专利名称：文冠果子仁霜的质量控制方法
技术领域：
本发明涉及一种质量控制方法。
背景技术：
文冠果中，用于治疗遗尿症、尿频、尿失禁、小儿智力低下、弱智、脑老化、中老年痴呆症、帕金森综合症，具有提高脑功能、提高人的机体抗糖尿活性的物质已确定为文冠果总皂苷。在文冠果子仁霜中，文冠果总皂苷含量的多少是一个很难控制的指标，这个指标直接关系到药物(文冠果总皂苷)含量的准确性，关系到药物的用量、药物的质量和药物的疗效。现在的做法是按文冠果子仁霜总量计算文冠果总皂苷的含量，这种方法计算文冠果总皂苷的含量是不准确的。现在亟需一种稳定、可靠、准确的文冠果子仁霜的质量控制方法。
发明内容
本发明的目的是为解决文冠果子仁霜中总皂苷含量指标很难控制的问题，提供一种文冠果子仁霜的质量控制方法，本发明具有稳定、可靠、准确的特点。本发明的方法是通过以下步骤实现的将通过正丁醇浸出物的测定方法和正己烷的测定方法测定合格的文冠果子仁霜制备成供试品溶液；取文冠果皂苷B对照品溶液(下称对照品溶液)；精密吸取文冠果子仁霜供试品溶液和对照品溶液各10～20μl，注入到液相色谱仪进样器中，紫外检测器波长为190～400nm，以高效液相色谱仪为测定载体；以十八烷基硅烷鍵合硅胶为色谱柱填料；按重量比以甲醇∶水∶磷酸＝64.9～85∶14.9～35∶0.01～0.1的溶液为流动相，记录紫外检测器所得的峰面积，以文冠果皂苷B为对照，以外标法计算供试品中文冠果皂苷B的含量，理论塔板数按文冠果皂苷B峰不低于3000即可。本发明以文冠果皂苷B的含量作为文冠果总皂苷的质量控制标准，主要是文冠果皂苷B在文冠果总皂苷中含量最高、稳定性好，可代表文冠果子仁霜中总皂苷的含量，检测结果可靠、准确。比现在按文冠果子仁霜总量计算文冠果总皂苷含量的方法精确80～90倍。使文冠果总皂苷含量很难控制的问题得到了解决，文冠果总皂苷含量的准确性问题解决后，关系到药物的用量、药物的质量和药物的疗效等问题也不再是问题，并为今后文冠果总皂苷的进一步利用铺平了道路。
具体实施例方式
具体实施方式
一本实施方式的方法是通过以下步骤实现的将通过正丁醇浸出物的测定方法和正己烷的测定方法测定合格的文冠果子仁霜制备成供试品溶液；取文冠果皂苷B对照品溶液(下称对照品溶液)；精密吸取文冠果子仁霜供试品溶液和对照品溶液各10～20μl，注入到液相色谱仪进样器中，紫外检测器波长为190～400nm，以高效液相色谱仪为测定载体；以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填料；按重量比以甲醇∶水∶磷酸＝64.9～85∶14.9～35∶0.01～0.1的溶液为流动相，记录紫外检测器所得的峰面积，以文冠果皂苷B为对照，以外标法计算供试品中文冠果皂苷B的含量，理论塔板数按文冠果皂苷B峰计不低于3000即可。
具体实施例方式
二本实施方式的文冠果子仁霜供试品溶液由以下步骤制成取文冠果子仁霜4～6g，向文冠果子仁霜中加入浓度为70％的乙醇溶液20～30ml，超声提取35～45分钟，滤过后取9～11ml，蒸干，向蒸干的物质中加入2～3ml水使其溶解，将溶解物注入到已处理好的树脂柱(D101吸附树脂，内径1.0cm，填充高度约10cm，乙醇装柱，用水洗净醇备用)上，吸附20～30分钟，按1.2～1.6ml/min的流速，依次用水45～55ml和浓度为70％的乙醇溶液45～55ml洗涤，收集乙醇洗脱液，将乙醇洗脱液水浴蒸至4～6ml，移入到10ml容量瓶中，向容量瓶中加入浓度为70％的乙醇溶液至10ml刻度，用0.45μm膜滤过即为供试品溶液。本实施方式的制备方法获得的文冠果皂苷B含量高，文冠果皂苷B(C60H92O24)的含量不少于0.3％。
具体实施例方式
三本实施方式的文冠果皂苷B对照品溶液由下列步骤制备而成；取文冠果子仁霜粉0.8～1.3kg，用浓度为60～80％的乙醇溶液回流提取1.5～2.5小时，减压回收乙醇，将回收乙醇后的浓缩液上80目柱层析硅胶柱，用重量比为氯仿∶甲醇＝55∶45～50∶50的洗脱液梯度洗脱，收集洗脱液，再使用140～160目的硅胶柱洗脱，收集洗脱液，浓缩，再用制备液相色谱洗脱，用皂苷分离柱制备，得文冠果皂苷B对照品溶液100mg。本实施方式制备的对照品纯度达到97％以上，可为对照品做质量控制用。
具体实施例方式
四本实施方式的正丁醇浸出物的测定方法如下取文冠果子仁霜3g，精密取定，用石油醚(30-60℃)回流提取6小时，残渣加入正丁醇50ml，静置1小时，回流提取1小时，过滤，滤液装入至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后于105℃干燥3小时，移至干燥器冷却30分钟，精密称定重量，正丁醇提取物不低于4.0％。此方法可做为文冠果子仁霜选择时的质量控制方法。
具体实施例方式
五本实施方式的正己烷的测定方法如下精取正己烷2.1μl，置于100ml气化瓶中，迅速塞紧，作为对照品(相当于150ppm)；另取文冠果子仁霜10g，精密取定，置于100ml气化瓶中，同样塞紧，于80℃条件下加热1小时，抽取顶空气100μl，照气相色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI E)，用浓度为5％的聚乙二醇丁二酸酯色谱柱(柱长2米)在柱温55℃、气化室150℃、检测室200℃条件下测定，按外标法，供试品的峰面积不人于对照品峰面积，文冠果子仁霜含正己烷不超过150ppm。本实施方式的目的在于控制文冠果子仁霜中正己烷含量。
权利要求
1.一种文冠果子仁霜的质量控制方法，其特征在于它是通过以下步骤实现的将通过正丁醇浸出物的测定方法和正己烷的测定方法测定合格的文冠果子仁霜制备成供试品溶液；取文冠果皂苷B对照品溶液；精密吸取文冠果子仁霜供试品溶液和对照品溶液各10～20μl，注入到液相色谱仪进样器中，紫外检测器波长为190～400nm，以高效液相色谱仪为测定载体；以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填料；按重量比以甲醇∶水∶磷酸＝64.9～85∶14.9～35∶0.01～0.1的溶液为流动相，记录紫外检测器所得的峰面积，以文冠果皂苷B为对照，以外标法计算供试品中文冠果皂苷B的含量，理论塔板数按文冠果皂苷B峰计不低于3000即可。
2.根据权利要求1所述的文冠果子仁霜的质量控制方法，其特征在于文冠果子仁霜供试品溶液由以下步骤制成取文冠果子仁霜4～6g，向文冠果子仁霜中加入浓度为70％的乙醇溶液20～30ml，超声提取35～45分钟，滤过后取9～11ml，蒸干，向蒸干的物质中加入2～3ml水使其溶解，将溶解物注入到已处理好的树脂柱上，吸附20～30分钟，按1.4～1.6ml/min的流速，依次用水45～55ml和浓度为70％的乙醇溶液45～55ml洗涤，收集乙醇洗脱液，将乙醇洗脱液水浴蒸至4～6ml，移入到10ml容量瓶中，向容量瓶中加入浓度为70％的乙醇溶液至10ml刻度，用0.45μm膜滤过即为供试品溶液。
3.根据权利要求1所述的文冠果子仁霜的质量控制方法，其特征在于文冠果皂苷B对照品溶液由下列步骤制备而成；取文冠果子仁霜粉0.8～1.3kg，用浓度为60～80％的乙醇溶液回流提取1.5～2.5小时，减压回收乙醇，将回收乙醇后的浓缩液上80目柱层析硅胶柱，用重量比为氯仿∶甲醇＝55∶45～5050的洗脱液梯度洗脱，收集洗脱液，再使用140～160目的硅胶柱洗脱，收集洗脱液，浓缩，再用制备液相色谱洗脱，用皂苷分离柱制备，得文冠果皂苷B对照品溶液100mg。
4.根据权利要求1所述的文冠果子仁霜的质量控制方法，其特征在于正丁醇浸出物的测定方法步骤如下取文冠果子仁霜3g，精密取定，用石油醚回流提取6小时，残渣加入正丁醇50ml，静置1小时，回流提取1小时，过滤，滤液装入至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后于105℃干燥3小时，移至干燥器冷却30分钟，精密称定重量，正丁醇提取物不低于4.0％。
5.根据权利要求1所述的文冠果子仁霜的质量控制方法，其特征在于正己烷的测定方法步骤如下精取正己烷2.1μl，置于100ml气化瓶中，迅速塞紧，作为对照品；另取文冠果子仁霜10g，精密取定，置于100ml气化瓶中，同样塞紧，于80℃条件下加热1小时，抽取顶空气100μl，照气相色谱法，用浓度为5％的聚乙二醇丁二酸酯色谱柱在柱温55℃、气化室150℃、检测室200℃条件下测定，按外标法，供试品的峰面积不大于对照品峰面积，文冠果子仁霜含正己烷不超过150ppm。
全文摘要
文冠果子仁霜的质量控制方法，它涉及一种质量控制方法。本发明的目的是为解决现有文冠果总皂苷含量指标很难控制的问题。本发明是将通过正丁醇浸出物的测定方法和正己烷的测定方法测定合格的文冠果子仁霜制备成供试品溶液；取达到标准的文冠果皂苷B制备对照品溶液；精密吸取文冠果子仁霜供试品溶液和对照品溶液各10～20μl，注入到液相色谱仪进样器中，紫外检测器的波长为190～400nm，按重量比以甲醇∶水∶磷酸＝64.9～85∶14.9～35∶0.01～0.1为流动相，记录紫外检测器所得的峰面积，理论塔板数按文冠果皂苷B峰计不低于3000即可。本发明以文冠果皂苷B的含量作为质量控制标准，主要是文冠果皂苷B在文冠果总皂苷中含量最高、稳定性好，可代表总皂苷的含量，检测结果准确。
文档编号A61P25/16GK1772090SQ20051001053
公开日2006年5月17日 申请日期2005年11月11日 优先权日2005年11月11日
发明者刘树军 申请人:刘树军