专利名称：4－氨基－5－氯－2－甲氧基－n－(1－氮杂双环[3.3.1]壬－4－基)苯甲酰胺盐酸盐水 ...的制作方法
技术领域：
本发明提供了一种制备形式II的伦扎必利(renzapride)盐酸盐水合物的方法。本发明还提供了含量75％或更高的结晶形式II的伦扎必利盐酸盐水合物以及其作为药物的用途。
EP-A-94742公开了取代的氮杂双环化合物--(±)-4-氨基-5-氯-2-甲氧基-N-(1-氮杂双环[3.3.1]壬-4-基)苯甲酰胺，已知其通用名为伦扎必利(也被称作伦扎必利游离碱)。该取代的氮杂双环化合物可用于治疗与胃肠道蠕动相关的障碍，例如迟缓性胃排空、消化不良、肠胃气胀、食管回流、和消化性溃疡，所述化合物还可用于治疗呕吐以及中枢神经系统疾病。
本发明人发现伦扎必利盐酸盐水合物还可以有效治疗肠易激综合征(IBS)、便秘、胃轻瘫以及腹痛和不适。
伦扎必利的盐酸盐(伦扎必利盐酸盐)优选为游离碱形式，这是因为其游离碱具有改善的稳定性。
EP-A-0239321公开了伦扎必利盐酸盐的水合物形式，相对于无水伦扎必利盐酸盐而言，该水合物形式具有改善的操作性和稳定性。
伦扎必利盐酸盐EP-A-94742公开了形成上述取代的氮杂双环化合物的一般方法。
伦扎必利盐酸盐水合物所具有的5-HT4受体激动剂以及5-HT2B和5-HT3受体拮抗剂活性使得其成为理想的候选药物。应该理解的是，可用作药物的化合物需要具备一定的特性。除了生理活性之外，这类化合物还必须具有其它特性，例如良好的溶解性、稳定性以及便于制剂等。
本发明人已经鉴定出伦扎必利盐酸盐水合物的一种新结晶形式，这种新结晶形式为其用作药物提供了改良特性。这种新结晶形式被称作形式II。
因此，本发明第一方面提供了一种制备形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的方法，所述方法包括在含有水和水混溶性溶剂的溶液中温育伦扎必利，接着向该伦扎必利溶液中加入浓盐酸，然后通过过滤分离得到形式II的伦扎必利盐酸盐水合物。用于实现本发明目的的所述水混溶性溶剂可以是四氢呋喃(THF)、丙酮和/或醇中的一种或多种。所述醇优选为甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇或叔丁醇中的一种或多种，更优选为乙醇。
该水/水混溶性溶剂溶液优选含有3％-15％的水，更优选含有5％-10％的水，最优选含有8％或者更多的水。
伦扎必利在水/水溶剂溶液中的温育优选通过搅动(agitation)进行，更优选通过搅拌(stirring)进行。伦扎必利溶液可以在20-25℃下温育。当然，也可以将伦扎必利溶液加热，以使伦扎必利溶解在水/水混溶性溶剂溶液中。优选最开始将伦扎必利溶液在20-25℃下温育例如15-30分钟，接着通过加热(例如回流)使其溶解进行温育。
伦扎必利在水/水混溶性溶剂溶液中温育后，所得溶液可以过滤除去所有的微粒物质。
向该伦扎必利溶液中加入盐酸优选在60-70℃下进行。然后可以将反应混合物的温度降低至室温，更优选20-25℃，同时温育一个或多个1-2小时的时间段。反应混合物还可以继续在0-5℃下温育一个或多个1-2小时的时间段。
为了将产物中的溶剂含量(例如乙醇含量)调节至商业用途上可接受的水平，同时保持最终的形式II产物不变，如果需要的话，可以将分离后的形式II的伦扎必利盐酸盐水合物真空干燥，以使溶剂例如乙醇的含量降低至＜3％，并且将所得到的固体暴露于封闭区的水(优选纯净水)中。
为了将产物中的溶剂例如乙醇含量从大约3％(w/w)调节至商业用途上可接受的水平，优选可以将分离后的形式II的伦扎必利盐酸盐暴露于水中而不必真空干燥，优选可以将该形式II的伦扎必利盐酸盐暴露于封闭区的纯净水中。对于本发明目的而言，所述商业用途上可接受的水平是指1％(w/w)或更低的溶剂含量，优选0.1％(w/w)或更低的溶剂含量。
伦扎必利可以按照EP-A-94742和/或GB0321091.1中的方案制备。对于本发明目的而言，术语伦扎必利是指如下所示的游离碱 伦扎必利(游离碱)并且伦扎必利盐酸盐是指如下所示的伦扎必利盐酸盐。
伦扎必利盐酸盐优选通过将取代苯基(11)与胺(14)缩合得到缩合产物(8)制备伦扎必利。特别地，可以将该取代苯基(11)活化为例如酰氯(13) (11) (13)并且化合物(11)的酰氯(13)可以与胺(14)缩合得到缩合产物(8)， (13) (14) (8)
接着化合物(8)脱保护得到伦扎必利。
(8)伦扎必利(游离碱)形成化合物(11)和(14)的方法公开在EP-A-94742和GB0321091.1中。
伦扎必利可以直接用于本发明第一方面的方法中，从而得到形式II的伦扎必利盐酸盐水合物。因此，本发明第一方面提供了一种方便的由伦扎必利制备形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的一步法。
本发明第二方面提供了一种由伦扎必利盐酸盐形成形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的方法，所述方法包括在含有有机溶剂和3％-30％水的溶剂体系中形成伦扎必利盐酸盐的饱和溶液，并且从中分离得到形式II的伦扎必利盐酸盐水合物。
在本发明第二方面的优选方案中，可以通过结晶分离形式II的伦扎必利盐酸盐水合物。
可以通过本领域已知的方法启动形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的结晶。优选通过将伦扎必利盐酸盐水合物的饱和溶液冷却至10℃或更低、优选0℃或更低、更优选-5℃或更低，从而从溶剂体系中结晶形式II的伦扎必利盐酸盐水合物。所述伦扎必利盐酸盐水合物的饱和溶液的冷却可以通过搅拌完成，直到伦扎必利盐酸盐水合物完成结晶或者到达到一个合适阶段。
为了促进结晶析出，可能需要加入不溶解伦扎必利盐酸盐水合物的混溶性有机溶剂(对于本发明目的而言，称作混溶性非溶剂)。或者也可以向伦扎必利盐酸盐水合物的饱和溶液中加入形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的籽晶。加入籽晶可以与冷却和/或搅拌和/或加入混溶性非溶剂单独、同时或依次使用。
为了得到伦扎必利盐酸盐的饱和溶液，可能需要将溶液温热。优选将伦扎必利盐酸盐溶剂混合物加热至回流。溶液可以搅拌或搅动以得到或者有助于得到饱和溶液。
对于本发明目的而言，所述溶剂体系可以含有一种或多种能够溶解伦扎必利盐酸盐且能与水混溶的溶剂。优选地，所述溶剂是乙醇、丙酮、异丙醇、叔丁基甲基醚(TBME)或者THF中的一种或多种，更优选乙醇。
由伦扎必利盐酸盐水合物重结晶得到形式II的伦扎必利盐酸盐水合物优选在含水乙醇溶液中、更优选在20％含水乙醇溶液中进行。
分离形式II的伦扎必利盐酸盐水合物可以通过过滤实现。残留在分离产物中的任何溶剂可以通过在有机溶剂中洗涤该结晶固体而除去。优选该洗涤溶剂比残留溶剂更具挥发性，从而其自身可以方便地从产物中除去。用于实现本发明目的的这类溶剂的实例包括THF、正庚烷或甲苯。或者，分离后的产物也可以在含有4-25％水、更优选含有8％或更多水的冷有机溶液例如8％含水乙醇溶液中进行洗涤。
产物可以干燥除去任何残留溶剂。优选所述干燥不会降低产物中水的百分比。当然，如果水的百分比出现了降低，产物则需要再水合以得到形式II的伦扎必利盐酸盐水合物。干燥产物的方法包括在存在或不存在真空的情况下，使用流化床干燥以及在烤箱中风干。优选在惰性气氛例如氮气氛下进行干燥。
残留溶剂可以进一步通过将产物在有机溶剂中浆化而除去。同样地，浆化溶剂也应当比残留溶剂更具挥发性，以保证其能方便地由产物中分离除去。浆化溶剂的适宜实例包括TBME。
本发明第三方面提供了一种形成形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的方法，所述方法包括将伦扎必利盐酸盐在含有4-25％水的有机溶剂中浆化，然后从中分离得到形式II的伦扎必利盐酸盐水合物。
优选该有机溶剂可与水混溶，并且可以是乙醇、丙酮、异丙醇、TBME或THF中的一种或多种。该溶剂更优选为乙醇。
所提供的有机溶剂优选含有6-10％水、更优选含有8％或更多水。在一特别优选的方案中，该有机溶剂是含有8％水的乙醇。
在本发明第二和第三方面讨论的伦扎必利盐酸盐可以按照EP0239321中的方法制备得到。所提供的伦扎必利盐酸盐可以以水合或非水合形式用于本发明的第二和第三方面。
具体地说，可以将伦扎必利(其游离碱形式)溶解于适宜溶剂优选乙醇中，然后加入盐酸在适宜溶剂优选乙醇中的溶液使产物沉淀。
伦扎必利伦扎必利盐酸盐本发明第四方面提供了含量为75％形式II或更高的结晶形式II的伦扎必利盐酸盐水合物，其中每摩尔伦扎必利盐酸盐含有两摩尔水。
优选所提供的形式II的伦扎必利盐酸盐水合物含量为80％或更高，更优选为90％或更高，最优选为95％或更高。
形式II的伦扎必利盐酸盐水合物以二水合物形式提供。其中含有8.3-9.8％的水，优选含有8.5-9.6％的水，更优选含有9.0％的水。如果不局限于任何科学理论的话，据信且有研究指出，水被束缚在伦扎必利分子的结晶结构中，并且非松散地与分子结合。
相对于无定形伦扎必利盐酸盐水合物而言，以形式II的伦扎必利盐酸盐水合物提供的伦扎必利给出了很多有利特性。此结晶形式的有利特性包括对大气水或湿度具有改善的稳定性、以及具有改善的过滤和干燥特性。本领域普通技术人员应该理解的是，形式II的伦扎必利盐酸盐水合物所具有的上述特性使得这种形式的伦扎必利尤其优选用作药物。具体地说，形式II的伦扎必利盐酸盐水合物对湿气显示出良好的稳定性，因而可以长期储存而不变质。具体地说，形式II的伦扎必利盐酸盐水合物可以长期储存，同时储存药物的含水量没有明显变化。
曾经指出过形式II的伦扎必利盐酸盐水合物显示狭窄的粒度分布。这一特性可以提供能够制备均匀制剂混合物(特别是在低剂量浓度下)的伦扎必利盐酸盐水合物形式。另外，形式II的伦扎必利盐酸盐水合物在原料的混合过程中还可以不需要过筛，从而可以更有效地配制制剂。此外，形式II的伦扎必利盐酸盐水合物相对于无定形而言，还具有改善的过滤特性。
此外，提供形式II的伦扎必利盐酸盐水合物还可以形成均匀的混合物，同时不需要降低粒径、过滤等。这样可以保证更有效地加工和配制伦扎必利。此外，形式II的伦扎必利盐酸盐水合物所具有的改善的水稳定性允许活性成分更有效地干燥，从而促进将其配制成例如胶囊剂或片剂形式。
因此，形式II尤其优选用于制备含有伦扎必利的药物，这是因为其狭窄的粒径分布可以允许其用于低浓度的胶囊剂或片剂中，同时不需要进行研磨或微粉化。
当其暴露于湿度中时，形式II的伦扎必利盐酸盐水合物显示出始终一致的行为。因此，这种形式可以长期储存。此外，在分配和制备过程中，该物质还可以以可预期的方式表现。
形式II的伦扎必利盐酸盐水合物所具有的上述改良特性意味着将形式II的伦扎必利盐酸盐水合物配制成剂型、例如片剂比无定形伦扎必利盐酸盐水合物的配制在时间、效能和成本上是更有效率的。此外，形式II的伦扎必利盐酸盐水合物及其制剂可以长期储存，这是因为形式II的伦扎必利盐酸盐水合物对湿气具有稳定性。
形式II的伦扎必利盐酸盐水合物以其红外光谱为特征，其中形式II的伦扎必利盐酸盐水合物显示位于835±1.5cm-1的诊断峰。
因此，本发明提供了一种鉴定样本中的形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的方法，其特征在于对伦扎必利盐酸盐水合物样本进行红外光谱分析，然后检测是否存在位于835±1.5cm-1的诊断峰(如
图13中的本发明第五方面涉及一种药物组合物，所述药物组合物含有本发明第四方面中定义的形式II的伦扎必利盐酸盐水合物以及药学赋型剂。
适宜的载体和/或稀释剂是本领域众所周知的，包括制药等级的淀粉、甘露醇、乳糖、硬脂酸镁、糖精钠、滑石、纤维素、葡萄糖、蔗糖(或者其它糖)、碳酸镁、明胶、油、醇、除污剂、乳化剂或水(优选无菌水)。所述组合物可以是组合物的混合制剂，或可以是供同时、单独或连续使用(包括给药)的联合制剂。
用于前述症状的本发明化合物可以通过任意一种常规方法给药，例如通过口服(包括吸入)、非肠道、粘膜(例如颊、舌下、鼻内)、阴道、直肠或经皮给药，并且相应调整其组成。
本发明形式II的伦扎必利盐酸盐水合物可以以延时释放组合物的形式提供。所述延时释放组合物联合含有形式II的伦扎必利盐酸盐水合物与延时释放组分。这种组合物可以将形式II的伦扎必利盐酸盐水合物靶向释放至下胃肠道例如小肠、大肠、结肠和/或直肠中。该延时释放组合物可以含有形式II的伦扎必利盐酸盐水合物以及肠溶性或pH依赖型包衣，例如醋酸邻苯二甲酸纤维素以及其它邻苯二甲酸酯(例如聚醋酸乙烯邻苯二甲酸酯、甲基丙烯酸酯(Eudragits))。或者通过提供对pH敏感的甲基丙烯酸酯包衣、对pH敏感的聚合微球或经水解降解的聚合物，所述延时释放组合物还可以提供向小肠和/或结肠的控制释药。所述延时释放组合物可以与疏水性或凝胶化赋型剂或包衣配制成制剂。借助于通过细菌酶例如直链淀粉或果胶消化的包衣、pH依赖型聚合物、随时间不断溶胀的水凝胶塞(Pulsincap)、时间依赖型水凝胶包衣和/或与氮杂芳香键相连的丙烯酸包衣可以进一步提供结肠递送。
对于口服给药，可以将该化合物配制成液体或固体形式，例如溶液剂、糖浆剂、混悬剂、乳剂、片剂、胶囊剂、锭剂、干燥粉末剂和/或颗粒剂。
液体制剂通常由化合物或其生理学上可接受盐在适宜的含水或非水液体载体例如水、乙醇、甘油、聚乙二醇或油中的悬浮液或溶液组成。这种制剂还可以含有助悬剂、防腐剂、芳香剂或着色剂。
片剂形式的组合物可以采用制备固体制剂时常用的任何适宜药学载体制备。这类载体的实例包括硬脂酸镁、淀粉、乳糖、蔗糖和微晶纤维素。
胶囊剂形式的组合物可以采用常规的包囊步骤制备。例如，利用标准载体可以制备得到含有活性成分的粉末剂、颗粒剂或丸剂，然后将其填入胶囊例如硬明胶胶囊、HPMC胶囊、软明胶胶囊等；或者，利用任何适当的药学载体例如含水树胶、纤维素、硅酸盐或油可以制备得到分散体或悬浮液，并且将该分散体或悬浮液填入软明胶胶囊中。
借助例如在片剂或胶囊剂上形成的外层包衣，设计用于口服给药的组合物以使其在经过消化道时保护其中的活性成分免受降解。
典型的非肠道组合物由化合物或其生理学上可接受盐在无菌含水载体或非水或非肠道可接受油例如聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、卵磷脂、花生油或芝麻油中的溶液或悬浮液组成。或者，也可以将该溶液冻干，然后在临给药之前用适当的溶剂复水。
可以方便地将鼻内或口服给药组合物配制成气雾剂、滴剂、凝胶剂和粉末剂形式。气雾剂通常含有活性物质在生理学上可接受的含水或非水溶剂中的溶液或细混悬液，并且通常以在密闭容器中的单剂量或多剂量的无菌形式提供，后者可以采取药筒形式或者再次注满与雾化装置一起使用。或者，该密闭容器还可以是一次性分散装置，例如单剂量的鼻吸入器或装配有计量阀门的气雾剂分配器，一旦容器中的内含物用尽后即可以弃去。如果剂型中含有气雾剂分配器，则其中应当含有可药用推进剂。气雾剂还可以采取泵式喷雾器形式。
适合颊或舌下给药的组合物包括片剂、锭剂和软锭剂，其中将活性成分与各种载体例如糖和阿拉伯胶、黄蓍胶、或明胶和甘油一起配制。
用于直肠或阴道给药的组合物可以方便地为栓剂(含有常规栓剂基质例如可可脂)、阴道栓剂、阴道片剂、泡沫剂或灌肠剂形式。
适合透皮给药的组合物包括软膏剂、凝胶剂和贴剂、以及包括粉末注射剂在内的注射剂。
组合物通常为单位剂型例如片剂、胶囊剂或安瓿形式。
根据所选择的给药方法，组合物可以含有0.1％-99％(w/w)、优选0.1-60％(w/w)、更优选0.2-20重量％、并且最优选0.25-12％(w/w)的形式II的伦扎必利盐酸盐水合物。
本发明第六方面涉及如本发明第四方面定义的形式II的伦扎必利盐酸盐水合物或其如本发明第五方面定义的药物组合物用于治疗和/或预防涉及胃肠道蠕动受损和/或腹痛的障碍的用途。
对于本发明目的而言，胃肠道包括食管、胃、小肠和大肠(包括结肠和直肠)。形式II的伦扎必利盐酸盐水合物通常可用于治疗涉及胃肠道蠕动受损的障碍。这些障碍包括肠易激综合征、胃排空迟缓或延迟、消化不良、食管返流、消化性溃疡、肠胃气胀、排泄受损、便秘、糖尿病性神经病、功能性腹部气胀、胃轻瘫或者腹痛中的一种或多种。形式II的伦扎必利盐酸盐水合物还可用于治疗与下述障碍相关的症状腹痛和/或不适、腹部气胀、大便稠度异常、大便频率异常、感觉排空不彻底、感觉尿急以及粘液溢出(passage of mucus)。其还可用于治疗呕吐和/或治疗中枢神经系统障碍例如精神病。形式II的伦扎必利盐酸盐水合物优选用于治疗肠易激综合征，更优选用于治疗便秘占优势的、腹泻占优势的或者交替性(混合症状)肠易激综合征。
可有效治疗上述障碍的形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的用量取决于待治疗障碍的性质和严重程度以及需要该治疗的患者的体重。然而，对于70kg的成年人而言，其单个单位剂量通常含有0.01-100mg、例如0.1-50mg、优选0.5-16mg本发明化合物/天。
单位剂量每天可以给药一次或多次，例如每天2、3或4次，通常为每天1-3次，更优选为每天1或2次。应该理解的是，前面所指定的剂量范围仅仅是针对成年人服用形式II的伦扎必利盐酸盐水合物而言。向婴儿或小孩施用的剂量可以由医生或本领域技术人员确定，其可以低于向成年人施用的剂量或者与其相同。单位剂量优选以胶囊剂或片剂的形式提供。
本发明第七方面涉及一种治疗涉及胃肠道蠕动受损的障碍的方法，所述方法包括以及向有该需要的对象施用如本发明第四方面定义的形式II的伦扎必利盐酸盐水合物或者如本发明第五方面定义的药物组合物。
本发明各方面的所有优选特征均适用于所有其它方面的各个变型方案。
本发明可以以各种方式应用于实践中，并且参照附图通过举例来说明一系列具体的实施方案，在这些附图中图1示出了形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的固态13C-NMR；图2示出了无定形伦扎必利盐酸盐水合物的固态13C-NMR；图3示出了形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的DVS吸收曲线图4示出了形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的DVS吸收曲线；图5示出了形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的DVS吸收曲线；图6示出了形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的等温图；图7示出了形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的DVS吸收曲线和等温图；图8示出了形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的DVS吸收曲线；图9示出了形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的等温图；图10示出了无定形伦扎必利盐酸盐水合物的DVS吸收曲线；图11示出了无定形伦扎必利盐酸盐水合物的等温图；图12示出了形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的IR光谱；图13示出了形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的IR光谱的放大区域；图14示出了形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的IR光谱；图15示出了形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的IR光谱的放大区域；图16示出了形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的IR光谱的放大区域；图17示出了形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的IR光谱；
图18示出了形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的IR光谱的放大区域；图19示出了形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的IR光谱；图20示出了形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的IR光谱的放大区域；图21示出了形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的X-射线粉末衍射图案；图22示出了形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的热分析。
下面参照一个或多个下述非限制性实施例对本发明进行示例性描述。
实施例形式II和无定形的伦扎必利盐酸盐水合物的制备形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的制备伦扎必利和伦扎必利盐酸盐可以使用EP-A-0094742、EP-A-0239321和GB0321091.1中的方法制备得到。
优选的成盐步骤将伦扎必利游离碱(1wt)悬浮于8％含水乙醇(5vol；由0.4vol水和4.6vol无水乙醇组成)中，同时在20-25下搅拌15-30分钟。混合物加热至回流，保持回流直到完全溶解(预期至多70分钟)，然后冷却至60-65，通过预热的管线(lines)和过滤器(1μm)使之澄清以除去任何颗粒物质。管线和过滤器用热(60-65℃)的8％含水乙醇(1vol；由0.08vol水和0.92vol无水乙醇制成)冲洗。然后将该游离碱溶液用浓盐酸(1.05摩尔当量)处理，同时保持内部温度为60-70℃。所得到的混合物冷却至20-25，然后在该温度范围内老化1-2小时。所得到的浆状物进一步冷却至0.5℃，并继续老化1-2小时。取出该浆状物的样品，过滤并通过IR检测该固体以确定其为形式II。为了确保该物质在分离之前为形式II，根据需要，可以将浆状物继续老化1-2小时。
通过过滤分离产物，滤饼用冷(0-5℃)的8％含水乙醇(1vol；由0.08vol水和0.92vol无水乙醇制成)置换洗涤，然后倾入过滤器中过滤3-4小时。将固体转移至托盘中，并置于有纯净水存在的密闭区域中，直到乙醇含量达到1％(w/w)或者更低。
重结晶步骤将伦扎必利盐酸盐(1wt)用20％含水乙醇(3vol；由0.6vol水和2.4vol无水乙醇制成)处理。搅拌后的混合物加热至回流，保持回流直到溶解(预期至多70分钟)，然后冷却至60-65℃，通过预热的管线和过滤器(1μm)使之澄清以除去全部颗粒物质。管线和过滤器用热(60-65℃)的乙醇(4.5vol)冲洗，整个过程保持伦扎必利盐酸盐溶液的温度为60-65℃。
将所得到的混合物冷却至20-25℃，同时在该温度范围下老化1-2小时。所得到的浆状物进一步冷却至0-5℃，并继续老化1-2小时。取出该浆状物的样品，过滤后固体通过IR检测以确定其为形式II。为了确保该物质在分离之前为形式II，根据需要，可以将浆状物继续老化1-2小时。
通过过滤分离产物，滤饼用冷(0-5℃)的8％含水乙醇(1vol；由0.08vol水和0.92vol无水乙醇制成)置换洗涤，然后倾入过滤器中过滤3-4小时。将固体转移至托盘中，置于有纯净水存在的密闭区域中，直到乙醇含量达到1％(w/w)或者更低。
浆化步骤将伦扎必利盐酸盐(1wt)用8％含水乙醇(5vol)处理，混悬液搅拌后冷却至0-5℃，同时在0-5℃搅拌2-3小时。取出该浆状物的样品，过滤并通过IR检测所述固体以确定其为形式II。为了确保该物质在分离之前为形式II，根据需要，可以将浆状物继续老化1-2小时。
通过过滤分离产物，滤饼用冷(0-5℃)的8％含水乙醇(1vol；由0.08vol水和0.92vol无水乙醇制成)置换洗涤，然后倾入过滤器中过滤3-4小时。将固体转移至托盘中，置于有纯净水存在的密闭区域中，直到乙醇含量达到1％(w/w)或者更低。
无定形伦扎必利盐酸盐水合物的制备无定形伦扎必利盐酸盐水合物按照EP-A-0094742和EP-A-0239321制备得到。对于本发明目的而言，术语“无定形”包括含有非结晶和结晶物质的伦扎必利盐酸盐水合物样品，其中所述结晶物质可以以一种或多种形式的混合物存在。
形式II的伦扎必利盐酸盐水合物与无定形伦扎必利盐酸盐水合物的比较固态13C-NMR收集形式II和无定形的伦扎必利盐酸盐水合物的固态13C-NMR光谱，其分别如图1和2所示。
形式II的伦扎必利盐酸盐水合物样品给出与无定形伦扎必利盐酸盐水合物不同的光谱。形式II的伦扎必利盐酸盐水合物所具有的驰豫特性(relaxation property)(其决定捕获条件)也不同于无定形伦扎必利盐酸盐水合物的驰豫特性。因此对各样品的试验参数进行了优化。
下表1列出了由形式II的伦扎必利盐酸盐观察到的信号。此外，还提供了这些峰建议的指定。
表1形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的固态13C-NMR数据
该分子应该给出七个高频(90+ppm)信号(忽略任何微细结构)，但是仅仅检测到六个。丢失的信号来自与氯相连的碳。这些核之间发生偶联得到加宽的信号(可能为多重态)，这应该可以解释位于100-130ppm之间的基线信号。类似的偶联作用略微加宽了来自与氮相连的碳的信号(例如据推测位于～149ppm的信号是芳香C-NH2)。
其它信号的建议指定如下基团中的三个-CH2-s+CH位于15-30ppm，基团中的三个-CH2-N′+＞CH-N位于43-53ppm，OMe位于55-58ppm，酰胺碳位于164-168ppm，芳香C-O位于156-159ppm，芳香C-C位于-131ppm以及OMe邻位的CH可能位于99ppm线，其它的CH位于109-112ppm。其它未标记的低强度信号为旋转边带信号，可以忽略不计。
形式II的伦扎必利盐酸盐水合物与无定形伦扎必利盐酸盐水合物的固态NMR光谱的比较在由形式II的伦扎必利盐酸盐水合物和无定形伦扎必利盐酸盐水合物得到的光谱中，观察到位于60-15ppm区域的信号图案的差异。此外，由无定形伦扎必利盐酸盐水合物获得的光谱含有位于131.8ppm的OMe信号，该信号为分裂峰。该位于131.8ppm的信号似乎是不能拆分的一对。另外，无定形伦扎必利盐酸盐水合物光谱中低频信号的分辨率不足可能是因为存在附加线而引起的。
动力蒸汽吸收方法将各样品置于样品盘并装填在DVS系统中。读取初始重量。然后将样品暴露于相对湿度(RH)为0％的大气中进行干燥，读取干燥重量。样品暴露在0-90％RH的吸收/解吸周期中，以10％RH为间隔。将重量数据的变化拟合成指数表达形式，利用该表达形式自动确定各阶段的终点，然后启动下一个增加/降低的相对湿度。
对于DVS踪迹来说，阶梯线(stepped line)表示隔室中的相对湿度(RH)。曲线表示样品的重量变化。自动控制RH，一旦样品重量变化的速率较小时即开始变化。
形式II的伦扎必利盐酸盐水合物形式II的吸收等温曲线表明，其在10％RH下迅速开始吸收(大约9％w/w)，此后样品质量有细微变化，这表明形式II是非常稳定的物质，这与其在湿度方面所具有的性质是相吻合的。
形式II的DVS和等温曲线如图3-9所示。
形式II的伦扎必利盐酸盐水合物样品所表现出的行为表明其为非常稳定的物质，这与其在湿度方面所具有的性质是相吻合的。
DVS数据并没有提供形式II的伦扎必利盐酸盐水合物在不同形式之间存在平衡的证据。当三个周期彼此进行对照时，质量存在极其细微的变化(也就是说，如等温曲线所示，它们非常相似)。
此外，当室中达到90％RH条件时，样品质量出现极其细微的变化，同时样品吸收大约9.5％(w/w)湿度，这表明该物质的湿度含量是稳定的，在三个周期过程中保持不变。观察到形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的重量增加与其二水合物形成相吻合。就暴露在湿度下而言，一旦超过10％RH，批样分析全部显示出非常稳定的曲线。当超过10％RH时，该二水合物的质量出现极其细微的变化。
无定形伦扎必利盐酸盐水合物无定形伦扎必利盐酸盐水合物的DVS曲线和等温图如图10和11所示。
无定形伦扎必利盐酸盐水合物的DVS曲线(图10)表明，当暴露于10％RH环境下时，其吸收大约6％(w/w)，随后逐渐吸收直到达到50％RH。超过50％RH之后，随着RH的增加，水分吸收越来越低。当RH从90降至10％RH时，质量逐渐减少。
第二和第三周期的吸收/解吸曲线是相同的，其中解吸周期与第一周期的解吸周期相同。在10-40％RH下的吸收高于第一周期观察到的吸收，这再次表明在10-0％RH的过程中失去了大部分水分。
等温图(图11)非常清楚地示出了第一及随后吸收周期之间的差异。在所有3个周期中，吸收周期是相同的。
图10和11中的数据表明，样品在第一吸收周期前后存在明显差异。在第一吸收和第一解吸周期之间存在显著差异。由于上述周期是不可重复的，因此这说明该物质的形式出现了变化，而不是与其它物理因素有关的滞后作用(hysteresis)。由0％RH至90％RH获得的总水分大约为12％(w/w)，其高于化学计量的二水合物所需要的含量。
第一周期完成后，吸收/解吸曲线是可重现的，这表明该物质其后就其与水分之间的相互作用而言是稳定的。
无定形伦扎必利盐酸盐水合物的上述行为似乎与其二水合物的行为不一致。
内在溶出度(Dissolution Rate)方法将样品制成园片形。每片通过在2吨压力下压制5分钟制得。将各片转移至静态溶出系统，其中药片的一面暴露于溶出介质下。由各批产物制得六片药片，在pH2.2、4.0和7.0下进行双份内在溶出度(IDR)测定。以5分钟为间隔取出溶出样品(0.8ml)，一直到第60分钟，然后分析样品。
将药物释出量(mg)除以圆片表面积(0.5cm2)得到含量/单位面积(mg cm-2)。将双份测定结果的平均值绘制作为时间(分钟)的函数。IDR(mg cm-2分钟-1)通过释出曲线线性范围内的梯度(通过线性回归测定)给出。如果认为在溶液中的溶出与pH无关的话，则计算出独立于pH的IDR。通过将所有研究pH下每个时间点上的数据进行平均，并且根据至少第1组5数据点计算线形回归，从而计算得到独立于pH的IDR。报道所有的IDR值，其均具有误差，其中包括上下95％的线性回归置信限。
因为释出曲线为线性的，因此使用全部数据点对IDR数据进行线性回归分析。
表2形式II和无定形伦扎必利盐酸盐水合物的IDR(mg/min/cm2)
形式II的物质具有不同于无定形物质的内在溶出度特征。
形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的特征形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的水含量分析通过Karl Fischer分析法测定形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的11个不同样品的含水量，重复地发现含有大约9.0％(w/w)水，相当于在结晶结构中存在2分子水。据发现，形式II的伦扎必利盐酸盐中的含水量的重现性与用于制备形式II的方法以及合成规模无关。本发明具有提供控制形式II的伦扎必利盐酸盐水合物中所存在的含水量的能力，这对于在储存、处理、制剂和生产过程中控制许可药物成分的质量是非常有利的。
水含量(用Karl Fischer法测定)
红外(IR)分析记录下按照本发明方法制备得到的一系列形式II样品的IR光谱。图12-20示出了形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的IR光谱。下表3给出了所观察到的IR峰。
表3形式II的伦扎必利盐酸盐水合物样品的代表性IR数据
*注释波数值(cm-1)。关于峰的描述s ＝尖峰，br＝具有指定为以下相对强度的宽峰，st＝强，m＝中等峰，并且w＝弱峰。
所观察的形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的所有样品具有位于835±1.5cm-1的特征峰。该峰可用于区分是否存在形式II的伦扎必利盐酸盐水合物。应该理解的是，该特征峰的精确值可能随样品的制备、所使用的装置等变化而变化。最后，表4给出了由形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的不同样品观察到的此特征峰的一系列数值。
形式II的IR光谱中的信号峰范围取自下表中的数值表4位于835±1.5cm-1的特征峰的观察值
在形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的IR光谱中存在位于835±1.5cm-1的特征峰，证明已经制备得到形式II的伦扎必利盐酸盐水合物。
形式II的伦扎必利盐酸盐的XRPD分析已经通过X-射线粉末衍射分析了形式II的伦扎必利盐酸盐水合物
形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的X-射线粉末衍射(XRPD)图案如图21所示。在XRPD图案中存在指定峰则说明该形式II具有晶体特征。
形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的稳定性将形式II的伦扎必利盐酸盐水合物样品置于25℃/60％相对湿度的储存条件下。
表5形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的稳定性
形式II的伦扎必利盐酸盐水合物在储存过程中显示出良好的水分稳定性。
粒径分布伦扎必利的粒径分布(PDS)按照下面详细描述的方法测量。
材料参数伦扎必利R.I.＝1.5 吸收度＝0.1型号普通目的(优)-灵敏度提高测量参数测量时间4秒钟背景时间8秒钟模糊极限3＜模糊＜20(滤光器)采样参数Scirocco2000振动进料速率40％气压3.5Bar对三份平行样品中的各批次的单一测量表6按照5kg批量制备的形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的粒径分布
*跨距＝(d(0.9)-d(0.1))/d(0.5)形式II显示出狭窄的粒径分布，跨距为2.1。
显微照相术将少量样品分散于硅油(显微镜载玻片上)中，并在上面放置一盖波片。使用校准的图像捕获软件捕获样品图像(最小为两倍放大)。
形式II的伦扎必利盐酸盐水合物由规则的立方体/菱面体形结晶组成，这种结晶优选用于制备固体剂型。
热化学分析形式II的TGA示踪如图22所示。
形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的TGA示踪含有位于150-180℃的吸热峰。该吸热峰似乎与该脱水物质发生相变、然后接着在分析过程中失水有关。
该热分析图示出了由于失去两分子水而引起的大吸热峰(Tmax位于大约100℃)。该吸热峰之后接着两个位于Tmax170℃和240℃的放热峰。因此，形式II物质经历失水后得到脱水的水合物，其在150-170℃附近发生相变，然后在270℃附近熔化，最后在高温下分解。
溶解性研究使用下述标准步骤研究形式II的伦扎必利盐酸盐水合物在各种水/溶剂混合物中的溶解性将大约50-100mg形式II的伦扎必利盐酸盐水合物加入至10cm3玻璃小瓶中，并加入5cm3的适当溶剂。混悬液在20℃下搅拌24小时。然后过滤混悬液，通过HPLC分析所得的清亮溶液。
结果汇总如下。
表7形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的溶解性研究
通过溶剂浆化除去乙醇可以通过溶剂浆化除去形式II中的残余溶剂。在水-湿丙酮、THF、TBME和甲苯中进行一系列浆化，以观察对乙醇含量的影响。使用下面的标准步骤在室温下，将100mg形式II在1cm3(10vol)溶剂中搅拌24小时。然后，过滤分离固体，并分析溶剂含量和物理形式。
结果汇总在表8和9中表8通过溶剂浆化除去乙醇
结果表明，可以通过在丙酮、四氢呋喃(THF)、甲苯和TBME中进行溶剂浆化除去乙醇，达到通过NMR检测不到的水平(估计为＜0.1％检测)。通过IR测定由该浆状物分离得到的物质形式，并发现均为形式II。
表9溶剂浆化后的分离形式
形式II的结晶和干燥研究为了除去任何残余乙醇，将物质在高至80℃的真空下干燥。然后该“无乙醇的固体”再水合得到最后产物。
为了研究不同形式的伦扎必利盐酸盐水合物的干燥，通过在1％水的乙醇溶液、5％水的乙醇溶液、1％水的IPA溶液以及5％水的IPA溶液中结晶，制备得到1g样品。应该理解，按照下面给出的重结晶步骤可以将伦扎必利盐酸盐水合物再次制备成形式II的伦扎必利盐酸盐水合物。使用下述步骤将1g伦扎必利盐酸盐水合物溶解于最少量的回流溶剂中，然后在室温下冷却大约1小时，接着在5℃下继续放置18小时。通过过滤分离固体，并通过NMR、IR和KF分析。得到的数据汇总在下面的表10和11中。
表10初始分析
*粗重-未校正溶剂或水
#在30℃下真空(17mbar)干燥4小时之后表11进一步干燥之后
a溶剂明显是IPA，据推测这是由在烤箱中用IPA衍生物质干燥样本引起的#在30℃下真空(17mbar)干燥4小时+在60℃下干燥15小时之后样品的初始分析表明，形式II(含有大约9％水)可以在5％水的乙醇溶液或者5％水的IPA溶液中结晶得到。分离得到的物质最初含有相对较低的溶剂残余物，分别为0.16％的乙醇和0.65％的IPA。这些溶剂含量远远低于在由1％水的乙醇溶液或1％水的IPA溶液中分离得到的物质中的溶剂含量，后者分别含有5.4％和9.1％。这表明，形式II的二水合物不能容易地保持过量的溶剂，并因此比由含有低含水量(＜4％)的溶剂分离得到的物质更容易干燥。
进一步的干燥样品表明，在60℃下真空(17mbar)加热后，所有样品中的溶剂和水都已经除去。
对于形式II特征的概括形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的特征数据表明，该形式为具有尖锐的X-射线衍射图案和IR光谱以及精确含水量的结晶物质。如DVS试验指出的那样，该含水量在各种湿度下不会发生变化。此性质允许所述物质的长期储存。形式II具有与其狭窄跨距和令人满意的混合均匀性一致的粒径分布。显微镜分析显示，其批量产品具有一致的、规则形状的结晶，这种结晶对于制备固体剂型而言是非常理想的。在分配和加工过程中，形式II将以可预期的方式表现。形式II在其IR中的835±1.5cm-1位置处具有诊断峰(尖峰)，该诊断峰可用于确认是否存在该形式。
权利要求
1.制备形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的方法，所述方法包括在含有水和水混溶性溶剂的溶液中温育伦扎必利，接着向该伦扎必利溶液中加入浓盐酸，并通过过滤分离形式II的伦扎必利盐酸盐水合物。
2.如权利要求1所述的方法，其中所述水混溶性溶剂是THF、丙酮和/或醇中的一种或多种。
3.如权利要求2所述的方法，其中所述醇是甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇或叔丁醇中的一种或多种。
4.如权利要求1-3中任意一项所述的方法，其中所述水/水混溶性溶剂溶液含有3％-15％水。
5.如权利要求1-4中任意一项所述的方法，其中伦扎必利通过将化合物(8)脱保护而制备得到 伦扎必利(游离碱)。
6.由伦扎必利盐酸盐形成形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的方法，所述方法包括在含有有机溶剂和3％-30％水的溶剂体系中形成伦扎必利盐酸盐的饱和溶液，并且从中分离形式II的伦扎必利盐酸盐水合物。
7.如权利要求6所述的方法，其中通过结晶分离所述形式II的伦扎必利盐酸盐水合物。
8.如权利要求6或7所述的方法，其中所述溶剂体系含有一种或多种可以溶解伦扎必利盐酸盐同时还可与水混溶的溶剂。
9.如权利要求8所述的方法，其中所述溶剂是乙醇、丙酮、异丙醇、TBME或THF中的一种或多种。
10.如权利要求7所述的方法，其中伦扎必利盐酸盐水合物的结晶在含水乙醇溶液中进行。
11.形成形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的方法，所述方法包括将伦扎必利盐酸盐在含有4-25％水的有机溶剂中浆化，然后从中分离形式I I的伦扎必利盐酸盐水合物。
12.如权利要求11所述的方法，其中所述溶剂是乙醇、丙酮、异丙醇、TBME或THF中的一种或多种。
13.如权利要求11或12所述的方法，其中所述有机溶剂优选含有6-10％水。
14.如权利要求1-13中任意一项所述的方法，其中通过所述方法制备得到的形式II的伦扎必利盐酸盐水合物具有一个或多个下述特征a)在其红外光谱中位于835±1.5cm-1的特征峰；b)基本上如图21所示的X-射线粉末衍射图；以及c)8.3-9.8％的含水量。
15.通过如权利要求1-14中任意一项所述的方法制备得到的形式II的伦扎必利盐酸盐水合物。
16.含量为75％的形式II或以上的结晶形式II的伦扎必利盐酸盐水合物，其中每摩尔伦扎必利盐酸盐含有两摩尔水。
17.如权利要求16所述的结晶形式II的伦扎必利盐酸盐水合物，其中含有8.3-9.8％的水。
18.如权利要求16或权利要求17所述的结晶形式II的伦扎必利盐酸盐水合物，其中在其红外光谱中具有位于835±1.5cm-1的诊断峰。
19.如权利要求16-18中任意一项所述的结晶形式II的伦扎必利盐酸盐水合物，其中所述形式II具有一个或多个下述特征a)在其红外光谱中位于835±1.5cm-1的特征峰；b)基本上如图21所示的X-射线粉末衍射图；以及c)8.3-9.8％的含水量。
20.鉴定样本中的形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的方法，其特征在于对伦扎必利盐酸盐水合物样本进行红外光谱分析，并且监测是否存在位于835±1.5cm-1的诊断峰。
21.药物组合物，所述药物组合物含有如权利要求16-19中任意一项所述的形式II的伦扎必利盐酸盐水合物以及药学赋型剂。
22.如权利要求16-19中任意一项所述的结晶形式II的伦扎必利盐酸盐水合物或者如权利要求21所述的药物组合物用于治疗和/或预防肠易激综合征、胃排空迟缓或延迟、消化不良、食管返流、消化性溃疡、肠胃气胀、排泄受损、便秘、糖尿病性神经病、功能性腹部气胀、腹痛和/或不适、腹部气胀、大便稠度异常、大便频率异常、感觉排空不彻底、感觉尿急、粘液溢出、呕吐、胃轻瘫中的一种或多种疾病和/或用于治疗中枢神经系统疾病。
23.如权利要求16-19中任意一项所述的结晶形式II的伦扎必利盐酸盐水合物或者如权利要求21所述的药物组合物用于治疗便秘占优势的、腹泻占优势的或者交替性(混合症状)肠易激综合征。
24.治疗涉及胃肠道蠕动受损的病症的方法，所述方法包括向有该需要的患者施用如权利要求16-19中所述的结晶形式II的伦扎必利盐酸盐水合物或者如权利要求21所述的药物组合物。
25.基本上如本文中一个或多个实施例所述的方法。
26.基本上如本文中一个或多个实施例所述的结晶形式II的伦扎必利盐酸盐水合物。
27.基本上如本文中一个或多个实施例所述的方法。
28.基本上如本文中一个或多个实施例所述的药物组合物。
全文摘要
本发明提供了制备形式II的伦扎必利盐酸盐水合物的方法、含量为7 5％或更高的结晶形式II的伦扎必利盐酸盐水合物及其用途。式(I)伦扎必利盐酸盐。
文档编号A61K31/435GK1894248SQ200480037746
公开日2007年1月10日 申请日期2004年12月16日 优先权日2003年12月18日
发明者R·M·J·帕尔梅, N·L·迈耶斯, J·奈特 申请人:阿里吉姆医疗有限公司