专利名称：灯盏细辛酮酯及其注射剂的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种从灯盏细辛药材中提取的有效部位灯盏细辛酮酯及其注射剂的制备方法，属于中药的技术领域，本发明具有益心通脑、活血化瘀、舒络止痛功能，主要用于治疗正气虚衰、血瘀脉阻所致的胸痹心痛证(冠心病心绞痛)、中风(缺血性脑中风及中风后遗症)。
背景技术：
中医理论所指中医理论所指的胸痹心痛证，证见胸闷胸痛、心悸气短、乏力慵懒，动则气促、面色无华或晦暗、咳唾心烦、舌质红暗或绛紫、脉沉细微、甚或结代。现代医学称为冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病)或冠心病心绞痛。《金匮要略·胸痹心痛短气病脉证治》曰“胸痹之病，喘息咳唾，胸背痛，短气，寸口脉沉而迟……”。《内经·痹论第四十三》云“心痹者，脉不通，烦则心下鼓，暴上气而喘，嗌干，善噫，厥气上则恐”。“在于脉血凝而不流”。
冠心病是因冠状动脉粥样硬化，心肌血液供应发展障碍引起的心脏病变，其发病机理为复杂的综合过程，分为四个阶段一是心血管内皮细胞受损，血管平滑肌细胞增生；二是血小板粘附于受损的血管壁后，释放出血清素、血栓素A2、血小板IV、VIII因子等；三是低密度脂蛋白由受损的内皮细胞渗入内膜下的平滑肌细胞，并被吞噬，进入细胞后被细胞内溶酶体的水解酶分解而释放游离胆醇，后者与亚油酸结合成为重要的发病环节；四是在上述病理的基础上，最终发生冠状动脉纤维化、钙化，轻则胸闷气憋，重则发生心绞痛、心肌梗塞、心律不齐甚至猝死。在我国居民全死率中，心脏病排位第三。
中医所谓中风，是指突然昏倒，继之口眼歪斜、半身不遂，甚至昏迷不醒。即现代医学所指的脑中风，本发明所针对的是缺血性脑中风，即缺血性脑中风及中风后遗症。《杂病源流犀烛》云“人生五六十岁，气血就衰，乃有中风之病，少壮无是也”。《证治要诀》曰“肥人多有中风病，以其气盛于外而歉于内也。”《素问·玄机原病式》曰“人肥则腠理致密而多郁湍，气血则难以通行，故多卒中”。《医门法律》云“偏枯不仁，要皆阳气虚馁，不能充灌所致”。
脑中风或中风后遗症是由于血管阻塞，缺氧或营养缺乏，造成神经元、神经脂质及血管系统的缺血性坏死或软化，在我国居民全死率中脑血管病排位第二，致残率在60％以上。
中医理论所指的痰饮肺胀证，证见咳嗽、喘息、胸中胀满、痰涎壅塞、胸痛心悸、动期尤甚、面色晦暗、唇绀舌紫、脉沉细弱，甚或结代等，即现代医学所指的肺动脉高压。
肺动脉高压为一系列肺胸疾病及其他疾病所引发的肺动脉压压高于正常值，肺动脉血管内皮组织病理改变，右心室肥厚，肺循环氧含量低于正常值的疾病，肺动脉高压在我国较为常见，如肺心病和某些病毒所致的呼吸系统传染性疾病常伴有肺动脉高压。
目前用于心脑血管疾病的药物较多，控制症状以化学药品为主，中药以口服制剂居多，注射剂品种少，中药口服制剂生物利用度低，效果不够理想。现有的这类注射剂中以灯盏细辛药材为原料的有灯盏细辛注射液和灯盏花素注射液。灯盏细辛药材含黄酮类和咖啡酸酯两大类有效成分，灯盏细辛注射液主要含咖啡酸酯类，野黄芩苷含量较少，相当于药材3g，含咖啡酸酯20～30mg，含野黄芩苷计为2～4mg，表明现有灯盏细辛注射液的提取分离工艺不合理，野黄芩苷黄酮类成分损失很大；而灯盏花素注射液主要含野黄芩苷黄酮类成分，不含咖啡酸酯类成分，每支10ml，相当于药材4g，含野黄芩苷20mg；灯盏细辛注射液和灯盏花素注射液的高效液相二级管阵列检测(HPLC-DAD)图有显著区别。因此，以药材投料的原灯盏细辛注射液，野黄芩苷黄酮类损失过高，浪费了资源，以总黄酮投料的灯盏花素注射液的制备工艺，将有效部位咖啡酸酯类损失遗尽，资源浪费更大。这充分说明现有灯盏细辛注射液和灯盏花素注射液的提取纯化工艺均不合理，有待进一步改进，应尽可能保留灯盏细辛药材中所含野黄芩苷黄酮类和咖啡酸酯类有效成分，经提取纯化研究，从而实现了本发明——灯盏细辛酮酯及其注射剂。
注射剂生物利用度高，血药浓度高，药效作用发挥快、质量可控，符合中药现代化要求。
发明内容
本发明的目的在于针对治疗胸痹心痛证(冠心病心绞痛)、中风(缺血性脑中风及中风后遗症)药物存在的问题，为医药界提供一种生物利用度高，血药浓度高，药效作用快，质量可控，毒副作用和不良反应小，充分利用药材中有效部位的新药——灯盏细辛酮酯注射剂，其中包括小容量灯盏细辛酮酯注射液、大容量灯盏细辛酮酯氯化钠注射液、大容量灯盏细辛酮酯葡萄糖注射液、大容量灯盏细辛甘油注射液、注射用灯盏细辛酮酯(冻干粉针剂)。
本发明的另一个目的是提供这种灯盏细辛酮酯及其注射剂的制备方法，本方法具有创新性，从灯盏细辛药材提取出所含的酮酯两大类有效部位，不但纯度高(有效部位含量高达85％以上)，而且充分地利用了药材资源。
本发明的目的是通过如下配方和制备工艺制取的药物来实现的。
一种灯盏细辛酮酯注射剂组合物，由适量的灯盏细辛酮酯，加适量辅料和注射用水组成。其特征在于所用灯盏细辛酮酯为灯盏细辛的有效部位，含有总黄酮类和总咖啡酸酯。
附加技术特征a.小容量灯盏细辛酮酯注射液，由灯盏细辛酮酯100～200mg，注射用水加至5～10ml组成。
b.大容量灯盏细辛酮酯氯化钠注射液，由灯盏细辛酮酯100～200mg，注射液总量0.9％氯化钠，注射用水加至50～100ml组成。
c.大容量灯盏细辛酮酯葡萄糖注射液，由灯盏细辛酮酯100～200mg，注射液总量5％葡萄糖，注射用水加至50～100ml组成。
d.大容量灯盏细辛酮酯甘油注射液，由灯盏细辛酮酯100～200mg，注射液总量2.6％(W/V)甘油，注射用水加至50～100ml组成。
e.注射用灯盏细辛酮酯(冻干粉针剂)，由灯盏细辛酮酯65～130mg，以150～200mg的甘露醇或葡聚糖或木糖醇或山梨醇作膨松剂，加注射用水加至2.5～3ml组成，经冷冻干燥制成0.25～0.40g冻干粉针剂。
本发明灯盏细辛酮酯及其注射剂，由灯盏细辛酮酯提取纯化工艺及注射剂制备工艺组成。其中灯盏细辛酮酯的提取纯化工艺为取灯盏细辛粗粉，用8倍量75％乙醇回流提取3次，每次1小时，合并醇液，滤过，滤液在95℃下减压回收乙醇，浓缩至每1ml相当于药材1g左右，冷藏过夜，滤过，用10％的氢氧化钠调节pH至8.0左右，加热溶解，加0.5％(W/V)活性炭搅匀，保温吸附约10分钟，趁热过滤，滤液在搅拌下缓缓加入20％硫酸溶液，调节pH至2～3，冷藏过夜，离心后过滤，沉淀用水洗涤至中性，沉淀备用；滤液浓缩至有沉淀产生(析出)，冷却至50℃，滤取沉淀，再浓缩至有沉淀析出，同法收集沉淀，滤液备用；合并3次沉淀，用水洗2～3次，75％乙醇洗2～3次，醇洗液备用；沉淀加1/5药材量的纯水搅匀，加10％氢氧化钠溶液调节pH值8.0左右，加热溶解后加0.5％(W/V)活性炭搅匀，保温吸附约10分钟，趁热滤过，滤液在搅拌下缓缓加入20％硫酸溶液调节pH值2～3，静置约2小时，滤过，用纯水洗涤2～3次，再用75％乙醇洗涤2～3次，收集沉淀，即得灯盏细辛总黄酮，备用；收集最后一次沉淀的滤液，浓缩至每1ml相当于药材10g左右，上聚酰胺柱(柱径与柱高比为1∶5～6，聚酰胺用量为药材量的15％)，先用水洗涤至水液pH值至5～6，水洗液备用；再用75％乙醇洗至浅黄色，在95℃下减压回收乙醇，并浓缩至每1ml相当于药材10g左右，即得灯盏细辛总咖啡酸酯，备用；取上述备用醇洗液，回收乙醇后与上述水洗液加热浓缩至每1ml相当于药材10g左右，冷藏4小时左右，滤过，滤液上聚酰胺柱(柱径与柱高比为1∶5～6，用量为药材量的10％)，先用水洗涤至pH值5～6，再用75％乙醇洗至淡黄色，在95℃下减压回收仲丁醇，并浓缩至每1ml相当于药材20g左右，与上述总咖啡酸酯浓缩液合并，并加入上述灯盏细辛总黄酮，并加入10％氢氧化钠溶液调节pH值至7.5左右，加热浓缩至稠膏状，在85℃左右下真空干燥，即得灯盏细辛酮酯(中间体)，密封保存，备用。
注射剂制备的特征在于取灯盏细辛酮酯100～200mg，加处方量约20％的注射用水，调节pH值至7.0左右，加热至沸，加吸附剂吸附约10min，过滤脱炭除吸附剂，加注射用水至全量，大容量氯化钠注射液加注射液总量0.9％氯化钠、大容量葡萄糖注射液加注射液总量5％葡萄糖、大容量甘油注射液加注射液总量2.6％(W/V)甘油、冻干粉针剂加150～200mg甘露醇或葡聚糖或山梨醇或木糖醇，调节pH值，精滤澄明，灌封，灭菌，灯检，包装，成品检验；冻干粉针剂经冷冻干燥，成品检验，包装即得。
本发明的优点在于生物利用度高，血药浓度高，药效发挥快，质量可控，毒副作用和不良反应小，充分利用了灯盏细辛的有效部位，避免了资源浪费。由灯盏细辛酮酯(含黄酮类、咖啡酸酯)制成的注射剂，药效试验证明，治疗胸痹心痛证(冠心病心绞痛)和中风(缺血性脑梗塞及脑梗塞后遗症)，疗效确切，药效较原灯盏花注射液和原灯盏细辛注射液均增强。
本发明的药物治疗心脑血管理论依据如下中医理论认为胸痹心痛证主要病机为痰瘀互结，立淫外袭，情志不节等，导至脉络阻滞，滞而成瘀，血瘀则闭，闭而成痹，痹则五脏失养、失调，终至正气虚衰。本病实证为寒凝、气滞、血瘀、痹阻胸痛、阻滞心脉，在心为痹，在脑为卒中，故有益心通脑、活血化瘀、舒络通脉以解瘀之实。灯盏细辛为辛，微苦，辛善通活，性温，温能行散，通活能化瘀，行散能化痰，心、脑、脉络同活，行血导气，故有祛风致寒、活血通络止痛之功，符合中医理论。
现代药学研究表明灯盏细辛有效部位为黄酮类和咖啡酸酯类，即灯盏细辛酮酯。灯盏细辛酮酯能降低心、脑血管阻力，增加心、脑血流量，改善微循环，改善脑缺血再灌脑组织血流量，抑制PKC过度激活或位移激活，抑制EAA氨基酸胞外堆积和细胞内钙超载，防止氧自由基生成，同时还能显著降低血液粘度，抑制血小板聚集，降低右心室肥厚指数，改善心肌缺血所致ST段抬高，降低缺氧心肌细胞LDH、AST、CK，对抗血栓形成。
灯盏细辛酮酯所含黄酮类和咖啡酸酯类均为灯盏细辛有效成分，酮酯类合用，不仅使治疗胸痹心痛证(冠心病心绞痛)、中风之缺血性脑中风及中风后遗症更加有效，同时也提高了药材利用率。
药理毒理研究表明本发明灯盏细辛酮酯注射剂能抑制血小板聚集，延长凝血酶原时间，增强纤溶酶活性(P＜0.01)，降低血纤维蛋白质，促进抗原结合胞增生，提高机体巨噬细胞吞噬免疫功能；减小右心肥大指数(P＜0.05)，显著扩张冠状动脉，增加冠脉血流量，降低心肌耗氧量，改善心肌缺血(P＜0.01)，抑制LPC产生，增加脑组织的SOD、GSH-Px、CTA、Na+、K+-ATP活性，增加脑血流量，改善微循环，增加中动脉平均流速和峰值流速(P＜0.01)，显著降低LDH对脑组织损害，对脑缺血再灌注造成的脑组织损伤有逆反保护作用，减小梗塞范围，抑制过快心率(P＜0.01)。
急性毒性试验表明按60kg体重成人静脉日用量的850倍和721倍给予小鼠或大鼠注药之后，观察14天，动物无死亡，摄食量和体重无明显减少，处死动物后观察重要器官(心、肝、脾、肺、肾等)，均无异常发现，其余也未见异常。
长期毒性试验表明，连续对Beagle犬静脉滴注，按60kg体重成人静脉给药日用量50倍药物及停药30天观察，未见明显异常，亦无明显延迟性毒性反应。
临床试验研究表明灯盏细辛酮酯注射剂具有益心通脑、活血化瘀、舒络止痛的功能，主要用于治疗正气虚衰，脉络阻滞所致的胸痹心痛证(冠心病心绞痛)及脑中风(缺血性脑中风及中风后遗症)，小容量灯盏细辛酮酯注射液，每日一次，每次1～2个剂量单位或遵医嘱，加入5％葡萄糖注射液或0.9％氯化钠注射液50～100ml，静脉输注；大容量灯盏细辛酮酯氯化钠(葡萄糖或甘油)注射液，每日一次，每次1～2个剂量单位或遵医嘱，静脉输注；注射用灯盏细辛酮酯(冻干粉针剂)，每日一次，每次1～2个剂量单位或遵医嘱，加入5％葡萄糖或氯化钠注射液50～100ml静脉输注。灯盏细辛酮酯注射剂对胸痹心痛证(冠心病心绞痛)的显效率为75.3％，有效率为21.7％，总有效率97.0％；对中风之脑梗塞及脑梗塞后遗症的显效率为74.1％，有效率为22.5％，总有效率96.6％。
图1为本发明灯盏细辛酮酯的制备工艺流程2为本发明小容量灯盏细辛酮酯注射液制备工艺流程3为本发明大容量灯盏细辛酮酯氯化钠注射液制备工艺流程4为本发明大容量灯盏细辛酮酯葡萄糖注射液制备工艺流程5为本发明大容量灯盏细辛酮酯甘油注射液制备工艺流程6为本发明注射用灯盏细辛酮酯(冻干粉针剂)制备工艺流程图具体实施方式
制备工艺灯盏细辛酮酯按下述方法制备取灯盏细辛药材粗粉，用8倍量75％乙醇回流提取3次，每次1h，合并醇液，滤液，滤液在95℃下减压回收乙醇，浓缩至每1ml相当于药材1.5g左右，冷藏过夜，用纱布过滤(除去黑色块状杂质)，用10％的氢氧化钠调节pH值至8.0左右，加热至沸，加1％(W/V)活性炭吸附，保温吸附约10分钟，趁热过滤，滤液在搅拌下缓缓加入20％硫酸溶液，调节pH值至2～3，冷藏过夜，离心，沉淀备用；上清液浓缩至有沉淀析出，冷却至50℃左右，滤取沉淀，再浓缩至有沉淀析出，同法收集沉淀，滤液备用；合并3次沉淀，75％乙醇洗2～3次，用水洗2～3次，再用乙醇洗涤1～2次，加1/5药材量的纯水搅匀，加10％氢氧化钠溶液调节pH值8.0左右，加热溶解后加0.5％(W/V)活性炭搅匀，保温吸附约10分钟，趁热滤过，滤液在搅拌下缓缓加入20％硫酸溶液调节pH值2～3，静置约2小时，滤过，用75％乙醇洗涤2～3次，再用纯水洗涤2～3次，收集沉淀，即得灯盏细辛总黄酮，备用；收集最后一次沉淀的滤液，浓缩至每1ml相当于药材10g左右，上聚酰胺柱(柱径与柱高比为1∶5～6，聚酰胺用量为药才量的15％，即450g)，先用水洗涤至水溶液pH值至5～6，水洗备用；再用75％乙醇洗脱至洗脱液为微黄色，在95℃下减压回收乙醇，并浓缩至每1ml相当于药材10g左右，即得灯盏细辛总咖啡酸酯浓缩液，备用；取水洗液加热浓缩至每1ml相当于药材10g左右，冷藏4小时左右，滤过，滤液上聚酰胺柱(柱径与柱高比为1∶5～6，用量为药材量的10％)，先用纯水洗至pH值5～6，再用75％乙醇洗至淡黄色，在95℃下减压回收乙醇，浓缩至每1ml相当于药材20g左右，与上述咖啡酸酯浓缩液合并，加入上述灯盏细辛总黄酮，并加入10％氢氧化钠溶液调节pH值至7.5左右，加热浓缩至稠膏状，在85℃下真空干燥，即得灯盏细辛提取物(中间体)，冷藏备用。
小容量灯盏细辛酮酯注射液按下述方法制备出成品取灯盏细辛酮酯65～130mg，加处方量约20％的注射用水，加0.3％(W/V)活性炭吸附约10min，过滤脱炭，加注射用水至全量，用10％氢氧化钠溶液调节pH至7.0左右，加热至沸，用0.45μm和0.22μm滤膜精滤澄明，灌封于5～10ml曲颈安瓿中，100℃灭菌30min，经检漏、灯检、印字、成品检验、包装即得。
实施例A小容量灯盏细辛酮酯注射液例1由灯盏细辛酮酯100mg，注射用水加至5ml组成。
例2由灯盏细辛酮酯200mg，注射用水加至10mi组成。
大容量灯盏细辛酮酯氯化钠注射液按下述方法制备出成品取灯盏细辛酮酯100～200mg，加注射液总量0.9％(W/V)的氯化钠，加处方量约20％的注射用水，调节pH值至7.0左右，加热煮沸，加0.3％(W/V)活性炭吸附约10min，过滤脱炭，加注射用水至全量，调节pH至7.0左右，精滤澄明，灌封于50～100ml输液瓶中，灭菌、灯检、贴标、成品检验、包装即得。
实施例B大容量灯盏细辛酮酯氯化钠注射液例1由灯盏细辛酮酯100mg，氯化钠0.45g，注射用水加至50ml组成。
例2由灯盏细辛酮酯200mg，氯化钠0.9g，注射用水加至100ml组成。
大容量灯盏细辛酮酯葡萄糖注射液按下述方法制备出成品取灯盏细辛酮酯100～200mg，加注射液总量5％(W/V)的葡萄糖，加处方量约20％的注射用水，调节pH值至6.0左右，加热煮沸，加0.3％(W/V)活性炭吸附约10min，过滤脱炭，加注射用水至全量，调节pH至6.0左右，精滤澄明，半成品检验合格后，灌封于50～100ml输液瓶中，灭菌、灯检、贴标、成品检验、包装即得。
实施例C大容量灯盏细辛酮酯葡萄糖注射液例1由灯盏细辛酮酯100mg，葡萄糖2.5g，注射用水加至50ml组成。
例2由灯盏细辛酮酯200mg，葡萄糖5g，注射用水加至100ml组成。
大容量灯盏细辛酮酯甘油注射液按下述方法制备出成品取灯盏细辛酮酯100～200mg，加注射液总量2.6％(W/V)的甘油，加处方量约20％的注射用水，调节pH值至7.0左右，加热煮沸，加0.3％(W/V)活性炭吸附约10min，过滤脱炭，加注射用水至全量，精滤澄明，半成品检验合格后，灌封于50～100ml输液瓶中，灭菌、灯检、贴标、成品检验、包装即得。
实施例D大容量灯盏细辛酮酯甘油注射液例1由灯盏细辛酮酯100mg，甘油1.3g，注射用水加至50ml组成。
例2由灯盏细辛酮酯200mg，甘油2.6g，注射用水加至100ml组成。
注射用灯盏细辛酮酯(冻干粉针剂)按下述方法制备出成品取灯盏细辛酮酯100～200mg，甘露醇或山梨醇或木糖醇或葡聚糖150～200mg，加处方量约60％的注射用水，加热煮沸，加吸附剂吸附约10min，过滤脱除吸附剂，注射用水加至2.5～3ml，用0.45μm和0.22μm微孔滤膜组成的复合微孔滤器过滤除菌，无菌条件下装入已灭菌的7～10ml冻干瓶中，预冻，然后冷冻干燥，制成0.25～0.4g冻干粉针剂，封口、贴标、成品检验、包装即得。
实施例E注射用灯盏细辛酮酯(冻干粉针剂)由灯盏细辛酮酯100～200mg，甘露醇或山梨醇或木糖醇或葡聚糖180mg，注射用水加至2.5～3.0ml组成。
例1由灯盏细辛酮酯100mg，甘露醇150mg，注射用水加至2.5ml组成，制成冻干粉针剂0.25g/瓶。
例2由灯盏细辛酮酯100mg，木糖醇150mg，注射用水加至2.5ml组成，制成冻干粉针剂0.25g/瓶。
例3由灯盏细辛酮酯100mg，葡萄糖150mg，注射用水加至2.5ml组成，制成冻干粉针剂0.25g/瓶。
例4由灯盏细辛酮酯100mg，葡聚糖150mg，注射用水加至2.5ml组成，制成冻干粉针剂0.25g/瓶。
例5由灯盏细辛酮酯200mg，甘露醇200mg，注射用水加至3ml组成，制成冻干粉针剂0.4g/瓶。
例6由灯盏细辛酮酯200mg，山梨醇200mg，注射用水加至3ml组成，制成冻干粉针剂0.4g/瓶。
例7由灯盏细辛酮酯200mg，葡萄糖200mg，注射用水加至3ml组成，制成冻干粉针剂0.4g/瓶。
例8由灯盏细辛酮酯200mg，葡聚糖200mg，注射用水加至3ml组成，制成冻干粉针剂0.4g/瓶。
例9由灯盏细辛酮酯200mg，木糖醇200mg，注射用水加至3ml组成，制成冻干粉针剂0.4g/瓶。
权利要求
1.一种益心通脑、活血化瘀、舒络止痛的灯盏细辛有效部位灯盏细辛酮酯及其注射剂组合物，灯盏细辛酮酯总含量不低于85％，其特征在于该提取物活性成分由含量为50％左右的黄酮类和含量为40％左右的咖啡酸酯类组成，灯盏细辛酮酯注射剂组合物包括小容量灯盏细辛酮酯注射液、大容量灯盏细辛酮酯氯化钠注射液、大容量灯盏细辛酮酯葡萄糖注射液、大容量灯盏细辛甘油注射液、灯盏细辛酮酯冻干粉针剂，均由适量灯盏细辛酮酯、药用辅料和注射用水组成，其特征在于所用灯盏细辛酮酯由黄酮类和咖啡酸酯组成。
2.按照权利要求1所述的小容量用灯盏细辛酮酯注射液组合物，其特征在于灯盏细辛酮酯100mg，其中含黄酮类不低于48mg，咖啡酸酯类不低于37mg，加注射用水至5～10ml。
3.按照权利要求1所述的大容量用灯盏细辛酮酯氯化钠注射液组合物，其特征在于灯盏细辛酮酯100mg，其中含黄酮类不低于48mg，咖啡酸酯类不低于37mg，注射液总量0.9％的氯化钠，加注射用水至50～100ml。
4.按照权利要求1所述的大容量用灯盏细辛酮酯葡萄糖注射液组合物，其特征在于灯盏细辛酮酯100mg，其中含黄酮类不低于48mg，咖啡酸酯类不低于37mg，注射液总量5％的葡萄糖，加注射用水至50～100ml。
5.按照权利要求1所述的灯盏细辛酮酯甘油注射液组合物，其特征在于灯盏细辛酮酯100mg，其中含黄酮类不低于48mg，咖啡酸酯类不低于37mg，甘油总量为2.6％(W/V)，加注射用水至50～100ml。
6.按照权利要求1所述的大容量用灯盏细辛酮酯冻干粉针剂组合物，其特征在于灯盏细辛酮酯100mg，其中含黄酮类不低于48mg，咖啡酸酯类不低于37mg，甘露醇或木糖醇或山梨醇或葡聚糖150mg，加注射用水至2.5～3ml，经冷冻干燥制成0.25g冻干粉针剂。
7.一种制备权利要求1、2、3、4、5所述的灯盏细辛酮酯及其注射液的工艺方法，由灯盏细辛酮酯的提取纯化工艺、注射剂制备工艺组成；其中灯盏细辛酮酯的提取纯化工艺，其特征在于取灯盏细辛粗粉，用8倍量75％乙醇回流提取3次，每次1小时，合并醇液，滤过，滤液在95℃下减压回收乙醇，浓缩至每1ml相当于药材1g左右，冷藏过夜，滤过，用10％的氢氧化钠调节pH至8.0左右，加热溶解，加0.5％(W/V)活性炭搅匀，保温吸附约10分钟，趁热过滤，滤液在搅拌下缓缓加入20％硫酸溶液，调节pH至2～3，冷藏过夜，离心后过滤，沉淀用水洗涤至中性，沉淀备用；滤液浓缩至有沉淀产生(析出)，冷却至40℃，滤取沉淀，再浓缩至有沉淀析出，同法收集沉淀，滤液备用；合并3次沉淀，用水洗2～3次，75％乙醇洗2～3次，醇洗液备用；沉淀加1/5药材量的纯水搅匀，加10％氢氧化钠溶液调节pH值8.0左右，加热溶解后加0.5％(W/V)活性炭搅匀，保温吸附约10分钟，趁热滤过，滤液在搅拌下缓缓加入20％硫酸溶液调节pH值2～3，静置约2小时，滤过，用纯水洗涤2～3次，再用75％乙醇洗涤2～3次，收集沉淀，即得灯盏细辛总黄酮，备用；收集最后一次沉淀的滤液，浓缩至每1ml相当于药材10g左右，上聚酰胺柱(柱径与柱高比为1∶5～6，聚酰胺用量为药材量的15％，聚酰胺先用纯水浸泡2～3小时，滤过，再用乙醇浸泡2～3小时，滤过，在70～80℃下干燥备用)，先用水洗涤至水液pH值至5～6，水洗液备用；再用75％乙醇洗至浅黄色，在95℃下减压回收乙醇，并浓缩至每1ml相当于药材10g左右，备用；取上述备用醇洗液回收乙醇后，与上述水醇液合并，并浓缩至每1ml相当于药材10g左右，冷藏4小时左右，滤过，滤液上聚酰胺柱(柱径与柱高比为1∶5～6，聚酰胺用量为药材量的10％)，先用水洗涤至pH值5～6，再用75％乙醇洗至淡黄色，在95℃下减压回收乙醇，并浓缩至每1ml相当于药材20g左右，与上述咖啡酸酯类浓缩液合并，即得灯盏细辛咖啡酸酯类浓缩液，加入上述灯盏细辛总黄酮，并加入10％氢氧化钠溶液调节pH值至7.5左右，加热浓缩至稠膏状，在85℃左右，真空干燥，即得灯盏细辛酮酯(中间体)，密封保存，备用。
8.按照权利要求1、2、3、4、5、6所述制备辛芪注射剂的方法，其特征在于所述注射剂制备工艺，包括小容量灯盏细辛酮酯注射液制备工艺、大容量灯盏细辛酮酯氯化钠注射液制备工艺、大容量酮酯葡萄糖注射液制备工艺、灯盏细辛酮酯冻干粉针剂制备工艺；其中a.小容量灯盏细辛酮酯注射液制备工艺，其特征在于取灯盏细辛酮酯100～200mg，加处方量约20％的注射用水，加热煮沸，加吸附剂吸附，过滤脱除吸附剂，加注射用水至全量，用10％氢氧化钠溶液调节pH至7.0左右，用0.45μm、0.22μm滤膜精滤澄明，灌封于5～10ml曲颈安瓿中，100℃灭菌30min，经检漏、灯检、印字、成品检验、包装即得。b.大容量灯盏细辛酮酯氯化钠注射液制备工艺，其特征在于取灯盏细辛酮酯100～200mg，加注射液总量0.9％(W/V)的氯化钠，加处方量约20％的注射用水，调节pH值至7.0左右，加热煮沸，加吸附剂吸附约10min，过滤脱除吸附剂，加注射用水至全量，用10％氢氧化钠溶液调节pH至7.0左右，精滤澄明，半成品检验合格后，灌封于50～100ml输液瓶中，灭菌、灯检、贴标、成品检验、包装即得。c.大容量灯盏细辛酮酯葡萄糖注射液制备工艺，其特征在于取灯盏细辛酮酯100～200mg，加注射液总量5％(W/V)的葡萄糖，加处方量约20％的注射用水，调节pH值至6.0左右，加热煮沸，加0.3％(W/V)活性炭搅匀吸附约10min，过滤脱炭，加注射用水至全量，调节pH至6.0左右，精滤澄明，半成品检验合格后，灌封于50～100ml输液瓶中，灭菌、灯检、贴标、成品检验、包装即得。d.灯盏细辛酮酯甘油注射液制备工艺，其特征在于取灯盏细辛酮酯100～200mg，加注射液总量2.6％(W/V)的甘油，加处方量约20％的注射用水，调节pH值至7.0左右，加热煮沸，加0.3％(W/V)活性炭搅匀吸附，滤过，滤液加注射用水至全量，精滤，灌封于50～100ml输液瓶中，灭菌、冷却、灯检、贴标、成品检验、包装即得。e.灯盏细辛酮酯冻干粉针剂制备工艺，其特征在于取灯盏细辛酮酯100～200mg，甘露醇或山梨醇或木糖醇或葡聚糖150～200mg，加处方量约60％的注射用水，加热煮沸，加吸附剂吸附约10min，过滤脱除吸附剂，加注射用水至2.5～3ml，用0.45μm和0.22μm微孔滤膜组成的复合微孔滤器过滤除菌，无菌条件下装入已灭菌的7～10ml冻干瓶中，预冻，然后冷冻干燥，制成0.25g～0.4g冻干粉针剂，封口、贴标、成品检验、包装即得。
9.按照权利要求所述的灯盏细辛酮酯注射剂治疗胸痹心痛证、脑中风(即缺血性脑中风及中风后遗症)，小容量灯盏细辛酮酯注射液，每日一次，每次1～2个剂量单位；或遵医嘱，加入5％葡萄糖或0.9％氯化钠注射液50～100ml静脉输注；大容量灯盏细辛酮酯氯化钠或葡萄糖注射液，每日一次，每次1～2个剂量单位；或遵医嘱，静脉输注；灯盏细辛酮酯冻干粉针剂，每日一次，每次1～2个剂量单位；或遵医嘱，加入5％葡萄糖或0.9％氯化钠注射液50～100ml静脉输注。
全文摘要
本发明公开一种灯盏细辛有效部位灯盏细辛酮酯的提取方法及灯盏细辛酮酯注射剂的制备方法。灯盏细辛酮酯由约50％黄酮类和40％的咖啡酸酯类组成，其提取方法的特征在于取灯盏细辛药材粗粉乙醇回流提取，浓缩，调pH值，3次醇沉，上清液经浓缩，上聚酰胺柱，醇洗，回收乙醇，得咖啡酸酯，与3次总沉淀混合后，加注射用水，调pH值，浓缩干燥，得灯盏细辛酮酯(中间体)。注射剂的制备方法的特征在于用灯盏细辛酮酯(中间体)，药用辅料，注射用水组成，可制成小针剂、输液剂、冻干粉针剂，由灯盏细辛酮酯制成的注射剂，优点是生物利用度高、血药浓度高，药效作用快，治疗正气虚衰，血淤脉阻所致的胸痹心痛证、缺血性脑中风及中风后遗症疗效确切、安全。
文档编号A61K36/28GK1762375SQ200510021769
公开日2006年4月26日 申请日期2005年9月29日 优先权日2005年9月29日
发明者罗明生 申请人:四川三民药业有限公司