专利名称：一种复方抗病毒喷雾剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种复方抗病毒喷雾剂及其制备方法。用于预防和治疗禽类病毒感染。
背景技术：
禽流感是由禽流感病毒引起的一种急性传染病，也能感染人类，感染后的症状主要表现为高热、咳嗽、流涕、肌痛等，多数伴有严重的肺炎，严重者心、肾等多种脏器衰竭导致死亡，病死率很高。此病可通过消化道、呼吸道等多种途径传播，人员和车辆往来是传播本病的重要因素。
一些国家高致病性禽流感疫情呈明显扩大态势，形势十分复杂。世界卫生组织(WHO)等国际组织日前发出警告，禽流感疫情有大规模暴发的危险，呼吁各国提高警惕，做好应对准备。在候鸟迁徙季节，全球有三条候鸟迁徙路线经过中国，带毒迁徙候鸟与家禽接触，容易引发新的疫情。我国部分地区家禽饲养方式相对落后，活禽流通和跨区域调运频繁，防控工作还存在一些薄弱环节。中国高致病性禽流感防控任务相当艰巨。
1997年香港的禽流感引发了一次规模不小的流感，在这次流感流行过程中有6人死亡。香港政府当机立断销毁了包括鸡在内的全部家禽。这次香港流感与1918年发生的流感大流行相隔近80年，经科学家研究，尽管两次流感流行间隔久远，但却有相似之处流感病毒发生的基因变异重组出一种人体免疫系统没有接触过的流感病毒新变种，然后流感从动物身上转移到人身上。
对禽流感的治疗，目前尚缺乏理想的特效药物。中国卫生部印发的人禽流感诊疗方案中，主要采用奥司他韦(Oseltamivir，达菲)、金刚烷胺(Amantadine)和金刚乙胺(Rimantadine)等抗病毒药物，辅以解热祛痰止咳等对症治疗及中医药辨证治疗。
我们采用纯中药提取物莪术油与贯叶连翘的提取物组成复方制剂，可以为禽流感的预防和治疗提供较好的方法。莪术油中含有莪术醇，对呼吸道合胞病毒(RSV)有直接抑制作用，对流感病毒A1型和A3型有直接灭活作用。贯叶连翘为双子叶植物药藤黄科植物贯叶连翘的全草或带根全草，其中含有的金丝桃素(Hypericin)和伪金丝桃素(pesudohypericin)具有很强的抗病毒作用，在体外试验中，能强烈地抑制各种逆转录病毒(retrolirus)。这两种药物合用能提高疗效，同时安全性也较好。
发明内容
本发明旨在提供一种抗病毒喷雾剂及其制备方法。该喷雾剂既可抑制或杀灭体表、物品及空气中的病毒、细菌等病原微生物，又可经禽类嘴部喷入以预防和治疗病毒性感染疾病。
具体技术方案如下由莪术油和贯叶连翘提取物组成的复方喷雾剂，该组方具有显著的抗病毒抗菌作用，其具体特征如下
将姜科植物莪术提取出的挥发油精制成有效部位一莪术油，藤黄科植物贯叶连翘HypericumPerforatum的带花全草提取物按一定的比例配制成固体或液体或无菌药物制剂。
1、该复方抗病毒喷雾剂，其特征在于，配方(重量份)为莪术油0.1～10％贯叶连翘提前物0.1～10％助溶剂A 1～5％助溶剂B 1～5％抑菌剂0.01～0.5％蒸馏水加至100％2、如权利要求书1所说的喷雾剂，其特征在于所述的助溶剂A和B选自脂肪酸山梨坦(SPan)类物质、聚山梨酯(Tween)类物质、聚氧乙烯脂肪酸酯类物质、聚氧乙烯脂肪醇醚(Brij)类物质、聚氧乙烯一聚氧丙烯共聚物、十二烷基硫酸钠、或溴化十六烷基三甲基溴化胺、或其混合物。
3、如权利要求书1所说的喷雾剂，其特征在于所述的抑菌剂选自尼泊金酯类(甲酯、丙酯)、新洁而灭、氯苄乙胺、苯甲醇、三氯叔丁醇、硫柳汞等。
4、一种复方抗病毒喷雾剂的制备方法，其特征在于，按以下步骤进行制备(1)称取权利要求1所述量的莪术油，加助溶剂A混合均匀，为溶液1；(2)称取权利要求1所述量的贯叶连翘提前物，加助溶剂B混合均匀，为溶液2；(3)将溶液2在搅拌下加到溶液1中，并混合均匀；(4)将少量蒸馏水溶解后的抑菌剂加入到上述混合液中，搅拌均匀；(5)加蒸馏水至约全量，进行中间体检测，并调节pH值和含量至产品合格；(6)在1万级净化条件下药液先过滤机粗滤，再用超滤器精滤，然后分装在带有喷雾器的容器内；(7)检验将分装后的成品进行产品检验，然后入库。
本发明的积极效果该药物制剂灌装在微型喷雾器中以喷雾的形式使用。(1)用于环境空气消毒灭菌，可以短时间内有效杀灭各种病毒、病菌，对人体无毒、无害、无色染、无腐蚀，喷雾后不需漂洗，也不会产生耐药性，使用方法独特，携带使用非常简单，可为人们随时随地提供洁净的生活和工作环境，远离病毒和病菌的侵害；(2)又可经禽类嘴部喷入以预防和治疗病毒性感染疾病。
实施例1处方莪术油0.3％贯叶连翘提前物0.25％
吐温802.5％乙醇 2.5％尼泊金丙酯0.02％蒸馏水加至100％配制方法(1)称取处方量莪术油，加吐温80混合均匀，为溶液1；(2)称取处量的贯叶连翘提前物，加处方量乙醇溶解，为溶液2；(3)将溶液2在搅拌下加到溶液1中，并混合均匀；(4)将少量蒸馏水溶解后的尼泊金丙酯加入到上述混合液中，搅拌均匀；(5)加蒸馏水至约全量的95％，进行中间体检测，并调节pH值和含量至产品合格；(6)在1万级净化条件下药液先过滤机粗滤，再用超滤器精滤，然后分装在带有喷雾器的容器内；(7)检验将分装后的成品进行产品检验，然后入库。
实施例2处方莪术油1％贯叶连翘提前物0.5％乙醇 5％硫柳汞0.01％蒸馏水加至100％配制方法(1)称取处量的贯叶连翘提前物，加处方量一半的乙醇溶解，为溶液1；(2)称取处方量莪术油，加处方量一半的乙醇搅拌均匀，为溶液2；(3)将溶液2在搅拌下加到溶液1中，并混合均匀；(4)将少量蒸馏水溶解后的硫柳汞加入到上述混合液中，搅拌均匀；(5)加蒸馏水至约全量的95％，进行中间体检测，并调节pH值和含量至产品合格；(6)在1万级净化条件下药液先过滤机粗滤，再用超滤器精滤，然后分装在带有喷雾器的容器内；(7)检验将分装后的成品进行产品检验，然后入库。
抗鸡源H5-AIV病毒实验1材料与方法
1.1 材料1.1.1 试验用病毒 AIV病毒株A/Chicken/Guangdong/1/2004(简称鸡源H5-AIV)由华南农业大学兽医学院禽病教研室分离、纯化保存。
1.1.2 试验用药物及来源 贯叶连翘提取物溶液的浓度为20μg/mL、200μg/mL、500μg/mL；莪术油溶液的浓度为20μg/mL、200μg/mL、500μg/mL；样品①为按照实施例1处方和工艺制备；样品②为按照实施例2处方和工艺制备。
1.1.3 试验用鸡胚 为10天龄低免疫鸡胚，由佛山市墟岗黄畜牧有限公司提供；1.1.4 HA试验用红细胞 为0.5％的鸡红细胞，自行配制；1.1.5 试验用酸碱 0.1N NaOH，0.1N HCl。
1.2 方法1.2.1 0.5％的鸡红细胞的制备由成年公鸡的翅静脉或心脏采血，放入灭菌试管(按每毫升血加入3.8％灭菌柠檬酸钠0.2mL做抗凝剂)内，迅速混匀。然后将血液注入离心管中，经3000转/分钟，离心10～15min，用吸管吸去上清液和红细胞上层的白细胞薄膜，将沉淀的红细胞加稀释液(生理盐水)洗涤，再用离心机3000转/min离心10～15min弃去上清液，再加稀释液洗涤，如此反复洗涤三次，将最后一次离心后的的红细胞泥，按0.5％的稀释度加入稀释液(0.5mL红细胞加99.5mL生理盐水)。
1.2.2 禽流感病毒鸡胚半数感染量(EID50)的测定将病毒原液用灭菌生理盐水按10-3～10-10稀释，接种10天龄鸡胚，每个稀释度接种8枚胚(鸡源H5-AIV采用了每个稀释度7枚胚的方法)，0.2mL/胚，37℃孵育，24小时内死亡的鸡胚弃去。测定24小时后死亡胚的HA效价，大于4孔为阳性。按Reed-Muench两氏法计算EID50。
1.2.3 药物pH值的调整用0.1N NaOH，0.1N HCl将抗禽流感病毒中药的pH值调为6～8之间。
1.2.4 药物对鸡胚的半数中毒剂量的测定倍比稀释药物，设5个度，5胚/组，0.2mL/胚，96小时，另设空白对照组。对胚不致死、不影响胚体正常发育者判为安全。按Reed-Muench两氏法计算半数中毒剂量，如用药物原液组胚体均正常发育，可视原液浓度为半数中毒剂量。
1.2.5 药物对禽流感病毒的抑制作用接种50个EID50(0.2mL)的病毒+最大安全剂量的药物(0.2mL)，5枚/组；37℃，72小时，24小时内死亡的胚弃去。72h冻胚(24h后死亡的胚则立即冻胚)，测HA效价，大于4孔为阳性。另设病毒阳性对照组。
2结果与分析2.1 禽流感病毒鸡胚半数感染量(EID50)的测定 结果如表3.1表3.1 禽流感病毒鸡胚半数感染量(EID50)
*为HA阳性胚数/接种胚数2.2 药物对鸡胚的半数中毒剂量的测定 结果如表3.2表3.2 半数中毒剂量的测定
*为正常发育胚数/接胚总数2.3 药物对禽流感病毒的抑制作用结果2.3.1 药物对鸡源H5-AIV的抑制作用结果 结果如表3.3表3.3 药物对鸡源H5-AIV的抑制作用结果
2.3.5 所有试验中药及复方对鸡源H5-AIV毒株的抑制作用的结果 根据表3-3的结果，用“+”表示10枚胚中的尿囊液均HA效价均为0，用“-”表示表示10枚胚中的尿囊液均HA效价均大于4孔，用“±”表示10枚胚中部分胚的尿囊液HA效价为0，“/”表示没用做相应的试验。表3.4为所有试验中草药对鸡源H5-AIV毒株的抑制作用的结果。
表3.4 所有试验中药及复方对鸡源H5-AIV毒株的抑制作用的结果
权利要求
1.一种复方抗病毒喷雾剂，其特征在于，配方(重量份)为莪术油 0.1～10％贯叶连翘提前物 0.1～10％助溶剂A 1～5％助溶剂B 1～5％抑菌剂 0.01～0.5％蒸馏水 加至100％
2.如权利要求书1所说的喷雾剂，其特征在于所述的助溶剂A和B选自脂肪酸山梨坦(SPan)类物质、聚山梨酯(Tween)类物质、聚氧乙烯脂肪酸酯类物质、聚氧乙烯脂肪醇醚(Brij)类物质、聚氧乙烯一聚氧丙烯共聚物、十二烷基硫酸钠、或溴化十六烷基三甲基溴化胺、或其混合物。
3.如权利要求书1所说的喷雾剂，其特征在于所述的抑菌剂选自尼泊金酯类(甲酯、丙酯)、新洁而灭、氯苄乙胺、苯甲醇、三氯叔丁醇、硫柳汞等。
4.一种复方抗病毒喷雾剂的制备方法，其特征在于，按以下步骤进行制备(1)称取权利要求1所述量的莪术油，加助溶剂A混合均匀，为溶液1；(2)称取权利要求1所述量的贯叶连翘提前物，加助溶剂B混合均匀，为溶液2；(3)将溶液2在搅拌下加到溶液1中，并混合均匀；(4)将少量蒸馏水溶解后的抑菌剂加入到上述混合液中，搅拌均匀；(5)加蒸馏水至约全量的90％，进行中间体检测，并调节pH值和含量至产品合格；(6)在1万级净化条件下药液先过滤机粗滤，再用超滤器精滤，然后分装在带有喷雾器的容器内；(7)检验将分装后的成品进行产品检验，然后入库。
全文摘要
一种中药抗病毒喷雾剂，本发明是由莪术油和贯叶连翘提取物组成的复方喷雾剂，该组方具有显著的抗病毒抗菌作用，其特征是将姜科植物莪术提取出的挥发油精制成有效部位——莪术油，藤黄科植物贯叶连翘Hypericum Peroratum的带花全草提取物按一定的比例配制成固体或液体或无菌药物制剂，使用时将该药物制剂灌装在微型喷雾器中以喷雾的形式使用。用于环境空气消毒灭菌，可以短时间内有效杀灭各种病毒、病菌，对人体无毒、无害、无色染、无腐蚀，喷雾后不需漂洗，也不会产生耐药性，使用方法独特，携带使用非常简单，可为人们随时随地提供洁净的生活和工作环境，远离病毒和病菌的侵害。又可经禽类嘴部喷入以预防和治疗病毒性感染疾病。
文档编号A61P31/12GK1961679SQ20051010093
公开日2007年5月16日 申请日期2005年11月8日 优先权日2005年11月8日
发明者黄亚东, 姚崇舜, 李校堃, 项琪, 赵文 申请人:广州暨南大学医药生物技术研究开发中心