的粘附的藻酸盐完全分离。
为了验证全部藻酸盐分离，刮划该组织，将刮划下来的物质溶解在1ml的人工唾液中，并且分析溶解的藻酸盐。没有检测到可分析的藻酸盐浓度。
因此，粘附在该食管黏膜段上的全部藻酸盐进入了所有的冲洗容器中。可以对每个容器取样，定量分析藻酸盐的存在量。
定量分析分离的藻酸钠制备藻酸盐标准校准溶液将藻酸钠加入人工唾液中，搅拌直到完全溶解，由此制备0.5重量％的藻酸钠溶液。使用它制备1ml的0.7～3.0g/L范围内的标准溶液。
制备样品溶液从每个容器取样1000mg，但是如果藻酸盐浓度高，需要稀释该样品，以保证待分析的藻酸盐浓度在分析范围(0.7～3.0g/L)内。
藻酸盐分析方法1ml的0.8M的氢氧化钠加入到1ml的藻酸盐溶液中，5分钟后用120μL的2.25M的柠檬酸中和。涡旋混合样品，加入40μL的DMMB，再混合，在室温下培养45分钟，使用安捷伦8453紫外光分光光度计(英格兰斯托克波特，安捷伦科技英国公司)在1cm通路长度的池中，在520和650nm下测定吸收强度。
由于在吸收比520∶650nm和0.7～3.0g/L范围内的藻酸盐浓度之间存在线性关系，所以可以定量分析出从每个容器中取样的藻酸盐量，因此而确定在每个时间点的分离水平。
在冲洗的每个阶段计算出保留率后，可以确定每种制剂随冲洗时间增加的保留程度，然后比较生物粘附特性。
统计分析使用GraphPad InStat v.3.05(美国加州圣地亚哥，GraphPad软件公司)进行所有的统计计算。在p＜0.05的显著水平下进行单因子方差分析(ANOVA)和Tukey多重比较试验。使用GraphPad Prism v3.02(美国加州圣地亚哥，GraphPad软件公司)进行非线性回归分析。
结果和讨论悬浮在多种水溶性稀释剂中的藻酸钠在食管黏膜上的保留施用制剂后，图7显示稀释剂的选择对施用到食管黏膜上的藻酸盐总量的影响。在各个稀释剂之间，施用到食管黏膜上的藻酸盐总量没有显著差异(p＞0.05)。
尽管稀释剂的选择不影响施用到食管黏膜上的藻酸盐量，但是在冲洗时，施用的藻酸盐从黏膜表面上的分离依赖于稀释剂。这表示在图8中。
图8显示藻酸钠在食管黏膜上的保留量随冲洗时间增加的变化。保留量用藻酸盐保留的百分比表示，即在冲洗x分钟时仍然保留在组织上的藻酸盐相对于t＝0时的冲洗前施用到组织上的藻酸盐总量的重量百分比。
可以清楚地看到，稀释剂的选择影响藻酸盐在黏膜表面上的保留。悬浮在甘油中的藻酸钠表现出对黏膜表面的最大保留，然而悬浮在聚乙二醇400中的藻酸盐保留最少。
实施例4前面已经表明，悬浮在水溶性稀释剂中的藻酸盐颗粒的溶胀影响藻酸盐与黏膜之间的生物粘附性相互作用力的形成。悬浮在引发溶胀需要最少的人工唾液稀释的稀释剂中的颗粒对黏膜表面具有最大的保留。带有人工唾液的稀释剂稀释程度影响颗粒溶胀，进而影响藻酸盐在黏膜上的保留，这种认识对于这些制剂的体内性能具有意义。
将一个剂量的制剂施用给患者之后，悬浮的藻酸盐将进入口腔，然后被吞咽进入上部食管。随着制剂沿口腔和食管的迁移，稀释剂被口腔内的唾液和黏膜表面上的流体稀释。在充分的稀释剂稀释之后，悬浮的藻酸盐颗粒开始溶胀而保留在黏膜上。各种稀释剂在引发颗粒溶胀所必需的稀释剂稀释程度上存在差别，受唾液的相对进入量的影响，这种差别可使被激活的颗粒溶胀发生在胃肠道的特定区域中。这样，可以使藻酸盐的保留具有位置特异性。例如，悬浮在甘油中的藻酸盐开始溶胀需要用人工唾液的最小稀释量，并且可以预期，藻酸盐在胃肠通过的早期阶段变为生物粘附性的，从而保留在口腔或上部食管内。
备选地，在聚乙二醇400制剂达到充分的稀释而溶胀和粘附之前，它可以被运输到下部食管；因此到达下部食管之前粘附将被延缓，使得用于包覆的藻酸盐层能够释放到这个位置。
因此认为，重要的是应当理解稀释剂的选择对于保留在黏膜表面上的藻酸盐的区域化分布具有何种影响。
可以使用内部的体外生物粘附测试系统来表征保留的藻酸盐的分布。专门设计“蠕动试管”生物粘附测试系统来测定潜在的生物粘附液体制剂在食管上的保留。“蠕动试管”生物粘附测试系统设备表示在图9中。在图9中，下列数字表示如下部件。
2-水加热器/循环器；供应金属斜床水夹套(37℃)4-加热的金属斜床(倾斜45°)6-用注射器注射的制剂和人工唾液试样量8-金属弯曲架/夹钳10-滚筒；提供蠕动作用12-食管(用Clingfilm包覆)14-收集在小瓶中的洗出液部分将制剂直接施用到食管组织的管道中，用重复等分量的人工唾液冲洗食管，由此测定食管内制剂的保留量。每次冲洗后，使用滚筒模拟咽下的蠕动作用。
在一系列的冲洗和蠕动波动后，切开食管组织的管道，刮划黏膜表面，定量分析刮下来的物质的藻酸盐浓度，由此计算保留在食管管上、中和下部区域的藻酸盐的分布。
实施例4使用了“蠕动试管”生物粘附测试系统，其目的是，确定在模仿蠕动条件下稀释剂的选择对沿食管组织管道的黏膜上保留的藻酸盐分布的影响。
食管的准备将猪宰杀后立即将新鲜的食管收集在磷酸盐缓冲盐水中，加冰运输。在宰杀1小时内解剖除去肌肉组织，剩下清洁的上皮组织管道。切割上部食管，以保证31cm的均匀管长。
食管连接在给药口(dosing port)上需要将食管连接在在给药口上。给药口张开食管，并且给药口上有直接向食管内注射制剂和人工唾液的装置。给药口由32mm长的塑料管(内径8mm)组成，该塑料管上连接两个紧密固定的硅酮橡胶法兰。给药口的法兰端插入到食管的上端，采用绳索打结来使食管紧密地固定在两个法兰之间。
将组织固定到斜坡(slope)上给药口和食管连接到弯曲架上，组织放在40cm长×6cm宽的铝斜坡(和水平方向成45度角)上。将食管定位，使其下端延伸出斜坡的底部之外，使下部食管口自由活动，以便将液体排出到收集容器中。食管的整个长度上用Clingfilm包覆以进行隔绝，并防止水分损失。使用水流动加热器，水在斜坡的下侧循环，以加热金属倾斜表面至37±1℃的温度。使组织定位在加热的斜坡上，使其平衡在37℃。
预冲洗食管在施用制剂之前必需预冲洗食管。这是为了保证洗去留在食管内的食物和食管黏膜上的黏液。经给药口注入10ml等份的37℃的人工唾液试样10次，以便冲洗食管。在每次注射后，使用100～150g的轻压力沿组织管的长度方向滚下塑料滚筒，以便通过蠕动排出该液体。
施用制剂到食管内使用给药注射装置将制剂施用到食管内。给药装置的结构为，通过由10ml的Luer lock注射器的盖制成的接头，将10ml的Luer lock注射器紧密地固定到1ml的注射器腔的顶部。
给药装置的填充方式为，用制剂充满1ml的注射器，然后单独称量10g的制剂到10ml注射器中，仔细地擦干净注射器外边的过量制剂。然后将两个注射器固定在一起，再称重。将给药注射器插入到给药口，使得给药口的上端与1ml注射器的顶端手把接触。这保证给药装置穿透到给药口下端的下方53mm，并且校准在食管内施用制剂的位置。上面的10ml注射器慢慢释放，必需夹紧插入的1ml注射器周围，以防止施用的制剂反冲。慢慢地从食管拔出给药装置，重新称量，以计算施用到食管内的制剂重量。
从食管中排出制剂同时进行人工唾液冲洗和使用塑料滚筒重复产生蠕动波动，从而从食管中排出制剂。一旦施用制剂之后，在冲洗之前，使用滚筒沿食管长度方向引发5次蠕动波动，从而排出过量的制剂。通过使用DMMB络合分析法来分析排出液中的藻酸盐浓度，可以定量地分析5次蠕动波动后藻酸盐的初始分离。
通过给药口注射30次1ml的37℃的人工唾液试样，并且在每次1ml的冲洗之后，使用滚筒重复产生蠕动波动，从而可以排出保留在黏膜表面上的剩余的藻酸盐。使用冲洗注射器经给药口注射人工唾液冲洗液。冲洗注射器是1ml塑料注射器，该注射器上固定有法兰，以防止注射器穿入至给药口以下14mm。这保证在制剂施用点以上40mm的地方开始冲洗，同时防止未排出的制剂在给药口周围累积成池。
保留在黏膜表面上的藻酸盐的测定在30次1ml冲洗之后，从斜坡上取下食管，将其分成70mm的3段，分别代表食管的上、中和下部。每段沿长度方向切开，露出内黏膜表面，使其在聚苯乙烯支架上平整地伸展。使用显微镜载玻片刮划该组织，以便从黏膜表面上除去保留的藻酸盐。
将刮划下来的物质从载玻片上冲洗到烧杯中，用人工唾液稀释到约0.7～2.5g/L的藻酸盐浓度。将刮划下来的物质搅拌过夜，以保证藻酸盐完全溶解。使用DMMB络合分析法可以定量分析从每个组织段上刮下来的藻酸盐的量。然后可以计算藻酸盐相对于施用剂量的保留率。
测试的制剂用刮铲充分混合两相，以便将40重量％的粒径为90～125μm的藻酸钠(Protanal LF120L)制剂悬浮在下列稀释剂中。
使用的稀释剂—甘油；70∶30(重量)甘油∶丙二醇；40∶60(重量)甘油∶丙二醇；丙二醇；聚乙二醇200；聚乙二醇400。
使用GraphPad InStat V.3.00(美国加州圣地亚哥，GraphPad软件公司)进行统计计算。在p＞0.05的显著水平下进行单因子方差分析(ANOVA)和t-检验。
结果和讨论5次蠕动波动后藻酸盐的排出使用“蠕动试管”生物粘附测试系统，可以研究稀释剂选择对食管内藻酸盐保留的影响。图10显示在进行5次初始蠕动波动之后进行冲洗，从食管流出的施用到食管黏膜上的藻酸盐总量的百分比。
很明显，甘油中悬浮的藻酸盐显著地(p＜0.05)减少了给药后藻酸盐从食管的排出。这应当是悬浮在甘油中的藻酸盐与食管黏膜快速地形成了生物粘附性相互作用，并且能抵抗5次蠕动波动干扰的影响。悬浮在甘油中的藻酸盐与食管黏膜快速地形成生物粘附性相互作用的能力类似于上述冲洗60秒钟后的保留行为。基于甘油的制剂的保留增加可以用以下原因来解释藻酸盐颗粒在食管内水化后，在甘油中的溶胀倾向增加，并且产生粘附性的内聚相互作用。
冲洗后藻酸盐在黏膜上的保留将制剂施用到黏膜后，用30次1ml的人工唾液冲洗食管。图11显示在冲洗后仍然保留在黏膜表面上藻酸盐占给药到食管的藻酸盐总量的百分比。
悬浮在甘油和70/30(重量/重量)的甘油丙二醇中的藻酸钠具有比悬浮在其它任何稀释剂中的藻酸盐显著(p＜0.05)较大的保留率。悬浮在这两种稀释剂中的藻酸盐在冲洗后其保留率增加，这与初始5次蠕动波动之后的更多保留有关系(图10)。和其它稀释剂相比，悬浮在甘油和70/30(重量/重量)的甘油丙二醇中的藻酸盐具有更大的溶胀倾向。
增加的溶胀能力是造成5次蠕动波动后更多的藻酸盐保留在食管中和在冲洗后最终更多地保留下的原因。但是对于悬浮在40∶60(重量)的甘油∶丙二醇、丙二醇、聚乙二醇和聚乙二醇400中的藻酸盐，在5次蠕动冲洗后流出了施用剂量的95％以上。悬浮在这些每种稀释剂中的藻酸盐在通过食管时不能充分地溶胀，不能形成与黏膜的生物粘附性相互作用。因此在30次1ml冲洗后，在食管内保留很少的量(施用剂量的3％以下)。
可以看出，悬浮的藻酸盐在通过食管时的溶胀能力是影响冲洗后藻酸盐保留程度的决定性因素。
通过描述30次1ml冲洗后在食管上的保留总量，可以认为，重要的是理解保留的藻酸盐在黏膜表面上如何分布。不同的制剂可保留在食管的不同区域，这对于可能用于黏膜保护的制剂的临床功效非常关键。在本发明的范围内，理想的制剂在通过胃肠时充分地溶胀，并且保留在下部食管的黏膜表面上，从而屏蔽胃回流物。
图12显示稀释剂的选择对藻酸盐在食管的上、中和下部3个区域内的保留的影响。
在食管的每个区域，悬浮在甘油中的藻酸盐比在其它稀释剂中的保留程度显著(p＜0.05)较大。类似地在下部食管中，基于70∶30(重量)的甘油∶丙二醇的制剂比除甘油外的所有其它稀释剂的保留更为显著。
还可以看出，对于悬浮在甘油或70∶30(重量)的甘油∶丙二醇的藻酸盐，在下部食管中比在上部食管中保留的藻酸盐显著(p＜0.05)较多。藻酸盐在食管的下部区域内的保留增加应当与制剂的水化有关。当制剂注射到食管中时，由于初始的蠕动波动，注射团块沿食管向下移动。到达下部食管后，由于被食管中的流体的稀释增加，所以悬浮的藻酸盐将处于最大的溶胀状态。相当大量的溶胀藻酸盐出现在下部食管中促进了粘附性和内聚性相互作用的形成，这可以解释为何藻酸盐在该区域内具有更大的保留。
如图11所示，悬浮在除甘油和70∶30重量的甘油∶丙二醇之外的稀释剂中的藻酸盐在冲洗后具有最低的保留程度。悬浮在这些稀释剂中的藻酸盐的低黏膜保留程度归因于藻酸盐不能溶胀且不能与黏膜产生必要的生物粘附性相互作用。另外，图12表明，保留在食管每个区域内的藻酸盐量没有显著差异(p＞0.05)。保留在食管内的藻酸盐的平均分布表明，甚至在下部食管中藻酸盐也不能溶胀，且不能以比上部食管更大的程度保留。这说明悬浮在40∶60(重量)的甘油∶丙二醇、丙二醇、聚乙二醇200和聚乙二醇400中的藻酸盐以相对不溶胀的状态通过食管的整个长度，不能被充分稀释、溶胀并被保留在这个位置。但是，应该清楚，如果在施用到食管之前用水稀释它们，可以显著增加使用这类其它载体时的保留程度。
结论可以通过选择稀释剂来改变食管内藻酸盐保留的分布。已经就藻酸盐在食管内的溶胀能力对此进行了讨论。悬浮甘油中的在藻酸盐在施用到食管中后溶胀能力最大，并能因此形成充分的粘附性内聚相互作用，从而保留在食管内。在下部食管中的保留最大。我们认为，这是因为藻酸盐在这个特定的通过点上处于高的溶胀状态。
实施例1～4的结论已经表明，可以调整悬浮在水溶性稀释剂中的藻酸盐颗粒的溶胀和在食管黏膜上的保留。通过选择稀释剂来进行调整，这些稀释剂表现为可以控制以下各项●引发颗粒溶胀所必需的制剂稀释量●颗粒在黏膜组织上的溶胀速率●制剂保留在黏膜表面上的启动和持续时间●藻酸盐在食管黏膜上的保留量的分布通过将藻酸钠的干燥颗粒释放进入多种水溶性稀释剂中形成制剂，这种制剂能够控制因该制剂的水化作用而产生的生物粘附性。这种现象提供了靶向作用于作为粘附位置的食管(在这些实施例中)和其它体表(在其它实施例中)的手段。非常希望能够设计这样一种制剂，该制剂在达到足够的稀释程度之前不发生溶胀，从而不引发对体表的粘附。
理想的用于在食管中保留的组合物在口腔中不溶胀，而会在正常的蠕动和胃肠道输送作用的影响下，作为一个团块沿食管壁移动。到达下部食管后，制剂开始溶胀，产生必要的粘附性和内聚性能，从而在下部食管内形成生物粘附性膜。如果生物粘附性屏障是充分一体化的，则它将可以抵抗由于唾液冲洗和蠕动所导致的溶解和崩解，从而成为保护性涂层保持在黏膜表面上。
这种类型的组合物提供了一种用来治疗/预防因胃返流导致的食管组织受损的优异手段。
上述类型的组合物还可以提供使其它活性组分延迟释放到胃肠道其它部分的手段。
上述类型的组合物在非治疗性用途中也是有用的。
权利要求
1.一种用来粘附在表面上的液体组合物，所述组合物包含悬浮在水溶性液体稀释剂中的水溶胀性聚合物颗粒，其中，所述液体稀释剂基本上没有水或包含不足以完全溶胀聚合物颗粒的量的水，其中，所述聚合物颗粒不同时包含阴离子聚合物颗粒和阳离子聚合物颗粒。
2.如权利要求1所述的组合物，其中，所述聚合物颗粒包含阴离子聚合物的颗粒。
3.如权利要求2所述的组合物，其中，所述聚合物包含藻酸盐、黄原胶或纤维素盐。
4.如权利要求3所述的组合物，其中，所述阴离子聚合物是藻酸盐。
5.如权利要求4所述的组合物，其中，所述藻酸盐是藻酸钠。
6.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中，所述聚合物颗粒具有30～500μm的平均粒径。
7.如前述权利要求中任一项所述的组合物，基于所述组合物的总重量，所述组合物包含2～90重量％的所述聚合物颗粒。
8.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中，所述液体稀释剂基本上不含水。
9.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中，所述液体稀释剂包含选自一元醇、多元醇、糖醇和糖多元醇的一种或多种物质。
10.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中，所述液体稀释剂包含多元醇。
11.如权利要求9所述的组合物，其中，所述液体稀释剂包含选自甘油、二元醇、二元醇醚或聚亚烷基二醇中的一种或多种物质。
12.如权利要求11所述的组合物，其中，所述液体稀释剂是甘油。
13.如权利要求11所述的组合物，其中，所述液体稀释剂包含与(100-x)重量份甘油混合的x重量份丙二醇，其中x是最大为30的数字。
14.如权利要求11所述的组合物，其中，所述液体稀释剂包含分子量在100～1000范围内的聚乙二醇。
15.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中，所述液体稀释剂具有不大于35(Jcm-3)1/2的希尔德布兰德溶解度参数。
16.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中，所述组合物用于治疗或预防体表的发炎、受损或疾病，所述液体稀释剂是药用的。
17.如权利要求14所述的组合物，所述组合物还包含选自止痛、杀菌、抗酸或消炎化合物中的一种或多种物质。
18.水溶胀性聚合物颗粒在制备治疗或预防体表发炎或受损的液体药物组合物中的应用，所述组合物包含悬浮在药用液体稀释剂中的所述水溶胀性聚合物颗粒，所述液体稀释剂基本上不含水或包含不足以显著溶胀聚合物颗粒的量的水，其中，所述聚合物颗粒不包含阴离子聚合物颗粒和阳离子聚合物颗粒。
19.如权利要求17所述的应用，其中，所述体表是黏膜表面。
20.如权利要求18所述的应用，其中，所述黏膜表面是食管表面。
21.一种治疗或预防体表发炎、疾病或受损的方法，所述方法包括将权利要求15或16所述的组合物施用到所述体表，其中，在进行所述方法之前或之中，所述组合物与水混合，使所述聚合物颗粒在体表附近溶胀。
22.如权利要求20所述的方法，其中，所述体表是黏膜表面。
23.如权利要求21所述的方法，其中，所述黏膜表面是食管表面。
24.如权利要求22所述的方法，其中，所述水来自唾液，所述混合在患者食管的上段发生。
25.一种用来治疗受损的或易于受损的体表的液体药物组合物，所述组合物基本上是特别参照所附实施例的本文所描述的组合物。
26.治疗体表发炎或受损的应用或方法，所述应用或方法基本上是特别参照所附实施例的本文所描述的应用或方法。
全文摘要
一种用来粘附在表面的液体组合物，该表面通常是体表，特别是黏膜表面。所述组合物包含悬浮在水溶性液体稀释剂中的水溶胀性聚合物颗粒，其中所述液体稀释剂基本上不含水或包含不足以完全溶胀聚合物颗粒的量的水。所述组合物与水混合后增稠，变得对表面的粘附性更强。于是，所述组合物易于施用，但在被处理位置上会变稠和变得具有粘附性。
文档编号A61K47/10GK1753656SQ200480004836
公开日2006年3月29日 申请日期2004年2月13日 优先权日2003年2月20日
发明者乔纳坦·克雷格·里查森, 科林·戴维·梅利亚, 彼得·威廉姆·德埃忒玛, 弗兰克·C·汉普森, 伊恩·G·乔利夫 申请人:雷克特本克斯尔保健(英国)有限公司