专利名称：具有催产素拮抗特性的物质用于制备治疗高血压的药物的制作方法
技术领域：
本发明涉及具有催产素拮抗特性的物质的用途和包括给予药学有效量的所述物质的治疗方法。
背景技术：
已知催产素是心血管激素和旁分泌递质，催产素和催产素受体表达于，例如心脏、血管内皮和平滑肌，以及肾(上皮)。
高血压是一种世界范围的常见病，该病患者中血压保持异常地高(140/90mmHg或更高)，原因是整个身体的微动脉保持收缩状态，驱使较大血管中的压力升高。因此，血流以大于正常值的压力流过血管。高血压使心脏过度疲劳，损伤动脉并增加了心脏病发作、中风和肾病的风险。
先兆子痫是仅在妊娠期发生的心血管病，既影响母亲又影响未出生的胎儿。它影响至少5％的孕妇，是一种快速进行性病症，其特征是高血压、肿胀(水肿)、尿中蛋白质排泄和胎儿生长限制。突发的体重增加、头痛和视力改变是重要的症状；然而，一些患有快速进行性疾病的妇女仅报告少数症状。先兆子痫一般发生在中三月或后三月晚期(妊娠中期至晚期)，但症状可能产生得较早。而且，患有先兆子痫的母亲的子女受到生长抑制的风险更高。合适的产前护理是诊断和治疗先兆子痫所必需的。先兆子痫、妊娠诱导的高血压(PIH)和毒血症是紧密相关的病症。HELLP综合征和子痫是更严重的形式。
HELLP综合征是先兆子痫(毒血症)的独特变体，HELLP代表H(溶血，红细胞分解)，EL(肝酶升高)，LP(血小板计数低)。它可对母亲和婴儿致命。HELLP综合征与先兆子痫前后发生。由于HELLP综合征的症状可能在先兆子痫的三种表现(高血压、尿中蛋白质排泄和肿胀(水肿))之前发生，它们可能被误诊为胃炎、弥散性血管内凝血(DIC)、急性肝炎、胆囊病和其它疾病的症状。结果是，母亲不能得到正确治疗，使母亲和婴儿处于较高风险中。
先兆子痫和妊娠期其它高血压病是世界上引起母亲和婴儿疾病和死亡的主要原因。保守估计，这些疾病每年在全世界引起约50,000-76,000例死亡。唯一已知的有效治疗是分娩胎儿。通常用MgSO4或其它抗高血压药对严重先兆子痫进行症状疗法和治疗。
宫内生长迟缓(IUGR)定义为小于孕龄预计胎重的10％，如果没有合适诊断可导致显著的胎儿发病率和死亡率。该病症最通常是由母胎循环不足引起，结果是胎儿生长和发育降低或抑制。不太常见的原因包括子宫内感染如巨细胞病毒和风疹，以及先天性异常如21三体性和18三体性。当诊断为IUGR时，重要的是试图矫正可逆的原因，尽管引起IUGR的许多情况不适合于产前治疗。通常推荐密切监视胎儿并且在妊娠38周前分娩。一些患有IUGR的出生婴儿有认知和医学问题，如器官发育的问题和出生前胎儿感染即先天性感染，尽管对于大多数婴儿来说，长期预后良好。IUGR在先兆子痫中是常见的。
在美国专利5,962,413中，通过给予有效缓解症状的量的一氧化氮合酶底物、一氧化氮供体或二者，联合一个或多个前列腺素抑制剂、前列环素模拟物、孕激素、催产素拮抗剂或β-激动剂以抑制子宫收缩来治疗雌性哺乳动物的痛经、无功能性子宫出血、早产和逾期分娩；通过单独给予一氧化氮抑制剂或联用孕酮拮抗剂、催产素或催产素类似物、或者前列腺素以刺激子宫收缩来实现妊娠雌性的月经失调、诱导流产或刺激分娩。因此，美国专利5,962,413的目的是调节雌性哺乳动物的子宫肌肉的一氧化氮依赖性收缩的方法。
本发明与美国专利5,962,413的不同之处在于不依赖用影响NO途径的化合物治疗收缩失调。
考虑到缺少上述疾病的治疗方法，因此，需要提供对高血压和参与高血压的疾病的治疗方法，尤其是因为当前没有对某些所述疾病还没有特定/病因疗法可用。
发明概述本发明一方面涉及具有催产素拮抗特性的物质在制造用于治疗与催产素诱导的血管收缩相关的疾病的药物中的用途。
本发明另一方面涉及一种治疗方法，包括将药学有效量的具有催产素拮抗特性的物质给予患有与催产素诱导的血管收缩相关的疾病的对象。
附图简要说明
图1显示催产素拮抗剂对妊娠大鼠的血压的影响。X轴代表妊娠时间(孕龄)，Y轴代表收缩压(mmHg)。将巴芦西班(barusiban)(200μg/d)、阿托西班(200μg/d)和对照(盐水)(200μg/d)在妊娠第19天至第22天和pp1至pp7(pp＝产后)给予妊娠大鼠。尤其是对巴芦西班而言，出生前后的收缩压有益地降低。
图2显示了将催产素体外给予分离的大鼠子宫动脉，对非妊娠、妊娠中期和妊娠晚期大鼠的宫缩的影响，以比较催产素敏感性。X轴代表催产素浓度[log M]，Y轴代表苯肾上腺素诱导的收缩％。与妊娠中期或妊娠晚期动物相比，非妊娠大鼠的子宫动脉对催产素的敏感性较高。获得了以下pD2值非妊娠(9.32±0.41，n＝7)，妊娠中期(7.46±0.13，n＝6)，妊娠晚期(7.87±0.39，n＝6)。可推测，通常妊娠期间子宫血管的敏感性较低与最终催产素局部浓度较高有关。
图3显示了从非妊娠自发性高血压(SHR)大鼠分离的子宫动脉、股动脉、颈动脉和主动脉的收缩剂量/反应关系和催产素敏感性。子宫动脉显示敏感性最高。
图4显示了从非妊娠Wistar(WKY)大鼠分离的子宫动脉、股动脉、颈动脉和主动脉的收缩剂量/反应关系和催产素敏感性。相比而言，子宫动脉具有显著的高敏感性。
图5显示了非妊娠Wistar和SHR大鼠的子宫动脉间的收缩剂量/反应关系和催产素敏感性。Wistar(WKY)大鼠显示敏感性较高。
与其它血管相比，子宫血管具有特别高的催产素敏感性，这说明内源性和(外源性催产素)对子宫血管的血管紧张性的关键作用。这些血管的收缩和舒张对胎儿、胎盘和子宫的灌注有直接影响。子宫血管的收缩和胎儿的灌注不足与疾病如IUGR或先兆子痫直接相关。本发明中催产素拮抗剂的新用途可引起直接子宫血管舒张和改善母亲和胎儿的疾病相关症状，以及使新生儿状况更好。
因此，图中所示实验在大鼠体内以及分离的动脉中证明了本发明构思。
发明详述在本发明用途的一个实施方式中，所述物质是肽。
在本发明用途的又一实施方式中，所述肽选自五肽、六肽、七肽、八肽、九肽和十肽。
在本发明用途的另一实施方式中，所述肽选自阿托西班、([Mpa1，D-Tyr(Et)2，Thr4，Orn8]-催产素、巴芦西班、C4，6，S1-环[N-(3-硫烷基丙酰基)-D-色氨酰-L-异亮氨酰-L-别异亮氨酰-L-天冬酰胺酰-L-2-氨基丁酰基-N-甲基-L-鸟氨酸醇(ornithinol)]及其药学上可接受的盐。
在本发明用途的一个实施方式中，所述具有拮抗特性的物质是七肽类似物或其药学上可接受的盐，具有催产素拮抗活性并由六肽部分S和通过酰胺键结合于部分S的C末端β氨基醇残基Z组成，其中β氨基醇是 其中Q是(CH2)n-NH-A，n是1-6，A是H或-C(＝NH)NH2，其中R是CH3或C2H5；部分S是 其中Mpa、Ile、Asn和Abu含义如下Mpa，3-巯基丙酸残基Ile，异亮氨酸残基Asn，天冬酰胺残基Abu，α-氨基丁酸残基；其中X是D-芳香族α-氨基酸；和Y是脂肪酸残基。
上述七肽类似物公开于EP 0 938 496 B1。
在本发明用途的又一实施方式中，所述具有拮抗特性的物质是加压催产素衍生物，其特征是它具有下式 其中Mpa是3-巯基丙酰残基(-S-CH2-CH2-CO-)；A是L-或D-酪氨酸-O-乙基醚(L-或D-Tyr(Et))的肽残基或疏水性D-氨基酸的肽残基；Ile是异亮氨酸的肽残基；B是谷氨酰胺(Gln)、苏氨酸(Thr)或缬氨酸(Val)的肽残基。
Asn是天冬酰胺的肽残基；Cys是半胱氨酸的肽残基；
Pro是脯氨酸的肽残基；C是L-或D-精氨酸(Arg)、鸟氨酸(Orn)或瓜氨酸(Cit)的肽残基；和Gly-NH2是甘氨酰胺的肽残基。
上述加压催产素衍生物公开于EP 0 112 809 B1。
在本发明用途的又一实施方式中，所述药物用于治疗高血压和用于治疗妊娠相关的高血压。
在本发明又一实施方式中，所述催产素诱导的血管收缩出现在子宫血管、胎盘和胎儿血管中。
在本发明用途的又一实施方式中，所述催产素诱导的血管收缩出现在心脏血管、肾脏血管、脑血管、胸腺血管、胰脏血管和任何其它血管中。预计可在哺乳动物体内，优选人体内存在催产素受体的任何血管中观察到根据本发明使用催产素拮抗剂的作用。
在本发明用途的又一实施方式中，所述药物用于治疗先兆子痫、宫内生长迟缓(IUGR)、胎儿的灌注不足、妊娠诱导的高血压(PIH)、毒血症、HELLP综合征或子痫。
在本发明方法中，所述物质优选肽。
在本发明方法的又一实施方式中，所述肽选自五肽、六肽、七肽、八肽、九肽和十肽。
在本发明方法的又一实施方式中，所述肽选自阿托西班、巴芦西班及其药学上可接受的盐。
在本发明方法的又一实施方式中，所述药物用于治疗高血压或用于治疗妊娠相关的高血压。
在本发明方法的另一实施方式中，所述催产素诱导的血管收缩出现在子宫血管、胎盘或胎儿血管中。
在本发明方法的又一实施方式中，所述催产素诱导的血管收缩出现在心脏血管、肾脏血管、脑血管、胸腺血管、胰血管或任何其它血管中。
在本发明方法的又一实施方式中，所述药物用于治疗先兆子痫、宫内生长迟缓(IUGR)、胎儿的灌注不足、妊娠诱导的高血压(PIH)、毒血症、HELLP综合征或子痫。
在本发明的一个实施方式中，用催产素拮抗剂治疗的所述对象是哺乳动物，优选人。
本文所用术语“药学有效量的物质”包括在单一剂量或多剂量中量为每患者每天约0.05mg-500mg，优选约1mg-350mg的物质。该剂量应足够高，以实现在体内对催产素诱导的血管收缩的弛缓效果，但没有任何负面副作用。
本文所用术语“物质”包括具有催产素拮抗特性的小分子、肽、非肽、肽模拟物或任何其它分子。
本文所用术语“五肽”指含有至少5个肽键的化合物。类似地，该定义可应用于六肽、七肽、八肽、九肽和十肽。
催产素拮抗剂可存在于适合给予患者的注射溶液中。除催产素拮抗剂之外，该注射溶液包括在本领域中常规用于注射溶液的任何赋形剂，如甘露醇、1M盐酸和注射用水。催产素拮抗剂也可存在于用于输注的浓缩溶液中。然而，催产素拮抗剂也可存在于任何其它剂型中，如适合于给予患者的鼻喷雾剂。
该物质，如阿托西班或巴芦西班，可以7.5mg/ml的注射液给予患者，即1ml溶液含有7.5mg阿托西班或巴芦西班乙酸盐的形式的游离碱物质。可用推注开始给药，然后输注，如每患者静脉推注0.9ml约1分钟和治疗方案(剂量6.75mg阿托西班)，随后每患者静脉内输注24ml/小时3小时和方案(总剂量18mg/小时阿托西班)，然后每患者静脉内输注8ml/小时和方案(总剂量6mg/小时阿托西班)。可调整上述剂量，以适合具体医疗状况。
本发明描述了催产素拮抗剂用于治疗高血压和高血压参与的疾病的新用途。本文提供的数据证明，催产素可调节血管收缩并刺激收缩或提高血压。根据本文所作研究，催产素拮抗剂能抑制血管收缩和血压。
因此，这些研究暗示，催产素拮抗剂可用于降低高血压，它们可用于治疗患有在妊娠妇女中发现的病症和高血压相关病症，尤其是与先兆子痫和IUGR相关的高血压患者的高血压状况。
此外，根据本发明，提供了催产素拮抗剂通过松弛相关血管(如子宫血管、胎盘和胎儿血管)改善母亲和胎儿之间灌注的用途。子宫动脉的直接舒张改善了胎儿的灌注。本发明催产素拮抗剂的新用途将不可避免地改善胎儿的灌注、营养、生长和发育，预计母亲和胎儿的健康状况更好。
在根据本发明当前除了分娩胎儿没有有效治疗手段可用的先兆子痫的情况下，本发明提供了催产素拮抗剂的新用途的有效病因疗法。
还预计将获得催产素拮抗剂巴芦西班和巴芦西班的变体的高选择性、高效能和效力。预计本发明催产素拮抗剂的新用途不会产生显著的副作用。
实施例在大鼠中测量血压(图1)动物。成年未生育过的妊娠大鼠(体重300-325g)购自Harlan Sprague Dawley，Inc(Indianapolis，Ind)，在妊娠第16天(精液涂片结果为阳性之日是第1天)由动物实验室接受。让所有动物随意获得食物和水。
测量血压。从妊娠第19天开始，每天或每隔一天用气动尾套囊装置(pneumatictail cuff device，NARCO Biosystems，Inc，Austin，Tex)在维持于约30℃的金属室中温暖的动物中测量收缩压。血压值获自3次连续测量的平均值，记录为各点上给定大鼠的血压。测量所有动物的收缩压，直到分娩，产后再测量7天(pp7)。所有动物在妊娠第22天(预产日)分娩。研究了3组动物第1组，用盐水处理的对照组，第2组巴芦西班治疗(200μg/天)，第3组阿托西班治疗(200μg/天)。
统计学分析。在妊娠和产后每天计算血压水平的平均值+/-SEM值。统计学分析用单向方差分析进行，然后与Fisher最小显著性差异标准多次比较。P＜.05被认为有显著性。
体外收缩方法(图2-5)非妊娠或定时妊娠的Sprague-Dawley大鼠(妊娠22天，观察到精液栓时为第1天)获自Charles River实验室(Houston，Texas)。在一些研究中，采用自发性高血压大鼠(SHR)及其各自的正常血压对照(WKY)。在第14天(妊娠中期)或分娩前第22天(妊娠期)或在发情周期(未妊娠)期间通过二氧化碳吸入法处死大鼠。通过腹部中线切口剪下血管组织(子宫动脉、股动脉、颈动脉或主动脉)，置于冷的Krebs缓冲液中，组成如下氯化钠，119.0mmol/l；氯化钾，4.7mmol/l；磷酸钾，1.2mmol/l；碳酸氢钠，25mmol/l；硫酸镁，1.2mmol/l；氯化钙，2.5mmol/l；乙二胺四乙酸钠，0.026mmol/l；葡萄糖，11.5mmol/l。从血管节段中部切下宽5mm的环，置于两个钨U形夹之间的器官室中，用等长力换能器(Harvard Apparatus，SouthNatick，Mass)记录张力。在含有维持在37℃并连续鼓入5％二氧化碳的10ml Krebs缓冲液(pH约7.4)的器官室中以2g被动张力平衡环，直到稳定。用DI-220数据获取系统(DataQ Instruments Inc，Akron，Ohio)记录子宫血管组织(切成环)的收缩并储存在计算机中。以10分钟间隔将10ul体积以1.0-log单位增加(10-9-10-5mol/l)的催产素直接加入器官室中。最后接触催产素15分钟后，洗涤器官室和组织的催产素和各自拮抗剂，静置30分钟后，加入60-mmol/l氯化钾或苯肾上腺素用来检查组织活力和这些血管收缩药诱导的最大收缩。
用Windaq/200(DataQ Instruments Inc)软件分析数据。计算加入各个浓度的药剂之前(基础活性)和之后以10分钟血管收缩曲线下的面积(表示为毫克/秒)描述完整活性，与基础活性比较(变化百分数)。在这些实验中平行进行时间-溶剂对照(溶剂是去离子水)，减去变化。确定引起50％最大效果的催产素浓度，计算并比较半数最大效果的-log50和浓度反应曲线下的面积。数据表示为平均值±SD。合适地使用单向方差分析和Tukey多重比较检验。双尾P值＜0.05被认为有统计学显著性。
权利要求
1.一种具有催产素拮抗特性的物质在制造用于治疗与催产素诱导的血管收缩有关的疾病的药物中的用途。
2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述物质是肽。
3.如权利要求2所述的用途，其特征在于，所述肽选自五肽、六肽、七肽、八肽、九肽和十肽。
4.如权利要求3所述的用途，其特征在于，所述肽选自阿托西班、巴芦西班、及其药学上可接受的盐。
5.如权利要求1-4中任一项所述的用途，其特征在于，所述药物用于治疗高血压。
6.如权利要求5所述的用途，其特征在于，所述药物用于治疗妊娠相关的高血压。
7.如权利要求1-6中任一项所述的用途，其特征在于，所述催产素诱导的血管收缩出现在子宫血管、胎盘或胎儿血管中。
8.如权利要求1-5中任一项所述的用途，其特征在于，所述催产素诱导的血管收缩出现在心脏血管、肾脏血管、脑血管、胸腺血管、胰脏血管或任何其它血管中。
9.如权利要求1-7中任一项所述的用途，其特征在于，所述药物用于治疗先兆子痫、宫内生长迟缓(IUGR)、胎儿的灌注不足、妊娠诱导的高血压(PIH)、毒血症、HELLP综合征或子痫。
10.一种治疗方法，所述方法包括将药学有效量的具有催产素拮抗特性的物质给予患有与催产素诱导的血管收缩相关的疾病的对象。
11.如权利要求10所述的方法，其特征在于，所述物质是肽。
12.如权利要求11所述的方法，其特征在于，所述肽选自五肽、六肽、七肽、八肽、九肽和十肽。
13.如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述肽选自阿托西班、巴芦西班、及其药学上可接受的盐。
14.如权利要求10-13中任一项所述的方法，其特征在于，所述疾病是高血压。
15.如权利要求14所述的方法，其特征在于，所述高血压与妊娠有关。
16.如权利要求10-15中任一项所述的方法，其特征在于，所述催产素诱导的血管收缩出现在子宫血管、胎盘或胎儿血管中。
17.如权利要求10-14中任一项所述的方法，其特征在于，所述催产素诱导的血管收缩出现在心脏血管、肾脏血管、脑血管、胸腺血管、胰脏血管或任何其它血管中。
18.如权利要求10-16中任一项所述的方法，其特征在于，所述疾病是先兆子痫、宫内生长迟缓(IUGR)、胎儿的灌注不足、妊娠诱导的高血压(PIH)、毒血症、HELLP综合征或子痫。
19.如权利要求10-18中任一项所述的方法，其特征在于，所述对象是人。
全文摘要
本发明涉及具有催产素拮抗特性的物质的用途和包括给予药学有效量的所述物质的治疗方法。
文档编号A61P15/00GK1909917SQ200580002548
公开日2007年2月7日 申请日期2005年1月13日 优先权日2004年1月19日
发明者T·M·赖恩海默, R·E·加菲尔德 申请人:凡林有限公司