专利名称：Cci－779冻干制剂的制作方法
背景技术：
CCI-779是雷帕霉素的42-双-羟甲基丙酸酯，在抗癌、多发性硬化和风湿性关节炎的活性临床试验中正在对其进行评价。与细胞毒素特性相反，CCI-779表现细胞生长抑制，并且可以延迟肿瘤发展的时间或肿瘤复发的时间。CCI-779被认为具有与西罗莫司(雷帕霉素)相同的作用机理。CCI-779结合于胞质蛋白FKBP并与之形成复合体，而所述复合体能够抑制酶，mTOR(雷帕霉素的哺乳动物靶点，所述雷帕霉素也被称作相关蛋白的FKBP12-雷帕霉素[FRAP])。mTOR′s激酶活性的的抑制，也就抑制了各种信号转导通路，包括细胞活素激活的细胞增殖，调节细胞周期G1期的一些关键蛋白质的mRNAs的转录，和IL-2诱导的转录，导致细胞周期由G1向S进展的抑制。导致Gi到S期阻断的CCI-779的作用机理对于抗癌药物是新的。
在体外，CCI-779已经被证明能够抑制若干组织学上不同肿瘤细胞的生长。中枢神经系统(CNS)癌、白血病(T细胞)、乳房癌、前列腺癌和黑素瘤系属于对CCI-779最敏感之列。该化合物抑制细胞周期的G1期中的细胞。
在裸鼠中进行的体外研究证明，CCI-779对不同的组织学类型的人类肿瘤异种移植物具有活性。胶质瘤对于CCI-779特别敏感，并且该化合物在裸鼠原位胶质瘤模型中具有活性。生长因子(血小板衍生的)诱导的人类成胶质细胞瘤细胞系的兴奋在体外显著地受到CCI-779的抑制。在体外进行的研究中，裸鼠中的一些人类胰腺肿瘤的生长以及两个乳房癌系中的一个也受到CCI-779的抑制。
导致难以制成效果良好的口服和液体剂型的CCI-779的物理化学特性，包括归因于若干机理的在水中的弱溶解性和化学不稳定性。
发明概述本发明提供了CCI-779冻干制剂，所述制剂克服了现有技术中CCI-779制剂的不良物理化学特性。所得冻干制剂可用于制备适于经由肠胃外途径给药的剂型，或者作为口服递送的中间产品。
通过下面的详细描述，本发明的其它方面和优点将是显而易见的。
发明详述本发明提供了预先冻干制剂，所述制剂提供本发明的在储存条件下具有改进的效力保持力和稳定性的冷冻干燥的CCI-779。更为特别地是，使用本发明的预先冻干制剂，发现冷冻干燥的CCI-779在40℃储存一个月后和在室温储存六个月后能够保持大于95％的初始效力。本发明还提供了适于肠胃外递送或者通过其它递送途径的重新配制的CCI-779制剂。
U.S.专利5,362,718描述了CCI-779的制备，在此引用作为参考。US专利6,277,983描述了CCI-779的区域选择性制备，在此引用作为参考。
通过将CCI-779溶解于适宜的有机溶剂或有机溶剂与水的混合物中，形成本发明CCI-779的预先冻干溶液。适宜地，溶剂具有充分挥发性，以便在商业冷冻干燥器中使用的标准温度和压力下是可以除去的。另外，CCI-779在有机溶剂或溶剂-水混合物中的溶解度足够高，以便能够制备足够浓的使药物得以实际应用的材料。通常，预先冻干的溶液中的CCI-779的浓度为0.1-250mg/mL，以提供适于制备CCI-779的1-500mg剂量的CCI-779冻干形式。有效溶剂的实例包括二甲亚砜、乙腈、乙醇、异丙醇、叔丁醇和只含有上述溶剂或者含有上述溶剂与水的混合物。这些溶剂中，叔丁醇是优选的。预计乙醇也是特别合乎要求的，因为与叔丁醇类似，其具有低的相对毒性级，能够与水混合并且于低温在真空下可以被除去。
这些溶剂或含有这些溶剂的混合物以约30％至约40％、至约50％、至约60％、至约70％、至约80％、至约90％、至约95％、至约100％v/v的量存在，虽然可以选择较低量的单一溶剂来构成混合物以提供混合物，从而提供在提供的范围内的溶剂总量。水可以以溶剂混合物的约0％-约70％v/v的量存在。然而，优选地，溶剂混合物含有小于40％v/v(即0％w/v-40％v/v的水)，优选小于30％v/v的水(即0％v/v-30％v/v的水)，所述v/v％是基于总溶液计的。
合乎要求地是，当大量的水(例如40％v/v或更高)存在于预先冻干的溶液的溶剂混合物中时，将pH调节至4-6是有利的，因为这是CCI-779的最大稳定性的范围。在一个实施方案中，将pH调节至约5.5的pH。
在某些实施方案中，预先冻干溶液还可以包含填充剂或抗氧化剂。这些组分可以由本领域技术人员根据选择的溶剂或溶剂混合物容易地加以选择。特别是，典型的水溶性填充剂例如糖或多元醇的溶解度由于有机溶剂的存在而降低。在这些实施方案中，使用有机溶剂与水的混合物，并用有效浓度的添加物质调节组成以平衡药物的足够浓度。适宜的填充剂包括甘露糖醇和蔗糖。另外，任选的材料包括聚乙烯吡咯烷酮、葡聚糖、淀粉、乳糖、海藻糖或羟乙基淀粉和甘油。可以使用上述填充剂的组合。可以将填充剂以0.5-10％w/v的范围使用于预先冻干的溶液中。
任选地，本发明预先冻干的溶液含有抗氧化剂组分，其浓度范围为0.001％-1％w/v或0.01％-0.5％w/v，虽然可以期望更低或更高的浓度。适宜的抗氧化剂和最佳浓度的实例包括BHT(0.005-0.02％w/v)、BHA(0.005-0.02％w/v)、α-生育酚(0.05-0.075％w/v)、抗坏血酸(0.02-0.5％w/v)、异抗坏血酸(0.1-1.0％w/v)、二硫苏糖醇(0.01-0.1％w/v)、二硫赤藓糖醇(0.01-0.1％w/v)、谷胱甘肽(0.01-0.1％w/v)、棕榈酸抗坏血酸酯(0.01-0.02％w/v)、一硫代甘油(0.1-0.5％w/v)、没食子酸丙酯(0.05-0.1％w/v)、亚硫酸氢钠(0.05-1.0％w/v)、偏亚硫酸氢钠(0.025-0.1％w/v)。
在某些实施方案中，本发明制剂的抗氧化剂组分还显示螯合活性。这样的螯合剂的实例包括例如柠檬酸、琥珀酸、苹果酸、马来酸、丙二酸、戊二酸、己二酸。抑制金属催化的反应但不必须起螯合剂作用的其它酸化剂包括乙酸和抗坏血酸(0.001-0.01％w/v)(其在本发明制剂中起典型的抗氧化剂作用并抑制金属的催化作用)。其它螯合剂包括能够结合溶液中的金属离子的材料，例如能够提高CCI-779溶解度的乙二胺四乙酸(EDTA)及其盐(0.002-0.1％w/v)、甘氨酸、谷氨酸或其它氨基酸(0.002-0.1％w/v)。
在某些实施方案中，将具有螯合活性的组分作为单独的“抗氧化剂组分”包含于本发明制剂中。通常，这样的金属结合组分，当作为螯合剂时，是以本文提供的抗氧化剂组分的浓度范围的下限使用的。在一个实例中，当以小于0.01％w/v的浓度使用时，柠檬酸提高CCI-779的稳定性。高浓度产生低稳定的溶液，并由此导致产物不合乎以液体形式进行长期储存的要求。另外，可以将这样的螯合剂与作为本发明抗氧化剂组分的部分的其它抗氧化剂联合使用。例如，可接受的制剂可含有柠檬酸和d，l-α-生育酚。选择的抗氧化剂的最佳浓度可以由本领域技术人员根据本文提供的信息容易地加以确定。在预先冻干溶液中，将所有百分比表示为％w/v。
合乎需要地，预先冻干的溶液具有4-6的pH，而本发明者们发现所述pH范围能够改善CCI-779的稳定性。根据预先冻干溶液的组分，可以使用任何适宜的无机或有机酸或者碱(按照需要)来调节pH。其后，将预先冻干溶液进行冷冻。
可以使用商业冷冻干燥器来进行冷冻干燥，这样的干燥器可以由众多供应商处获得，并使用制造商推荐的操作指南。合乎需要地，将产物冷冻干燥以使冻干的产物含有小于1％w/v的溶剂/稀释剂。在一个实例中，将产物在约20℃投料，在约-40℃以30度/小时进行冷冻；于-40℃保持6小时，然后通过将搁架温度升至-20℃并保持2-8小时将冷冻的溶液进行热处理。或者，通过使温度由-40℃至-5℃并回到-20℃循环，将冷冻的溶液进行热处理。其后，启动冷凝器并调节真空(例如至100毫托)并将搁架温度升至+10℃。任选地，当产物温度达到+10℃时，将产物进行二次干燥。这样的二次干燥可以在当搁架温度达到约40℃时开始。将二次干燥在压力例如约100毫托下进行过夜(例如约12-18小时)或最长达约24小时。或者，可以将该步骤进行更短或更长的时间。适宜地，冷冻干燥产生的产物所具有的残余溶剂的量小于冻干的CCI-779中的固体最终重量的1％重量。除了第二步骤以外或者作为第二步骤的替代，可以使用其它处理技术来进一步降低所得冻干的原料中的残余溶剂。这样的处理技术包括氮气吹扫。
有利地是，本发明冻干的CCI-779在各种储存条件下能够长期保持高于95％的效力。这种冻干组合物可用于制备递送给个体的各种剂型，并且以液体和口服剂型为特别有利。
当制备用于重新配制的冷冻干燥的CCI-779时，选择适宜的溶剂。用于重新配制的有效溶剂是生物相容的，以较小的体积溶解足够量的药物，并且在注射到体液或稀释于静脉内输注溶液的过程中避免药物的沉淀。在一个实施方案中，将肠胃外可接受的两亲性化合物与水、有机溶剂或水与有机溶剂的混合物合并。适宜的两亲性化合物的实例包括聚山梨醇酯20、60或80，乙氧基化油例如PEG-35蓖麻油(例如Cremophor EL)，脂肪酸PEG酯例如Solutol HS，]，维生素E生育酚丙二醇琥珀酸酯(维生素E TPGS)，蔗糖脂肪酸酯，胆汁盐，磷脂和胆汁盐与磷脂的组合。重新配制溶剂中的两亲化合物的浓度为2％-100％w/v。或者，在某些实施方案中，可以将两亲化合物与预先冻干制剂中的CCI-779混合。在这样的实施方案中，可以使用水或水与有机溶剂的组合来完成重新配制。
当按照本发明将CCI-779重新配制时，重新配制制剂所含CCI-779的浓度为0.05mg/mL、2.5mg/mL、5mg/mL或10mg/mL至最高达约50mg/ml。可以将浓缩物与稀释剂混合，以最高达约1份浓缩物与1份稀释剂的比例混合，以产生CCI-779浓度为1mg/mL、5mg/mL、10mg/mL、20mg/mL至最高达约25mg/ml的制剂。本发明也包括在助溶剂浓缩物中具有较低浓度的CCI-779的制剂，和其中将1份浓缩物与大于1份稀释剂混合的制剂，例如浓缩物∶稀释剂的比例为约1∶1.5、1∶2、1∶3、1∶4或1∶5v/v等等，至CCI-779制剂具有低至最低检测水平的CCI-779浓度。适宜的稀释剂可以由本领域的技术人员根据递送途径而容易地加以选择。例如，稀释剂可以是水、主要成分为水，例如葡萄糖溶液、盐水、缓冲盐水、0.9％氯化钠注射液、5％葡萄糖注射液、乳酸盐林格注射液或非水的。
在一个实施方案中，将冻干的CCI-779用含有5-10％w/v聚山梨醇酯80或约8％w/v聚山梨醇酯80、35-45％w/v脱水酒精或约40％w/v脱水酒精且其余为水的稀释剂重新配制，以制得具有5-10mg/mL CCI-779的浓缩物，用于肠胃外途径给药。或者，将冻干的CCI-779用约5-10％w/v聚山梨醇酯80和水重新配制，用于通过肠胃外途径给药。任选地，将重新配制的浓缩物用氯化钠溶液稀释，以提供用于注射的所需CCI-779浓度。
本发明重新配制制剂可用于制备肠胃外剂型。这样的剂型可以适于通过直接注射给药或者通过加到用于静脉内输注的无菌输液中来给药。
US专利申请10/626,943及其相应的国际专利申请WO2004/011000提供了适宜的肠胃外剂型的实例。
US专利申请10/626,943和国际专利出版物WO 2004/011000公开了用于具有3-羟基-2-(羟基甲基)-2-甲基丙酸的雷帕霉素42-酯的特别合适的可注射制剂，在此引用作为参考。
在该实施方案中，用于本发明的可注射制剂提供了含有肠胃外可接受的溶剂和上述抗氧化剂的CCI-779助溶剂浓缩物以及含有CCI-779的肠胃外制剂，所述制剂由CCI-779、肠胃外可接受助溶剂、抗氧化剂、稀释溶剂和表面活性剂组成。用于本发明的任何给定制剂可以含有每一种类组分的多个组分。例如，肠胃外可接受溶剂可以包括非醇类溶剂、醇类溶剂或它们的混合物。适宜的非醇类溶剂的实例包括例如二甲基乙酰胺、二甲亚砜或它们的混合物。“醇类溶剂”可含有一种或多种醇作为制剂的醇类溶剂组分。可用于本发明制剂的溶剂的实例包括但不限于乙醇、丙二醇、聚乙二醇300、聚乙二醇400、聚乙二醇600、聚乙二醇1000或它们的混合物。乙醇和丙二醇是特别合乎需要的，因为对于这些助溶剂来说，经由氧化作用和内酯环开裂而引起的降解在较低程度上发生。而且，可以将乙醇和丙二醇联合使用。
有利地，在用于本发明的肠胃外制剂的某些实施方案中，通过使用包含于稀释剂溶液中的表面活性剂，可以避免在用输注水溶液或血液稀释时CCI-779发生沉淀。一种特别合乎需要的表面活性剂是聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。然而，本领域的技术人员可以容易地选择其它适宜的表面活性剂。稀释剂的其它组分可包括水、乙醇、聚乙二醇300、聚乙二醇400、聚乙二醇600、聚乙二醇1000，或含有一种或多种这些聚乙二醇、丙二醇和其它肠胃外可接受的助溶剂或用于调节溶液的重量克分子渗透浓度的物质的混合物，所述用于调节溶液的重量克分子渗透浓度的物质是例如氯化钠、乳糖、甘露醇或其它肠胃外可接受的糖、多元醇和电解质。预计表面活性剂将占稀释剂溶液的2-100％w/v、5-80％w/v、10-75％w/v、15-60％w/v，优选占稀释剂溶液的至少5％w/v或至少10％w/v。
可以将用于本发明的肠胃外制剂制备为单一溶液，或者优选制备为含有CCI-779、醇类溶剂和抗氧化剂的助溶剂浓缩物，随后将所述助溶剂浓缩物与含有稀释溶剂和适宜的表面活性剂的稀释剂混合。
可以将用于本发明的肠胃外制剂用来制备适合于经由直接注射给药或通过加到用于静脉内输注的无菌输注液体中来给药的剂型。
在某些情况下，将化合物以气雾剂的形式直接给药于气道，可以是合乎需要的。
或者，可以将本发明的重新配制制剂用来制备适合于口服给药的剂型。US专利申请10/663,506及其相应的国际专利申请WO2004/026280；US专利6,197,781和US专利6,004,973提供了适宜的口服剂型，本文将其引用作为参考。这样的口服剂型含有CCI-779、水溶性聚合物、pH调节剂、表面活性剂和抗氧化剂。
可以将本发明组合物以药盒部分的形式制备。这样的药盒用于制备含水药物组合物。通常，所述药盒至少包含具有本发明冻干CCI-779组合物的第一容器，和具有其生理学可接受的溶剂的第二容器。其它组成部分可以包括小瓶，搅拌器，盖子，关于重新配制、混合、储存和/或使用的说明书。任选地，在具有冻干或重新配制的CCI-779的方案中，也可以施用其它活性组分。本发明还包括药物包装，其包含用于一个体哺乳动物的一个疗程的药物，其中药物包装包括CCI-779和一个或多个上述药盒组成部分。
下面的实施例举例说明本发明。本发明并非限制于此中所描述的百分比、组分和技术。
实施例实施例1-8提供本发明例证性预先冻干制剂，所述制剂已按照本发明方法冷冻干燥。
实施例1
将上面溶液过滤，填充到玻璃小瓶并冷冻干燥以除去叔丁醇-水混合物。塞住之前将小瓶用氮气回填。X-射线衍射花样显示所得材料主要是无晶形的。于40℃储存5个月后，发现冷冻干燥的材料保持高于98％的效力。
实施例2
将上面溶液过滤，注入玻璃小瓶并冷冻干燥以除去叔丁醇-水混合物。塞住之前将小瓶用氮气回填。X-射线衍射花样与冷冻干燥的甘露糖醇对照制剂十分一致，没有明显的晶体药物。于40℃储存一个月后和室温储存6个月后，发现冷冻干燥的材料保持大于95％的初始效力。
实施例3
在上式中，较低浓度的叔丁醇可以容许将大量的填充剂甘露糖醇掺加到预先冻干的溶液中。在一个实验中，将含有2％w/v甘露糖醇的溶液过滤，填充到玻璃小瓶中并冷冻干燥以除去叔丁醇-水混合物。塞住之前将小瓶用氮气回填。X-射线衍射花样与冷冻干燥的甘露糖醇对照制剂十分一致，没有明显的晶体药物。
在实施例1和3(实施例3使用5％w/v甘露糖醇)中，使用在100毫托压力下于40℃温度进行的二次干燥进行干燥最长达24小时，以除去残余叔丁醇，使残余叔丁醇的量达到小于固体最终重量的1％的水平。
实施例4-8例证说明本发明其它预先冻干制剂。
实施例4
如这些实施例中所用，脱水酒精，USP，含有不低于98％体积的乙醇(乙基醇)。
实施例5
实施例6
实施例7
实施例8
将上面溶液过滤，填充到玻璃小瓶内并冷冻干燥以除去乙醇-水混合物。在塞住之前将小瓶用氮气回填。X-射线衍射花样预料显示所得材料主要是非晶形的。在40℃储存几个月后，冷冻干燥的材料预计保持效力。
实施例9和10例证说明用于经由肠胃外途径给药的CCI-779冻干制剂的重新配制。
实施例9
把上面的稀释剂加到实施例3中以制得10mg/mL的CCI-779重新配制溶液。可以用0.9％的氯化钠注射液将重新配制的溶液进行1∶10的稀释以制得没有可见沉淀物的混合物。
在某些实例中，用具有较高水含量的稀释剂，以低于预先冻干的溶液的浓度，重新配制冷冻干燥的材料实施例10
将上面的稀释剂加到实施例2中以制得5mg/mL的CCI-779重新配制溶液。可以将溶液直接注射或者稀释到用于静脉内输注的0.9％氯化钠注射液中。
将本文所确认的文献引用作为参考。本文所描述的技术和组分的各种修改对于本领域的技术人员来说是显而易见，并且是包含于下面权利要求的范围之内的。
权利要求
1.用于制备冷冻干燥的CCI-779的溶液，所述溶液包含0.1mg/mL-250mg/mL CCI-779和至少30％v/v的选自下列的溶剂二甲亚砜、乙腈、乙醇、异丙醇、叔丁醇和它们的混合物，所述混合物任选还含有水。
2.权利要求1的溶液，其中所述溶液包含40％v/v的水并且具有4-6的pH。
3.权利要求1的溶液，其中所述溶液包含40％-70％v/v的溶剂。
4.权利要求1的溶液，其中所述溶剂包含叔丁醇。
5.权利要求1的溶液，其中所述溶剂是乙醇。
6.权利要求4的溶液，其中所述溶剂包含40-60v/v％的在水中的叔丁醇。
7.权利要求1的含有水的溶液，其中pH为约5.5。
8.权利要求1-7任一项的溶液，所述溶液包含10mg/mL-100mg/mL CCI-779。
9.权利要求1-8任一项的溶液，其中所述溶液还包含2-5％w/v的填充剂。
10.权利要求9的溶液，其中所述填充剂是甘露糖醇。
11.权利要求1-10任一项的溶液，其中所述溶液还包含抗氧化剂。
12.制备CCI-779冻干制剂的方法，所述方法包括冷冻干燥权利要求1-11任一项的溶液的步骤。
13.制备CCI-779冻干制剂的方法，所述方法包括以下步骤(a)制备pH为4-6，并且包含10mg/mL-100mg/mL CCI-779、2-5％w/v的甘露糖醇和在水中的叔丁醇的溶液；和(b)冷冻干燥所述溶液以形成冻干的CCI-779。
14.通过冷冻干燥权利要求1-11任一项的溶液而形成的CCI-779冻干制剂。
15.制备用于以液体形式递送的CCI-779的方法，所述方法包括用肠胃外可接受的溶剂重新配制CCI-779以形成浓的CCI-779溶液，并将所述浓溶液与含有水的稀释剂混合以形成CCI-779的液体剂型的步骤。
16.权利要求15的方法，其中所述稀释剂还包含5-8％w/v的聚山梨醇酯80。
17.权利要求15或16的方法，其中所述稀释剂还包含脱水酒精。
18.权利要求15的方法，其中将所述浓溶液用0.9％氯化钠溶液进行1∶9的稀释。
19.通过权利要求15-18任一项的方法形成的CCI-779的液体剂型。
20.提高CCI-779的储存稳定性的方法，所述方法包括将溶液冻干的步骤，所述溶液包含25mg/mL-100mg/mL CCI-779、叔丁醇并且具有4-6的pH。
21.权利要求20的方法，其中所述溶液还包含2-5％w/v的甘露糖醇。
22.包括装有权利要求14的冻干CCI-779和用于将其重新配制的溶剂的容器的药盒。
全文摘要
本申请公开了CCI－779冻干制剂和用于制备冷冻干燥的CCI－779制剂的溶液，所述溶液由CCI－779和选自二甲亚砜、乙腈、乙醇、异丙醇或叔丁醇的溶剂组成。还提供了制备CCI－779冻干制剂的方法，重新配制所述制剂的方法以及所述制剂的应用。
文档编号A61K47/20GK1829514SQ200480021450
公开日2006年9月6日 申请日期2004年7月15日 优先权日2003年7月25日
发明者J·T·鲁比诺 申请人:惠氏公司