专利名称：用作放射指示剂和显象剂的吡啶基乙炔类化合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的吡啶基乙炔衍生物、它们的制备、它们作为放射指示剂/标记物的用途以及包含它们的组合物。
更具体地说，本发明提供了游离碱形式或酸加成盐形式的式I化合物 其中R为CH3、(CH2)nI、(CH2)nBr或(CH2)nF，n为1、2、3或4。
优选如下游离碱形式或酸加成盐形式的式I化合物，其中R为11CH3、(3H)3C、(CH2)n123I、(CH2)n76Br或(CH2)n18F，n为1、2、3或4。
在可能的立体异构现象中，例如双键的顺/反异构，化合物能以纯立体异构体或其混合物存在。
另一方面，本发明提供了生产式I化合物和其盐的方法，其包括如下步骤a)对于式Ia化合物的生产 其中Ra分别为11CH3或(3H)3C，
将式II化合物在碱存在的条件下，分别与11CH3I或C(3H)3I反应， 或者b)对于式Ib化合物的生产 其中Rb分别为(CH2)n18F、(CH2)n123I或(CH2)n76Br，将式III化合物分别与18F、123I或76Br反应， 其中n如上文所定义，X为OTs或OMs，或将式II化合物与式IV化合物反应X-RbIV其中X和Rb如上文所定义，并回收所形成的游离碱形式或酸加成盐形式的式I化合物。
这些反应可根据已知的方法，例如按照实施例中描述的那样进行。
反应混合物的后处理以及所得到的化合物的纯化可以根据已知的方法进行。
酸加成盐可用已知的方法从游离碱制得，反之亦然。
式II、III和IV的起始原料是已知的，或可用与已知方法类似的方式获得，如实施例中描述的那样。
游离碱形式或酸加成盐形式的式I化合物(在下文中称为本发明的物质)呈现可作为组织病理标记物、显象剂和/或生物标记物(在下文中称为“标记物”)的有价值的性质，可用于选择性地标记代谢型谷氨酸受体亚型5(mGlu5受体)。
更具体地说，本发明的物质可在体外和体内用作标记中枢和外周mGlu5受体的标记物(参阅实施例5-7)。
所以，本发明的物质可用于确定作用于mGlu5受体的药物的受体占据水平，或用于诊断由于mGlu5受体失调或功能异常而导致的疾病，以及用于监察所述疾病的药物治疗有效性。
如上所述，本发明提供了用作神经显象标记物的本发明的物质。
另一方面，本发明提供了用于在体内和体外标记涉及mGlu5受体的脑和外周神经系统结构的组合物，该组合物包含本发明的物质。
另一方面，本发明还提供了用于在体内或体外标记涉及mGlu5受体的脑和外周神经系统结构的方法，该方法包括用本发明的物质接触脑组织。
本发明的方法还可以包括确定是否本发明的物质已标记靶结构的步骤。所述步骤可通过使用正电子发射断层成像术(PET)或单光子发射计算机断层成像术(SPECT)或使用任何允许进行放射性辐射检测的仪器观察靶结构来进行。
下面的实施例举例说明了本发明。
实施例13-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-环己-2-烯酮O-[11C-甲基]-肟将[11C]-MeI与3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-环己-2-烯酮肟的钠盐(1mg)在干燥的DMF(400μl)中反应以合成3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-环己-2-烯酮O-[11C-甲基]-肟。[11C]-MeI是通过慢速的氦气流引入的，加完后将反应混合物加热至120℃，保持10分钟。产物的纯化是通过反相高效液相色谱法完成的，使用C-18 μ-Bondapak色谱柱(7.8×300mm)，流动相为CH3CN/0.1％ H3PO4(70/30)，流速为5ml/min。目标产物的保留时间在6分钟至7分钟之间。
在包含吐温(2％)、乙醇(10％)和盐水(0.9％)的溶液中配制3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-环己-2-烯酮O-[11C-甲基]-肟。
LogD＝2.5(用经典的摇瓶法测定)。
起始原料用下文描述的方法制备a)3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-环己-2-烯酮将2-乙炔基-6-甲基-吡啶(702mg，6mmol)、3-溴-环己-2-烯酮(1.26g，7.2mmol)、二-(三苯膦)-钯-二氯化物(168mg，0.24mmol)、碘化亚铜(93mg、0.48mmol)、三乙胺(4.8ml，34.4mmol)在12ml DMF中的溶液加热至55℃，保持1小时。然后将溶液用乙酸乙酯(500ml)稀释，并用饱和NaHCO3水溶液(1×150ml)洗涤。水相用乙酸乙酯(1×150ml)萃取，合并的有机相用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。残余物(1.88g)用柱色谱法进行纯化(硅胶，洗脱剂己烷/乙酸乙酯3∶1v/v)，收集包含目标化合物的级分，真空浓缩得到1.05g(收率为82％)淡黄色油状的标题化合物。
b)3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-环己-2-烯酮肟将3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-环己-2-烯酮(422mg，2mmol)和羟基胺盐酸盐(278mg，4mmol)在吡啶(20ml)中的溶液在室温下搅拌17小时。然后将溶剂真空蒸发。残余物溶解在乙酸乙酯(300ml)中并用饱和NaHCO3(1×50ml)洗涤。水相用乙酸乙酯(1×50ml)萃取，合并的有机相用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。残余物(0.45g)用柱色谱法进行纯化(硅胶，洗脱剂己烷/乙酸乙酯2∶1v/v)，收集包含目标化合物的级分，真空浓缩得到0.192g(收率为42％)淡黄色结晶状的标题化合物，熔点为166-168℃。
实施例23-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-环己-2-烯酮O-[三(3H)-甲基]-肟将3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-环己-2-烯酮肟与[3H]-MeI(0.5当量)在K2CO3存在的条件下，在DMF中于100℃反应180分钟，随后用反相色谱法进行纯化，制得标题化合物。
实施例33-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-环己-2-烯酮O-(2-[18F-氟]-乙基)-肟将3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-环己-2-烯酮肟的钠盐(2mg)在干燥的DMF(400μl)中与[18F]-2-氟-乙基甲苯磺酸酯(从乙烯二甲苯磺酸酯和[18F]-KF-Kryptofix络合物获得)在100℃下反应10分钟。反应混合物用tC-18 Sep-Pak色谱柱进行纯化，包含目标化合物的级分进一步用半制备反相HPLC法进行纯化，使用C18 Bondclone柱(300×7.8mm)，流动相为CH3CN/0.01M H3PO4(70/30)，流速为4ml/min。含有产品的级分(保留时间在12分至13分之间)通过tC-18 Sep-Pak色谱柱，并用1ml乙醇进行洗脱。该醇溶液用0.15M的磷酸盐缓冲液缓冲，无菌过滤后得到等渗和可注射的溶液。
实施例43-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-环己-2-烯酮O-[18F-氟]-甲基)-肟3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-环己-2-烯酮的钠盐(2mg)在干燥的DMF(400μl)中，在100℃下与[18F]CH2OTf反应30分钟。在将反应混合物通过tC-18 Sep-Pak色谱柱进行最初的纯化后，3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-环己-2-烯酮O-[18F-氟]-甲基-肟用半制备反相HPLC法进行最后的纯化，使用C18 Bondclone柱(300×7.8mm)，流动相为CH3CN/0.01M H3PO4(70/30)，流速为4ml/min。产品用3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-环己-2-烯酮O-(2-[18F-氟]-乙基)-肟类似的方法进行配制(实施例3)。
实施例5Ki/IC50测定(结合试验)在体外实验中，使用Gasparini等人在Biorg.Med.Chem.Lett.2002，12，407-409中描述的放射配体置换技术测定与mGlu5受体的亲和力。结果表明，对于从稳定表达人mGlu5受体的L-tk细胞膜(Daggett等人，Neuropharm.1995，34871-886)置换[3H]-2-甲基-6-((3-甲氧基苯基)乙炔基)-吡啶而言，3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-环己-2-烯酮O-甲基-肟的IC50为8nM(Hill系数为1.08；95％置信区间为6.0-10.0nM)。使用Cheng-Prusoff方程，通过计算得出Ki为4nM(试验所用的放射配体浓度为2nM)。
实施例6器官和脑结构分布用两组体重为250-300g的雄性成年Sprague-Dawley大鼠进行生物分布研究。第一组(n＝3)作为对照组，第二组(n＝3)作为阻断组。每只动物由一侧尾静脉接受250-300pmol(0.6-40MBq)的3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-环己-2-烯酮O-[11C-甲基]-肟。阻断组共同注射2-甲基-6-((3-甲氧基苯基)乙炔基)-吡啶(1mg/kg)，而对照组(n＝3)只给予相应体积的0.9％NaCl。动物在注射后30分钟处死。器官或脑部区域如海马、纹状体、皮质、小脑被取出，并用γ计数器测量。组织分布以每克湿组织注射的剂量的百分数表示(％注射的剂量/克器官)。
实施例7用3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-环己-2-烯酮O-[11C-甲基]-肟进行的脑分布研究的结果下表展示了归一化的每克组织注射剂量的百分数。K1、K2、K3为对照动物的个体值。B1、B2、B3为共同注射2-甲基-6-((3-甲氧基苯基)乙炔基)-吡啶的动物的个体值。
权利要求
1.游离碱形式或酸加成盐形式的式I化合物 其中R为CH3、(CH2)nI、(CH2)nBr或(CH2)nF，n为1、2、3或4。
2.游离碱形式或酸加成盐形式的权利要求1的化合物，其中R为11CH3、(3H)3C、(CH2)n123I、(CH2)n76Br或(CH2)n18F，n为1、2、3或4。
3.如权利要求1所定义的式I化合物或其盐的生产方法，其包括如下步骤a) 对于式Ia化合物的生产 其中Ra分别为11CH3或(3H)3C，将式II化合物在碱存在的条件下，分别与11CH3I或C(3H)3I反应， 或者b)对于式Ib化合物的生产 其中Rb分别为(CH2)n18F、(CH2)n123I或(CH2)n76Br，将式III化合物分别与18F、123I或76Br反应， 其中n如权利要求1所定义，X为OTs或OMs，或将式II化合物与式IV化合物反应X-RbIV其中X和Rb如上文所定义，并回收所形成的游离碱形式或酸加成盐形式的式I化合物。
4.用作神经显象的标记物的如权利要求1所定义的游离碱形式或酸加成盐形式的式I化合物。
5.用于在体内和体外标记涉及mGlu5受体的脑和外周神经系统结构的组合物，其包含如权利要求1所定义的游离碱形式或酸加成盐形式的式I化合物。
6.在体内和体外标记涉及mGlu5受体的脑和外周神经系统结构的方法，该方法包括将脑组织与权利要求1所定义的游离碱形式或酸加成盐形式的式I化合物接触。
全文摘要
本发明涉及式I的新的吡啶基乙炔衍生物，它们的制备，它们作为放射指示剂/标记物的用途，以及包含它们的组合物。
文档编号A61K31/44GK1856468SQ200480027309
公开日2006年11月1日 申请日期2004年9月24日 优先权日2003年9月26日
发明者F·加斯帕里尼, Y·奥贝松, L·凯斯勒, S·M·阿梅塔梅 申请人:诺瓦提斯公司